“AÑO DE LA DIVERSIFICACIÓN PRODUCTIVA Y DEL FORTALECIMIENTO DE LA EDUCACIÓN” UNIVERSIDAD NACIONAL JOSÉ FAUSTINO FAUSTINO SÁNCHEZ CARRIÓN FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS, IND. ALIMENTARIAS Y ING. AMBIENTAL ESCUELA DE INGENIERIA AMBIENTAL AMBIENTAL
BIOUIMICA PRACTICA PRA CTICA N! "# MESA N! "$ %&"" ' (&"" )* )* CÓDOVA CÓDOV A MELÉNDEZ, G+-/0+ G/1-2/33/ DIAZ HUERTA, M2+40 S12/0 FACTORES QUE DIAZLA RAMIREZ, N5-+ 6/0 P0+ALTERAN ACTIVIDAD UEZADA PACHECO, B-+7 S3/)8+71#" ' "% ' $9 CATALITICA DE LOS ENZIMAS
I.
OBJETIVOS D/*1:3-+- /0 /;/<31 6/ 01: ;+<31-/:& <1773-+<=7 6/ :5:3-+31, <1773-+<=7 6/ /7>*+, <1773-+<=7 6/ )H 4 3/*)/-+35-+ :1-/ 0+ +<3?6+6 /7>*@3<+ 6/ 0+ +*0+:+ :+0?+0 :1-/ /0 +0*6=7.
II.
FUNDAMENTO TEORICO L+ /<+<+ 6/ 57 /7>*+ :/ *6/ )1- 0+ ?/01<6+6 6/ 3-+7:;1-*+<=7 6/0 :5:3-+31 /7 )-165<31. L+ +<3?6+6 6/ 0+: /7>*+: :/ ?/ +;/<3+6+ )1- 6?/-:1: ;+<31-/: /73-/ 01: 5/ 6/:3+<+7 01: :25/73/:& I.1.
CONCENTRACIÓN DEL SUSTRATO
E7 316+ -/+<<=7 <+3+0>+6+ )1- 57 /7>*+, : :/ *+73/7/ <17:3+73/ 0+ <1773-+<=7 6/0 E, 0+ ?/01<6+6 6/ 0+ -/+<<=7 +5*/73+ /)17/7<+0*/73/ +0 7<-/*/73+-:/ 0+ <1773-+<=7 6/0 :5:3-+31, 4+ 5/ +0 /:3- *@: *10<50+: 6/ :5:3-+31 /: *@: )-1+0/ /0 /7<5/73-1 <17 /0 /7>*+ 4 0+ ;1-*+<=7 6/0 <1*)0/1 ES. E:3/ +5*/731 6/ ?/01<6+6 /: -@)61 )+-+ <1773-+<17/: ++: 6/ :5:3-+31 4, + */66+ 5/ /:3/ +5*/73+, :/ ?+ 8+</761 *@: 0/731 8+:3+ 5/ 0+ <1773-+<=7 6/0 :5:3-+31 +0<+7>+ 57 </-31 ?+01-, + )+-3- 6/0 <5+0, +575/ +5*/73/ 0+ <1773-+<=7 6/0 *:*1, 71 +5*/73+ 0+ ?/01<6+6 6/ 0+ -/+<<=7. E:31 /: 6/61 + 5/ /0 /7>*+ /:3+ :+35-+6+ )1- /0 :5:3-+31 /: 6/<-, 316+: 0+: *10<50+: 6/0 /7>*+ /:3@7 576+: +0 :5:3-+31 ;1-*+761 /0 <1*)0/1 ES. C5+761 1<5--/ /:31, :/ 6 5/ 0+ -/+<<=7 8+ +0<+7>+61 0+ ?/01<6+6 *@*+. E7 $($# L/171- M<8+/0: 4 + M+56 M/73/7 /:356+-17 0+ ?+-+<=7 6/ 0+ ?/01<6+6 6/ 57+ -/+<<=7 /7>*@3<+ /7 ;57<=7 6/ 0+ <1773-+<=7 6/0 :5:3-+31 4 )-1)5:/-17 0+ :25/73/ /<5+<=7, 5/ /: ?@06+ )+-+ <1773-+<17/: 6/ :5:3-+31 71 :+35-+73/.
