JURNAL PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI LANJUT UJI KATALASE DAN FERMENTASI KARBOHIDRAT
Oleh : Nama
: Afifah Thahirah
NIM
: 1147020001
Kelompok
:6
Dosen
: Opik Taufiqurrohman !"!i
Asis#en
: Devra Ardhitya Trisandy
Tan$$al %rak#ikum
: 14 April 2016
Tan$$al n$$al Masu Masuk k &ap &apor oran an
: 21 21 Apri Aprill 201 2016 6
JURUSAN BIOLOGI FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI UNIVERSITAS UNIVERSITAS ISLAM NEGERI SUNAN GUNUNG DJATI BANDUNG 2016
I
%'NDA()&)AN 1 Tu*uan )n#uk men$u*i kemampuan mikro+a pen$hasil en,im ka#alase -alam men-e$ra-asi • •
2
hi-ro$en peroksi-a" Mempela*ari kemampuan mikro+a un#uk men-e$ra-asi -an memfermen#asi
kar+ohi-ra# .an$ -iser#ai pro-uksi asam a#au asam -an $as" Dasar Teori /ak#eri a-alah or$anisme mikro -an #i-ak -apa# -iliha# -en$an ma#a#elan*an$"
Ke+era-aan +ak#eri umumn.a +ersifa# meru$ikan or$anisme lainn.a .an$-ikenal -en$an is#ilah pa#o$en seper#i: 'sherihia coli, Vibrio sp, Shalmonella sp" -an se+a$ain.a" /ak#eri ini +an.ak -i#emukan hampir -iseluruh me-ia#empa#seper#i: #anah u-ara air -i #u+uh makhluk hi-up -an se+a$ain.a A$ar3al 2005" )*i ka#alase -i$unakan un#uk men$e#ahui ak#ii#as ka#alase pa-a +ak#eri .an$ -iu*i" Ke+an.akan +ak#eri mempro-uksi en,im ka#alase .an$ -apa# memeah (2O2 men*a-i (2O -an O2" 'n,im ka#alase -i-u$a pen#in$ un#uk per#um+uhan aero+ik karena (2O2 .an$ -i+en#uk -en$an per#olon$an +er+a$ai en,im pernafasan +ersifa# raun #erha-ap sel mikro+a" /e+erapa +ak#eri .an$ #ermasuk ka#alase ne$a#if a-alah !#rep#oous &euonos#o &a#o+aillus -an los#ri-ium As#a3an 2005" Or$anisme .an$ #i-ak mempro-uksi ka#alase -ilin-un$i oleh penanaman -en$an *arin$an he3an a#au #um+uhan a#au or$anisme lain .an$ mempun.ai kemampuan mempro-uksi en,im" Ka#alase -ipro-uksi oleh +e+erapa +ak#eri" /e+erapa +ak#eri -ian#aran.a mempro-uksi ka#alase le+ih +an.ak -aripa-a .an$ lain" Ini -i#un*ukkan -en$an *umlah .an$ +an.ak pa-a +ak#eri aero+" !e-an$kan en,im #i-ak -ipro-uksi oleh +ak#eri anaero+ o+li$a# karena mereka #i-ak memerlukan en,im #i-ak -ipro-uksi oleh +ak#eri anaero+ o+li$a# karena mereka #i-ak memerlukan en,im #erse+u# Karmana 20085" /ak#eri ka#alase posi#if +isa men$hasilkan $elem+un$9$elem+un$ oksi$en karena a-an.a pemeahan (2O2 hi-ro$en peroksi-a5 oleh en,im ka#alase .an$ -ihasilkan oleh +ak#eri i#u sen-iri" Komponen (2O2 ini merupakan salah sa#u hasil respirasi aero+ik +ak#eri -imana hasil respirasi #erse+u# *us#ru -apa# men$ham+a# per#um+uhan +ak#eri karena +ersifa# #oksik +a$i +ak#eri i#u sen-iri" Oleh karena i#u komponen ini harus -ipeah a$ar #i-ak +ersifa# #oksik la$i" /ak#eri ka#alase ne$a#if #i-ak men$hasilkan $elem+un$9 $elem+un$" (al ini +erar#i (2O2 .an$ -i+erikan #i-ak -ipeah oleh +ak#eri ka#alase
ne$a#if misaln.a L. casei sehin$$a #i-ak men$hasilkan oksi$en" /ak#eri ka#alase ne$a#if #i-ak memiliki en,im ka#alase .an$ men$uraikan (2O2 (as#u#ik 20025"
Enzim
merupakan
katalisator
sejati,
dimana
molekul
ini
meningkatkan dengan nyata kecepatan reaksi kimia spesifk yang tanpa enzim akan berlangsung sangat lambat. Enzim tidak dapat mengubah titik keseimbangan reaksi yang dikatalisnya, enzim juga tidak akan habis dipakai atau diubah secara permanen oleh reaksi-reaksi ini. Enzim merupakan
biokatalis
yang
berungsi
untuk
membantu
proses
metabolisme. Enzim memiliki kemampuan untuk mengkatalisis suatu reaksi. !uatu enzim adalah suatu katalis biologis. "ampir tiap rekasi biokimia dikatalis oleh enzim#$elczar, %&&'( Enzim merupakan katalis yang lebih efsien daripada kebanyakan katalis laboratorium atau industri. Enzim juga memungkinkan suatu selektivitas pereaksi-pereaksi dan suatu pengendalian laju reaksi yang tidak
dimungkinkan
oleh
kelas
katalis
lain.
