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practica de laboratorio que identifica la velocidad de la oxidacion de la glucosa en un hidrogenador Parr
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Descripción: DEMOSTRACIÓN DE LA DIGESTIÓN Y ABSORCIÓN DE LOS CARBOHIDRATOS: GLUCOSA PRE Y POST PRANDIAL
BIOQUIMICA MACHALAFull description
FACULTAD DE INGENIERÍA INDUSTRIAL ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL E INDUSTRIAS ALIMENTA ALIMENTARIAS RIAS
ASIGNATURA: ASIGNATURA: BIOQUIMICA GENERAL DOCENTE: CESAR TORRES
AUTORES: SILVA SILVA MORENO, MORENO, María Alexandra Alexan dra NUE! ESPINO!A, Mar"#$el% VALLADOLID SAMPERTEGUI, &'l
%$SULLANA- PERU 2015
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INTRODUCCIÓN: La enzima glucosa oxidasa es una oxidorreductasa que cataliza la oxidación de la glucos glucosaa para para formar formar peróxi peróxido do de hidróg hidrógeno eno y D-glu D-glucon cono-δ o-δ-la -lacto ctona. na. En las célula célulass contribuye a degradar los azcares hacia sus metabolitos. La glucosa oxidasa es ampliamente utilizada para la determinación y cuantificación de glucosa libre en los fluidos biológicos! tales como sangre y orina! en materia prima "egetal y en la industria de los alimentos. #iene adem$s muchas aplicaciones en biotecnolog%a! y se utiliza para la fabricación de biosensores sensibles a glucosa. La glucosa oxidasa es ampliamente utilizada acoplada a una reacción mediada por la peroxidasa que permite "isualizar colorimétricamente el &'(' formado! de este tipo son los ensayos para la determinación de glucosa libre en el suero o plasma sangu%neo utiliz utilizado adoss con finali finalidad dades es diagnó diagnósti sticos cos.. La reacci reacción ón es adapta adaptable ble a proced procedimi imient entos os manuales utilizando un espectrofotómetro o a técnicas automatizadas! e incluso para su utilización en ensayos r$pidos como los de las tiras reacti"as de orina.) ' Ensayos simila similares res permit permiten en monito monitorea rearr los ni"ele ni"eless de glucos glucosaa en proces procesos os de fermen fermentac tación ión!! biorreactores! y el control de ni"eles de glucosa en materia prima "egetal y productos alimentarios En la industria manufacturera! la *(x se utiliza como aditi"o debido a sus efectos oxidantes.
OBJETIVOS: Demostrar que la temperatura influye en la concentración de glucosa. Determinar si los "alores de +& influyen en la concentración concentración de glucosa
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MARCO TEORICO: La glucosa oxidasa es un e,emplo de enzima con di"ersas aplicaciones. La glucosa oxidasa! *ox E./.).).0.1! es una enzima que cataliza la oxidación oxidación de la
-D glucosa!
por la "%a del D-glucano- δ-lactona! hacia $cido glucónico y peróxido de hidrógeno! usando el ox%geno molecular como aceptor final de electrones
(Fiedurek y Gromada !"""#$ Las enzimas son prote%nas que se producen en los organismos "i"os. #iene la capacidad de facilitar y acelerar las reacciones qu%micas que se realizan en los te,idos y células! actan sobre las moléculas llamadas 2ubstratos! las cuales se con"ierten en diferentes compuestos a los que se les conoce como +roductos. De acuerdo a la reacción que lle"an a cabo! las enzimas se clasifican en3 oxidoreductasas! hidrolasas! transferasas! isomerasas! liasas o sintasas y ligasas o sintetasas.
(Ei%&e'eer e) a*$ +,,,#$ 2e han encontrado algunas bacterias productoras de *ox pertenecientes al género 4acillus #hong5antha et al.! '666. 7dem$s se ha obtenido esta enzima mediante la mutación de cepas de +seudomonas 7eruginosa.
(-a)a'kar !"+!#$ La *ox es ampliamente utilizada a ni"el industrial para la conser"ación de alimentos y forma parte de los reacti"os para la determinación de glicemia y otros par$metros cl%nicos. #ambién es empleada en el procesamiento de alimentos para la determinación cuantitati"a de glucosa en los procesos de fermentación y en la producción de $cido glucónico.
(-a)a'kar !"+!#$
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Las enzimas son susceptibles de muchas aplicaciones en di"ersos tipos de industrias! entre las que destaca la alimenticia. En algunos casos! como en la obtención de yogur! o la producción de cer"eza o de "ino! la fermentación se debe a las enzimas presentes en los microorganismos que inter"ienen en la producción.
(Caridi e) a*$ +,,+#$ 7 p& 8! la glucosa est$ presente en solución en forma de hemiacetal c%clico! siendo un 90!9: ;-D-glucopiranosa y un 09!1: <-D-glucopiranosa la proporción de moléculas lineales y de furanosa es despreciable. La glucosa oxidasa se une espec%ficamente a la ;-D-glucopiranosa y no interacciona con <-D-glucopiranosa. Es capaz de oxidar toda la glucosa en lasolución! dado que el equilibrio entre los anómeros < y ; es conducido hacia la forma ; conforme ésta "a siendo consumida en la reacción.) La glucosa oxidasa cataliza la oxidación de ;-D-glucosa enD-glucono-)!=-lactona! que es hidrolizada a $cido glucónico.
(Caridi e) a*$ +,,+#$ +ara cada enzima existe un óptimo de p& en el que se crean las condiciones m$s fa"ora fa"orable bless para para el manten mantenimi imient entoo de la confor conformac mación ión funcio funcionalm nalment entee acti"a acti"a de la molécula. Los grupos amino y carboxilo de los restos de amino$cidos ionizados a una magnitud de p& determinada! participan en el mantenimiento de la conformación de la molécula prote%nica necesaria para la confrontación de los censos catal%ticos de la enzima y fa"orecen también a su ligación con el sustrato. 7 magnitud del p& distinta se altera la ionización de los grupos correspondientes! y como resultados se rompen los enlaces que aseguran la formación de los centros catal%ticos! y la enzima se inacti"a. 7 los "alores del p& muy altos o muy ba,os las enzimas se desnaturalizan.
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-ROCEDIMIENTO:
En tres tubos de ensayo se agrega ) ml de reacti"o! el tubo ) se lle"a a temperatura de 6>! el tubo ' se lle"a a temperatura de 08> y el tubo 0 se lle"a a temperatura de
86> respecti"amente. Luego se agrega la glucosa a cada tubo y se incuba por )6 min respecti"amente. Los "alores de absorbencia se determinan por la temperatura. 2e mide mediante un equipo de E2#?@AE(BE#C?7. E2#?@AE(BE#C?7.
CA.CU.OS / RESU.TADOS:
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En tres tubos de Ensayo Ensayo se agrega ) um de reacti"o reacti"o respecti"amente! al tu"o 0 2e le
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/oncentración de *lucosa
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CONC.USION:
/oncentración de glucosa en cada compuesto. De acuerdo a las mesclas homogenizadas homogenizadas se puede concluir que a m$s color de la mescla en el tubo de ensayo se determina m$s concentración de glucosa.