Standarisasi Dan Jaminan Mutu Ekstrak Fix

5/20/2018

StandarisasiDan Jaminan MutuEkstrakFix-slidepdf.com

Standarisasi Jaminan Mutu Ekstrak

Nurrahmah Nawwir Az Zahra Diar Sukandi Fauziyah Dwi Utami http://slidepdf.com/reader/full/standarisasi-dan-jaminan-mutu-ekstrak-fix

1/51

5/20/2018


Parameter dan Metode Uji Ekstrak •

Terdapat 2 jenis parameter dalam melakukan suatu metode uji ekstrak, yaitu :

Spesifik

Non Spesifik

http://slidepdf.com/reader/full/standarisasi-dan-jaminan-mutu-ekstrak-fix

2/51

5/20/2018


Parameter Spesifik • • • • • • • •

Uji Identitas kandungan kimia Penetapan kadar minyak atsiri Penetapan kadar steroid Penetapan kadar tanin Penetapan kadar flavonoid Penetapan kadar saponin Penetapan kadar alkaloid Penetapan kadar antrakinon


3/51

5/20/2018


Parameter Nonspesifik • • • • • • • •

Susut Pengeringan & Bobot Jenis Kadar Air Kadar Abu Sisa Pelarut Logam Berat Uji lempeng total (bakteri) Uji nilai dekat Coliform Angka Kapang, Khamir, dan Aflatoksin


4/51

5/20/2018


Nonspesifik Nurrahmah Nawwir Az Zahra


5/51

5/20/2018


Susut Pengeringan •

•

•

Definisi : Pengukuran sisa zat setelah pengeringan pada temperatur 105°C selama 30 menit atau sampai berat konstan. Tujuan : Memberikan batasan maksimal tentang besarnya senyawa yang hilang pada proses pengeringan. Nilai : Minimal/ rentang yang diperbolehkan terkait dengan kemurnian & kontaminasi.


6/51

5/20/2018


Prosedur 1. Masukkan ekstrak sebanyak 1-2 gram. Ekstrak kering diratakan dalam botol timbang bertutup dengan menggoyangkan botol (ketebalan estrak 5-10mm). Ekstrak cair diratakan dengan batang pengaduk.

2. Buka penutup botol timbang, panaskan pada suhu 150°C selama 30 menit di oven. 3. Keluarkan botol timbang, tutup dan biarkan hingga suhu kamar. Timbang, ulangi hingga bobot tetap. 4. Bila ekstrak sulit kering & mencair pada pemanasan, ditambahkan 1 gram silika.


7/51

5/20/2018


Bobot Jenis •

•

•

Definisi : Massa per satuan volume pada suhu kamar (25°C) yang dihitung menggunakan alat khusus piknometer atau alat lainnya. Tujuan : Memberikan batasan tentang besarnya masa per satuan volume yang merupakan parameter khusus ekstrak cair s.d ekstrak kental yang masih dapat dituang. Memberikan gambaran kandungan kimia terlarut Nilai : Minimal atau rentang yang diperbolehkan. Terkait dengan kemurnian & kontaminasi.


8/51

5/20/2018


Prosedur Bobot Jenis 1. Kalibrasi bobot kering piknometer dan bobot air yang didihkan pada suhu 25°C. 2. Atur suhu ekstrak ± 20°C masukkan ke dalam piknometer, buang kelebihan ekstrak dan timbang. 3. Hitung bobot jenis esktrak dengan cara :

BJ ekstrak = Bobot Ekstrak-Bobot Piknometer kosong Bobot Air-Bobot Piknometer kosong


9/51

5/20/2018


Kadar Air •

•

•

Definisi : Pengukuran kandungan air yang berada di dalam bahan dilakukan dengan cara yang tepat diantara cara titrasi, atau destilasi Tujuan : Memberikan batasan minimal atau rentang tentang besarnya kandungan air di dalam bahan. Nilai : Maksimal atau rentang yang diperbolehkan, terkait dengan kemurnian & kontaminasi.