)espesifkan
enzim
disebabkan oleh bentuknya yang unik dan oleh gugus-gugus polar #atau nonpolar( yang terdapat dalam struktur enzim tersebut.*eberapa enzim bekerja bersama suatu koaktor nonprotein, yang dapat berupa senya+a organik maupun anorganik #ehninger, /(. "idrolisis 0elatin terdapat Enzim-enzim
yang
menguraikan
golongan
potein
disebut
protenase1protease, kedua nama ini dianggap sinonim. 2ontoh pada hidrolisis gelatin dimana protein diperoleh dari hidrolisis kalogen, yaitu zat pada jaringan penghubung dan tendon dari he+an. 0elatin akan terurai oleh mikrobia yang mensintesis enzim proteolisis. arutan gelatin bersiat cair pada suhu ruang atau suhu kamar dan padat apabila berada di dalam rerigerator. Dan apabila gelatin sudah dihidrolisis oleh mikroba, maka akan tetap bersiat cair #Taylor, 3%(. Me#a+olisme merupakan reaksi9reaksi kimia .an$ #er*a-i pa-a makhluk hi-up" %roses me#a+olisme -i+e-akan men*a-i -ua *enis .ai#u ana+olisme -an ka#a+olisme" Ana+olisme Biosintesis5 .ai#u reaksi +iokimia .an$ meraki# molekul9molekul se-erhana men*a-i molekul9 molekul .an$ le+ih kompleks" Misaln.a p em+en#ukkan pro#ein -ari asam
amino" !eara umum proses ana+olik mem+u#uhkan ener$i" !e-an$kan ka#a+olisme .ai#u reaksi +iokimia .an$ memeah a#au men$uraikan molekul9molekul kompleks men*a-i molekul9molekul .an$ le+ih se-erhana" %roses ka#a+olik melepaskan ener$i .an$ -i+u#uhkan oleh sel alu.o 20045" /ak#eri memiliki ,a#9,a# #er#en#u +aik un#uk men$am+il ,a#;,a# makanan maupun un#uk mem+on$karn.a"
5"
4ermentasi
merupakan
salah
satu
aktivitas
biokimia
yang
dilakukan oleh mikroba. 4ermentasi adalah proses pengubahan senya+a makromolekul organik menjadi senya+a yang lebih sederhana oleh aktivitas mikrobia pada kondisi anaerob. 4ermentasi dapat menghasilkan berbagai senya+a akhir, contohnya ermentasi karbohidrat yang dapat menghasilkan
berbagai
senya+a
asam
seperti
asam
laktat
dan
propionet, ester-ester, keton dan gas #$elczar, %&&'(. 5enis karbohidrat yang digunakan pada uji ermentasi karbohidrat antara lain , sukrosa, laktosa, maltosa dan manitol. 0lukosa dapat langsung masuk dalam jalur ermentasi tahap pertama sedangkan sukrosa, laktosa, manitol dan maltosa akan dihidrolisis terlebih dahulu menjadi
monosakarida
penyusunnya.
