LAPORAN PRAKTIKUM MIKROTEKNIK PREPARAT SUPRAVITAL EPITELIUM MUKOSA MULUT Disusun guna memenuhi tugas laporan praktikum mikroteknik Dosen pengampu : Dra. Ely Rudyatmi,M.Si Disusun oleh : Raharja Kuncara
4411414006
ROMBEL 1
JURUSAN BIOLOGI FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS NEGERI SEMARANG 2016
PREPARAT SUPRAVITAL EPITELIUM MUKOSA MULUT A. TUJUAN 1. Membuat preparat supravital epitelium mukosa mulut dengan zat warna Methylen blue 2. Menganalisis hasil pembuatan preparat supravital epitelium mukosa mulut B. DASAR TEORI Epitel adalah jaringan yang terdiri atas sel-sel yang sangat rapat tanpa adanya zat antar sel. Epitel tidak mempunyai pembuluh darah, namun semua epitel tumbuh pada jaringan ikat yang mempunyai pembuluh darah. Epitel dipisahkan dengan jaringan ikat melalui membrana basalis (Subowo. 1992). Jaringan epitelium (epithelial tissue) terdapat dalam wujud lapisan-lapisan sel yang terkemas dengan rapat. Pada banyak epitelium, sel-sel tersebut dipatri menjadi satu oleh tight junction (persambungan ketat). Permukaan bebas pada epitelium itu terpapar ke udara atau cairan, sementara sel-sel yang berada di bagian dasar rintangan itu melekat ke suatu membran basal (Campbell, 2004). Pengamatan kondisi patologis yang terjadi di dalam rongga mulut dapat dilakukan dengan membuat preparat apusan yang diperoleh dengan membuat irisan tipis dari sepotong kecil jaringan yang telah difiksasi, kemudian dipulas, dilekatkan dalam medium dengan indeks refraksi yang sesuai di atas sebuah kaca objek kemudian ditutup dengan suatu kaca tutup. Setelah hasil usapan ditempel pada gelas objek secara merata kemudian direndam dalam larutan alkohol 96% untuk fiksasi. Jaringan yang telah difiksasi kemudian direhidrasi dengan cara merendam gelas objek dalam sederetan alkohol yang konsentrasinya makin menurun. Setelah itu, baru dilakukan pemulasan atau pewarnaan yang bertujuan meningkatkan kontras alami dan untuk memperjelas berbagai unsur sel dan jaringan. Setelah dipulas, kelebihan warna dihilangkan melalui proses dehidrasi (penarikan molekul air dari dalam jaringan) yang dilakukan dengan cara merendam gelas objek dalam deretan alkohol dengan konsentrasi yang makin meningkat. Jaringan tersebut kemudian dijernihkan dengan agen penjernih seperti xilol, kloroform, benzene, dan minyak kayu sedar. Setelah dikeluarkan dari larutan penjernih, diatas irisan jaringan tersebut diberi setetes medium saji yang mempunyai indeks refraksi hampir sama dengan indeks refraksi kaca, misalnya Canada balsam. Sajian itu ditutup dengan kaca tutup dan dibiarkan mengering (Balaciart, 2004). Jaringan epitelium (epithelial tissue) terdapat dalam wujud lapisan-lapisan sel yang terkemas dengan rapat. Pada banyak epitelium, sel-sel tersebut dipatri menjadi satu oleh tight junction (persambungan ketat). Permukaan bebas pada epitelium itu terpapar
ke udara atau cairan, sementara sel-sel yang berada di bagian dasar rintangan itu melekat ke suatu membran basal. (Campbell, 2004). Asal epitel yaitu tumbuh dari lapisan yaitu tumbuh dari lapisan ectoderm dan entoderm embrio, walaupun ada sejumlah epitel yang berasal dari mesoderm seperti pada systema vrogenitale dan cortex glandula suprarenalis. Epitel yang berbentuk membrane dan berasal dari mesoderm ada dua yaitu: 1. Endothelium merupakan susunan sel-sel yang membatasi permukaan dalam pembuluh darah, jantung dan pembuluh limfa. 2. Mesothelium merupakan susunan sel-sel yang membatasi rongga tubuh yang besar yang yang juga menutupi beberapa organ tertentu, seperti misalnya melapisi peritoneum, pleura dan pericardium. Fungsi umum dari membrane epitel itu sendiri yaitu diantaranya : 1. Proteksi atau perlindungan, karena epitel melapisi permukaan dalam dan luar tubuh. 2. Absorbsi, misalnya epitel yang membatasi permukaan dalam usus berperan dalam proses penyerapan hasil-hasil pencernaan makanan yang bekerja secara selektif. 3. Lubrikasi, sebagian besar saluran-saluran dalam tubuh permukaannya harus tetap basah, sehingga epitel yang menutupi harus menghasilkan cairan tertentu. 4. Sekretoris, dalam hal ini epitel bertindak sebagai kelenjar. 5. Neurosensoris Untuk sebaran sel epithelium dalam tubuh manusia antara lain sel epitel di mulut. Jaringan epithelium mempunyai ciri-ciri umum sebagai berikut : 1. Epithelium hanya terdiri atas sel-sel yang saling berdekatan, yang berbentuk pipih. Hanya ada sedikit material antarsel. 2. Jaringan bersifat avaskular atau tanpa pembuluh darah. 3. Permukaan atas epithelium bebas, atau terbuka bagi bagian luar tubuh atau rongga tubuh bagian dalam. Permukaan basal berada pada jaringan ikat. 4. Pembelahan sel pada epithelium terjadi secara terus menerus untuk menggantikan sel-sel yang rusak. Metode supravital adalah suatu metode untuk mendapatkan sediaan dari sel atau jaringan yang hidup. Sel-sel yang hidup juga dapat menyerap warna. Zat warna yang biasa dipakai untuk pewarnaan supravital adalah janus green, neutral red, atau methylene blue dengan kosentrasi tertentu. Preparat supravital merupakan preparat yang bersifat Preparat Supravital Epitelium sementara sehingga harus segera diamati setelah pembuatan. Pengamatan terhadap Mukosa Mulut. epithelium ini akan nampak inti dari sel-sel yang teramati. (Rudyatmi, 2016).
