I.
I I.
JUDUL Topik Praktikum Ke Tanggal Tanggal
: Membuat Media Padat dan Cair : III (tiga) : 3 !eptember "#$
P%&D'ULU'& Medium adala *uatu baan +ang terdiri ata* ,ampuran nutri*i +ang dipakai untuk menumbukan mikroba. !elain untuk pembuatan mikroba- medium dapat pula digunakan untuk melakukan i*ola*imemperban+ memperban+akak-
penguian penguian
*i/at*i/at *i/at*i/at
/i*iologi /i*iologi
dan
peritunga peritungan n
mikroba. !eingga pembuatan medium itu aru* *e*uai kompo*i*i dan tuuan penanamann+a- *erta ,ara pembuatan medium iru aru* dengan baik agar medium +ang dia*ilkan *e*uai dengan +ang diingikan. !emua makluk idup membutukan nutrien untuk pertumbuan dan reproduk*in+a. &utrien merupakan baan baku +ang digunakan untuk membangun komponen0komponen baru dan untuk untuk
menga menga*ilk *ilkan an
keidupan keidupan mikrob mikrobaa
*el.
energ energii
Untuk
diperlu diperlukan kan
+ang +ang dibutu dibutuk kan an
menumbuk menumbukan an
*uatu *uatu
*ub*tr *ub*trat at
dalam dalam
pro*e* pro*e*
dan mengembang mengembangbiakk biakkan an +ang +ang
di*ebu di*ebutt
medium medium..
!edangkan medium itu *endiri *ebelum digunakan aru* dalam keadaan *teril- artin+ artin+aa tidak ditumb ditumbui ui ole ole mikroba mikroba lain lain +ang tidak tidak diarapkan. 'gar mikroba dapat tumbu dan berkembang dengan baik didalam medium- maka diperlukan per*+aratan tertentu +aitu diantaran+a ba1a di dalam medium aru* terkandung *emua un*ur ara +ang diperlukan untuk pertumbuan dan perkembangan mikroba. 2le karena al ter*ebut- maka diadakan praktikum ini guna menamba menamba keterampilan keterampilan dan pengetaua pengetauan n
mengenai mengenai pembuatan pembuatan
medium pertumbuan mikroba. !elain itu- media tumbu mikroba uga dibedakan berda*ar *i/at /i*ik +aitu media padat- *etenga padat dan ,air. ,air. Media padat +aitu media +ang mengandung agar #4 *eingga * eingga *etela dingin media menadi padat- media *etenga padat +aitu media +ang mengandu mengandung ng agar -30-54 -30-54 *eingga *eingga menadi *edikit *edikit ken+alken+almedia media
,air +aitu +aitu media media +ang +ang
tidak tidak menga mengand ndung ung agar agar-- ,onto ,onton+ n+aa
adala adala
&6 (&utr (&utrien ientt 6rot)6rot)- L6 L6 (La,to* (La,to*ee 6rot). 6rot). Media Media tumbu tumbu
mikroba uga dibedakan menadi media *inte*i* +aitu media +ang kompo*i*in+a diketaui eni* dan takarann+a *e,ara pa*ti- mi*aln+a 7lu,o*e 'gar- Ma, Conke+ 'gar. Media *emi *inte*i* +aitu media +ang *ebagian kompo*i*in+a diketaui *e,ara pa*ti- mi*an+a PD'. Media non *inte*i* +aitu media kompo*i*in+a tidak dapat diketaui
*e,ara pa*ti dan bia*an+a lang*ung diek*trak dari baan
da*arn+a- mi*aln+a Tomato Jui,e 'gar. Media dibedakan menadi dua menurut kompo*i*i kimia1in+a +aitu medium *intetik dan medium non0*intetik atau
komplek*.