D176/& •
• • •
V /: 0+ ?/01<6+6 6/ 0+ -/+<<=7 )+-+ 57+ 6/3/-*7+6+ <1773-+<=7 6/ :5:3-+31. V*+ /: 0+ ?/01<6+6 *@*+ 6/ 0+ -/+<<=7. S /: 0+ <1773-+<=7 6/0 :5:3-+31. * /: 57+ <17:3+73/ 6/71*7+6+ <17:3+73/ 6/ M<8+/0: M/73/7, /: <+-+<3/-K:3<+ 6/ <+6+ /7>*+.
S /7 0+ /<5+<=7 $ 8+*1: V V*+ 4 6/:)/+*1: * 13/7/*1: 5/ * S *. S/ )5/6/ 6/7- <1*1 0+ <1773-+<=7 6/ :5:3-+31 7/*+ )1- :5 :5:3-+31& S * /: +03+ 76<+ 5/ /0 /7>*+ 3/7/ )1<+ +76+6 )1- /0 :5:3-+31 4+ 5/ :/ 7/+- 0+ *3+6 6/ 0+ ?/01<6+6 *@*+. S * /: ++ 76<+ 5/ /0 /7>*+ 3/7/ *5<8+ +76+6 )1- /0 :5:3-+31 4+ 5/ :/ 7/+- 0+ *3+6 6/ 0+ ?/01<6+6 *@*+. I.2.
TEMPERATURA
L+ TQ 754/ /7 0+ +<3?6+6 /7>*+3<+. E7 2/7/-+0 )1- <+6+ $"C 5/ +5*/73/ 0+ 3/*)/-+35-+ 0+ ?/01<6+6 6/ 0+ -/+<<=7 +5*/73+ 6/ + ?/+ 57 ?+01- *@*1 TQ =)3*+ 6176/ 0+ +<3?6+6 /: *@*+. E:31 :/ 6// + 5/ +0 +5*/73+- 0+ TQ +5*/73+ /0 *1?*/731 6/ 0+: *10<50+: 4, )1- 3+731 +5*/73+ 0+ )-1+06+6 6/ /7<5/73-1 /73-/ /0 S 4 /0 E. S 0+ TQ +5*/73+ )1- /7<*+ 6/ 0+ TQ =)3*+, 6:*754/ / 7<05:1 *@3<+ 6/61 + 5/ 0+ /7>*+ :/ 6/:7+35-+0>+. C+6+ /7>*+ )1:// 57+ TQ =)3*+, /7 0+: /7>*+: 85*+7+: :5/0/ /:3+- +0-/6/61- 6/ #%C. L1: +7*+0/: )15013/-*1: 6/61 + 5/ <+-/7 6/ */<+7:*1: )+-+ -/250+- 0+ TQ <1-)1-+0, :/ ?/7 102+61:
+ 8/-7+- /7 0+ /:3+<=7 ;-K+ )5/: 0+ +<3?6+6 6/ :5: /7>*+: 6/61 + 0+: ++: 3/*)/-+35-+: /: *54 ++. I.3.
