CROMATOGRAFÍA EN PLACA FINA Y EN COLUMNA
Investigación bibliográfca La cromatografía es la técnca !"e se#ara "na me$cla %e sol"tos &asa%a en la 'eloc%a% %e %es#la$amento %e los msmos !"e se esta&lece al ser arrastra%os #or "na fase m('l )l!"%a o gaseosa* a tra'és %e "n lec+o cromatogr,-co !"e contene la fase estaconara. la c"al #"e%e ser s(l%a o lí!"%a/ 0n em&argo. em&argo. estos %os méto%os tenen en com1n el "so %e "na fase estaconara 2 "na fase m('l/
Cromatograía Cromatograía en placa fna )En nglés t+n la2er c+romatogra#+2 o TLC* es "na técnca analítca r,#%a 2 senclla. m"2 "tl$a%a en "n la&oratoro %e 3"ímca Org,nca/ La m"estra a anal$ar se %e#osta cerca %e "n e4tremo %e "na l,mna %e #a#el a%sor&ente )fase estaconara*/ Entonces. la l,mna se coloca en "na c,mara cerra%a !"e contene "no o 'aros %sol'entes me$cla%os )el"2ente o fase m('l*/ A me%%a !"e la me$cla %e %sol'entes ascen%e #or ca#lar%a% a tra'és %el #a#el a%sor&ente. se #ro%"ce "n re#arto %ferencal %e los #ro%"ctos #resentes en la m"estra entre el %sol'ente 2 el a%sor&ente/
Cromatograía Cromatograía en columna 0e em#lea #ara la se#arac(n %e me$clas o #"r-cac(n %e s"stancas a escala #re#arat'a/ Como fase estaconara se "sa. generalmente. gel %e sílce o al1mna %entro %e "na col"mna/ La elecc(n %el %sol'ente es cr"cal #ara "na &"ena se#arac(n/ Una col"mna %e cromatografía es "n t"&o %e '%ro relleno con "na s"stanca s(l%a %e #ro#e%a%es A%sor&entes constt"%a #or #e!"e5as #artíc"las6 gel %e sílce 2 al1mna son las m,s "sa%as/ Este relleno es lo !"e se conoce en cromatografía como la fase estaconara/ A tra'és %e la col"mna se +ar, #asar "na corrente %e "n %sol'ente o me$cla %e %sol'entes %enomna%a el"2ente 27o fase m('l/ La me$cla %e com#"estos a se#arar se %s"el'e en "na #e!"e5a cant%a% %e %sol'ente 2 se coloca so&re el a%sor&ente. en la #arte s"#eror %e la col"mna. !"e%an%o a%sor&%a #or el msmo/ A contn"ac(n se #asa "n 8"9o %e el"2ente a tra'és %e la col"mna/ Los com#"estos constt"2entes %e la me$cla son arrastra%os #or #o r el el"2ente a s" #aso. +acén%oles a'an$ar a lo largo %e la col"mna/ 0n em&argo. no to%os los com#"estos a'an$an a la msma 'eloc%a%. 2 esta es #recsamente la cla'e %e la cromatografía/ Alg"nos com#"estos se 'en m,s f"ertemente reten%os #or el a%sor&ente )fase estaconara* 2 #or lo
tanto a'an$ar,n m,s %es#aco/ Por el contraro. otros a#enas son reten%os 2 a'an$ar,n a ma2or 'eloc%a%/
OBJETIVOS : ;etermnar el gra%o %e #"re$a %e "n com#"esto/ 0e #"e%e %etermnar así. #or e9em#lo. la efect'%a% %e "na eta#a %e #"r-cac(n/ : Com#arar m"estras/ 0 %os m"estras corren g"al en #laca #o%rían ser %éntcas/ 0. #or el contraro. corren %stnto entonces no son la msma s"stanca/ : Real$ar el seg"mento %e "na reacc(n/ Es #os&le est"%ar c(mo %esa#arecen los react'os 2 c(mo a#arecen los #ro%"ctos -nales o. lo !"e es lo msmo. sa&er c",n%o la reacc(n +a aca&a%o/
ET!S :Real$ar la #r,ctca #or com#leto :Lograr c"m#lr los o&9et'os %e esta #r,ctca/ : ;esarrollar cromatografía en #laca :;etermnar el Rf %e las s"stancas/
!"C!#CES :A#lcar las técncas cromatogr,-cas #ara o&tenc(n %e com#"estos #"ros :Esta&lecer la %ferenca !"e e4ste entre la cromatografía en #laca -na 2 la %e col"mna/ :;esarrollar la cromatografía en c"al!"er st"ac(n/
EC!#ISO $E %E!CCI La m"estra se %s"el'e con "na fase m('l )!"e #"e%e ser "n gas. "n lí!"%o o "n 8"%o s"#ercrítco* la c"al se +ace #asar a tra'és %e "na fase estaconara nmscs&le -9a en "na col"mna o en "na s"#er-ce s(l%a/ Las %os fases se elgen %e tal forma !"e los com#onentes %e la m"estra se %str&"2en en gra%os %stntos entre la fase m('l 2 la fase estaconara/
