UNIVERSIDAD DE CARTAGENA FACULTAD DE INGENIERÍA PROGRAMA DE INGENIERÍA DE ALIMENTOS OBSERVACIÓN DE HONGOS Z. AMEZQUITA 1, S.X. MENDOZA2, L.A.BELTRÁN2, K. TORRES2, J. MARTINEZ2 CARTAGENA MAYO 23 DEL 2013 1. Docente Universidad de Cartagena 2. Estudiante Ingeniería Alimentos
RESUMEN Los hongos están ampliamente distribuidos y se encuentran donde quiera que haya humedad. Tienen gran importancia para los seres humanos, tanto en términos de beneficio como de perjuicio. Es por ello que observamos en el laboratorio de manera macroscópica y microscópica la estructura de hongos unicelulares como levaduras ( Saccharomyces cerevisiae , el microorganismo eucariota mas intensamente estudiado en el mundo) y hongos pluricelulares como mohos que estaban incubados con agar y que provenian de un alimento contaminado.
Palabras claves: Hongo, levadura, moho, glicerina, agar
ABSTRACT The fungi are widely distributed and are found wherever there is moisture. They have great importance for humans, both in terms of benefit and injury. That is why we observe in the laboratory on a macroscopic and microscopic unicellular fungi structure as yeast (Saccharomyces cerevisiae, the most intensively studied eukaryotic organism in the world) and multicellular fungi and molds that were incubated with agar and were from a food polluted.
Keywords: Fungus, yeast, mold, glycerin, agar
INTRODUCCIÓN
El term termin inoo hong hongoo [del [del latí latínn fungus, seta seta]] incluye incluye organismo organismoss eucariotas eucariotas sin clorofila clorofila,, que se reproducen reproducen de forma asexual asexual y sexual, sexual,
unicelulares (levaduras) o pluricelulares (moho) que, a diferencia de las plantas y los animales, se alimentan mediante la absorción directa de nutrientes, que obtienen mediante la degradación de moléculas de alimento del medio (nutrición absortiva).
Los hongos son fundamentalmente organismos terrestres, aunque algunos son de agua dulce o marinos. Muchos son patógenos, e infectan plantas y animales.los hongos establecen también relaciones beneficiosas con otros organismos. Por ejemplo, aproximadamente tres cuartas partes de todas las plantas vasculares forman asociaciones (llamadas micorrizas) entre sus raíces y los hongos. También se encuentran hongos en la parte superior de muchas plantas. Estos hongos endofîticos afectan a la reproducción de las plantas y a su sabor para los herbívoros. Los líquenes son asociaciones de hongos y algas o cianobacterias. A excepción de las especies unicelulares, la mayoría de los hongos (mohos) están constituidos por filamentos tubulares que reciben el nombre de hifas. Cada hifa está rodeada por una pared celular que normalmente contiene quitina, un polisacárido que también forma parte del exoesqueleto de los insectos. Las hifas crecen por alargamiento de las puntas y también por ramificación. La proliferación de hifas, resultante de este crecimiento, se llama micelio.
Los hongos han sido utilizados desde antiguo como alimento. Muchas especies de setas son comestibles, como el champiñón. Otros hongos se emplean en la producción o fabricación de alimentos. Las levaduras, por ejemplo, son necesarias en la fabricación del vino, en la fermentación del pan y en la elaboración de la cerveza. Ciertos hongos se emplean en el proceso de maduración del queso, en los quesos Brie, Camembert y Roquefort.
Los hongos también son muy importantes en la producción de antibióticos; por ejemplo, la penicilina y la ciclosporina, son utilizadas para luchar contras las enfermedades fúngicas y bacterianas. El objetivo de esta práctica es la identificación de las estructuras de los hongos.
MATERIALES • •
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Glicerina 8 Cajas petri de vidrio Agar Sabouraud 5 varillas de vidrio dobladas en forma de “U” Azul de lactofenol Portaobjetos Agua Cubreobjetos Gasa Bisturí Algodón 1 pinzas de disección Papel de estraza 3 Pipetas de 10 ml estériles 1 Matraz erlenmeyer de 250ml
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1 Microscopio óptico 1 Microscopio de disección 2 mecheros Fisher Cuenta colonias
PROCEDIMIENTO Observación de levaduras: 1. Toma una asada de levadura suspendida en solución salina. Colóquela en un portaobjeto cúbrala con una laminilla y obsérvela con 10 y 40 X realice el esquema 2. En un portaobjeto, coloque una gota de lugol tome una asada de la suspensión de levadura y haga una emulsión con el asa: Coloque un cubreobjeto y observa el microscopio con 10 y 40X. 3. Trate de identificar las siguientes estructuras pared celular, núcleo, vacuolas etc. Realice el esquema de lo observado.
Observacion de mohos: 1. Examine las colonias de los hongos presentes en las cajas con agar Sabouraud. Describa consistencia color y forma. 2. Prepara una placa tomando con un asa estéril una muestra de cultivo deposítela en un portaobjeto el cual previamente se le ha adicionado una gota de azul de lactofenol: Luego póngale una laminilla y presione con la yema de los dedos o con el borrador del lápiz. Observe al microscopio con objetivo de 10 y 40X haga esquema del tipo de hifa y órgano de reproducción. Identifique el género de Moho.
