Informe de Aislamiento de Hongos

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AISLAMIENTO DE HONGOS CURSO:

MICROBIOLOGIA GENERAL

PROFESOR:

CORDERO AZABACHE, Jorge Eduardo

INTEGRANTES:

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SECCION: GRUPO:

CODIGO:

HUAYLLANI HILARIO, Kael ILARES QUISPE, Henry LARA NINAHUANCA, Jorge RIVERA VILLANES, Diana TICSE HUAMAN, Jesid

U2011116833 U2010208193 U2010114090 U2010207091 U2010208687 U2010208687

BI1001 I-1

HUANCAYO PERU 2013 - I –

ÍNDICE OBJETIVOS

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……………………………………………………………………………

GENERAL

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……………………………………………………………... ….

ESPECIFICO

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INTRODUCCIÓN

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………………………………………………………………….……

MARCO TEÓRICO................................................................................................5 TEÓRICO................................................................................................5 MATERIALES Y METODOS .

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… ……………………………………………………..…

PROCEDIMIENTOS ..........................................................................................10 …

RESULTADOS

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……………………………………………………… ……………… …

DISCUCIÓN DE RESULTADOS

…………………………………

CONCLUSIONES

…………………

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...25

………………

BIBLIOGRAFÍA

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……………..

ANEXOS

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……………

…………………………………………………………

…………………………………………………………………

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MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL

OBJETIVOS

Objetivo general 

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Identificar los distintos tipos de hongos que se pueden encontrar en muestras biológicas y ambientales. Aislar y sembrar a estos hongos en placas Petri utilizando correctamente sus respectivos agares y caldos de cultivo, en distintos métodos de aislamiento.

Objetivo específico 

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Conocer las características macro morfológicas de colonias fúngicas de distintos tipos de hongos ya sea en: color, superficie, borde, consistencia, aspecto y desarrollo. Atender las explicaciones y sugerencias de nuestro docente antes de realizar las prácticas de laboratorio de microbiología en el aislamiento de hongos.

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INTRODUCCION Los hongos no son plantas ni animales, aunque se parezcan en algunas de sus características tanto a las unas como a los otros. A las plantas, por ser organismos sedentarios que se encuentran fijos a un sustrato y, mientras están vivos, no cesan de crecer. A los animales, pues, aunque las células de los hongos poseen pared como las de las plantas, las paredes celulares fúngicas son ricas en quitina, la misma sustancia que hace duro el esqueleto externo de los insectos. En realidad, los organismos que conocemos como hongos tienen diferentes orígenes en el árbol de la vida, razón por la cual se distribuyen en tres distintos reinos. La mayoría, los más familiares y reconocibles, conforman el reino de los hongos verdaderos (Fungí o Eumycota). Otros se ubican en el mismo reino de las amebas, el llamado Protozoo, como es el caso de los hongos mucilaginosos; y otros más, entre los que se cuentan ciertos mohos acuáticos que parasitan peces, comparten un tercer reino, el denominado Chromista, con las diatomeas, esas particulares algas microscópicas de curiosa simetría. En el presente informe se presentara como se da el crecimiento de hongos en los alimentos, aguas, etc, para lo cual se está detallando cada procedimiento y se está dando a conocer cada resultado para tener una idea m ás clara de cómo actúan. El éxito de la práctica está en la observación de cada detalle en la morfología de los tipos de hongos, en seguir en orden correcto los pasos de cada experimento, en la habilidad en el manejo adecuado de cada material y reactivo .Es por eso que para una correcta realización de trabajo de práctica es necesario familiarizarse con los nombres, funciones, manejo adecuado del material de laboratorio de microbiología para la preparación de aislamientos de hongos.

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MARCO TEÓRICO LOS HONGOS Los hongos son un grupo extraordinariamente diverso de eucariontes que difieren mucho por sus características estructurales y sus modos de reproducción. Tienen muy poco en común, excepto la nutrición heterotrófica obligada, por la ausencia de clorofila. Sus células están incluidas en paredes celulares por lo menos en alguna de su ciclo vital, y producen algún tipo de espora, generalmente en gran número. Existen dos grupos de hongos: 1. Myxomycota o mohos del légamo incluyen los mohos plasmodiales del légamo que difieren netamente en su estructura y por sus medios de reproducción. Los mohos de légamo celulares son parecidos a los protozoarios y remedan amibas durante la mayor parte de sus etapas vitales. No tienen células flageladas y las esporas no se producen por divisiones citoplasmáticas, como en otros hongos, sino por formación de paredes alrededor de células amiboides individuales.