galaktosa dan glukosa. !ukrosa
aktosa
dihidrolisis
menjadi
dihidrolisis menjadi glukosa
dan
ruktosa. 6anitol diubah menjadi manosa atau galaktosa. !edangkan maltosa akan dihidrolisis menjadi dua molekul glukosa. 6onosakarida jenis manosa dan galaktosa terlebih dahulu akan diubah menjadi glukosa melalui reaksi epimerisasi . !edangkan ruktosa akan diubah terlebih dahulu menjadi ruktosa 7-osat dan kemudian ruktosa 7osat diubah menjadi glukosa 7- osat. 0lukosa 7-osat dan glukosa hasil epimerisasi galaktosa dan manosa akan masuk dalam tahap a+al
proses ermentasi untuk menghasilkan asam piruvat, asam asetat dan 28% dan kemudian pada tahap kedua ermentasi asam piruvat dan asam asetat direduksi kembali oleh atom hidrogen yang dilepaskan dalam tahap pertama, membentuk asam laktat dan etanol #9utter, %&%(. 6enurut 4ardiaz, #%&&%(, Degradasi ermentasi dalam kondisi anaerob dilakukan dalam kaldu ermentasi yang mengandung tabung durham, sebuah botol batin terbalik untuk mendeteksi produksi gas sebagai
ilustrated.
media
ermentasi
karbohidrat
yang
khas
mengandung: •
;utrisi
bahan
kaldu
untuk
mendukung
pertumbuhan
semua
organisme. •
)arbohidrat
tertentu
yang
berungsi
sebagai
substrat
untuk
menentukan kemampuan ermentasi organisme. •
IIM'TOD' K'?@A
Alat dan *ahan Alat $embakar
5umlah unit
*ahan )ultur e-coli%=-=' jam
bunsen up inokulasi
buah
)ultur S. aureusberumur %=-=' !ecukupnya
% buah unit buah
jam "idrogen $eroksida >? !ecukupnya 6edia 6iring T!A buah 6edia kaldu laktosa merah % buah
Tabung reaksi 9ak tabung Termometer $ipet tetes !pidol
5umlah !ecukupnya
buah
enol 6edia kaldu laktosa merah
buah
Dekstrosa 6edia kaldu
laktosa
% buah
merah % buah
sukrosa
buah
% 2ara kerja
a. Uji Katalase *akteri pada media •
Digoreskan #streak( dengan teknik aseptik dan sisakan satu tabung untuk kontrol •
Diinkubasikan pada kultur pada suhu >3 & 2 selama %=-=' jam
"asil
b. Fermentasi Karbohidrat 6ikroba @ji •
Diinokulasikan pada media yang telah ditentukan dengan teknik aseptik
•
Diperhatikan untuk tidak mengocok tabung ermentasi karena akan memaksa udara masuk kedalam tabung durham. Tabung terakhir digunakan sebagai kontrol •
Diinkubasisemua tabung pada suhu >3 & 2 selama %= jam
"asil
DAFTAR PUSTAKA
A$ar3al A" up#a !" !harma ?"K" 200" ?ole of OBi-a#ie !#ress in Cemale ?epro-u#ion" Journal Reproductive Biology and Endocrinology" 14>5 :>928" As#a3an M Tu#ik An,s /(" 200" %emanfaa#an rumpu# lau# se+a$ai sum+er sera# pan$an un#uk menurunkan koles#erol -arah #ikus" J Hayati" 1215:2>;7" D3i-*osepu#ro D" 200>5" asar!asar "ikrobiologi" @akar#a: @am+a#an"
Car-ia, !rikan-i" 20025" "ikrobiologi #angan $" @akar#a: rame-ia %us#aka" (as#u#ik !ri u#ami 2002. #etun%uk #raktikum "ikro" Malan$ :)MM press Karmana Oman" 2008" Biologi" @akar#a : %T rafin-o Me-ia %ra#ama
$elczar. %&&'. Dasar-dasar Mikrobiologi. 6alang :Djambatan. 9utter, 5. 6. %&%. A !tudy 8 The 2arbohydrate 4ermentation 9eactions 8 2lostridium 8edematiens .Med. Microbiol.> #/( : %'>-%'. Taylor, elton <. and David Achanzar . 3% .2atalase Test as an Aid to the