• Agar Sabouraud: Preparar medio siguiendo las indicaciones del reactivo. 2. Preparar 6 cajas petri (por equipo) de la siguiente forma: • Colocar una varilla de vidrio en forma de “U” dentro de la caja encima de esta un portaobjetos y 2 cubreobjetos, cerrar la caja. • Colocar las cajas petri preparadas de acuerdo al punto anterior en un cilindro para esterilizar cajas petri. Nota: esterilizar pipetas, medio de cultivo, agua glicerinada, bisturí y pinzas envueltas en papel de estraza y los cilindros con cajas petri y pipetas en el autoclave 3. En condiciones asépticas vaciar el agar a 2 cajas petri (por equipo) calcular aproximadamente 25 ml por caja. Preparación del microcultivo 1. Bajo condiciones estériles y con ayuda de un bisturí cortar cuadros pequeños de agar aproximadamente de 1 cm X 1 cm. 2. Utilizando las pinzas de disección colocar en cada una de las cajas petri un cuadro de agar sobre el portaobjetos. 3. Con el asa estéril inocular por picadura en cada uno de los 4 lados del cuadro de agar hongos (muestra y aquellos proporcionados por el profesor). Colocar con la ayuda de las pinzas de disección estériles el cubreobjetos encima del agar. 4. Adicionar agua glicerinada estéril a cada una de las cajas petri hasta cubrir dos terceras partes de la varilla de vidrio. Tapar las cajas. 5. Incubar las cajas a 30ºC durante una semana. Verificar que las cajas conserven un nivel adecuado de agua glicerinada.
Técnicas de cultivo
Observación de los hongos
Microcultivo 1. Preparación de reactivos y medio de cultivo: • Solución glicerinada al 5 % (5 ml de glicerina en 100 ml de agua)
1. Observar con el microscopio de disección los hongos desarrollados después de 7 días de incubación.
2. En un portaobjetos colocar una gota de lugol y cubrirla con el cubreobjetos que proviene del microcultivo, observar al microscopio óptico.
Con respecto a los mohos, las colonias presentes en la caja de petri con agar Saboraud, observamos lo siguiente:
3. Observar al microscopio el portaobjetos del microcultivo, retirar el cuadro de agar, agregar una gota de solución de lactofenol y cubrir con un cubreobjetos limpio.
RESULTADOS Con respecto a la observacion de levaduras vimos colonias de levaduras, las cuales tenian forma esferica u ovoide
En el microoscopio observamos en el moho unos filamentos largos a modo de hilos de celulas ramificadas (hifas).
Imagen a 10X Se ve muchas hifas
CUESTIONARIO 1. Explica ¿cuáles son las características distintivas de los hongos? RTA: unicelulares y pluricelulares carentes de clorofila y con nutrición heterotrófica digestión extracelular reproducción sexual y asexual esporas • •
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2. ¿Cuáles son los principales criterios de clasificación? RTA: principal criterio de clasificación en los hongos en la reproducción sexual, en diferentes caracteres, macroscópico, microscópico y mediante su DNA. Imagen 40X Aquí se puede ver mas claro las hifas y esporaas
3. ¿Cómo están divididos? RTA: • •
Chytridiomycota Zygomycota
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Glomeromycota
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Basidiomycota
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Ascomycota
4. ¿Cuáles son las principales diferencias ente hongos y levaduras? RTA: HONGOS 1- Pertenecen al Reino Fungi. 2- Son Unicelulares en el caso de los MOHOS y Pluricelulares en el caso de los Hongos Superiores. 3- Son Descomponedores, junto con las bacterias, transformando la materia orgánica muerta en materia inorgánica formando así el HUMUS o Tierra Negra, muy fértil para los vegetales. 4- Algunos hongos son PARÁSITOS, alimentándose de plantas, animales o incluso de otras especies de hongos y otros son SAPROFITOS ya que obtienen el alimento de la materia orgánica muerta. Algunos hongos establecen relaciones simbióticas con otros organismos. Por ejemplo, las raíces de muchas especies de plantas desarrollan una asociación beneficiosa con los hongos formando una MICORRIZA. 5- Son AEROBIOS, es decir necesitan del O2 para vivir. 6- Se diferencian en el hongo el Cuerpo Vegetativo y el Reproductivo.
beneficiosos. 5- No existen en ellos una distinción entre cuerpo Vegetativo y Reproductivo. 6- Producen enzimas capaces de descomponer diversos sustratos, principalmente los azúcares.
LEVADURAS 1- Pertenecen al Reino Protista 2- Son Unicelulares únicamente. 3- Son microorganismos facultativos que pueden RESPIRAR de forma ANAEROBIA, es decir sin la presencia de O2. 4- Son importantes por su capacidad para realizar la FERMENTACIÓN de hidratos de carbono, produciendo distintas sustancias, por ejemplo el alcohol etílico, son excretados por la levadura como producto de desecho, ya que en ausencia de O2 éste producto no puede ser aprovechado en su totalidad. Son
c. Ascomicetos Sexual: Ascosporas Asexual: Conidios
5. Explica en qué consisten las reproducciones asexuales y sexuales en: a. Oomicetos b. Basidiomicetos c. Ascomicetos d. Zigomicetos e. Deuteromicetos RTA: a. Oomicetos Asexual: Zoosporas Sexual: Oosporas b. Basidiomicetos Asexual: Esporas (en soros) Sexual: Basiodiosporas
d. Zigomicetos Asexual: Esporangiosporas Sexual: Zigospora e. Deuteromicetos Asexual: Conidios o esporas
Sexual: No tiene
CONCLUSIÓN Con esta práctica pudimos ver las diferentes partes que tienen los hongos y levaduras. La micología o el estudio de los hongos nos han sido muy útil desde sus inicios, la cual nos permite clasificar estos seres para una mayor comprensión de científicos e investigadores que trabajan día a día con ellos.