10/51

5/20/2018


Prosedur Kadar Air •

Cara Titrasi

1. Menggunakan pereaksi & larutan yang peka terhadap air contohnya Pereaksi Karl Fischer 2. Buret otomatis dengan labu pengering 3. Pengaduk dengan gas nitrogen atau magnetik stirer

4. Elektrode Platina dihubungkan dengan mikrometer 5. Untuk senyawa yang melepaskan air secara

perlahan, titrasi secara tidak langsung


11/51

5/20/2018


1. Titrasi Langsung 1. Masukkan ± 20 mL metanol ke dalam labu titrasi dan titrasi dengan Karl Fischer hingga TA. 2. Tambah dgn cepat zat yg diperkirakan mengandung 10-50 mg air ke dalam labu titrasi. 3. Hitung jumlah air dalam mg dengan : VxF V= Volume pereaksi Karl Fischer F= Faktor Kesetaraan Air


12/51

5/20/2018


2. Titrasi Tidak Langsung 1. Masukkan ± 20 ml metanol ke dalam labu titrasi dan titrasi menggunakan Karl Fischer hingga TA. 2. Masukkan dengan cepat zat yang telah ditimbang seksama diperkirakan mengandung 10-50 mg air ke labu titrasi 3. Tambahkan pereaksi Karl Fischer berlebih & diukur seksama, biarkan beberapa waktu hingga reaksi sempurna. 4. Hitung jumlah dalam mg air dengan rumus :

FV1-aV2 F = Faktor kesetaraan air pereaksi Karl Fischer V1 = Volume dalam ml pereaksi Karl Fischer yang diukur seksama A = Kadar air dalam mg dari larutan baku air-metanol V2 = Volume dalam ml larutan baku air-metanol


13/51

5/20/2018 •


Destilasi

Alat: 1. Labu 500 mL

2. Alat Penampung 3. Pendingin air balik 4. Tabung Penerima

Pereaksi : Toluen Sejumlah Toluen P dikocok dengan air, biarkan memisah, buang lapisan air suling. http://slidepdf.com/reader/full/standarisasi-dan-jaminan-mutu-ekstrak-fix

14/51

5/20/2018


Prosedur Penetapan Kadar Air secara Destilasi

1. Masukkan sejumlah ekstrak yang diperkirakan mengandung 2-4ml air ke dalam labu pengering. 2. Bila ekstrak kental, ditimbang dalam sehelai lembaran logam dengan ukuran sesuai leher labu, untuk ekstrak yang bisa menimbulkan bubbling, masukkan pasir kering yang telah dicuci secukupnya dan menutupi dasar labu. 3. Masukkan ± 200 mL toluen ke dalam tabung penerima, panaskan alat selama 15 menit 4. Setelah toluen mendidih , suling dengann kecepatan 2 tetes per detik, hingga air tersuling kemudian naikan menjadi 4 tetes per detik 5. Cuci bagian pendinging dengan toluen dan suling lagi selama 5 menit. 6. Setelah air & toluen memisah sempurna, baca volume air dlm persen. http://slidepdf.com/reader/full/standarisasi-dan-jaminan-mutu-ekstrak-fix

15/51

5/20/2018


Kadar Abu •

•

•

Definisi : Bahan dipanaskan pada temperatur dimana senyawa organik dan turunannya terdestruksi dan menguap. Sehingga tinggal unsur mineral dan organik. Tujuan : Memberikan gambaran kandungan mineral internal & eksternal yang berasal dari proses awal sampai terbentuknya ekstrak. Nilai : Maksimal atau rentang yang diperbolehkan, terkait dengan kemurnian & kontaminasi.


16/51

5/20/2018


Prosedur Penetapan Kadar Abu •

Penetapan Kadar Abu 1. Timbang 2-3 gram ekstrak yang telah digerus,masukkan ke dalam krus silika yang telah dipijar dan ditara

2. Pijar perlahan-lahan hingga arang habis, dinginkan dan timbang. 3. Jika arang tidak hilang, tambahkan air panas, saring melalui kertas saring bebas abu. 4. Pijar kertas saring dan filtrat ke dalam krus yang sama. Pijar hingga bobot tetap, timbang. 5. Hitung kadar abu terhadap bahan yg telah dikeringkan di udara. http://slidepdf.com/reader/full/standarisasi-dan-jaminan-mutu-ekstrak-fix

17/51

5/20/2018

•


Penetapan Kadar Abu yang Tidak Larut dalam Asam

1. Abu yang diperoleh pada penetapan kadar abu, didihkan dengan 25 mL asam sulfat encer selama 5 menit.

2. Bagian yang tidak larut dalam asam, saring melalui krus kaca masir atau kertas saring bebas abu, cuci dengan air panas. 3. Pijarkan hingga bobot tetap, timbang. 4. Hitung kadar abu yang tidak larut dalam asam terhadap bahan yang telah dikeringkan di udara.