2. Eumycota u hongos verdaderos hay unas 80000 especies de hongos verdaderos, coinciden en muchas propiedades con las algas, por lo que se piensa que proceden de una o varias divisiones de algas. Los hongos verdaderos comprenden desde levaduras, ciertos mohos, mildéu, royas, tizones y setas. Algunos hongos verdaderos son unicelulares, pero la mayoría son pluricelulares formados de filamentos ramificados llamados hifas. La pared celular externa del hongo puede estar expuesta de quitina, lignina o celulosa. Toda la masa de hifa ramificada que forma un solo hongo se llama micelio. La presencia de micelio es una de las características de Eumycophyta. En el moho común del pan este micelio se presenta de forma presenta en forma de una masa de hebras entrelazadas sobre la superficie, las que penetran en el interior del pan. En otros hongos, por ejemplo las setas, gran parte del micelio se encuentra bajo tierra. El sombrero del hongo que comemos es el cuerpo esporífero, una estructura reductora especializada que se desarrolla del micelio subterráneo. Los hongos son saprofitos o parásitos; se encuentran dondequiera que exista substancia orgánica disponible; se desarrolla mejor en lugares obscuros y húmedos. Algunos hongos pueden crecer aún bajo condiciones al parecer muy desfavorables, resisten 5


considerablemente la plasmólisis, pueden desarrollarse en soluciones concentradas de sal o azúcar, por ejemplo sobre confitura. Al ramificarse el micelio y establecer contactos con substancia orgánica, secreta enzimas que desdoblan las proteínas, carbohidratos y grasas, y absorbe productos secundarios. En esta forma muchos hongos intervienen en forma importante en ciclos como del carbono, nitrógeno; desintegran los compuestos orgánicos que existen en las hojas muertas y troncos muertos, y los transforman nuevamente en compuestos que pueden ser utilizados para el ciclo.

CLASES DE EUMYCOTA 

ZYGOMICETES

Es una división de hongos, que incluye alrededor de mil cincuenta especies. Los hongos pertenecientes al filo Zygomycota se caracterizan por formar zigosporas con gruesas paredes, de origen sexual y esporangiosporas no nadadoras, de origen asexual. El moho negro del pan (Rhizopus nigricans), un representante bien conocido de este grupo del orden Mucorales, produce masas de hifas sobre pan, fruta y otros alimentos deteriorados. El cuerpo de este hongo, compuesto de hifas no septadas, muestra que a pesar de una pequeña diferenciación celular entre los hongos, las hifas pueden especializarse por varios propósitos. Los hongos del orden Entomoftorales son parásitos de las moscas, miniaturas y de otros insectos. Son organismos sapotróficos, se mantienen de restos de plantas y animales del suelo. Tienen esporangiosporas sencillas dentro de unos receptáculos; en el interior de cada uno de ellos se desarrollan unas estructuras que llegan a independizarse y funcionar como conidios. El orden Zoopagales comprende hongos parásitos de amebas, nematodos y artrópodos. Los hongos zigospora producen esporas dentro de los esporangios y durante la reproducción sexual, se forma una zigospora antes de la meiosis y la producción de esporas. La mayoría de los hongos conocidos como mohos, como los del pan o la fruta, pertenecen a esta división. 

ASCOMYCETES

Son hongos con micelio tabicado que producen ascosporas endógenas. Hay unas 64.000 especies. Es la División (Filo) más grande del Reino Fungí. Pueden ser unicelulares y talófitos. La reproducción puede ser de dos tipos: asexual, por esporas exógenas (conidios o conidioesporas), y sexual, esporas endógenas (ascospora).Han sido aislados de lugares extremos, 6


desde dentro de rocas en la planicie helada de Antártica hasta las profundidades del mar. En los grupos más evolucionados se forman ascocarpos o cuerpos de fructificación (esporocarpo). Existen en ambientes terrestres y acuáticos, en sustratos como la madera, materiales de queratina (uñas, plumas, cuernos y pelos), estiércol, suelo y alimento, entre otros. Pueden ser parásitos de animales y el hombre, además de atacar a las plantas. Entre los más sencillos destacan las levaduras responsables de la fermentación. 

DEUTEROMYCETES

Los hongos imperfectos (fungí imperfecto), antiguamente llamados deuteromicetes (Deuteromycetes) o deuteromicotas (Deuteromicotas), comprenden más de 15000 especies diferentes1 que se clasifican juntas porque no se conoce en ellas la fase sexual de reproducción. De ordinario, se trata de hongos de los filos Ascomycota y Basidiomycota que se reproducen asexualmente. Son de gran importancia para el hombre por ser el filo de mayor patogenicidad humana dentro del Reino Fungí y tienen una gran peso en el campo de la Biotecnología. Entre sus miembros asimismo se encuentran los géneros Penicillium2 y Aspergillus, entre otras de gran fama. El término deuteromicotas antes considerado un filo formal ha caído hoy en desuso dado que los hongos imperfectos no encajan en la clasificación taxonómica común de los hongos basada en el concepto de especie biológica o en las características morfológicas de las estructuras sexuales (porque, como ya se dijo, no se conoce su fase de reproducción sexual); de ahí deviene la denominación de "imperfectos". Los deuteromicetes son organismos saprófitos oportunistas que se reproducen asexualmente por medio de conidios. Cada conidio forma una hifa y el conjunto de hifas luego forman los micelios constituidos por hifas tabicadas. 

