Introducción: Los grupos sanguíneos son un sistema de antígenos específicos determinados genéticamente genéticamente localizados en la membrana de eritrocitos. Fueron descubiertos en 1900 por un científico alemán llamado Karl Landstainer, representando uno de los mayores aportes r ealizados en el campo medico de todos los tiempos. Aunque existen más de 21 grupos sanguíneos diferentes, desde el punto de vista clínico, el sistema ABO y Rh, exhiben un interés particular, dado a su amplio rango de variabilidades en la población general y las fuertes reacciones de incompatibilidad incompatibilidad que producen. El sistema ABO está determinado por dos genes diferentes que determinan dos antígenos, llamados A y B, haciendo referencia a las primeras letras del alfabeto. Los individuos que poseen antígenos A, son del grupo A, los que poseen antígenos B, son del grupo B, y los que poseen ambos son sistema AB, mientras que los que no poseen ninguno, del grupo gr upo O haciendo referencia a inicial de la palabra OHMO, que significa significa “No Hay”. El sistema ABO fue el primero en ser descubierto, posteriormente posteriormente se descubrió el sistema Rh en los monos determinados por los antígenos C, D y E. De todos los anteriores anteriores el antígeno con con mayor poder antigénico es el D, por ello los individuos que lo poseen son Rh positivos, y quienes lo carecen son Rh negativos. La mayor frecuencia en este tipo de grupos sanguíneos es el O y A al igual que los Rh positivos, los sistemas Rh negativos, tipo B y AB son muy poco frecuentes. Un avance fundamental en el campo médico fue el descubrimiento de los grupos sanguíneos, lo cual ha permitido utilizar la sangre humana como un importante recurso terapéutico. Los dos sistemas descubiertos por Lansteiner en 1900 (ABO) y por él mismo y Wiener en 1940 (Rh) siguen siendo los principales en la clasificación de la sangre y sus productos. La membrana celular de los glóbulos rojos contiene en su superficie diferentes proteínas, las cuales son las responsables de los diferentes tipos de sangre. Existen principalmente principalmente dos tipos de proteínas que determinan el tipo de sangre, la proteína A y la B. Según las diferentes combinaciones de las proteínas de la superficie de los glóbulos rojos dan como resultado los 4 grupos gr upos sanguíneos existentes: Grupo A: Tiene Ag A en la superficie del eritrocito y Ac anti-B en el plasma. Grupo B: Tiene Ag B en la superficie del eritrocito y Ac anti-A en el plasma. Grupo AB: Tiene ambos Ag A y B en la superficie del eritrocito y sin Ac anti-A ni anti-B en plasma. Grupo O: No tiene ninguna (A o B) en la superficie del eritrocito y con Ac anti-A ni y anti-B en plasma. El Rh es otra proteína que si está presente en la superficie del glóbulo rojo será Rh positivo y si está ausente, es Rh negativo. De esta forma una persona debe de tener un grupo sanguíneo formado por la proteína A, B, ambas o ninguna y además será Rh positivo o negativo. La aglutinación es la interacción entre el Ac y un Ag en específico que resulta en un agrupamiento visible. Los Ac que producen estas reacciones son las aglutininas. El análisis de tipificación de sangre se basa en la capacidad de unión a anticuerpo para alterar el estado físico del antígeno al cual se une. En las reacciones de determinación del grupo sanguíneo, los antígenos blanco se encuentran sobre la superficie de los eritrocitos, y la reacción de agrupación causada por anticuerpos contra ellos se llama hemaglutinación. La hemaglutinación se usa para determinar el grupo sanguíneo ABO y Rh de las personas. La aglutinación es inducida por anticuerpos (aglutininas) anti-A ó anti-B para el caso del grupo ABO, y anti-D para el grupo Rh. En el caso del grupo ABO, las aglutininas se unen a los carbohidratos del grupo A ó B que están siendo expresados por los eritrocitos. Dichos carbohidratos juegan el papel de antígenos de grupo sanguíneo y están dispuestos en muchas copias sobre la superficie del
eritrocito, lo que permite a las células aglutinarse cuando los anticuerpos forman enlaces cruzados con ellas. Recientemente se han agregado determinaciones de subgrupos tanto el sistema ABO como del Rh, lo que nos ha permitido tener una mejor alternativa para evitar las complicaciones de transfusiones incompatibles. Objetivos: Realizar los dos tipos de pruebas: Prueba directa o Globular y Prueba inversa o Sérica para determinar nuestro grupo sanguíneo. Observar la reacción de aglutinación que se presenta al mezclar muestras de sangre con antisueros del sistema ABO y Rh, esto para determinar el grupo sanguíneo de cada uno de los alumnos de laboratorio. Obtener la frecuencia del sistema ABO del grupo de laboratorio para poder compararlo con la frecuencia Nacional. Materiales: Gradilla por persona.
