Bioanalitic Poe. de Copro

LABORATORIO LABORATORIO DE DE MICROBIOLOGIA CLINICA MICROBIOLOGIA CLINICA MANUAL MANUAL Manual de Procedimi Procedimientos entos de Coprocult Coprocultivo ivo SISTEMA DE GESTON DE CALIDAD

CODIGO: CODIGO:

BA – BA – BJ – BJ – LC - 01 BA – BA – BJ – BJ – LC - 01

VERSIÓN: VERSIÓN: PÁGINA:

01 1 - 20

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS DE COPROCULTIVO

Elaborado por:

Revisado por:

Aprobado por:

Baneza Katy Janampa Coras

Nilda Aurea Apayco Espinoza

Homero Ango Aguilar

Se prohíbe su reproducción total o parcial sin la autorización de BIOANALITIC. Se considera copia no controlada a toda copia impresa que no lleve el sello de COPIA CONTROLADA. Documento de uso exclusivo de BIANALITIC.

Manual de Procedimi Procedimientos entos de Coprocult Coprocultivo ivo SISTEMA DE GESTON DE CALIDAD

VERSIÓN: VERSIÓ N:

01

PÁGINA:

2 - 20

CONTENIDO CARATULA

1

I.

INTRODUCCIÓN

2

II.

OBJETIVOS Y CAMPO DE APLICACIÓN

4

2.1. Objetivos 2.2. Campo de aplicación III. NORMAS DE REFERENCIA

4

IV. DEFINICIONES

4

V.

PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTANDARIZADO DE COPROCULTIVO

6

5.1. PROCEDIMIENTO DE COPROCULTIVO EN BACTERIOLOGÍA

6

5.1.1. PROCESO PRE-ANALÍTICO a) Metodología b) Control de Calidad

7

c) Registro

8

5.1.2. PROCESO ANALÍTICO

9

a) Metodología b) Control de Calidad

10

c) Registro

12

5.1.3. PROCESO POST-ANALÍTICO

13

a) Metodología b) Control de Calidad

16

c) Registro

17

VI. ANEXOS

18

VII. BIBLIOGRAFIAS

20


LABORATORIO LABORATORIO DE DE MICROBIOLOGIA CLINICA MICROBIOLOGIA CLINICA MANUAL MANUAL

Manual de Procedimientos de Coprocultivo SISTEMA DE GESTON DE CALIDAD

I.

CODIGO: CODIGO:

BA – BJ – LC - 01 BA – BJ – LC - 01

VERSIÓN:

01

PÁGINA:

3 - 20

INTRODUCCIÓN

La porción inferior del intestino tiene una flora bacteriana normal excesivamente amplia. Los microorganismos con mayor prevalencia son los anaerobios ( Bacteroides, bácilos gram positivos, Estreptococos), microorganismos entéricos gran negativos y Enterococcus faecalis . Cualquier intento por aislar bacterias patógenas de las heces implica la separación de las especies patógenas, usualmente a través del empleo de medios selectivos diferenciales y de cultivos enriquecidos. Las principales causas de trastornos gastrointestinales agudos incluyen a los virus, las toxinas (de : Estafilococos, Vibriones, Escherichia coli ), bacilos entéricos gran negativos invasores, los fermentadores lentos de la lactosa, la Shigella, la Salmonella y la Campilobacterias. La importancia relativa de estos grupos tiene grandes discrepancias en las distintas partes del mundo. Las heces y los raspados rectales son los especimenes de que se dispone con mayor facilidad. Debe anotarse, en el examen macrocópico la presencia de sangre, moco o helmintos en la inspección inicial. Se suspenden los especímenes en un caldo selectivo como el Caldo de Tetrationato y se cultivan sobre medios ordinarios así como en medios selectivos diferenciales, por ejemplo Agar EMB, Agar McConkey, Agar S-S, para permitir la separación de los bacilos gran negativos que no fermentan la lactosa de otras bacterias entéricas comunes. Los frotis teñidos pueden revelar una prevalencia de leucocitos y de ciertos microorganismos anormales como Cándida o estafilococos, pero no pueden utilizarse para diferenciar las bacterias entéricas patógenas de las de la flora normal, por lo que deben realizarse otro tipo de pruebas para discriminar los tipos de bacterias presentes en la muestra como son las pruebas bioquímicas. II.