BASIDIOMYCETES

Son una división del reino Fungí que incluye los hongos que producen basidios con basiodiosporas. Contiene a las clásicas setas y hongos con sombrero. Este filo es el más evolucionado y el más conocido pues comprende numerosos y variados tipos de hongos. Cuando son de carácter heterotálico, el micelio primario sufre dicariotización (somatogamia o espermatización) produciendo hifas dicarióticas que corresponden al micelio 7


secundario. En los hongos de carácter homotálico una basiodiospora produce el micelio dicariótico. Hay presencia de quitina en las paredes celulares, y aparecen unas estructuras llamadas fíbulas, muy parecidas a los uncínulos de los ascomicetos. 

CARACTERÍSTICAS MACROMORFOLOGICAS DE COLONIAS FÚNGICAS

COLOR · ANVERSO · REVERSO producción de pigmento difusible SUPERFICIE · LISA · ACUMINADA · CRATERIFORME · RADIADA · UMBILICADA · CEREBRIFORME BORDE · LISO · RADIADO · FESTONEADO · LOBULADO CONSISTENCIA · BLANDA · FILANTE · ADHERENTE · LEÑOSA ASPECTO · CREMOSO · YESOSO · CEREBRIFORME · ALGODONOSO · AFELPADO · ATERCIOPELADO DESARROLLO · POBRE · REGULAR · ABUNDANTE

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INSTRUMENTAL DE LABORATORIO Y METODOS Materiales:                    

1 Una balanza ordinaria. 1 Estufa 1 rejilla. 1 probeta graduada. 4 vasos de precipitado. 1 Varillas o braguetas de vidrio.

Pipetas graduadas de 1 ml al 0.01 Pipetas graduadas de 5 ml al 0.1 Tubos de prueba 16x150 mm. Placas Petri 15x100 mm. 1 Gradillas. 1 Espátulas para pesar. 1 asa de siembra

Pinzas de punta roma. 1 pro pipeta Microscópico Espátulas Drigalsky Láminas y laminillas Hisopos estériles. Homogenizador Mechero de bunsen

Medios de cultivo:

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Agar licuado. Agar papa dextrosa Agar extracto de lavadura-malta Agar Sabouraud glucosado Agar extracto de malta

Reactivos:  

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Azul lactofenol Agua destilada


PROCEDIMIENTOS Procedimiento 1: Aislamiento de Zigomycetes Acuáticos.  

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Depositamos aproximadamente 15 ml de agua de charco o acequia en una placa Petri estéril. Con ayuda de una pinza depositamos 2 a 3 carnadas (moscas), previamente cortadas en trozos pequeños y sometidos a una sumersión rápida en agua hirviendo, sobre la superficie del agua. Utilizamos un sólo tipo de carnada por placa. Dejamos en incubación por 3 a 4 días, a temperatura ambiente. Para la observación microscópica recogemos con ayuda del asa de siembra y pinzas, la carnada que se encuentra recubierta por hifas y depositamos sobre una gota de azul de Lactofenol en una lámina. Cubrimos con una laminilla.

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Procedimiento 2: Aislamiento de Zigomycetes Terrestres.  

Depositamos un pequeño trozo de estiércol sobre una placa de agar papa dextrosa. Dejamos en incubación por 3 a 4 días, a temperatura ambiente. Observamos en el microscopio.

Procedimiento 3: Aislamiento de Ascomycetes - Levaduriformes     

Sembramos la bebida alcohólica (vino) en una placa de agar extracto de lavadura-malta. incubamos a temperatura ambiente por 2 a 3 días. observamos la formación de colonias elevadas, opacas, grandes y bien definidas. Con el asa de siembra, recogimos parte de la colonia y depositarla sobre una gota de azul de Lactofenol en una lámina y cubrir con una laminilla. Observamos en el microscopio.

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Procedimiento 4: Aislamiento de Deuteromycetes - Filamentosos   

Con ayuda de una asa de siembra, depositamos una pequeña porción de la muestra sobre un tubo con agar papa dextrosa. Incubamos a temperatura ambiente por 3 a 4 días. hicimos el estudio de las colonias que desarrollan visto en el microscopio.

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Procedimiento 5: Aislamiento de Deuteromycetes Levaduriformes –

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Utilizamos un hisopo estéril, bien lavado y esterilizado en autoclave. Frotamos la superficie de la piel (de preferencia planta y espacios interdigitales de los pies) enérgicamente en sentido circular. Estriamos el hisopo sobre un placa con agar Sabouraud glucosado más Cloramfenicol. incubamos a temperatura ambiente, sin invertir la placa, durante 48 horas. hicimos el estudio de las levaduras aisladas observadas en el microscopio.

