efecto del suelo sobre la capacitanciaDescripción completa
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Cinética enzimática Efecto del pH Efecto de concentración de enzima Curva tipo
practica de laboratorio que identifica la velocidad de la oxidacion de la glucosa en un hidrogenador Parr
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Ascorbato OxidasaDescripción completa
Descripción: Monografía sobre Influencia del pH sobre la absorción y eliminación de fármacos.pdf
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Practica Sobre Aislamiento Del Glucogeno Hepatico y Obtencion de GlucosaDescripción completa
EFECTO DEL PH SOBRE LA GLUCOSA OXIDASA
1. OBJET OBJETIV IVOS OS
Estudiar la infuencia del pH sobre la glucosa oxidasa
2. F!"# F!"#$E! $E!TO TO TEO%I&O TEO%I&O 'ara cada en(i)a existe un *pti)o de pH en el +ue se crean las condiciones ),s -ao -aora rabl bles es para para el )a )ant nten eni) i)ie ient nto o de la co conn-or or)a )aci ci*n *n -unc -uncio iona nal) l)en ente te ac acti tia a de la )ol/cula. 0os grupos a)ino carboxilo de los restos de los a)ino,cidos ioni(ados a una )agnitud de pH deter)inada participan en el )anteni)iento de la con-or)aci*n de la )ol/cula prote3nica necesaria para la con-rontaci*n de los centros catal3ticos de la en(i)a -aorecen ta)bi/n a su ligaci*n con el sustrato. # )agnitud de 'H distinta se altera la ioni(aci*n de los grupos correspondientes co)o resultado se ro)pen los enlaces +ue aseguran la -or)aci*n de los centros catal3ticos la en(i)a se inactia. # los alores de pH )u altos o )u ba4os las en(i)as se desnaturali(an.
En 2 tubos de ensao a 1 )l de glucosa oxidasa se agreg* H&l 8grupo 1 >9 encubar por 1? )inutos para luego llear al espectro-ot*)etro espectro-ot*)etro )edir la absorbancia. En 2 tubos de ensao a 1 )l de glucosa oxidasa se agreg* !aOH 8grupo 5 @9 encubar por 1? )inutos para luego llear al espectro-ot*)etro espectro-ot*)etro )edir la absorbancia. En 2 tubos de ensao a 1 )l de glucosa oxidasa se le agrega glucosa 8grupo A 119 encubar por 1? )inutos para luego llear al espectro-ot*)etro espectro-ot*)etro )edir la absorbancia.
6%'O 1 >
6%'O 5 @
6%'O A 11
%eactio de traba4o #gregar H&l ?.?1$ #gregar !aOH ?.?1$ #gregar glucosa 8ul9 Incubar a 5> & por 1?
1 )l ?.1 )l 77 1? C
1 )l 77 ?.1 )l 1? C
1 )l 77 77 1? C
)in. 0E&T%#D E0 espectro-ot*)etro utili(a una longitud de onda de A?A n) para la )edici*n de la absorbancia
A. &0OS %ES0T#"OS "E 0# E='E%I$E!T#&I! 6lucosaG FCabsorbancia del tubo proble)a F =
( glucosa ) absorvid. del estandar
= 229 mg /dl
6%'O 1 >
6%'O 5 @
6%'O A 11
#bsorbancia
?.1?? ?.?A
?.121 ?.1>@ ?.2@5 ?.1?A
6lucosaG )gdl
22.@? 15.22 2>.>? .@@ K>.?@ 2<.?< ? @ 1 > A
0as obseraciones ),s isibles -ueron con los ensaos del reactio de traba4o cuando se le )odiLco el pH 8agregando !aOH9 ca)biando de color la )uestra. # co)paraci*n de los ensaos en la cual solo se agreg* glucosa no se )odiLc* el color de la )uestra.
K. "IS&SI! no de los atributos ),s sobresalientes de las en(i)as es el de su especiLcidad de actuaci*n de suerte +ue tan solo ciertos sustratos experi)entan su acci*n Mnica)ente tiene lugar a un tipo de reacci*n sin +ue se produ(ca reacciones laterales o sus productos. Sin e)bargo al )odiLcar el pH de una en(i)a puede )odiLcar as3 ta)bi/n su naturale(a 8el pH desnaturali(a las en(i)as9.