18/51

5/20/2018


Sisa Pelarut Diar S. H. Sukandi


19/51

Sisa Pelarut

5/20/2018


Tujuan

Definisi •

Menentukan kandungan sisa pelarut tertentu (yang memang ditambahkan) secara umum dengan kromatografi gas.

•

•

Memberikan jaminan bahwa selama proses tidak meninggalkan sisa pelarut yang seharusnya tidak boleh ada. Sedangkan untuk ekstrak cair menunjukkan jumlah pelarut (alkohol) sesuai dengan yang ditetapkan


Nilai •

Maksimal yg diperbolehkan , namun dalam hal perlarut berbahaya seperti kloroform nilai harus negatif sesuai batas deteksi instrumen. 20/51

5/20/2018


Prosedur

Cara Destilasi http://slidepdf.com/reader/full/standarisasi-dan-jaminan-mutu-ekstrak-fix

Kromatografi Gas 21/51

5/20/2018


Cara Destilasi A. Penetapan kadar untuk cairan yang diperkirakan mengandung 30% etanol atau kurang 1. Suhu destilat diatur sama dengan suhu pemipetan. Pipet ± 25 mL cairan uji ke alat destilasi. 2. Destilasi dicatat hingga diperoleh destilat kurang dari 2mL lebih kecil dari volume cairan uji yang dipipet. 3. Air ditambahkan secukupnya pada destilat hingga volumenya sama dengan volume cairan uji. 4. Bobot jenis cairan ditetapkan pada suhu 25°C.


22/51

5/20/2018


Cara Destilasi B. Penetapan kadar untuk cairan yg diperkirakan mengadung 30% etanol atau lebih 1. Cairan uji dipipet 25 mL, lalu dimasukkan ke corong pisah, tambahkan air dengan volume yang sama. 2. Campuran dijenuhkan dengan NaCl(p) , tambahkan 25 mL heksana(p) dan kocok. 3. Lapisan bawah dipisahkan dengan corong pisah. Ulangi ekstraksi 2 kali, tiap kali dengan 25 mL Heksana. 4. Kumpulan filtrat diekstraksi dengan heksana tiga kali dengan 10 mL larutan NaCl. 5. Kumpulkan larutan destilasi hingga volume mendekati volume uji semula. 6. Hitung bobot jenis destilat. http://slidepdf.com/reader/full/standarisasi-dan-jaminan-mutu-ekstrak-fix

23/51

5/20/2018

•

• • •

•


Kromatografi Gas-Cair

Alat kromatografi gas dilengkapi detektor ionisai nyala & kolom kaca 1,8 m x 4 mm. Fase diam S3 dengan ukuran partikel 100-120 mesh. Gas pembawa: Nitrogen/Helium Sebelum digunakan kondisikandengan kolom semalaman 235°C, alirkan gas pembawa laju lambat. pada suhu Atur laju aliran sehingga baku internal asetonitril terelusi 5-10 menit pada suhu 120°C.


24/51

5/20/2018

•


Kromatografi Gas-Cair Larutan untuk Kromatografi Gas-Cair

Larutan baku: Encerkan 5 mL etanol mutlak dengan air hingga 250 mL. Lar. Baku internal: Encerkan 5 mL asetonitril dengan air hingga kadar etanol ±2% v/v. Larutan uji II : Pipet masing-masing 10 mL larutan uji I & baku internal ke dalam labu ukur 100 mL, encerkan sampai tanda. Lar. Baku II : Pipet masing-masing 10 mL larutan baku I & baku internal ke dalam labu ukur 100 mL, encerkan dengan air hingga tanda.


