PEMBUATAN PREPARAT SUPRAVITAL EPITELIUM MUKOSA MULUT LAPORAN Disusun untuk memenuhi tugas mata kuliah Mikroteknik Prodi Pendidikan Biologi
Dosen Pengampu Saiful Ridlo
Oleh Navia Eka Savitri 4401411146 Rombel 05
JURUSAN BIOLOGI FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS NEGERI SEMARANG 2014
A. JUDUL : PEMBUATAN PREPARAT SUPRAVITAL EPITELIUM MUKOSA MULUT Tanggal 15 april 2014 B. TUJUAN 1. Membuat preparat supravital epitel mukosa mulut dengan zat warna Methylene blue. 2.
Mengamati menganalisis struktur Epitelium mukosa mulut
C. DASAR TEORI Epitel adalah jaringan yang terdiri atas sel-sel yang sangat rapat tanpa adanya zat antar sel. Epitel tidak mempunyai pembuluh darah, namun semua epitel tumbuh pada jaringan ikat yang mempunyai pembuluh darah. Epitel dipisahkan dengan jaringan ikat melalui membrana basalis. Epitel membungkus dan membatasi semua permukaan tubuh, termasuk luar dan dalam. Epitel mempunyai fungsi bermacam-macam yaitu, pada permukaan luar tubuh, epitel memberi perlindungan terhadap kerusakan mekanis, perlindungan terhadap masuknya mikroorganisme dan mencegah penguapan air. Lebih lanjut, epitel penting sebagai reseptor sensoris, karena pada sel-sel epitel terdapat ujungujung saraf penghantar rasa sakit. Pada permukaan dalam, fungsi epitel yaitu sebagai absorpsi atau sekresi. Epitel mempunyai struktur yang berbeda-beda tergantung pada fungsinya. Jaringan epithelium dapat dibedakan berdasarkan bentuk sel yaitu epitel pipih, epitel kubus, dan epitel silindris. Untuk sebaran sel epithelium dalam tubuh manusia antara lain sel epitel di mulut. Jaringan epithelium mempunyai ciri-ciri umum sebagai berikut : Epithelium hanya terdiri atas sel-sel yang saling berdekatan, yang berbentuk pipih. Hanya ada sedikit material antarsel, Jaringan bersifat avaskular atau tanpa pembuluh darah, Permukaan atas epithelium bebas, atau terbuka bagi bagian luar tubuh atau rongga tubuh bagian dalam. Permukaan basal berada pada jaringan ikat. Pembelahan sel pada epithelium terjadi secara terus menerus untuk menggantikan sel-sel yang rusak. Metode supravital adalah suatu metode untuk mendapatkan sediaan dari sel atau jaringan yang hidup. Sel-sel yang hidup juga dapat menyerap warna. Zat warna yang biasa dipakai untuk pewarnaan supravital adalah janus green, neutral red, atau methylene blue dengan kosentrasi tertentu. Preparat supravital merupakan preparat
yang bersifat sementara sehingga harus segera diamati setelah pembuatan. Pengamatan terhadap epithelium ini akan nampak inti dari sel -sel yang teramati. Jaringan lunak mulut terdiri dari mukosa pipi, bibir, ginggiva, lidah, palatum, dan dasar mulut. Struktur jaringan lunak mulut terdiri dari lapisan tipis jaringan mukosa yang licin, halus, fleksibel, dan berkeratin atau tidak berkeratin. Jaringan lunak mulut berfungsi melindungi jaringan keras di bawahnya; tempat organ, pembuluh darah, saraf, alat pengecap, dan alat pengunyah. Sel-sel epitel mukosa mulut terdiri dari empat lapisan berturut-turut dari yang paling dalam ke permukaan yaitu lapisan germinativum/basalis, lapisan spinosum, lapisan granulosum dan lapisan corneum. Stratum basalis terdiri dari selapis sel berbentuk kubus yang berbatasan dengan lamina propia dan mengandung sel-sel induk yang secara kontinyu bermitosis dan anak selnya dikirimkan ke lapisan yang lebih superfisial. Stratum spinosum terdiri dari beberapa lapis sel berbentuk bulat atau oval dan mempunyai karakteristik sel yang mulai matang. Stratum granulosum terdiri