LABORATORIO DE FARMACOGNOSIA
PRÁCTICA N°13
DROGAS CARDIOTÓNICOS Y SAPONÓSIDOS DÍA DE PRÁCTICA: LUNES 9 AM - 1PM MESA DE LABORATORIO N°1 Docentes:
Dra. Gorriti Gutiérrez, Arilmí
Mg. Retuerto-Figueroa, Mónica
Mg. González Elera, Sixto
Mg.
Q.F Ramos Llica, Eva
Mg. Herrera Calderón, Oscar
Soria López, Raúl
Integrantes:
Alarcón Tito, Yelsin Edwin.
Ponte Castro, Alejandra Noemí.
Vergara Ortega, Estefanny Ivonne.
Montoya Obregón, Diego Alonso.
2018
Farmacognosia I
PRACTICA N°13
DROGAS CARDIOTÓNICOS Y SAPONÓSIDOS Vergara Ortega, Estefanny1, Castro, Alejandra1, Montoya Obregón, Diego Alonso1, Alarcón Tito, Yelsin1 González-Elera Sixto2, Gorriti-Gutiérrez, Arilmí2, Herrera-Calderón, Oscar 2, RamosLlica, Eva2, Retuerto-Figueroa, Mónica2 Soria López, Raúl2 1 Alumnos
de la Facultad de Farmacia y Bioquímica, UNMSM 2 Docentes de la cátedra de Farmacognosia y Medicina Tradicional
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METHODOLOGY: The practice was based on the identification of saponins and cardiotónicos by reactions of coloration and precipitation, whose results were positive when performing the practice. CONCLUSIONS: The presence of saponins in the extract of the seeds of Sapindus saponaria L. was determined qualitatively and the presence of cardiotonic heterosides was identified from the decoction of the leaves of Thevetia peruviana. Key words: steroidal glycosides, cardiotonic, saponosides, aglycone, saponins. I.
RESUMEN: Las saponinas constan de una parte glucídica y de una genina, solubles en mezclas hidroalcohólicas e insolubles en disolventes orgánicos, proporciona beneficios en la prevención de enfermedades crónicas, y los heterósidos cardiotónicos constan de una genina de naturaleza estereroídica y una parte osídica, actúan sobre el músculo cardiaco, aumentando la contractilidad. El propósito de este estudio fue conocer la importancia de los heterósidos esteroideos en farmacognosia e identificar saponinas y cardiotónicos. METODOLOGÍA: La práctica se basó en la identificación de saponinas y cardiotónicos mediante reacciones de coloración y precipitación, cuyos resultados fueron positivos al realizar la práctica. Se determinó CONCLUSIONES: cualitativamente la presencia de saponinas en el extracto de las semillas de Sapindus saponaria L. y se identificó a partir de la decocción de las hojas de Thevetia peruviana la presencia de heterósidos cardiotónicos. Palabras clave: heterósidos esteroideos, cardiotónicos, saponósidos, aglicona, saponinas. ABSTRACT:
SUMMARY: Saponins consist of a glucidic part and a genin, soluble in hydroalcoholic mixtures and insoluble in organic solvents, provide benefits in the prevention of chronic diseases, and cardiotonic glycosides consist of a genin of a sterearyrite nature and an ossidic part, act on the cardiac muscle, increasing contractility. The purpose of this study was to know the importance of steroid glycosides in pharmacognosy and to identify saponins and cardiotonics. Facultad de Farmacia y Bioquímica
INTRODUCCIÓN
Las saponinas constan de una parte glucídica (con uno o más azúcares) y de una genina (parte no glucídica) denominada sapogenina, son de carácter poco polar. Los saponósidos son solubles en mezclas hidroalcohólicas e insolubles en disolventes orgánicos de media y baja polaridad. (1) Las saponósidos son heterósidos cuyas geninas pueden ser esteroidales (neutras) o triterpenoides (ácidas). Se presentan generalmente como polvos blancos amarillentos o pardos, inodoras, higroscópicas y de sabor variado desde amargo hasta dulce. Las saponinas presentan poder detergente debido a que baja la tensión superficial, formando con el agua soluciones coloidales que producen espuma por agitación. (2) El consumo de saponinas, proporciona beneficios en la prevención de enfermedades crónicas, como cáncer, desórdenes cardiovasculares y disminución de los niveles de colesterol. (3) Algunas saponinas son tóxicas estas son llamadas sapotoxinas y tienen una acción hemolítica sobre los glóbulos rojos sanguíneos si son inyectadas directamente por vía intravenosa. La mayoría se ajustan a la fórmula general CnH2n-8O10. (4) Los heterósidos cardiotónicos se denominan digitálicos debido al nombre de la especie. Constan de una genina de naturaleza estereroídica y una parte osídica que generalmente es un oligósido unido por su hidroxilo β en C3. Cuando la glucosa está
presente, ésta siempre se encuentra en la porción terminal de la estructura. Se pueden distinguir en primarios que se encuentra en plantas frescas, presentando la glucosa terminal que puede ser fácilmente eliminada Página | 2
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por hidrólisis durante el proceso de secado, y secundarios que contienen una serie de principios activos que actúan sobre el músculo cardiaco, aumentando la contractilidad y mejora el tono del músculo cardíaco generando latido más lento, pero enérgico. Algunas de las plantas que contienen este tipo de sustancias son: Digitalis purpurea y D. lanata (F. Scrophulariaceae). (5)
OBJETIVOS
II.