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Procedimiento 6: Aislamiento de Basidiomycetes Levaduriformes –

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Identificamos los soros cerrados en plantas infectadas. Abrimos el soro, con asa de siembra estéril, tomamos una muestra de las esporas y sembramos en una placa con agar extracto de malta. Incubamos a temperatura ambiente por 3 a 4 días. Observamos el desarrollo de colonias y resembrar el micelio en tubos con agar extracto de malta.

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RESULTADOS Los integrantes del grupo I - 1 del laboratorio de microbiología general realizamos la práctica de aislamiento de hongos. De los cuales trabajamos en la identificación de los hongos sembrados con anticipación y también la identificación de su crecimiento a una temperatura ambiente. De una forma segura en relación con la bioseguridad de cada uno de nosotros para poder así lograr una buena y exitosa práctica de laboratorio (experimentación). Asimilamos los procedimientos de la práctica que el docente nos daba a conocer todo esto en relación al aislamiento de hongos, ante toda mucha limpieza en la mesa de trabajo para poder desarrollar una buena práctica. Se dio el siguiente reporte de resultados:

CARACTERÍSTICAS MACROMORFOLOGICAS DE COLONIAS FÚNGICAS MUESTRAS

TIPO DE HONGOS

FORMA

ELEVACION

MARGEN

DESARROLLO

BEBIDA FERMENTADA – VINO

Ascomycetes Levaduriformes

Circular (esporangios -poras)

Pulvinada

Entero

Abundante

AGUA DE CHARCO CON CARNADAS (MOSCAS)

Zigomycetes Acuáticos

Filamentosa

Convexa

Lobulada

Abundante

ESTIERCOL DE VACUNO (Mucoráceos)

Zigomycetes Terrestre

Irregular

Umbonada Ondulado

Abundante

INODORO DEL BAÑO DURAZNO CONTAMINADO

Basidiomycetes

Filamentosa

Umbonada

Lobulada

Abundante

Deuteromycetes

Rizoide

Elevada

Lobulada

Abundante

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MUESTRAS

OBSERBACIONES

VINO

AGUA DE CHARCO CON MOSCAS

ESTIERCOL DE VACUNO

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MUESTRAS

OBSERBACIONES

INODORO DEL BAÑO

DURAZNO CONTAMINADO

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DISCUSION DE RESULTADOS En la discusión de resultados especificamos y analizamos el aislamiento de hongos, en medios de cultivo, que nos permitieron reconocer los diferentes tipos de hongos siendo de muchísima importancia en el laboratorio de microbiología por lo que un control en su preparación y conservación en uso dando por seguro la exactitud y confiabilidad de nuestros resultados obtenidos en el proceso de observación en el m icroscopio. Por otro lado se encontraron diferentes fuentes bibliográficas de esta práctica de laboratorio donde se dieron procesos de identificación de los tipos de hongos, donde se suscitaron el crecimiento y morfología de los hongos, por la cual para la redacción de la discusión de resultados el grupo Nº I - 1 tuvo que analizar y responder las aspectos importantes de cada proceso de experimentación. 

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REFERENCIA BIBLIOGRAFICA :

UNIVERSIDAD PEDAGOGICA Y TECNOLOGICA DE COLOMBIA FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS TUNJA 2011 AISLAMIENTO DE HONGOS ASOSIADOS A SINTOMAS DE ENFERMEDADES.

DISCUCIÓN.

En este trabajo sus objetivos son diferentes a los nuestros ya que ellos consideraron a las enfermedades y sus síntomas a diferencia de nosotros que las cuales eran de identificación de tipos de Hongos y caracterización de las colonias formadas por hongos aislados y sembrados en placas Petri. Trabajaron únicamente con frutas a diferencia de nosotros que trabajamos con alimentos en estado de descomposición, agua estancada, etc. En lo que es los procedimientos nosotros utilizamos con ayuda de las asas de siembras aislar directamente de las muestras y sembrarlas en agar. Este informe citado realiza algunos pasos más como por decir: cortan los trozos de cascara de naranja una de ellas infectada y la otra sin infectar.

Luego de ello, realizan una desinfección de ambos trocitos de cascara de naranja con ayuda de unas gasas cortadas sumergiéndolas en etanol y luego en agua destilada, 18


para que posteriormente lo sembraran en una placa Petri con PDA acidulado en mismo tiempo que nosotros de 7 a 8 días a temperatura ambiente (25°C). En lo que son resultados ellos encontraron lo que es Penisillum en la naranja. En nuestro informe nosotros encontramos diferentes tipos de hongos de acuerdo a su habitad. Caracterizamos sus formas de colonias formadas y también observamos en el microscopio sus partes como son las hifas, etc. -