dari beberapa lapis sel yang lebih gepeng dan lebih matang dari stratum spinosum dan mengandung banyak granula keratohyalin yang merupakan bakal sel keratin. Stratum corneum terdiri dari selapis atau berlapis-lapis sel (tergantung regio) berbentuk pipih yang tidak berstruktur dan tidak mempunyai inti sel. Mukosa mulut dapat dikelompokkan menjadi tiga tipe yaitu mukosa pengunyahan, mukosa penutup dan mukosa khusus. Mukosa pengunyahan terdapat di regio rongga mulut yang menerima tekanan kunyah seperti gusi dan palatum durum. Jaringan epitelnya parakeratinised (mempunyai lapisan keratin tipis yang beberapa selnya da yang masih memiliki inti sel yang tidak sempurna). Mukosa penutup terdapat pada dasar mulut, permukaan inferior lidah, permukaan dalam bibir dan pipi, palatum molle dan mukosa alveolaris kecuali gusi. Tipe epitelnya nonkeratinised (tidak memiliki lapisan keratin). Mukosa khusus terdapat pada dorsum lidah, tipe epitelnya ortokeratinised (memiliki lapisan keratin yang tebal yang terdiri dari sel-sel yang sudah tidak berinti) (Puspitawati, 2003). Perbandingan antara sel basal-parabasal, sel intermediet, dan sel superfisial disebut indeks maturasi. Pada kondisi normal, jumlah sel pada lapisan superfisial sesuai dengan jumlah sel pada lapisan sel basal (Naib, 1970).
D. LANGKAH KERJA Mulut harus dibersihkan dengan cara berkumur dengan air. Epithelium mukosa mulut diambil menggunakan sendok pada bibir bawah bagian dalam.
Epithelium mukosa mulut dilekatkan pada gelas benda yang bebas lemak. Pewarnaan dengan meneteskan 1 tetes zat warna supravital methylene blue 0,25% dalam larutan garam fisiologis (NaCl 0,9%) pada epithelium mukosa mulut. Obyek ditutup / mounting menggunakan gelas penutup dan bantuan jarum pentul secara hati-hati.
Selanjutnya
adalah
pengamatan
dengan
menggunakan
mikoskop
perbesaran kuat dan pengambilan foto obyek.
E. PEMBAHASAN Prosedur pembuatan preparat supravital epithelium mukosa mulut ini sangat sederhana. Secara singkat, langkah-langkah dalam pembuatan preparat supravital epithelium mukosa mulut yaitu: afiksing, pewarnaan, dan penutupan. Setelah proses afiksing, epithelium mukosa mulut langsung diwarnai menggunakan zat warna supravital methylene blue 0,25% dalam larutan garam fisiologis (NaCl 0,9%). Proses pewarnaan tidak diawali dengan proses fiksasi terlebih dahulu. Pewarnaan ini merupakan pewarnaan tunggal, yaitu pewarnaan yang hanya menggunakan satu macam zat warna saja. Setelah proses pewarnaan dan penutupan dengan gelas penutup, preparat langsung diamati dengan menggunakan mikroskop. Setelah pengamatan, gelas benda langsung dibersihkan. Berdasarkan foto dan hasil pengamatan preparat sementara sel mukosa dengan metode supravital dan pewarnaan methelyn blue dapat diketahui bahwa ketika diamati dibawah mikroskop sel-sel epitel terwarna biru dengan kontras. Nukleus sel epitel terwarna lebih kuat menjadi lebih biru karena nukleus lebih mudah untuk menyerap warna. Sel jika di bawah mikroskop ada yang memisah sendiri dan berkelompok serta ada yang bertumpuk. Hal ini terjadi karena saat mengoleskan sediaan dari tusuk gigi tidak merata dan kemungkinan pemberian zat warna yang terlalu berlebih juga mempengaruhi letak sel dalam preparat sediaan ini. Sel epitel yang terlihat berbentuk pipih. Inti sel tidek terlihat jelas karena ketika mengamati perbesaran yang digunakan 4x10. Sebenarnya sel epitel mukosa mulut berbentuk pipih berlapis, tetapi pada preparat tidak terlihat. Pada preparat hanya terlihat sel pipih saja.