25/51

5/20/2018


Cemaran Logam Berat


26/51

5/20/2018

•

•


Menjamin ekstrak tidak mengandung logam berat Menunjukkan bahwa cemaran logam yang dengan ion sulfida menghasilkan endapan pada kondisi penetapan, tidak melebihi batas logam berat yang disyaratkan, dinyatakan dalam% zat uji. Ditetapkan membandingkan secara visual


dengan

27/51

5/20/2018


Penetapan Metode •

Tetapkan jumlah logam berat menggunakan Metode I, kecuali dinyatakan lain pada monografinya. –

–

–

Metode I adalah untuk zat yang pada penetapan menghasilkan larutan jernih tidak berwarna. Metode III digunakan bila metode I tidak menghasilkan zat jernih tidak berwarna, atau pengendapan denganion sulfida terganggu. Metode II digunakan jika metode I dan III tidak bisa.


28/51

5/20/2018


Cemaran Mikroba


29/51

5/20/2018


Uji Angka Lempeng Total •

Pengertian dan prinsip: Pertumbuhan koloni bakteri aerob mesofil setelah cuplikan diinokulasikan pada media lempeng agar dengan

•

cara tuang dan diinkubasi pada suhu yang sesuai. Media: Plate Count Agar (PCA)

•

Pereaksi: Pepton Dilution Fluid (PDF), Fluid Casein Digest Soy Lecithin Polysorbate (FCDSLP), minyak mineral (paraffin cair), tween 80 dan 20.

•

Alat khusus: blender, alat hitung koloni.


30/51

5/20/2018

Uji Angka Lempeng Total StandarisasiDan Jaminan MutuEkstrakFix-slidepdf.com

Siapkan 5 tabung, isi dengan 9 ml Pepton Dilution Fluid (PDF). Pipet 1 ml sampel pengenceran 10-1 ke tabung 1, buat hingga 10-6 Masing-masing pipet 1 ml ke cawan petri, +15-20 ml media Plate Count Agar (PCA ) (45±1oC). segera kocok ringan&putar cawan petri.

Buat blanko (hanya diisi PDF dan media) Setelah media memadat, inkubasi pada 35-37oC, 24-48jam dengan posisi terbalik. Jumlah koloni yang tumbuh diamati dan dihitung. http://slidepdf.com/reader/full/standarisasi-dan-jaminan-mutu-ekstrak-fix

31/51

5/20/2018

•

•

•

Uji Nilai Dekat Coliform


Pengertian dan prinsip: pertumbuhan bakteri coliform setelah cuplikan diinokulasikan pada media cair yang sesuai, adanya reaksi fermentasi dan pembentukan gas di dalam tabung Durham Pereaksi khusus: Pepton Dilution Fluid (PDF), Mac Conkey Broth (MCB), dll. Peralatan khusus: stomacher/blender, pipet ukur, tabung durham.


32/51

5/20/2018


Uji Angka Kapang, Khamir, dan Aflatoksin


33/51

5/20/2018


Uji Angka Kapang Khamir •

•

•

Pengertian dan prinsip: Petumbuhan kapang dan khamir setelah cuplikan diinokulasikan pada media yang sesuai dan diinkubasikan pada 2025oC. Pereaksi/ media khusus: Potato Dextrose Agar (PDA) atau Czapek Dox Agar (CDA), Malt Agar , air suling agar 0,05% (ASA), kloramfenikol 100mg/l media. Peralatan khusus: Lemari aseptic, stomacher/blender, pipet ukur mulut lebar.


34/51

5/20/2018


Uji Angka Kapang Kamir Siapkan 3 tabung, isi 9 ml air suling agar (ASA)

Pipet 1 ml sampel pengenceran 10-1 ke tabung 1, buat hingga 10-4

Pipet 0,5 ml/tabung, tuang ke permukaan Potato Dextrose Agar ) PDA, goyang.