2.1.3
Ensayo de espuma
Se añadió 0.5 mL de extracto y se agrega 1 mL de agua y se agita. La formación de espuma estable por 10 minutos indica reacción positiva. Reacción con R. Lieberman
Se añaden 0.5 mL de extracto mas 0.5 mL de cloroformo y 1 mL de vainillin clorhídrico en un tubo de ensayo. Una coloración rojiza indica reacción positiva. DE 2.2 ÍNDICE AFROSIMÉTRICO
ESPUMA
O
Colocar 10 tubos de ensayo del mismo diámetro y añadir volúmenes de 1 a 10 mL de sol. de saponina y completar la diferencia con agua hasta 10 mL a cada uno de los tubos. Agitar por 1 min. y dejar en reposo por 30 min., observar el tubo de menor dilución que presenta 1 cm. de espuma y anotarlo.
MATERIALES Y MÉTODOS
A.) MATERIALES
Se agregó 0.5 mL de extracto en un tubo de ensayo y se agrego III gotas de H2SO4. Coloracion rojiza indica reacción positiva.
2.1.4
1. Determinar cualitativamente la presencia de saponinas en el extracto de las semillas de Sapindus saponaria L. 2. Identificar a partir de la decocción de las hojas de Thevetia peruviana la presencia de heterósidos cardiotónicos.
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Baño maría Beacker Espátula Gradilla Capsula Tubos de ensayo Papel filtro H2SO4 R. Lieberman R. Vainillin R. Keller-Killiani R. Baljet R. Legal H2O destilada Cloroformo Solucion de saponina 1%
2.3 EXTRACCIÓN DE CARDIOTÓNICOS
HETERÓSIDOS
B.) MÉTODOS Guía de Prácticas de Farmacognosia (6)
1.MATERIAL DE TRABAJO Macerado de semilla de boliche (Sapindus saponaria L.) Hojas de nuez de la india (Thevetia peruviana L.)
2. ANÁLISIS DE LAS MUESTRAS 2.1 ANÁLISIS SAPONINAS 2.1.2
CUALITATIVO
DE
Reaccion con H2SO4
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CUALITATIVO PARA 2.4 ANALISIS HETERÓSIDOS CARDIOTÓNICOS
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1. ÍNDICE DE ESPUMA
2.3.1 Reacción con R. Keller-Killiani Tomar 0.5 mL de la fase orgánica y evaporar el solvente mas III gotas de R. de Keller y III gotas de R. Killiani en zona. Coloración rojiza en la zona de contacto indica reacción positiva. 2.4.2
Reacción con R. Baljet
Mezclar V gotas de Baljet A y V gotas de Baljet B y añadir 1 mL de fase orgánica y evaporar el solvente. Una coloración rojiza indica reacción positiva. 2.4.3
Reacción con R. Legal
Tomar 1 mL de fase orgánica y evaporar el solvente mas V gotas de nitroprusiato de sodio 0.5%. Coloración rojo oscuro indica reacción positiva. 2.4.4
Reacción con R. Lieberman
Tomar 1 mL de fase organica mas I gota de anhídrido acético y añadir II gotas de H2SO4 cc. Coloracion rojiza indica reacción positiva.
III.
RESULTADOS
SAPONINAS 1. IDENTIFICACIÓN Tabla N°1: Reacciones de identificación de saponinas. REACCION RESULTADOS H2SO4 ++ Ensayo de espuma +++ R. de Lieberman ++ R. de Vainillín +++
Fig. 5 Reacciones de índice de espuma, de izquierda a derecha: Vol. De 1 a 10 mL de sol. de saponina.
Tabla N°2: Reacciones de índice de espuma de saponinas. ÍNDICE DE ESPUMA VOL. DE SAPONINA 1 mL 2 mL 3 mL 4 mL 5 mL 6 mL 7 mL 8 mL 9 mL 10 mL
ÍNDICE DE ESPUMA VOL. DE SAPONINA 1 mL 2 mL 3 mL 4 mL 5 mL 6 mL 7 mL 8 mL 9 mL 11 mL
Cálculos: 1g -> 100 mL X -<> 5.5 mL X= 0.55g 0.55g -> 10 mL 1g -> Y mL Y = 18.1818 mL Índice afro simétrico =18.1818 mL
HETERÓSIDOS CARDIOTÓNICOS 1. IDENTIFICACIÓN Tabla N°3: Reacciones de identificación de heterósidos cardiotonicos. REACCION RESULTADOS R. de Keller-Kiliani ++ R. de Baljet +++ R. Legal +++ R. de Lieberman ++
Fig. 4 Reacciones de identificación de saponinas, de izquierda a derecha: Reacción con H2SO4. (A), Reacción de espuma. (B), Reacción de Lieberman positiva., (C) Reacción de Vainillín positivo (D).