Tabel hasil pengamatan preparat supravital epitelium mukosa mulut (15 april 2014) No
Perbesaran
Gambar
Keterangan
1
Foto hasil pembuatan preprat
2
10x10
Preparat supravital epitelium mukosa mulut
Nukleus Membran plasma Sitoplasma
Sel epitelium terwarna dengan baik, warna
inti
dibandingkan
lebih
terwarna
sitoplasma
kuat
sehingga
terlihat kontras. Sel epitelium tipis, meski ada satu atau dua sel epitelium yang terlihat bertumpuk namun masih teramati dengan jelas. Masih ada kotoran yang ikut teramati pada preparat epitelium. Pada preparat terdapat gelembung yang
sangat
kecil,
namun
tidak
mengganggu
saat
diamati
karena
posisinya berada di tepi gelas penutup sehingga dapat dikatakan preparat ini cukup baik.
F. PEMBAHASAN Berdasarkan hasil pengamatan menggunakan mikroskop, epitelium mukosa mulut merupakan epitelium pipih. Dalam pengamatan preparat mukosa mulut dengan metode supravital dan menggunakan pewarnaan methelyn blue 0,25% dalam larutan NaCl fisiologis dapat diketahui bahwa preparat epitel mukosa epitel dapat diamati dengan baik pada perbesaran 10x10, meskipun pada beberapa tempat ada penumpukan sel epitel. Pengamatan dibawah mikroskop sel-sel epitel terwarna biru agak keunguan. Nukleus sel epitel terwarna lebih kuat menjadi lebih biru karena nukleus bersifat asam akan terwarna oleh pewarna basa yaitu methylene blue. Saat pengamatan sel masih dalam bentuk asalnya, tidak terjadi plasmolisis atau krenasi karena menggunakan zat warna netral yaitu pada kosentrasi setara dengan kosentrasi cairan tubuh 0,9% larutan. Didalam preparat masih terdapat kotoran hal ini diduga berasal dari kotoran yang ada di dalam mulut yang ikut terambil saat pengambilan epitelium mukosa menggunakan sendok. Pada percobaan ini praktikan mengamati sel mukosa mulutnya sendiri. Pada sel mukosa mulut praktikan dapat melihat adanya membran sel, inti sel dan sitoplasma. Fungsi inti sel dan sitoplasma pada sel hewan sama seperti pada sel tumbuhan, bedanya sel hewan tidak memiliki dinding sel. Sel hewan hanya mempunyai membran sel yang berfungsi untuk melindungi organel-organel yang berada di dalamnya. Sel didalam tubuh manusia, terdiri dari membran plasma , sitoplasma , organel , dan nukleus.
G. KESIMPULAN 1. Preparat supravital epithelium mukosa mulut merupakan preparat sementara. Secara singkat, langkah-langkah dalam pembuatan preparat supravital epithelium mukosa mulut yaitu: afiksing, pewarnaan, dan penutupan / mounting
2. Preparat
sementara epitelium mukosa mulut dapat dibuat dengan metode
supravital, pewarna methylene blue 0,25% dalam larutan NaCl 0,9%. 3. Epithelium mukosa mulut merupakan epithelium pipih berlapis.
4. Pewarnaan supravital dengan zat pewarna methylene blue dapat mewarnai sel epitel mukosa mulut dengan kontras sehingga dapat membedakan bagian nukleus dengan bagian sel lain seperti sitoplasma.
Saran -
Pada saat meratakan epithelium mukosa mulut pada gelas benda, hendaknya benar-benar diperhatikan proses perataannya agar tidak dihasilkan preparat yang bertumpuk-tumpuk.
H. DAFTAR PUSTAKA Rudyatmi E & NR. Utami. 2004. Diktat Mikriteknik. Semarang: Jurusan Biologi FMIPA UNNES. Suntoro HS. 1983. Metode Pewarnaan. Jakarta Subowo. 2006. Histologi Umum. Jakarta : PT Bumi Aksara. Puspitawati Ria. 2003. Struktur Makroskopik dan Mikroskopik Jaringan Lunak Mulut. Jurnal Kedokteran Gigi Universitas Indonesia; 10 ( Edisi Khusus) : 462-467.