Los resultados que obtuvimos de nuestro trabajo de laboratorio, expresa a través de imágenes las propiedades físicas (Características macro morfológicas, etc.) que tiene cada tipo de hongo, conociendo el origen (hábitat) en donde los podemos encontrar, nuestras imágenes tomadas y plasmadas en el informe, dicho trabajo hace eco de las formas que presenta cada hongo, algunos benéficos para el hombre y también perjudiciales, lo importante del trabajo de laboratorio, no es solo limitarnos a observar lo que obtuvimos al ver en el microscopio si no interpretar las funciones peculiares que cada tipo de hongo tiene y genera frente a una situación, a lo largo de la vida los hongos han sido de ayuda para el hombre en aspectos alimenticios, salud, etc. Por ello es importante poder experimentar acerca de las propiedades que estas nos ofrecen y poder darles un uso adecuado para nuestro bien. Los puntos limitantes que se observaron , fueron las deficiencias que tuvimos al momento observar las muestras en el microscopio, ya que en algunos medios no lograron prosperar el crecimiento de nuestro hongos, causante de que no podamos observar todos los tipos de hongos que inoculamos en los distintos medios de cultivo.

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http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0187-31802009000100003

El presente link es sobre una revista científica, en la cual se estudiaron hongos presentes en los libros y el ambiente de una biblioteca del cual se aislaron un total de 409 unidades formadoras de colonias (UFC) en agar con dextrosa y papa y agar celulosa, localizadas en el ambiente (89.7%) y en los libros (10.3%). El 37.16% de las UFC se detectaron en el Depósito General, el 9.78% en el Depósito de la Hemeroteca y un 34.97% en la Colección de Libros Antiguos. En total se encontraron 17 géneros, predominando Cladosporium (59.72%), Fusarium (9,31%), Curvularia(6,62%), Aspergillu s (6,37%) y Chaetomium (5,64%). Todos mostraron capacidad para crecer en agar celulosa. De los cuales a través de las muestras tomadas y el método aplicado se llegó a obtener Los principales géneros causantes de biodeterioro en la biblioteca los cuales fueron: Aspergillus, Penisillum y Chaetomium. La abundancia de UFC pertenecientes a los géneros Aspergillus, Cladosporium y Fusarium coloca en riesgo la salud de los funcionarios de la biblioteca. Las condiciones ambientales de la biblioteca de la Universidad del Valle necesitan controlarse en todas las salas ajustándolas a las siguientes condiciones ambientales: temperatura entre 19 y 20 °C; humedad relativa entre 45 y 55 %. Se debe implementar un programa de mantenimiento y conservación con periodicidad anual por parte de la Universidad. Además de limpiar periódicamente estanterías, paredes y aspirar el exterior de los libros, desinfectando los pisos con 19


productos químicos inocuos para el papel. También es necesario establecer un programa de monitoreo continuo de las colecciones para detectar focos de contaminación y realizar labores puntuales de prevención y control. Se recomienda realizar un trabajo de investigación sobre los diferentes tipos de control empleando técnicas de combinaciones cruzadas de termonebulización y luz ultravioleta, debido a la importancia de proteger las colecciones de la biblioteca central de la Universidad. De la presente revista científica, el punto que nos llama la atención es que, aparte de perjudicar a los materiales que se encuentran en dicho lugar, son también un riesgo a la salud de los trabajadores, de allí parte la importancia de poder conocer los medios en los cuales estos se pueden proliferar, para no vivir a expensas de riesgos de rutina, el mundo de los hongos es muy amplio, los podemos encontrar en muchos lugares, más cerca de los que creemos, el convivir con ellos es necesario, el alterar su medio a veces no es viable, el conocer más sobre estos nos permitirá, poder tomar acciones en las situaciones que creamos de riesgo, por ello en necesario el análisis o interpretación que nos muestra cada tipo de hongo, y así poder seguir con la cadena trófica sin alterarla. -

http://www.dspace.espol.edu.ec/bitstream/123456789/21150/1/D-92862.pdf

En el laboratorio de microbiología se aisló cuatro tipos (Zigomycetes, ascomicetes, deuteromicetes, basidiomicetes) de hongos pertenecientes a Eumycota. Después se visualizó con el azul de lactofenol. Se sabe que los hongos intervienen en forma importante en ciclos como del carbono, nitrógeno; desintegran los compuestos orgánicos que existen en las hojas muertas y troncos muertos, y los transforman nuevamente en compuestos que pueden ser utilizados para el ciclo, estos son saprofitos o parásitos; que se encuentran dondequiera que exista substancia orgánica disponible; se desarrolla mejor en lugares obscuros y húmedos. Algunos hongos pueden crecer aún bajo condiciones al parecer muy desfavorables, resisten considerablemente la plasmólisis, pueden desarrollarse en soluciones concentradas de sal o azúcar, por ejemplo sobre confitura. Al ramificarse el micelio y establecer contactos con substancia orgánica, secreta enzimas que desdoblan las proteínas, carbohidratos y grasas, y absorbe productos secundarios. Por ello en los últimos tiempos se ha realizado investigaciones sobre biorremediación con hongos, como se es sabido el Cr (VI) es elemento soluble perjudicial para los seres humanos y animales, ya que son tóxicos para las células, por ello se hace investigaciones que reduzcan al Cr(VI) a Cr(III) ya que este es insoluble e incluso participa como elementos traza, para la recucion de este elemento se utilizó la acción de los hongos Candida sp., Saccharomyces cerevisiae, Lecythophora sp., Candida sp., Aureobasidium pullulans y los hongos filamentosos Aspergillus sp., Aspergillus tubingensis y Penisillum sp. Concluyendo con lo siguiente Los mecanismos fúngicos de interacción con el cromo promisorios en el contexto de la Biotecnología Ambiental son la biosorción, la bioacumulación y la biotransformación; de éstos, el menos entendido a nivel bioquímico es la biotransformación. 20