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Fig. 6 Reacciones de identificación de heterósidos cardiotonicos, de izquierda a derecha: Reacción de Keller-Kiliani, Reacción de Baljet, Reacción de Legal, Reacción de Lieberman.
IV.
DISCUSIÓN
Otra reacción de identificación de saponinas es la reacción de Salkowski en la que se toma una pequeña cantidad del extracto y se le añadió 2 ml de cloroformo y 2 ml de ácido sulfúrico, la reacción variante A de Salkowski permite diferenciar a una saponina triterpénica de la esteroidal.7 La reacción Variante A de reacción de Salkowski, permite diferenciar a una saponina triterpénica de la esteroidal, basándose en el color del producto. En nuestro caso, mediante esta reacción se determina la presencia de saponinas triterpénicas pues el producto de la reacción fue un anillo de color rojizo-grosella en el boliche resultando positivo para saponina triterpénica.7 La reacción Variante B de reacción de Salkowski, también permite diferenciar a una saponina triterpénica de la esteroidal, basándose en el color del producto. En nuestro caso, mediante esta reacción, se determinó la presencia de saponinas esteroidales. 7 En la prueba de la espuma, el boliche presentaro abundante espuma y esta fue persistente en el tiempo, esto nos indica la presencia de saponinas en grandes cantidades en el boliche. 8 Otra forma para la cuantificación de saponinas es Por el método Facultad de Farmacia y Bioquímica
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espectrofotométrico UV/VIS donde la curva de calibración toma en cuenta la interferencia de color de las muestras ara cada determinación con el reactivo Lieberman-Burchard, también se considera la desviación estándar de las medidas en esta se puede comprobar el comportamiento lineal de la relación entre absorbancia y concentración de saponina cumpliendo la Ley de Beer para determinaciones de concentraciones de saponinas de la muestras. 9
V. CONCLUSIONES 1.
Se determinó cualitativamente la presencia de saponinas en el extracto de las semillas de Sapindus saponaria L.
2.
Se identificó a partir de la decocción de las hojas de Thevetia peruviana la presencia de heterósidos cardiotónicos.
VI. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS 1. López T. Saponósidos. Elsevier. 2001 junio; 20(6): p. 124-9. 2. Delporte C. Farmacognosia. trabajo de investigación. Santiago de Chile: Universidad de Chile, Ciencias quimicas y farmaceuticas; 2010. 3. Barrón R,Villanueva C,García R, Colinas T. Valor nutricio y contenido de saponinas en germinados de huauzontle (chenopodium nuttalliae saff.), calabacita (cucurbita pepo l.), canola (brassica napus l.) y amaranto (amaranthus leucocarpus s. watson syn. hypochondriacus l.). Revista Chapingo serie horticultura. 2009 diciembre; 15(3): p. 237-243. 4. Cueva E,Valle I. Regulación de la incidencia del nematodo agallador. tesis. Ambato: Universidad técnica de Ambato, Facultad de ciencias agropecuarias; 2016.
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Debenedetti S, Wilson E. Farmacognosia clases teóricas y presentaciones triterpenos y esteroides heterósidos cardiotónicos. tesis. Buenos aires: Universidad de Belgrano, Facultad de Ciencias Exactas y naturales; 2014.
6. Gorriti A, Retuerto M, Gonzáles S, Herrera O. Manual de laboratorio de Farmacognosia I. UNMSM. 2018. Pág. 95-101. 7. T. flores, J. Huamán, G. Tomás. ESTUDIO COMPARATIVO DE TRES METODOLOGÍAS CUANTITATIVAS DE EXTRACCIÓN DE SAPONINAS DE LA melisa officinalis “TORONJIL” . Rev. Per. Quím. Ing. Quím. Vol. 16 N.º 2 , 2013. Págs. 47-51. 8. Lic. Licet Mena Valdés. Determinación de saponinas y otros metabolitos secundarios en extractos acuosos de Sapindus saponaria L. (jaboncillo). Rev Cubana Plant Med vol.20 no.1 Ciudad de la Habana ene.-mar. 2015. 9. Bianca G uzmán. CUANTIFICACION DE SAPONINAS EN MUESTRAS DE CAÑIHUA CHENOPODIUM PALLIDICAULE AELLEN. Revista Boliviana de Química. vol. 30, núm. 2, julio-diciembre, 2013, pp. 131-136, Universidad Mayor de San Andrés. La Paz, Bolivia.
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