LABORATORIO LABORATORIO DE PRINCIPIOS DE QUIMICA ORGANICA
INFORME N°6: CROMATOGRAFIA CROMATOGRAFIA EN CAPA CAPA FINA
SEBASTIAN AROCHA. COD: 245565
JOSEPH MUÑOZ. COD: 244661 GRUPO 1
UNIERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA
FACULTAD DE CIENCIAS
MARZO 2!15
R"#$%"& En el presente informe se mostraran los resultados pertenecientes a llevar a cabo la experimentación para la separación de pigmentos de diferentes propiedades, esto se lleva a cabo mediante la cromatografía de capa na, mediante el uso de diferentes sustancias separadoras.
P'()"*+%+"&,(
reparar " c#maras cromatogracas con " solventes diferentes
reparar ! placas
roceda a reali'ar la cromatografía (dibuar los resultados)
$pli%ue en cada placa " muestras (muestra original, & colorantes)
eleccione los elu&entes m#s adecuados para la me'cla %ue se tiene
R"#$-,*(# (IBT)
C'(%,(/'0 "& ) 3& F#" "#,)+(&'+ #-+) /"7,"' *" T(-$"&(:M", F#" %+T(-$"&( M",&(",'-"( &(- 89:1 atrón ase móvil 1uestra problema 3oo de metilo 54nitrofenol udan III 4nitrofenol
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T;- 1. 3esultados de la cromatografía en capa na, con fase estacionaria en sílica gel, de una muestra problema comparados con los valores obtenidos para diferentes sustancias patrones usando tolueno, 7ter de petróleo, metanol & me'cla tolueno8metanol 8* como fases móviles. 9alores dados en cm.
C'(%,(/'0 "& ) 3& F#" "#,)+(&'+ #-+) /"- 8-('"# R0 < =R0 7,"' *" T(-$"&(:M",&( F#" %+T(-$"&( M",&(",'-"( - 89:1 laca laca * laca + laca * laca + + :3 :3f 3f :3f 3f 3f :3f 3f :3f 3f :3f 3f :3f f +2 / / 6 !* / -- 62 0+ 2 -0 /; /; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; 26 -0" +" 4 "; +; 4 4 4 4 4 4 ; ; ; ; *! */ - !/ 0 -* 4 4 4 4 4 4 4 ; ; ; ; ; ; +2 / / " -6 ! -" 4 4 4 4 4 4 ; ; ; ; ; ; ; "! 2 - -2 ! -" 4 4 4 4 4 4 ; ; ; ; ; ; ;
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1uestra problema
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4
4nitrofenol
4
4
3oo de metilo 54nitrofenol
4 4 06 ; !/ ;
laca *
T;- 2. 9alores calculados de 3f & :3f para cada una de las sustancias en las diferentes fases móviles
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atrón 3oo de metilo 54nitrofenol
T;- >. 9alores calculados de :st para la sustancia problema con respecto a las diferentes sustancias de referencia.
A&?-+#+# *" '"#$-,*(# $l ver las distancias recorridas por las sustancias, tanto las de referencia como la problema, en las diferentes fase móviles, es f#cil determinar cual de estas es las m#s adecuada para la correcta separación de los compuestos de la muestra problema. Aos resultados obtenidos usando 7ter de petróleo como fase móvil muestran %ue las sustancias sufrieron una separación mu& leve, puesto %ue dos sustancias, la problema & el sudan III, no tuvieron ningn recorrido, & en las " restantes sus recorridos fueron mu& cortos, siendo el ma&or de estos de *,/ cm para el o4nitrofenol. $un%ue dic:a fase móvil no es la m#s adecuada para la separación de todas las sustancias del lí%uido problema, si nos permite reali'ar algunas especulaciones sobre la caracteri'ación de estas. Es de resaltar %ue la muestra problema no sufrió ni el m#s mínimo despla'amiento, tal como el sudan III, usando esta fase móvil. En cambio, a pesar de %ue el despla'amiento no fue demasiado largo, el o4nitrofenol si pudo moverse mediante el uso de 7ter de petróleo, por lo %ue esto nos da un indicio de %ue esta sustancia podría no estar me'clada en la muestra problema. En el caso del roo de metilo & del p4nitrofenol, sus despla'amientos fueron tan cortos %ue no nos permite ni si%uiera considerar %ue no podrían estar en la sustancia problema. Considerando el caso donde fue usado el metanol como fase móvil, si bien :ubo despla'amiento en todas las sustancias, no se logró una separación signicativa en ninguna de las dos placas, por lo %ue se puede ver claramente como esta fase móvil no es adecuada para una reali'ación correcta de la cromatografía para esta sustancia problema. $ diferencia del caso mostrado anteriormente, usando metanol como fase móvil no es posible tener ningn indicio de cuales podrían ser las sustancias presentes en la muestra problema. $nali'ando los resultados obtenidos usando tolueno como fase móvil, es f#cilmente apreciable la separación signicativa de las sustancias, tanto las de referencia como la problema. Ao primero %ue cabe resaltar en este caso es %ue se evidencia claramente %ue el tolueno es una fase móvil correcta para la separación cromatogr#ca de estas sustancias. $:ora, en cuanto a la identicación de las sustancias presentes en la muestra problema, es posible apreciar como los indicios mostrados en el caso en el cual fue usado 7ter de petróleo como fase móvil son conrmados con el tolueno como fase móvil. El o4 nitrofenol tuvo un despla'amiento considerablemente ma&or al de la muestra problema, por lo %ue se puede descartar su presencia en ella. ucede lo mismo con el p4nitrofenol, mostrando así %ue el breve despla'amiento mostrado en el 7ter de petróleo si era una prueba de su ausencia en la muestra problema. En cambio, tanto el roo de metilo como el sudan III tuvieron despla'amientos mu&
similares, si no iguales, al reali'ado por la muestra problema, evidenci#ndose unos :st iguales a 2; & *//; respectivamente. $l obtener los meores resultados usando tolueno como fase móvil & con el metanol tener la capacidad de despla'ar las sustancias, fue usada una me'cla 8* de tolueno8metanol, buscando obtener una meor separación cromatogr#ca con esta fase móvil. in embargo, los resultados obtenidos no fueron los esperados. En la placa +, las sustancias se despla'aron pero no sufrieron separación alguna, tal como en el caso del metanol como fase móvil. En la placa * se observó un comportamiento atípico a lo evidenciado en los otros casos. e ve %ue la muestra problema tuvo un despla'amiento mu& diferente con respecto al uso de esta misma fase móvil pero en la placa +, evidenciado en un 3f del 62; en la placa * & del 2; en la placa +. $dem#s, se esperaba %ue el roo de metilo tuviera un despla'amiento intermedio entre el obtenido usando metanol como fase móvil & tolueno como fase móvil. in embargo, su despla'amiento fue menor %ue en ambos casos, evidenciado por sus 3f, %ue en los casos anteriores :abía sido de 06; & 26;, & en este ltimo fue de 0";. robablemente estos resultados inesperados se deban a una incorrecta manipulación de las placas con la fase estacionaria, tal ve' una inadecuada introducción de la placa en la c#mara cromatogr#ca, la alteración de la fase estacionaria al manipular la placa o simplemente alguna imperfección en el momento de aplicar la fase estacionaria sobre la placa. 5bservando los :st de la sustancia problema obtenidos usando las diferentes fases móviles con respecto a las sustancias de referencia, es posible observar como en el caso del sudan III & del roo de metilo estos oscilan cerca al *//; en la ma&oría de sus casos. Cuando se obtiene un resultado indeterminado en el :st con el sudan III, esto se debe a %ue en ambos caso el 3f es de /;. En los casos del roo de metilo, descartando el dato atípico, el resultado de /; se debe al 3f de la muestra problema %ue es igual al /;. Con esto, podemos concluir %ue tanto el roo de metilo como el sudan III son las sustancia presentes en la muestra problema. En cambio, reali'ando el mismo an#lisis de los :st con respecto al p4nitrofenol & o4nitrofenol, se pueden apreciar desviaciones importantes al *//; %ue se obtendría en caso de tener alguno de estos compuestos en la muestra problema. >e :ec:o, donde sus :st fueron cercanos al *//; fue por%ue no se reali'ó separación de los compuestos, no por%ue sus separación :a&a coincidido en las distancias despla'adas al punto de siembra.
C(&)-$#+(&"# ue posible el correcto uso de la t7cnica de separación cromatogr#ca de capa na para la separación de la muestra problema recibida al inicio de la pr#ctica, logrando mostrar %ue las sustancias presentes en dic:a muestra eran el roo de metilo & el sudan III. Tambi7n fue posible demostrar %ue la meor fase móvil
para la separación de esta muestra, por medio de la cromatografía de capa na, %ue fue usada en esta pr#ctica fue el tolueno, dado %ue se logró una separación signicativa de las sustancias anali'adas. $dem#s, se mostró %ue el metanol no es una fase móvil adecuada para la separación por esta t7cnica, dado %ue despla'a las sustancias pero no las separa. El 7ter de petróleo por si solo no es suciente para determinar las sustancias presentes en la muestra problema, por%ue, aun%ue logra una breve separación de las sustancias, & esto nos da indicios de cuales sustancias podrían estar en la me'cla, sus despla'amientos son demasiado cortos como para poder determinar cuales est#n presentes en la muestra problema & cuales no.