Existen escasos estudios en relación con las respuestas a cromo en los hongos, por lo que se espera que la aplicación de los enfoques de proteómica, genómica y metabolómica contribuya al entendimiento de los cambios asociados con respuestas a la toxicidad del ión y/o de importancia para la destoxificación del mismo. A futuro, esta información puede servir para el desarrollo de nuevas variedades fúngicas con capacidades mejoradas. Se requiere contar con un mayor número de estudios en birreactores que conduzcan a mejoras en la ingeniería de los procesos para el biotratamiento de efluentes industriales y de procedimientos para la biorremediación de sitios contaminados. -

Teresa Mier, Conchita Toriello y Miguel Ulloa, “Hongos microscópicos saprobios y parásitos: métodos de laboratori o”, México, 2002

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Teniendo en cuenta el informe referencial mostrado, comparando con puntos importantes con el nuestro, podemos afirmar de que compartimos las ideas más importantes en la preparación donde hay algunos procedimientos iguales al de nosotros. hay procedimientos extensivos donde daremos a conocer a continuación en lo que nosotros no realizamos y no estaba planteado en el guía de prácticas:

Experimento N°1: AISLAMIENTO DE ZIGOMYCETES

AISLAMIENTO DE ZIGOMYCETES ACUÁTICOS FUENTE: FACULTAD DE BIOLOGÍA- UNIVERSIDAD DE MICHOACANA DE SAN NICOLÁS DE HIDALGO- PRACTICAS DE LABORATORIO DE MICOLOGPIA-“OBSERVACIÓN DE HONGOS ACUÁTICOS”

OBJETIVOS: 1. Aislar hongos acuáticos de diferentes zonas de agua dulce. 2. Identificar las estructuras somáticas y reproductoras de los hongos acuáticos. MATERIALES: Microscopio óptico. Microscopio estereoscópico. Portaobjetos. Cubreobjetos. Agujas de disección. 9 cajas Petri. 3 frascos de vidrio. Cebos: 15 moscas, 3 exoesqueletos de camarón, 30 fragmentos de uñas. PROCEDIMIENTO. PARTE 1. 21


1. Colectar 3 muestras de agua de diferentes cuerpos de agua. 2. Colocar cada muestra de agua en 3 cajas de Petri 3. Colocar las carnadas de la siguiente manera:

4. Dejar las cajas de Petri tapadas durante 8 días y a temperatura ambiente. 18 PROCEDIMIENTO PARTE 2. 5. Revisa cada una de las cajas Petri en el microscopio estereoscópico y busca estructuras somáticas y reproductoras. Esquematiza las estructuras observadas. 6. En el microscopio óptico observar preparaciones de micelio y esquematizar las estructuras somáticas y reproductoras de los hongos acuáticos encontrados. Estructuras que pueden encontrarse: micelio cenocítico, esporangios, zoosporangios, zoosporas, oogonios, oosporas y anteridios. RESULTADOS:

FUENTE: FACULTAD DE INGENIERIA- UNIVERSIDAD CONTINENTAL DE CIENCIAS E INGENIERIA-PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA“AISLAMIENTO DE LOS HONGOS”

Nuestro objetivo es poder identificar el crecimiento de hongos utilizando moscas que nos permitirán observar el crecimiento, a diferencia del experimento de la otra 22


universidad utilizamos como cebo solo moscas, pinzas, para comenzar a realizar nuestro experimento solo utilizamos una caja Petri donde se colocó 15mL de agua de rio, y se puso a hervir las moscas y cortarlas en tres partes cabeza, tórax y abdomen antes de colocarla en la caja Petri junto al agua de rio, lo cual l a universidad a discutir solo agrego las moscas en tres tipos de agua en tres cajas Petri sin hacerlas hervir, lo mismo hizo con los exoesqueletos de los camarones y los fragmentos de uñas y como resultado después de observar en el microscopio óptico pudimos observar las hifas de los hongos que crecieron alrededor de las moscas, lo cual no coincidimos con los resultados de ellos por que encontraron micelio cenocítico, esto tal vez por qué se siguió procedimientos distintos y aparte que también utilizaron el microscopio estereoscópico.