pH
E0 )H /: 13-1 ;+<31- 5/ 754/ /7 0+ +<3?6+6 /7>*@3<+, 6/61 + 5/ /0 )H 754/ /7 0+ 17>+<=7 6/ 01: 2-5)1: ;57<17+0/: 6/ 01: +*71@<61: 5/ ;1-*+7 0+ )-13/K7+ /7>*@3<+. C+6+ /7>*+ -/+0>+ :5 +<<=7 6/73-1 6/ 57 6/3/-*7+61 73/-?+01 6/ )H, 6/73-1 6/ /:3/ 73/-?+01 8+-@ 57 )H =)3*1 6176/ 0+ +<3?6+6 /7>*+3<+ :/-@ *@*+. P1- 6/+1 6/0 )H *7*1 1 )1- /7<*+ 6/0 )H *@*1 /0 /7>*+ :/ 7+<3?+ 4+ 5/ :/ 6/:7+35-+0>+. E7 0+ *+41-K+ 6/ 0+: /7>*+: /0 )H =)3*1 /:3+ )-=*1 + 0+ 7/53-+06+6, +575/ 8+4 /)<17/:. I.4.
INHIBIDORES
S17 <1*)5/:31: 5K*<1: 5/ :/ 57/7 +0 /7>*+, /7 6:3731: )5731: 6/0 *:*1 4 6:*754/7 1 7<05:1 *)6/7 :5 +<3?6+6. E:31: <1*)5/:31: )5/6/7 :/- 6/ 6:3731: 3)1:& 17/:, *10<50+: 1-2@7<+: 4 + ?/+7 :/ 0+ 6/71*7+ 78<=7. L+ 78<=7 )5/6/ :/-& •
•
•
Inh!"#n $$%&%$'!(%) C5+761 /0 7861- *)6/ )/-*+7/73/*/73/ 0+ +<3?6+6 /7>*@3<+, /7 )1-5/ :/ 57/ 6/ ;1-*+ )/-*+7/73/ <17 2-5)1: ;57<17+0/: *)1-3+73/: 6/0 73-1 +<3?1 1 /7 )1-5/ +03/-+ :5 /:3-5<35-+. A /:31: 7861-/: :/ 0/: 6/71*7+ ?/7/71:4 + 0+ 78<=7 5/ -/+0>+7 :/ 0+ 6/71*7+ /7?/7/7+*/731 6/0 /7>*+. E. L+ )/7<07+ 5/ 78/ 0+: /7>*+: 5/ :73/3>+7 0+ )+-/6 +<3/-+7+. E0 =7 <+75-1 +<3+ :1-/ 0+ <31<-1*1 16+:+ /7>*+ -/:)-+31-1. Inh!"#n $%&%$'!(%) E0 7861- :/ 57/ +0 /7>*+ 6/ ;1-*+ 3/*)1-+0 */6+73/ /70++ )/-*+7/73/*/73/. P5/6/ :/- 6/ 61: 3)1:& C*+p%,,&-& E0 7861- /: :*0+- +0 :5:3-+31 4 :/ )5/6/ 57+0 73-1 +<3?1 6/0 /7>*+ *)6/761 5/ 01 8+2+ /0 :5:3-+31. E: 6/<- +*1:, 7861- 4 :5:3-+31 <1*)3/7 )1- 57-:/ +0 73-1 +<3?1 6/0 /7>*+. L+ +<<=7 :5/0/ +750+-:/ +5*/73+761 0+ <1773-+<=7 6/0 :5:3-+31
•
N* "*+p%,,&-) E0 7861- 71 <1*)3/ <17 /0 :5:3-+31, )5/6/ +<35+- 6/ ;1-*+:& S1-/ /0 /7>*+, 57761:/ + /0 /7 57 052+- 6;/-/73/ +0 73-1 +<3?1 4 *16<+761 :5 /:3-5<35-+ 01 5/ 6<503+ 5/ /0 /7>*+ :/ )5/6+ 57- <17 /0 :5:3-+31. S1-/ /0 <1*)0/1 ES 57761:/ + 0 4 6<503+761 :5 6/:73/2-+<=7 4 )1- 01 3+731 0+ ;1-*+<=7 6/ 01: )-165<31:.
III.
MATERIALES REACTIVOS • • • • •
IV.