P'"/$&,# 1. Du7 ocurre si al introducir la placa en la c#mara cromatogr#ca, el nivel del elu&ente alcan'a el sitio de aplicación de la manc:aF
R,: si el nivel del elu&ente alcan'a la manc:a de muestra lo %ue va a pasar es %ue dependiendo de la naturale'a de la muestra esta se va a diluir en el solvente, provocando %ue se deba repetir el experimento.
2. DCu#l es el efecto de la polaridad en la cromatografíaF R,: El efecto de la polaridad en la cromatografía tiene como efecto el poder arrastrar con ma&or facilidad o no la muestra, &a %ue las sustancias m#s polares tienden a ser m#s retenidas mientras %ue las sustancias menos polares suelen ser arrastradas f#cilmente.
>. DCu#les son las consecuencias de una columna mal empacadaF R,: Esto podría generar unos resultados erróneos &a %ue la forma en la %ue se distribu&e la muestra pasada la sesión de cromatografía depende del material de relleno & esto depende a su ve' de en %u7 características se encuentra, es decir si no se encuentra en un entorno controlado los resultados ser#n erróneos.
4. DCu#les son las diferencias entre cromatografía li%uida & de gasesF R,: Aa diferencia principal radica e cual es la fase móvil, en la cromatografía li%uida la fase móvil es lí%uida, mientras %ue en la cromatografía de gases la fase móvil es un gas, adem#s de todo esto estas + t7cnicas se diferencian en los lugares en los %ue se desarrolla la cromatografía, mientras %ue la li%uida se puede desarrollar tanto en una c#mara como una columna, la de gases solo puede :acerlo en una columna.
5. rofundi'ación sobre Guorescencia para sustancias incoloras.
R,: i la sustancia %ue se pretende separar es transparente o su color puede ser nali'ado el proceso incoloro, se necesita algo %ue sirva como marcador para poder identicar el tra&ecto de la muestra, muc:as veces se usa una l#mpara Guorescente o en contra parte un reactivo %ue les otorgue coloración a las muestras.
6. ar#metros de la cromatografía de alta eciencia. R,: debido a %ue los diferentes tipos de cromatografía de alta eciencia son8 cromatografía li%uida de alta resolución, fase normal, fase reversa, exclusión molecular, intercambio iónico, bioanidadH los par#metros de la cromatografía de alta eciencia son8 >i#metro interno, medida de las partículas, tamao del poro, presión del sistema.
@. En %u7 orden (de arriba abao) se puede esperar los siguientes compuestosF Jaftaleno, acido butírico & acetato de fenilo en un gel de placa de TAC de sílice desarrollada con diclorometano. . 5rganice los siguientes compuestos en orden creciente de 3f empleando la ilica como fase estacionaria en cromatografía de capa delgada, acetalde:ído, +4octanona, decano & *4butanol. 9. ue efecto se produce si se siembra muc:a muestra en la cromatoplaca.
R,: si se siembra muc:a muestra en la cromatoplaca pueden pasar lo siguiente8 la muestra se puede desperdigar de manera errónea provocando %ue se me'cle con otras si se tiene, o %ue la muestra se dilu&a en el solvente & caiga en el recipiente.
1!.
e observa una manc:a con un 3f de //!+ despu7s de desarrollar la cromatoplaca para una me'cla de reacción Drueba esto %ue usted tiene solamente un producto presenteF Expli%ue.
R,: Aa denición del 3f se da como la relación entre la distancia recorrida por el centro de la manc:a de la sustancia desde el punto de aplicación & la distancia recorrida por el elu&ente tambi7n desde el punto de aplicación, &a %ue cada sistema sorbente4elu&ente tiene un 3f característico esto nos da a indicar %ue efectivamente solo :abría un producto presente.
11.
>e %u7 manera inGu&e la saturación en la c#mara en el proceso de separación.
B+;-+(/'0 IBT . (s.f.). 5btenido de
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KiMipedia. (s.f.). Wikipedia . 5btenido de :ttp8??es.KiMipedia.org?KiMi?Cromatograf;C";$>aLenLcapaLna*metros NiMipedia. (s.f.). Wikipedia. NiMipedia. (s.f.). Wikipedia. 5btenido de :ttp8??es.KiMipedia.org?KiMi?Cromatograf;C";$>aLl ;C";$>%uidaLdeLaltaLecacia<ar.C".$