AISLLAMIENTO MUCORÁCEOS

DE

ZIGOMYCETES

TERRESTRES:

AISLAMIENTO

DE

FUENTE: FACULTAD DE INGENIERIA- UNIVERSIDAD CONTINENTAL DE CIENCIAS E INGENIERIA-PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA“AISLAMIENTO DE LOS HONGOS”

Al observar la muestra después de haber seguido sigilosamente lo especificado en la hoja de laboratorio notamos que la muestra de estiércol vacuno formo colonias de hogos las culas se notan a simple vista como si fueran gránulos que sobre salen de la muestra después del tiempo que especifico la práctica y la correcta posición de cada pedacito de estiércol en la caja Petri. Nos preguntamos el por qué se da el origen de estos microorganismo y las causas que lo producen y casi la mayoría del equipo considera que se debe a la interacción de estos microorganismos y el agar papa dextrosa así dando como resultado a que se produzca esa formación y también al ambiente al cual sometimos a las bacterias en si esto ocurre gracias a la intervención de diversos factores como físicos y ambientales. Consideramos también que el crecimiento de las colonias alrededor del estiércol también se a la putrefacción del estiércol ya que es totalmente asquerosos, pero de alguna manera este también contribuye como abono para la fertilidad del suelo.

Experimento N°2: AISLAMIENTO DE ASCOMYCETES LEVADURIFORMES FUENTE: FACULTAD DE INGENIERIA- UNIVERSIDAD CONTINENTAL DE CIENCIAS E INGENIERIA-PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA“AISLAMIENTO DE LOS HONGOS”

Al observar nuestra muestra después de haber realizado el experimento siguiendo todos los pasos sin equivocarnos, notamos que durante la elaboración de la práctica teníamos que esperar que la parte solida de la chicha de jora se encuentre en la base del vaso de 23


precipitación, porque lo que nos importaba estriar es la parte solida de la chicha de jora, después del estriado pudimos observar el crecimiento de colonias muy pequeñas de hongos, durante la realización de la práctica no hubo ninguna dificultad ya que solo era estriar la muestra de la chicha de jora, y después ponerlo en el horno a una temperatura adecuada para el crecimiento de los hongos, que es lo que se esperaba y se logró el propósito de poder observar la colonia de hongos formados en la caja Petri con el agar de extracto de levadura.

Experimento N°3: AISLAMIENTO DE DEUTEROMYCETES FILAMENTOSOS FUENTE: FACULTAD DE INGENIERIA- UNIVERSIDAD CONTINENTAL DE CIENCIAS E INGENIERIA-PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA“AISLAMIENTO DE LOS HONGOS”

Durante el desarrollo dela práctica de laboratorio de aislamiento de hongos, para poder seguir los procedimientos de la práctica teníamos que tener 5muestra de frutas, vegetales, etc., que estas deberían estas malogradas, con hongos si era posible la dificultad que tuvimos fue el de poseer solo dos cebos malogrados totalmente el resto solo está un poco malogrado lo que tuvimos mayor crecimiento de mohos fue el del durazno y de la zanahoria ya que esto se debe que se pudo introducir de mejor forma en los tubos de ensayo que contenían agar papa dextrosa la cual es la más utilizada para para el cultivo de hongos, y para el crecimiento de estos mohos, la dificultad que se tuvo es el no poder introducir con la asa de siembra correctamente en la parte media del agar, para tener un mejor crecimiento, pero si se logró el crecimiento de mohos en todos los tubos (zanahoria, durazno, manzana, tomate y limón).

LEVADURIFORMES FUENTE: FACULTAD DE INGENIERIA- UNIVERSIDAD CONTINENTAL DE CIENCIAS E INGENIERIA-PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA“AISLAMIENTO DE LOS HONGOS”

Con unos hisopos esterilizados se prepararon las muestras necesarias para estriar, en este caso se preparó la frotación del todo el tórax y la parte axilar, y otro fue solo la palma de la mano, lo cual después estriamos en dos cajas Petri respectivamente las cuales contenían agar sabouraud glucosado que es utilizado para el aislamiento, identificación y conservación de hongos patógenos y saprófitos, lo cual nos permitió observar el crecimiento de mohos delas manos y del tórax, pero se pudo observar que los mohos de las manos formaban grandes colonias de mohos, esto debido que antes que se frote la mano nuestra compañera no se lavó la mano y tal vez estaba más sucio de lo común, mientras que en el tórax solo se vio pequeñas colonias de mohos. 24


Se observaron las características de los Levaduriformes que habían contaminado a cultivos como es la flora de la piel. Así mismo, se realizaron preparaciones para observar sus características microscópicas, que no se lograron observar muy claramente.