Medium *intetik dibuat dari baan kimia dengan kemurnian tinggi dan ditentukan dengan tepat- *edangkan medium non0*intetik tidak diketaui dengan pa*ti (adioetomo- "#). Media pertumbuan mikroorgani*me adala *uatu baan +ang terdiri dari ,ampuran 8at08at makananan (nutri*i) +ang diperlukan mikroorgani*me
untuk
pertumbuann+a.
Mikrooorgani*me
meman/aatkan nutri*i media berupa molekulmolekul dirakit
untuk
pertumbuan kultur
men+u*un dapat
murni
komponen
dilakukan dan
uga
i*olat
*el.
ke,il
Dengan
mikroorgani*me
memanipula*i
+ang media
menadi
kompo*i*i
media
pertumbuann+a (Indra- "9). 6erda*arkan kon*i*tenn+a atau kepadatann+a- medium dibagi menadi tiga eni* - +aitu : medium ,airbrotli;uid mediummedium *etenga padat (*emi *olid medium) dan medium padat (*olid medium) ('nonimou*- "9). Untuk menelaa mikroorgani*me dilaboratorium- kita aru* dapat menumbukan mereka. Mikroorgani*me dapat berkembang biak dengan alami atau dengan bantuan manu*ia. Mikroorgani*me +ang dikembangkan ole manu*ia dilaboratorium melalui *ub*trat +ang di*ebut media. Untuk melakukan al ini aru*la dimengerti eni*0eni* nutrien +ang di*+aratkan ole bakteri dan uga ma,am lingkungan
/i*ik
+ang
men+ediakan
kondi*i
optimum
bagi
pertumbuann+a (Label- "9). &utrien 'gar (&') digunakan untuk budida+a bakteri dan untuk pen,egaan organi*me dalam air- limba-
kotoran
dan
lainn+a. Kompo*i*in+a terdiri dari ek*trak daging- pepton- agar dan a;uade* (
TUJU'& Memaami
,ara0,ara
pembuatan
media padat dan ,air- ,ara
menimbang- melakukan *terili*a*i dan menaru media +ang dibuat ter*ebut dalam umla +ang dikeendaki- ke dalam 1ada01ada +ang *e*uai I>.
>.
>I.
'L'T &
&ama 'lat
Jumla
o # " 3 5 $ ? 9 =
&era,a Labu %rlenme+er # ml Labu %rlenme+er " ml Penanga* air Pan,i 'utokla/ 7ela* ukur 6otol @ou C # 6un*en
# bua # bua # bua # bua # bua # bua # bua " botol # bua
6''& &
&ama 6aan
Jumla
o # " 3 5 $ ?
&utrient 'gar &utrient 6rot 'lkool Kapa* 'lumunium /oil Kerta* label 'kuade*
#5 gram #-" gram !e,ukupn+a !e,ukupn+a !e,ukupn+a !e,ukupn+a
C'<' K%
5. Menimbang nutrient agar (&') *eban+ak #5 gram . Mema*ukkan &' +ang tela ditimbang ke dalam labu erlenme+er # ml $. Menambakan air pada labu erlenme+er *ampai ml ?. Menggo+angkan labu erlenme+er *ampai agar &' dan air ter,ampur 9. Mengi*i pan,i dengan air *eban+ak A n+a =. Meletakkan pan,i diata* penanga* air #. Ma*ukkan labu erlenme+er &' kedalam pan,i ##. Mengidupkan penanga* air #". Menunggu ingga &' benar0benar larut *ambil menggo+ang labu erlenme+er agar tidak go*ong #3. !etela baan &' *uda ter,ampur *e,ara omogen baru diangkat diangkat dari penanga* #5. Membagi baan &' menggunakan gela* ukur *eban+ak 5 ml #. Memana*kan uung botol @ou C # dengan api dari bun*en agar botol tetap *teril #$. Mema*ukkan 5 ml dari gela* ukur ke dalam botol @ou C # #?. Menutup botol @ou C # dengan kapa* lalu dilapi*i dengan alumunium /oil agar udara tidak ma*uk #9. Memberi label pada botol @ou C # dengan nama kelompok dan 6. #. ". 3. 5. .