Centrifuga. Muestra de sangre por alumno. Células tipificadas A 1, A2, B y O. Solución salina.
12 tubos de ensaye de 13x100.
Vacutainer. Pipeta Pasteur por persona. Antisueros (anti-A, anti-B, anti-AB, anti-D).
Metodología Toma de sangre Colocar el brazo extendido, realizar un torniquete, seleccionar la vena por palpación Limpiar con una torunda impregnada con alcohol en forma circular, desde dentro hacia fuera. Insertar la aguja con el bisel hacia arriba, llenar una tercera parte del tubo vacutainer y mezclar la sangre con el anticoagulante. Tratamiento de muestra. Etiquetar 10 tubos: 5 con os sueros (A, AB, B Rh y Rhcontrol) y 5 tubos con las células (A1, A2, B y O), uno como tubo Auto testigo (AT), uno como tubo para plasma y el otro como tubo para eritrocitos al 3%. Centrifugar por 5 minutos a 200rpm para separar el plasma de los eritrocitos. Con ayuda de una pipeta Pasteur separar el plasma de la solución de eritrocitos en uno de los tubos. Agregar 2 gotas de plasma a los tubos con células: A1, A2, B, O y AT. Tomar de 2 a 3 gotas de eritrocitos en un nuevo tubo y generar una solución al 3% con ayuda de Solución Salina. De esta solución de eritrocitos al 3% tomar 1 gota y añadir a los tubos con sueros: anti-A, anti-B, anti-AB, anti-D. Centrifugar los tubos por 30 segundos a 3000 rpm y tomar lectura de la aglutinación en los tubos.* Como primer punto se tomaron los resultados del equipo, agrupándolos en la siguiente tabla para observar como son las reacciones de aglutinación. Tabla 1. Determinación de grupo sanguíneo del equipo 1. Integrante:
Prueba Directa.
A
AB
B
Prueba inversa.
Rh
Rhc
A1
A2
B
O
AT
Para obtener la frecuencia del grupo se tabularon los resultados: Tabla 2. Determinación de grupo sanguíneo del Grupo 1 de Inmunología General.
2
Grupo sanguíneo.
Para calcular la frecuencia se tiene los siguientes resultados: Tabla 3. Frecuencia del grupo comparando con resultados nacionales. Tipo sanguíneo Resultados: Frecuencia de Frecuencia grupo: Nacional * O 26 76.47% A 6 17.65% B 2 5.88% AB 0 0% Total: 34 100% *Comparación con diapositivas del profesor Julio. ** Comparación con bibliografía consultada. [3]
Frecuencia DF (1981)** 56% 30.9% 10% 3.1% 100%
Abul K. AbbAs. Inmunología celular y molecular. Editorial Saunders-Elsevier. 5º edición. España, 2004. pp.151, 152. MARTÍNEZ I. Código Glicano. Hypatia - Revista de Divulgación Científico - Tecnológica del Estado de Morelos. http://hypatia.morelos.gob.mx Revista de la Facultad de Medicina UNAM “Frecuencia de los grupos sanguíneos ABO y Rh (D) en la zona media del Estado de SLP.” Enero -Febrero 2004 Volumen 47 Numero 1.
http://www.medigraphic.com/pdfs/facmed/un-2004/un041f.pdf http://www.bvs.org.do/revistas/rmd/2002/63/02/RMD-2002-63-02-124-126.pdf
Consultada por última vez el 3 de Abril del 2012
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