Experimento N°4: AISLAMIENTO DE BASIDIOMYCETES FUENTE: FACULTAD DE INGENIERIA- UNIVERSIDAD CONTINENTAL DE CIENCIAS E INGENIERIA-PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA“AISLAMIENTO DE LOS HONGOS”

En el laboratorio el docente lo que pidió fue gongos comestibles, pero lo que utilizamos fue hongos del campo lo cual nos facilitó el trabajo ya que era mejor cortarla y poder echar las esporas a la caja Petri con agar de extracto de malata, donde se observó el crecimiento de hongos, es decir colonias no tan pequeñas, pero si se formó bastantes colonias, lo cual nos indica que se llegó al resultado esperado, lo que nos dificultamos un poco fue el corte longitudinal que se le tenía que hacer al hongo, pero aparte de eso todo el experimento nos salió bien y obtuvimos los resultados esperados.

CONCLUSIONES   

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Logramos identificar algunos hongos como son los geofílicos, acuáticos, zoofílicos, fitofilicos o antropofílicos, según su habitad. Se logró aislar a los hongos de las muestras y sembrarlas en placas con cultivos diferentes para que puedan desarrollarse. Pasado una semana de haber sembrado correctamente nuestras muestras de hongos en placas, observamos a las colonias que se formaron en las placas, caracterizándolas en sus diferentes aspectos. Esto nos ayudó a conocer a las diferentes: coloraciones, aspectos y consistencia que tienen los hongos, relacionados con el origen de sus muestras biológicas y ambientales. Con ayuda de asas de siembras logramos obtener pequeñísimas muestras de hongos y posteriormente adicionándole una gota de azul de lacto fenol a casa muestra que pudimos observarlas correctamente.

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REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 1. “MICROBIOLOGIA AMBIENTAL”, ATLAS RONAL 2. Tortora Gerald J., Funke BerdellR., Case Christine L., “Introducción a la Microbiología”, Editorial Medica Panamericana, 9° Edición, Buenos Aires, 2007, Pág. (345 -352) 3. Prescott, Lansing M., Harley, John P., Klein, Donald, “Microbiología”, Editorial McGraw Hill, 5° Edición, España, 2004, Pág. 595 4. Teresa Mier, Co nchita Toriello y Miguel Ulloa, “Hongos microscópicos saprobios y parásitos: métodos de laboratorio”, México, 2002

5. UNIVERSIDAD PEDAGOGICA Y TECNOLOGICA DE COLOMBIA FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS TUNJA 2011 AISLAMIENTO DE HONGOS ASOSIADOS A SINTOMAS DE ENFERMEDADES. 6. http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0187-31802009000100003 7. CLAUDE A. VILLEE EDITORIAL Mc Graw Hill pAG 183 – 193 8. http://www.dspace.espol.edu.ec/bitstream/123456789/21150/1/D-92862.pdf

ANEXOS Experimento N°1: AISLAMIENTO DE ZIGOMYCETES

AISLAMIENTO DE ZIGOMYCETES ACUÁTICOS

Ponemos a hervir agua junto con las moscas, después de eso con ayuda de una pinza cortamos la mosca en tres parte (cabeza, tórax y abdomen)

Preparamos una caja Petri con 15 mL de aguade rio, después se le agrega las moscas partidas para luego llevarlas a una temperatura ambiente para observar el crecimiento de los mohos.

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Presencia de mohos alrededor de una parte de la mosca.

AISLLAMIENTO MUCORÁCEOS

DE

ZIGOMYCETES

1. Depositamos pequeños trozos de estiércol en forma de una cruz en la papa dextrosa.

TERRESTRES:

AISLAMIENTO

2. Dejamos incubar una semana en el horno a una temperatura adecuada para luego observar Se observa la abundante presencia de mohos casi en toda la caja Petri.

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DE

Experimento N°2: AISLAMIENTO DE ASCOMYCETES LEVADURIFORMES 1. Se siembra la parte sólida en una caja Petri con agar extracto de levadura.

2. Se lleva al horno a una temperatura adecuada para la observación del crecimiento de los mohos.

Crecimiento de mohos pero en colonias pequeñas.

Experimento N°3: AISLAMIENTO DE DEUTEROMYCETES LEVADURIFORMES Estriar la frotación del tórax y Estriar la frotación de las manos en el axilas en el agar sabouraud agar sabouraud glucosado y llevarlo glucosado y llevarlo a incubar una a incubar una semana semana Crecimiento en pequeñas cantidades de mohos.

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Crecimiento grande dela colonia de mohos en la palca Petri


Experimento N°4: AISLAMIENTO DE BASIDIOMYCETES

Sembrar en una placa Petri con agar extracto de malta las esporas del hongo y luego llevarlo a incubar una semana para luego observar.

Crecimiento de colonias de mohos

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Informe de Aislamiento de Hongos

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