UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO
FACULTAD DE QUÍMICA Integrantes
Práctica 7: Cromatografía en columna.
Equipo 1
Química Orgánica I 1311
Objetivos:
Comprender la técnica de cromatografía en columna, sus características y los factores que intervienen en ella. Llevar a cabo una cromatografía en columna para separar un compuesto orgánico. Controlar la cromatografía en columna por medio de la cromatografía en capa fina.
Resultados:
Se llevó a cabo la cromatografía por columna obteniendo 8 viales 6 con mililitros de las fracciones de la muestra. Después se hizo cromatografía de capa fina a cada una de las muestras contenidas en los viales, obteniendo lo siguiente:
Valor de Rf Testigo Fracciones 1, 2, 3 y 4 Testigo
0.69
Fracción 5
0.68
Fracción 6
0.68
Fracción 7
0.52
Fracción 8
0.50
0 0.69
Fig. 1 Resultados de la cromatografía a capa fina.
Rendimiento a partir de destilación simple:
Análisis de resultados:
Como se puede observar el la fig. 1, en la cromatoplaca donde hay fracciones 1, 2, 3 y 4 no hay presencia del compuesto activo, solo tenemos la mancha de la muestra testigo, podemos decir que los viales nada más contenían eluyente. A partir de la fracción 5 hasta la 8 en la cromatoplaca ya hay aparición de manchas, lo que indica que hay parte del compuesto activo, la muestra testigo tiene mayor tamaño debido a que la concentración es mayor. En cuanto a su polaridad, es casi la misma, solo difiere por muy poco en la muestra 7 y 8. Al momento de llevar a cabo la destilación de estas últimas fracciones se obtuvo un rendimiento de tan sólo el 16%, cabe mencionar que este tipo de destilación es para purificar y por ello no se puede obtener un rendimiento del 100%, también suponemos que aún quedaron en la columna cromatográfica parte de los componentes del medicamento ya que en el vial número 8 al llevar a cabo la cromatografía de capa fina se observa que sigue habiendo compuesto.
Conclusiones:
La cromatografía en columna sirve para la separación de componentes en una mezcla. La cromatografía en capa fina nos sirve para controlar e identificar los componentes de una mezcla. Ambos tipos de cromatografía se complementan.
Cuestionario: 1.- Indique algunas de las aplicaciones de la cromatografía de adsorción.
Capa fina: para la identificación de sustancias, por ejemplo, la separación de aminoácidos. Columna: separación de colorantes, proteínas, separa mayores cantidades de producto principal.
2.- Diga cuál es la diferencia entre una cromatografía en capa fina y la de columna.
La cromatografía en capa fina es un procedimiento para identificar y para determinar cuantitativamente componentes individuales, mientras que la cromatografía en columna se aplica para llevar a cabo purificaciones, en la cual se pueden separar grandes cantidades de una mezcla de compuesto.
3.- ¿Qué debe hacerse para encontrar el eluyente adecuado para un compuesto que se purifica en
cromatografía en columna? Esta elección depende del componente que se va a separar y del material en que la separación se llevará a cabo. En la elección influyen varios factores: * No utilizar compuestos muy volátiles. * Pureza. * Evitar que contengan trazas de metales (catalizadores). La elección del eluyente se realiza de forma empírica. Hay que estudiar la polaridad del componente y probar con eluyentes cada vez menos polares.
4.- ¿Por qué es necesario realizar una cromatografía en capa fina a los eluatos obtenidos de la
columna cromatográfica? La cromatografía en capa fina es un control de la cromatografía en columna, nos sirve para saber en qué fracciones de los viales se encuentra el principio activo de nuestra muestra, en este caso, del desenfriol.
5.- Escriba una lista de eluyentes utilizados en cromatografía en columna en or den de polaridad
creciente. Los eluyentes usados en cromatografía en columna deben tener polaridad baja a media, los más utilizados son: Hexano Tolueno Éter Diclometano Acetato de etilo Acetonitrilo Isopropanol Etanol Metanol
Polaridad
Bibliografía: Primo, Yúfera Eduardo, Química orgánica básica y aplicada: De la molécula a la industria, Volumen II, Editorial Reverté, España, 1995.