Buat blanko( hanya berisi ASA dan PDA) Semua cawan diinkubasi pada 20-25oC, 5-7 hari. Lempeng agar yang diamati adalah lempeng yang terdapat 40-60 koloni Kapang/khamir. hitung jumlah koloni dan angka kapang/khamir http://slidepdf.com/reader/full/standarisasi-dan-jaminan-mutu-ekstrak-fix

35/51

5/20/2018

•

•

•

Uji Cemaran Aflatoksin


Pengertian dan prinsip: Pemisahan isolate aflatoksi secara KLT. Pereaksi khusus: media dan pengenceran media Yeast Extract Sucrose Broth (YESB) Peralatan khusus: lemari aseptic, lampu UV, mikropipet


36/51

5/20/2018


PARAMETER SPESIFIK Fauziyah Dwi Utami


37/51

5/20/2018


•

Identitas

•

•

Senyawa Identitas

•

Nama ekstrak (generik, dagang, paten) Nama latin tumbuhan (sistematika botani) Bagian tubuhan yang digunakan Nama Indonesia tumbuhan

Senyawa yang menjadi petunjuk tertentu spesifik dengan metode tertentu.


38/51

5/20/2018

•

•


Tujuan : Pengenalan awal yang sederhana seobyektif mungkin. Prinsip : Penggunaan panca indra mendeskripsikan bentuk, warna, bau, rasa sebagai berikut : Bentuk : padat, serbuk-kering, kental, cair Warna: kuning, coklat, dll Bau : Aromatik, tidak berbau, dll Rasa : Pahit, manis, kelat, dll


39/51

5/20/2018


Senyawa Terlarut Dalam Pelarut Tertentu

Prinsip : •

•

Melarutkan ekstrak dengan pelarut (alkohol atau air) untuk ditentukan jumlah bagian terlarut yang identik dengan jumlah senyawa kandungan secara gravimetri. Dalam hal tertentu dapat diukur senyawa terlarut dalam pelarut lain misalnya heksana, diklormetan, methanol.


40/51

5/20/2018


Kadar senyawa yang larut dalam air

1. Maserasi sejumlah dengan 100 ml air 5,0 gram ekstrak selama 24 jam 2. Menggunakkan labu bersumbat sambil berkali-kali dikocok selama 6 jam pertama dan kemudian dibiarkan selama 18 jam 3. Saring lalu uapkan 20 ml filtrat hingga kering dalam cawan dangkal berdasar rata yang telah ditara 4. Panaskan residu pada suhu 105Oc hingga bobot tetap. 5. Hitung kadar dalam persen senyawa yang larut dalam air, dihitung terhadap ekstrak awal.


41/51

5/20/2018


Kadar Senyawa yang Larut dalam Etanol

1. Maserasi sejumlah 5 gram ekstrak selama 24 jam dengan 100 ml etanol (95%). 2. Menggunakan labu bersumbat sambil berkali-kali dikocok selama 6 jam pertama dan kemudian dibiarkan selama 18 jam. 3. Saring cepat dengan menghindarkan penguapan etanol, kemudian uapkan 20 ml filtrat hingga kering dalam cawan dangkal berdasar rata yang telah ditara 4. Panaskan residu pada suhu 105OC hingga bobot tetap. 5. Hitung kadar dalam persen senyawa yang larut dalam etanol (95%), dihitung terhadap ekstrak awal.


42/51

5/20/2018


Uji Kandungan Kimia Ekstrak

Pola Kromatogram Prinsip : Ekstrak ditimbang, diekstraksi dengan pelarut dan cara tertentu, kemudian dilakukan analisis kromatografi sehingga memberikan pola kromatogram yang khas.

Tujuan : memberikan gambaran awal komposisi kandungan kimia berdasarkan pola kromatogram.(KLT, KCKT,KG)

Nilai : kesamaan pola dengan baku


43/51

Penentuan Kadar Kandungan Kimia Tertentu

5/20/2018


•

Terdapat kandungan kimia yang berupa senyawa kimia utama ataupun kandungan kima lainnya, maka secara kromatografi instrumental dapat dilakukan penetapan kadar kandungan kimia tersebut. •

Instrument Metode penetapan kadar harus diuji

•

Densitometer, Kromatografi Gas, Kromatografi Cair Kinerja Tinggi atau instrument lain yang sesuai.