A!"ellos com#onentes !"e son f"ertemente reten%os #or la fase estaconara se m"e'en con m"c+a lentt"% con el 8"9o %e la fase m('l/ En cam&o. los com#onentes "n%os %é&lmente a la fase estaconara se m"e'en con ra#%e$/ Como consec"enca %e las %stntas 'eloc%a%es %e mgrac(n. los com#onentes %e la m"estra se se#aran en &an%as o $onas %stntas !"e se #"e%en anal$ar en forma c"altat'a 2 c"anttat'a/ Pre#arac(n %e las #lacas -nas o cromato#lacas/
;E0ARROLLO E LA PR
;e9ar secar la #laca
Leer &en la #r,ctca con el o&9et'o %e lle'ar &en aca&o el e4#ermento/
Cromatografía en col"mna
0e agrega el gel sílce me$cla%o con +e4ano/
=erter la m"estra a la col"mna tenen%o c"%a%o %e no %eformar la s"
C,lc"los6 ;etermnac(n %el Rf %e los com#"estos em#lea%os en la #r,ctca/ Distanciarecorrida por el problema ( desde el origen ) Rf = Distancia recorrida por el disolvente ( desde elorigen )
Placa %s"elta en %sol'ente A A 3.3 Rf placa A = = =0.63 Fs 5.25
;stanca recorr%a #or el %sol'ente6 >> mm Me%anamente Polar
? se #"e%e %ecr !"e es
Placa %s"elta en %sol'ente @ Rf placa B =
B 0.00 = =0.00 Fs 5.25
;stanca recorr%a #or el %sol'ente6 / mm ? se #"e%e %ecr !"e es No Polar
Placa %s"elta en %sol'ente C Rf placaC =
C 5.1 = = 0.97 Fs 5.25
;stanca recorr%a #or el %sol'ente6 B mm ? se #"e%e %ecr !"e es Altamente Polar
I#TE%'%ET!CI $E "OS ES'ECT%OS
;e los res"lta%os anterores el me9or corrmento 2 se#arac(n %e com#"estos lo o&t"'o la #laca C. se #"e%e %etermnar !"e es "n com#"esto altamente #olar 2 #or consec"ente el me9or %%ol'ente %e los tres. es #or eso !"e f"e el !"e se "tl$( en el %esarrollo %e la cromatografía en col"mna/
COSTO( BE#E)ICIO La Cromatografía en ca#a -na )TLC* ofrece "n méto%o r,#%o. &arato 2 re#ro%"c&le .las técncas %e cromatografía son m"2 "tl$a%as 2a !"e #ermten "na me9or a#recac(n %e los com#"estos. a%em,s se#ara los com#onentes %e "na manera !"e se +ace 's&le m"2 f,clmente/ Otras técncas #ara la #"r-cac(n %e s"stancas son6 :;estlac(n :E4tracc(n :Crstal$ac(n/ Los &ene-cos %e la cromatografía en com#arac(n con estas otras técncas. es !"e es m"c+o m,s &arato oc"#ar tras %e #a#el 2 "na #e!"e5a cant%a% %e sol'entes. a%em,s es &ene-coso en a+orro %e tem#o #"es es m"c+o m,s f,cl c"%ar %e esta e4#ermentac(n #or!"e n8"2en #ocas 'ara&les/
*SOS + !'"IC!CIO#ES Las n"e'as técncas %e la !"ímca !"e #ermte la r,#%a %ent-cac(n %e com#"estos #otencalmente 1tles mé%cos/ La cromatografía es la +erramenta %eal #ara encontrar estos com#"estos en #artc"lar el "so %e al1mnas/ Tecnología %e almentos 2 Pro%"ctos Nat"rales/: P"e%e real$arse la caracter$ac(n %e Acetes Esencales 2 Aromas. los c"ales son em#lea%os en la ela&orac(n %e sa&or$antes. aromat$antes. lcores. #erf"mes. artíc"los %e aseo. 2 como materas #rmas #ara #ro%"ctos farmacé"tcos/ Control Am&ental/: ;entro %e los contamnantes #os&les %e ser est"%a%os est,n6 los +%rocar&"ros arom,tcos. @TED. #estc%as organoclora%os 2 organo:fosfora%os en m"estras %e ag"as s"#er-cales. s"&terr,neas. s"elos 2 lo%os/ 3"ímca Forense/: Es #os&le la a#lcac(n %e la cromatografía %e gases 2 la es#ectrometría %e masas en la %etecc(n 2 c"ant-cac(n %e analtos
%e nterés en la !"ímca forense/ Por e9em#lo la %etermnac(n. c"ant-cac(n %e alco+ol en sangre. an,lss %e lcores. entre otros/
CO#C"*SIO#ES El "so %e la cromatografía es m"2 e4tenso gracas a s" &a9o costo 2 a la facl%a% con la !"e se nter#retan los res"lta%os/ 0e +an c"m#l%o los o&9et'os %e la #r,ctca 2a !"e +e enten%%o los conce#tos 2 f"nconamento %e la cromatografía/
BIB"IO,%!)I! : ;omng"e$.: Cromatografía en #a#el 2 #laca %elga%a. OEA/ : Cramer.: Pa#er C+romatogra#+e. =erlag C+eme/