S105<=7 6/ +0*6=7 E7>*+& S105<=7 6/ +0;+ +*0+:+ :+0?+0 6+0>+6+ +0 $W S105<=7 5X/- ;1:;+31 ",$ M + )H , , 4 (," S105<=7 4161 4165-+6+ L5210 S105<=7 <01-5-1 6/ :161 ", W
PROCEDIMIENTO E/PERIMENTAL A.COLECCIÓN DE SALIVA
E0 +05*71 617+73/ 71 6// 8+/- 72/-61 +0*/731 57+: 81-+: +73/: <1*1 *K7*1. P-/?+*/73/ :/ 3/7/ 5/ /75+2+- 0+ 1<+ <17 +25+, 05/21 *+73/7/761 0+ 1<+ --+6+ )1- 571: 9 ' % *7531: /:)/-+-@ 5/ :5 1<+ :/ 00/7/ 6/ :+0?+. L5/21 /7 57 ?+:1 6/+-+ 5- )1- 2-+?/6+6 0+ :+0?+ )+-+ /?3+- 5/ :/ ;1-*/ /:)5*+.
B. PREPARACIÓN DE LA SOLUCIÓN DE SALIVA AL 10
P-/?+*/73/ 0+ :+0?+ -/<10/<3+6+ :/ 6// 03-+- 4 05/21 */6",9 *L 4 605-01 <17 +25+ 6/:30+6+ /7 57+ )-1/3+ 6/ 9" *L.
I.9.
S/25- 0+: 76<+<17/: 6/ 0+: :25/73/: 3+0+:& a. Batería N° 01
TUBO REACTIVO S10. A0*6=7
$
#
9
%
(
$"
$
$
$
$
$
$,9
$
$
$
$
$W B5X/- )H 9 , B5X/- )H 9 9 , B5X/- )H 9 (," S10. N+C0 $, $, $, $, A25+ , ," ," ," 6/:30+6+ [ $, *L 6/ :50;+31 6/ <1-/
9
9
9
9
9
9
$,
$,
$,
$,
$,[
,
$,9
#,
,"
,"
,"
HOMOGENIZAR CADA TUBO C101<+- /7 +\1 *+-K+ + #%!C 01: 351: 6/0 $ +0 % )1- " *7531:. E0 351 00/?+- + "!C )1- " *7531: 4 /0 351 ( + +\1 *+-K+ + $""!C. C5*)061 01: " *7531:, +2-/2+- 0+ :105<=7 /7>*@3<+, <1*1 :/ 76<+ /7 /0 :25/73/ <5+6-1& S10. E7>*@3< +
","
",
",
",
",
",
",
",
",
",
MEZCLAR BIEN CADA TUBO SIN RETIRARLO DEL MEDIO EN UE SE ENCUENTRAN. C5*)061 /0 3/*)1 /+<31 6/ " *7531:, */6- ",9 *L 6/ <+6+ 351 4 +\+6- + 0+ +3/-K+ N! " 3+0 <1*1 :/ 76<+ /7 0+ :25/73/ 3+0+. b. Batería N°02
TUBO $ REACTIVO S10. HC0 ,9 ","9 N *L S10. L5210 9," *L I7<5+61 ",9 *L HOMOGENIZAR
#
9
%
(
$"
,9
,9
,9
,9
,9
,9
,9
,9
,9
9,"
9,"
9,"
9,"
9,"
9,"
9,"
9,"
9,"
",9
",9
",9
",9
",9
",9
",9
",9
",9
II.
• • • •
RESULTADOS
9
#
TUBO N! "$& TUBO N! "& TUBO N! "#& TUBO N! "&
•
$
TUBO N! "9&
%
• •
TUBO N! "& TUBO N! "%&
• • •
TUBO N! "& TUBO N! "(& TUBO N! $"&
III.
CONCLUSIONES
(
$"
IV.
DISCUSION
V. •
BIBLIOGRAFIA 833)&]]^^^.+<800/-+31./:]1012+]3/*+9])9.83*0