Universidad Técnica de Manabí Facultad de Ciencias Matemáticas Físicas y Químicas Laboratorio de Microbiología
Informe de Hongos y Levaduras Pertenece a: Andrade
Díaz Fidel Ernesto
Fecha: 8 de enero de 2013 Ingeniería Química
VII Nivel “E”
Catedrática: Ing. Virginia Sánchez
Laboratorio de Microbiología Informe #4 Tema:
Identificación de Hongos y Levaduras Objetivo General:
.Determinar presencia o ausencia de hongos y levaduras en una muestra de tierra de la Universidad Técnica de Manabí
Objetivos Específicos:
.Aplicar todos los conocimientos obtenidos en el curso de Microbiología Determinar la presencia de hongos y levaduras
Marco Teórico:
Los hongos son microorganismo eucariota de mayor tamaño y complejidad que las bacterias. Según su morfología los hongos se pueden dividir en dos grupos: mohos (hongos filamentosos) y levaduras. Las levaduras son unicelulares y generalmente presentan reproducción asexual por gemación.
Los mohos presentan una estructura vegetativa denominada micelio, el cual está formado por una serie de tubos rígidos ramificados, dentro de los cuales se encuentra el citoplasma multinucleado. Estos tubos reciben el nombre de hifas. De esta forma a partir de una espora en germinación se desarrolla una hifa, esta se ramifica y forma un micelio. El crecimiento del hongo se prolonga hasta que los nutrientes desaparezcan. Las hifas pueden ser de dos tipos: vegetativas que penetran el substrato con el fin de
Absorber nutrientes e hifas aéreas que son las portadoras de las estructuras reproductoras. La clasificación de los hongos se hace según las características de las hifas, la formación de esporas asexuales, las estructuras que contienen éstas y la capacidad de producir esporas sexuales.
Orden de caracteres para la identificación en hongos: ▪ Aspecto macroscópico de la colonia ▪ Tipo de hifa ▪ Colocación del o los esporóforos ▪ Presencia de esterigmatas (esporangióforo o coni dióforo) y el orden que presentan ▪ Forma tamaño y distribución de las esporas ▪ Presencia o no de rizoides. Sólo se presentan en hongos de hifa no septada. Por ejemplo: Rihizopus, Rhizomucor, Absidia ▪ Practicar pruebas de identificación bioquímica
Materiales y Equipos
Autoclave Balanza Analítica Contador de colonias Pera Incubadora Cabina de Flujo Laminar (Biobase) Pipetas Matraz Cajas Petri Tubos de ensayo Hornilla eléctrica
Sustancias y Reactivos
Agar Sabouraud Dextrose Agar with Chloramplenicol Agua Peptonada Agua Residual Agua destilada
Procedimientos: Medio de cultivos:
Medio de Cultivo: Sabouraud Dextrose Agar with Chloramplenicol
1. Combinar 19,5g de medio con 300ml de agua desionizada. Mezclar para obtener una solución homogénea 2. Hervir el agua desionizada para disolver completamente. No sobrecalentar. 3. Autoclavamos a 121°C por 15 minutos.
Agua Peptonada 1. Suspender 7,5g en 500ml de agua destilada. Mezclar bien y dispensar en tubos.
2. Autoclavar a 121ºC por 15min
Preparación de la muestra:
Tierra: 1. Tomamos un frasco para muestra previamente esterilizado, colocamos la tierra y tapamos. 2. Pesamos 1g de la muestra y la diluimos en agua destilada hasta obtener una solución no tan turbia. Diluimos 1g en 350ml. 3. Trasladamos la muestra diluida a la cabina de flujo laminar para realizar disoluciones. Realizamos 4 disoluciones en tubos de ensayo 1ml de la muestra y 10 de agua peptonada. 4. Tomamos 1ml del primer tubo y lo depositamos en una caja petri. Realizamos el mismo proceso con los demás tubos 2, 3, 4, por vertido doble. 5. Colocamos el medio en las cajas petri que contienen las muestras de los tubos. Esperamos hasta que gelifique. 6. Incubamos por 1 semana a 20°C. 7. Observamos los resultados.
Resultados:
Disolución #1 (Tubo #1) Presencia de 5 hongos y 8 levaduras Disolución #2 (Tubo #2) Presencia de 1 levadura y 2 hongos
Disolución #2 (Tubo #2’) Presencia de 3 levaduras y 2 hongos
Disolución #3 (Tubo #3) Presencia de 3 levaduras y 2 hongos Disolución #3 (Tubo #3’) Presencia de 2 levaduras y 1 hongo Disolución #4 (Tubo #4 y 4’) No se observó presencia de levaduras ni hongos.
Conclusiones:
La obtención de Hongos fue claramente exitosa, lo q demuestra una práctica exitosa Las muestras más contaminadas determinamos que fueron la tercera ya que en este hubo mayor presencia de hongos
Recomendaciones:
Utilizar guantes, mascarilla, gorros para evitar la contaminación de las muestras mientras se las manipula. Mantener todos lo instrumentos y las muestras dentro del área estéril del laboratorio para evitar contaminación externa.