C. HASIL DAN ANALISIS
Pewarnaan
: Methylene blue
Perbesaran
: 100 x 10
Keterangan : 1. 2. 3. 4.
Membran sel Sitoplasma Inti sel Sel epitel mukosa mulut
1 2 3 4
Sel epitelium terwarnai cukup baik dan warna terlihat kontras antara inti sel dan sitiplasma. Inti sel terwarnai lebih kuat dibandingkn dengan sitoplama, terdapat inti sel yang keluar dari sel karena terdapat sel yang telah hancur dan intinya lepas.
D. PEMBAHASAN Berdasarkan hasil pengamatan dan analisis, epithelium mukosa mulut termasuk dalam epithelium skuamosa simplek atau epitel pipih selapis karena terdiri dari satu lapis sel tunggal, pipih, nucleus sentral dan bulat menyerupai telur goreng. Dalam praktikum ini menggunakan pewarna methylen blue 0,25% dalam garam fisiologi (NaCl 0,9%), bertujuan agar sel tetap hidup dan tidak lisis atau krenasi. Inti sel epitel berwarna gelap dikarenakan inti sel bersifat asam sedangkan methylene blue merupakan pewarna basa. Preparat ini merupakan termasuk kedalam preparat sementara, Preparat sementara adalah preparat yang keawetannya hanya sementara atau hanya beberapa jam saja tidak lebih dari 24 jam. Preparat supravital epitelium mukosa mulut ini tidak dilakukan pengawetan
dengan cara apapun, namun tetap dengan memberikan
pewarnaan pada preparat ini yaitu dengan pewarna methylen blue. Pewarnaan ini termasuk kedalam pewarnaan tunggal yaitu pewarnaan yang hanya menggunakan satu macam zat warna saja. Pada saat pengamatan di bawah mikroskop, sudah teramati jelas pada perbesaran 10 x 10 tetapi pada perbesaran ini inti sel tidak dapat terlihat jelas. Pada perbesaran 40 x 10 sel-sel epitel dapat teramati lebih jelas, dengan inti terwarna biru dengan kontras jika dibandingkan dengan sitoplasma. Pada perbesaran 100 x 10 Inti sel dapat terlihat sangat jelas terlihat terwarna lebih kuat yaitu lebih biru, karena inti sel yang bersifat asam
sehingga lebih mudah untuk menyerap warna ketika terwarnai oleh pewarna basa yaitu methylene blue. Pada preparat ini masih terlihat sel yang menumpuk karena pada saat pembuatan sel epitel tidak terbentang dengan baik sehingga masih terdapat sel yang enumpuk. Sel-sel epitel mukosa mulut merupakan epitel tanpa keratin dan terdapat di permukaan basah. Selain di dalam mulut, epitel ini juga terdapat di kapsula bowman, permukaan dalam membrane tymphany, endotil yang membatasi permukaan sistem peredaran dan alveoli paru-paru. Dalam sitoplasma sel-sel yang menyusun epitel terdapat organelle yang berfungsi sebagai rangka penyokong, diantaranya sebagai anyaman yang dinamakan “cell web” yang termasuk dalam struktur kerangka sel. Bentuk khusus pada sisi sel epitel dibedakan menjadi tiga yaitu Macula merupakan daerah kecil berupa bercak, sedangkan Zonula dimaksudkan apabila daerah tersebut melingkari sel sebagai gelang. Apabila daerahnya luas dinamakan fascia.
E. KESIMPULAN Berdasarkan hasil dan pembahasan dapat disimpulkan sebagai berikut: 1. Preparat epitelium mukosa mulut merupakan preparat sementara yang dibuat dengan metode supravital, menggunakan pewarna methylene blue 0,25% dalam larutan NaCl 0,9% 2. Pewarnaan dengan zat warna methylene blue dapat mewarnai sel epitelium mukosa mulut dengan kontras, sehingga dapat dibedakan antara inti sel dengan bagian lain seperti sitoplasma F. SARAN Setelah melakukan praktikum pembuatan preparat epitelium mukosa mulut, saran yang dapat diberikan yaitu: 1. Pada saat meratakan sel epitelium mukosa mulut di atas gelas benda, sebaiknya benar-benar merata secara keseluruhan agar preparat yang dihasilkan tidak tertumpuk. 2. Sebelum pembuatan preparat sebaiknya membersihkan mulut terlebih dahulu dengan cara berkumur. 3. Preparat supravital epitelium mukosa mulut merupakan preparat sementara sehingga pengamatan harus dilakukan secara cepat agar preparat tidak mengering.
DAFTAR PUSTAKA
Balaciart Daniel. 2004. Evaluation of Keratinization and Agnors Count in Exfoliative Cytology of Normal Oral Mucosa from Smokers and Non-Smokers. MED ORAL 2004; 9: 197 - 203. Campbell, Reece, Mitchell. 2004. Biologi. Edisi Kelima. Jilid 3. Jakarta. Erlangga. Rudyatmi E. 2014. Diktat Mikriteknik. Semarang: Jurusan Biologi FMIPA UNNES. Subowo. 1992. Histologi umum. Jakarta: PT.Bumi Aksara. .