>. &O!&0SI! Se estudi* co)prob* +ue la glucosa oxidasa pierde su naturale(a 8desnaturali(a9 al ser )odiLcado su pH por una soluci*n. EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBBRE LA GLUCOSA OXIDASA
1. OBJETIVOS "e)ostrar el e-ecto de la te)peratura sobre la glucosa oxidasa 2. F!"#$E!TO TEO%I&O
0a te)peratura del )edio infue )uc;o en la actiidad de las en(i)as. 0a te)peratura *pti)a para la acci*n de en(i)as es la te)peratura del cuerpo de los ani)ales +ue oscilan en el interalo de 5K a <1 &. &on cierto au)ento de la te)peratura del )edio ocurre aceleraci*n de la reacci*n a consecuencia de la actiaci*n de las )ol/culas del sustrato. # la e( incluso un au)ento pe+ueNo de la te)peratura conduce al debilita)iento de los enlaces +ue )antienen la con-or)aci*n de las )ol/culas de las en(i)as necesaria para la )ani-estaci*n de su actiidad catal3tica. E)pie(a gradual)ente la desnaturali(aci*n de la en(i)a cuando se acelera brusca)ente la te)peratura esta sobrepasa los A? &. 0a inactiaci*n de la en(i)a con au)ento de la te)peratura del )edio es irreersible. #l ba4ar la te)peratura la actiidad de la en(i)a dis)inue. El )ecanis)o de este proceso no est, claro. Sin e)bargo el en-ria)iento no causa desnaturali(aci*n de la en(i)a por lo tanto su inactiaci*n puede ser reersible. 3. %E#&TIVOS "E T%#B#JO 6lucosa oxidasa 'eroxidasa Indicador oxido7reducci*n8cromógeno9 :cido clor;3drico 8H&l9 Hidr*xido de sodio 8!aOH9 6lucosa #gua destilada 4. '%O&E"I$IE!TO E='E%I$E!T#0 En 2 tubos de ensao a 1 )l de glucosa oxidasa 8grupo < 1?9 llear los tubos a una te)peratura de ?& luego agregar glucosa 81? ul9 luego encubar nuea)ente por 1? )inutos a ?& para luego llear al espectro-ot*)etro )edir su absorbancia. •
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En 2 tubos de ensao a 1 )l de glucosa oxidasa 8grupo 2 9 llear los tubos a una te)peratura de 5>& luego agregar glucosa 81? ul9 luego encubar nuea)ente por 1? )inutos a 5>& para luego llear al espectro-ot*)etro )edir su absorbancia. En 2 tubos de ensao a 1 )l de glucosa oxidasa 8grupo K 129 llear los tubos a una te)peratura de >?& luego agregar glucosa 81? ul9 luego encubar nuea)ente por 1? )inutos a >?& para luego llear al espectro-ot*)etro )edir su absorbancia.
6%'O < 1?
6%'O 2
6%'O K 12
%eactio de traba4o 0lear lo tubos 8%T9 a te)peratura8&9 Encubar 1? )inutos #gregar glucosa 8ul9 Incubar 1? )inutos
1 )l ?
1 )l 5>
1 )l >?
C 1? ?
C 1? 5>
C 1? >?
8&9 0E&T%#D E0 espectro-ot*)etro utili(a una longitud de onda de A?A n) para la )edici*n de la absorbancia
?.?@2 ?.51A ?.?.A ?.25@ < K.<> <<.< 21.?K >2.15 12.5K A<.>5 1 A K 1
6. "IS&SI!
no de los atributos ),s sobresalientes de las en(i)as es el de su especiLcidad de actuaci*n de suerte +ue tan solo ciertos sustratos experi)entan su acci*n Mnica)ente tiene lugar a un tipo de reacci*n sin +ue se produ(ca reacciones laterales o sus productos. Sin e)bargo al )odiLcar la te)peratura a una ),s alta de una en(i)a puede )odiLcar as3 ta)bi/n su naturale(a 8la te)peratura eleada desnaturali(a las en(i)as9. 7. &O!&0SI!
&o)prob* +ue la glucosa oxidasa pierde su naturale(a 8desnaturali(a9 al ser )odiLcado la te)peratura 8 elear la te)peratura9. 8. BIB0IO6%#FI#
0ibro bio+u3)ica le;ninger.
P#QO "E 0# "IVE%SIFI&IO! '%O"&TIV# R "E0 FO%T#0E&I$IE!TO "E 0# E"&IO! UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA FACULTAD DE INGENIERIA DE MINAS ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA QUIMICA
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CURSO: BIOI$I
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TRABAJO: I!FO%$E "E 0#BO%#TO%IO ! 5 <
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TEMA: e-ecto de la te)peratura pH sobre la glucosa oxidasa
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CICLO: V SE$EST%E 2?1A7I
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DOCENTE DE TEORIA: &ES#% TO%%ES "I#U DOCENTE DE PRACTICAS: JO%6E BE%$EJO BE!ITES INTEGRANTES DEL GRUPO N 11