&' Pembuatan Media &6 Men+iapkan alat dan baan Men+iapkan ala* dari alumunium /oil Mengatur nera,a analitik agar po*i*in+a nol () Menimbang &6 *eban+ak #-" gram Mema*ukkan &6 +ang tela ditimbang kedalam labu erlenme+er
" ml $. Menambakan air pada labu erlenme+er *ampai # ml ?. Menggo+angkan labu erlenme+er agar &6 dan air ter,ampur 9. Mengi*i pan,i dengan air *eban+ak A n+a =. Meletakkan pan,i diata* penanga* air #. Mema*ukkan labu erlenme+er &6 ke dalam pan,i ##. Mengidupkan penanga* air #". Menunggu ingga &6 benar0benar larut *ambil menggo+angkan labu erlenme+er agar tidak go*ong #3. !etela baan &6 *uda ter,ampur *e,ara omogen baru diangkat dari penanga* #5. Membagi baan &6 menggunakan gela* ukur *eban+ak # ml #. Memana*kan uung botol @ou C # dengan api dari bun*en agar botol tetap *teril #$. Mema*ukkan # ml dari gela* ukur ke dalam botol @ou C #
#?. Menutup botol @ou C # dengan kapa* lalu dilapi*i dengan alumunium /oil agar udara tidak ma*uk #9. Memberi label pada botol @ou C # dengan nama kelompok dan &6
>II.
'!IL P%&7'M'T'& &
7ambar a*il pengamatan
o #
&'
Keterangan #. 'lumunium /oil dan kapa* ". Labu 2
erlenme+ar
# ml 3. &utrien 'gar
3
"
&6
#. 'lumunium /oil dan
1
kapa* ". Labu erlenme+ar " 2
ml 3. &utrient 6rot
3
>III.
P%M6''!'& Media adala *ub*trat dimana mikroorgani*me dapat tumbu dan
*e*uai dengan lingkungann+a. Keidupan mikroorgani*me
tergantung pada nutri*i dalam *ub*tratmedium lingkungan
+ang
baik-
karena
tidak
*emua
dan
/aktor
medium untuk
pertumbuan mikroorgani*me *angat berBaria*i- tergantung dari apa +ang diadikan da*ar penanaman. Mikroba dapat tumbu dengan baik ika dalam *uatu medium ter*ebut memenui *+arat0*+arat- +aitu aru* mengandung *emua 8at ara +ang muda digunakan ole mikrobaaru* mempun+ai tekanan o*mo*i*- tegangan permukaan dan p +ang *e*uai dengan kebutuan mikroba +ang ditumbukan- tidak mengandung mikroba-
dan
8at08at aru*
+ang berada
dapat
mengambat
dalam
kondi*i
pertumbuan *teril
*ebelum
digunakan (a/ra- "=). 6erda*arkan kompo*i*i kimian+a dikenal medium *intetik dan medium non*intetik atau medium komplek*. Kompo*i*i kimia medium *intetik diketaui dengan pa*ti dan bia*an+a dibuat dari baan0baan kimia +ang kemurniann+a tinggi dan ditentukan dengan tepat. Diantara medium +ang dibuat dalam per,obaan ini +ang terma*uk dalam medium *intetik adala medium +ang mengandung agar- *eperti aln+a medium nutrient agar +ang digunakan untuk mempelaari kebutuan makanan mikroba. Di piak lain kompo*i*i kimia non*intetik tidak diketaui dengan pa*ti. !eperti baan0baan +ang terdapat dalam kaldu nutrient +aitu ek*trak daging dan pepton.