Batas deteksi, selektivitas, linearitas, ketelitian, ketepatan

dahulu validitasnya Nilai

•

Minimal atau rentang kadar yang telah ditetapkan


44/51

Kadar Total Golongan Kandungan Kimia

5/20/2018

•

•

• •


Prinsip : Penerapan metode spektrofotometri, titrimetri, volumetric, gravimeteri atau lainnya, dapat ditetapkan kadar golongan kandungan kimia. Metode harus sudah teruji validitasnya, terutama selektivitas dan batas line aritas. Tujuan : memberikan informasi kadar golongan kandungan kimia sebagai parameter mutu ekstrak Nilai : minimal atau rentang yang telah ditetapkan Beberpa golongan kandungan kimia yang dapat dikembangkan dan ditetapkan metodenya. Yaitu : – – – – – – –

Golongan minyak atsiri Golongan steroid Golongan tannin Golongan flavonoid Golongan triterpenoid (saponin) Golongan alkaloid Golongan antrakinon


45/51

5/20/2018


Contoh Standarisasi & Penjaminan Mutu Ekstrak


46/51

Ekstrak kental buah kapulaga (Amomi Compacti Fructus Extractum Spissum)

5/20/2018


Pembuatanekstrak: maserasi dg etanol 70%P (1:10) 18 jam, saring/dekantasi Rendemen: Tidak kurang dari 6,6%

•

Identitas ekstrak:

•

–

Pemerian: Ekstrak kental, warna cokelat tua, bau khas, rasa agak pahit.

–

Senyawa identitas: Sineol

•

Kadar air: Tidak lebih dari 27,3% Abu total: Tidak lebih dari 6,0%

•

Abu tidak larut asam: Tidak lebih dari 3,7%

•

Kandungan kimia ekstrak: Kadar minyak atsiri tidak kurang dari 5%.

•


47/51

Ekstrak kering getah daun lidah buaya (Secretum Aloe Verae Folii Extractum Siccum)

5/20/2018


Pembuatan ekstrak: ambil daun lidah buaya, timabng 30 kg, iris melintang, tampung getahnya, biarkan menetes 6 jam. Biarkan mengering (jadam). Rendam dg etanol P 8 jam, keringkan dg penangas air. Rendemen: tidak kurang dari 0,03%, gunakan etanol P sebagai pelarut • •

Identitas ekstrak: – – –

Pemerian: Ekstrak kering,kuning kecoklatan, bau khas, rasa pahit. Senyawaidentitas: aloinA Pola kromatografi: Lakuakan Kromatografi Lapis Tipis,

Fase gerak: etil asetat P-metanol P-air (100:13,5:10) Fase diam: silica gel 60 F254 Larutan uji: 1% dlm metanolP, Larutan Pembanding: aloin 0,1% dalam methanol P Volume Penotolan: masing-masing 5 ul Deteksi: kalium hidroksida etanol LP dan UV 366


48/51

5/20/2018


Kadar air: Tidaklebihdari 10%

•

Abu total: Tidaklebihdari 5,0% Abu tidak larut asam: Tidak lebih dari 2,6%

• •

Kandungan kimia ekstrak

•

Kadar antrakinon total Tidak kurang dari 3,20% dihitung sebagai aloin  spektrofotometri.

–

Larutan pembanding: Timbang 50 mg

–

aloinpembanding, kelabuukur 50 mlad metanol.buatkonsentrasi5, 10, 15, dan 20 ug/ml


49/51

5/20/2018

–

•

Larutan uji


Timbang 100mg ekstrak + 10 ml air panas, vortex 5 menit kemudian saring panas.

•

Dinginkan, ekstraksi dengan 10ml benzen. Ambil lapisan air ke tabung refluks + 2ml FeCl3 5% dan 1ml HCl (p). Panaskan pada penangas air selama 10 menit, biarkan dingin. Ekstraksi cairan dengan 5 ml benzen, tuang lapisan benzene ke cawan porselen, uapkan di tangas air hingga kering. Larutkan residu dalam 5 ml KOH 5% dalam metanol (p). Pipet 1 ml ad 50ml KOH dalam metanol

•

•

Larutan blanko. KOH 5% dalam methanol (p) Ukur serapan pada 506 nm. Hitung persentase antrakuinon total aloin Cp= kadar dalam ug/ml dalam larutan pembanding Au=serapan larutan uji Ap=serapan larutan pembanding W=berat sampel dalam mg


50/51

5/20/2018


•

Knapa harus pake toluen?

•

Kadar Kloroform


51/51

Standarisasi Dan Jaminan Mutu Ekstrak Fix

Recommend Documents