Medium &utrien 'gar (&') berda*arkan *u*unan kimian+a merupakan medium
non0*intetik*emi
alamia-
berda*arkan
kon*i*ten*in+a merupakan medium padat. &' digolongkan pada medium
umum
*ebab
dapat
digunakan
untuk menumbukan
beberapa
eni* bakteri. &utrien 'gar (&') merupakan *uatu
medium +ang berbentuk padat- +ang merupakan perpaduan antara baan alamia dan *en+a1a0*en+a1a kimia. &' dibuat dari ,ampuran ek*trak daging dan pepton dengan
menggunakan
agar
*ebagai
pemadat- karena *i/atn+a +ang muda membeku dan mengandung karboidrat +ang berupa galaktan *eingga tidak muda diuraikan ole mikroorgani*me. Dalam al ini ek*trak daging dan pepton digunakan *ebagai baan da*ar karena merupakan *umber proteinnitrogen- Bitamin *erta karboidrat +ang *angat dibutukan ole mikroorgani*me untuk tumbu dan berkembang. ';uade* ber/ung*i *ebagai pelarut dan untuk mengomogenkan larutan. &utrien 'gar (&') merupakan medium untuk menumbukan bakteri (alu+o"?). &utrient 6rot (&6) adala medium +ang berbentuk ,air dengan baan da*ar adala ek*trak bee/ dan peptone. Perbedaan kon*entri* antara &utrient 'gar dengan &utrient 6rot +aitu nutrient agar berbentuk padat dan &utrient 6rot berbentuk ,air. !u*unan kimia *ama0*ama *intetik. ung*i kimia dari nutrient agar dan nutrient brot *ebagai medium umum. Medium &utrient 6rot (&6)merupakan medium +ang ber1arna ,oklat +ang memiliki kon*i*ten*i +ang ,air dimana medium ini bera*al dari *intetik dan memiliki kegunaan *ebagai medium untuk menumbukan bakteri *ama *eperti medium &'.
IE.
K%!IMPUL'& 6erda*arkan a*il pengamatan dan pembaa*an- maka dapat ditarik beberapa ke*impulan *ebagai berikut : #. Mikroba dapat tumbu dengan baik ika dalam *uatu media ter*ebut memenui
*+arat0*+arat-
+aitu
aru*
mengandung
*emua 8at ara +ang muda digunakan ole mikroba- aru* mempun+ai tekanan o*mo*a- tegangan permukaan dan p +ang *e*uai dengan kebutuan mikroba +ang ditumbuakan ". &utrien 'gar (&') merupakan medium untuk menumbukan bakteri 3. Medium &utrien 'gar (&') berda*arkan *u*unan kimian+a merupakan medium
non0*intetik*emi
alamia-
berda*arkan
kon*i*ten*in+a merupakan medium padat 5. &utrient 6rot (&6) adala medium +ang berbentuk ,air dengan baan da*ar adala ek*trak bee/ dan peptone . Perbedaan kon*entri* antara &utrient 'gar dengan &utrient 6rot +aitu nutrient agar berbentuk padat dan &utrient 6rot berbentuk ,air
E.
D'T'< PU!T'K' 'nnonim."#. Media
NA
NB
PDA.
ttp*:id.*,ribd.,omdo,#3?"3$?99Media0&'0&60PD'. diak*e* " 2ktober "#$ 'lauddin."#. Praktikum
Mikrobiologi.ttp:bio./*t.uin0
alauddin.a,.id/ilebioF/ileP%TU&JUK4"P<'KTIKUM 4"MIK<26I2L27I4""#.pd/ . diak*e* " 2ktober "#$ D1ido*eputro- D.#=9=. Dasar-Dasar Mikrobiologi.Malang:Dambatan &eneng-
Li*1ara."#$. Penuntun
Praktikum
Mikrobiologi.Palangkara+a:UniBer*ita* Palangkara+a
'nna."#".
Bahan
Segar
ttp:*ta//.un+.a,.id*ite*de/ault/ile*pengabdiananna0 rakma1ati0**im*ippm0"#"0baan0*egar.pd/ . diak*e* 2ktober "#$
"