OBJETIVO Y CAMPO DE APLICACIÓN 2.1. OBJETIVO GENERALES El objetivo del presente manual, es describir los Procedimientos Operativos Estandarizados del Coprocultivo. Identificar las posibles especies patógenas de microorganismos presentes en las vías gastrointestinales (Heces) a través del coprocultivo. 2.2. OBJETIVO ESPECÍFICOS Conocer un conjunto de técnicas que nos permita diferenciar la morfología, y características, para la Identificación el microorganismo patógeno, que se encuentran en la materia fecal. Conocer cómo obtener la muestra de heces para un determinado coprocultivo. Interpretar resultados, validación, emisión del informe.


Manual de Procedimientos de Coprocultivo SISTEMA DE GESTON DE CALIDAD

VERSIÓN:

01

PÁGINA:

4 - 20

Realizar el respectivo control de calidad en cada uno de procesos operativos estandarizados del coprocultivo. Realizar registros de control de calidad por cada proceso operativo establecido. 2.3. CAMPO DE APLICACIÓN Bajo los alcances del presente manual, se encuentran todas las actividades relacionadas a los Procedimientos Operativos Estandarizado de coprocultivo, que se llevan a cabo en el Laboratorio de Microbiología Clínica Bioanalitic, que incluyen los procesos pre-analíticos, analíticos y post-analíticos. III.

NORMAS DE REFERENCIA NTS Nº 072-2008 UPS de Patología Clínica NTS Nº 018 ISO N° 17025

IV.

DEFINICIONES Cepa: en microbiología, conjunto de virus, bacterias u hongos que tienen el mismo patrimonio genético. Enfermedad: alteración o desviación del estado fisiológico en una o varias partes del cuerpo, por causas en general conocidas, manifestada por síntomas y signos característicos, y cuya evolución es más o menos previsible. Enzima: catalizador biológico, normalmente una proteína, que mediatiza y promueve un proceso químico sin ser ella misma alterada o destruida. Son catalizadores extremadamente eficientes y muy específicamente vinculados a reacciones particulares. Fermentación: conversión biológica anaeróbica (sin oxígeno) de las moléculas orgánicas, generalmente hidratos de carbono, en alcohol, ácido láctico y gases, mediante la acción de ciertos enzimas que actúan bien directamente o como componentes de ciertas bacterias y levaduras. En su uso más coloquial, el término hace referencia a menudo a bioprocesos que no están estrictamente relacionados con la fermentación. Infección: invasión de un ser vivo por un agente patógeno que desencadena una enfermedad. Microorganismo: organismos microscópicos pertenecientes por regla general a virus, bacterias, algas, hongos o protozoos. Organismo: entidad biológica capaz de reproducirse o de transferir material genético, incluyéndose dentro de este concepto a las entidades microbiológicas, sean o no celulares. Casi todo organismo está formado por células, que pueden agruparse en


LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA CLINICA MANUAL Manual de Procedimientos de Coprocultivo

CODIGO: VERSIÓN:

BA – BJ – LC - 01 01

SISTEMA DE GESTON DE CALIDAD PÁGINA: 5 - 20 órganos, y éstos a su vez en sistemas, cada uno de los cuales realizan funciones específicas. Patógeno: productor o causante de enfermedad. Toxina: proteína responsable de la especificidad funcional de ciertas bacterias, que es venenosa para determinados organismos. Entre las mejor conocidas, tanto por su estructura como por los mecanismos de acción, figuran las toxinas colérica y tetánica que interaccionan con las células diana a través de gangliósidos de membrana. Vacuna: Antígeno procedente de uno o varios organismos patógenos que se administra para inducir la inmunidad activa protegiendo contra la infección de dichos organismos. Es una aplicación práctica de la inmunidad adquirida.


LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA CLINICA PROCEDIMIENTO PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDARIZADOS DE ANÁLISIS COPROLÓGICO SISTEMA DE GESTON DE CALIDAD

V.

CODIGO:

BA – BJ – LC - 01

VERSIÓN:

01

PÁGINA:

6 - 20

PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDARIZADOS DE ANÁLISIS C OPROLÓGICO En consideración a los procesos desarrollados en el Laboratorio de Microbiología Clínica, se estableció los siguientes POEs de Análisis Coprológico, como se detalla a continuación:

5.1. PROCEDIMIENTO COPROLÓGICO EN BACTERIOLOGÍA 5.1.1. FASE PRE-ANALÍTICO 1. TOMA DE MUESTRA DE HECES Toma de muestra

Materiales Protocolo

Trasporte al laboratorio

Condiciones Parabasales

Criterio

-

Heces: Hisopos rectales. Heces fresca o líquida (especialmente diarreicas). Si la muestra es sólida enviar 2 gramos de deposición y si es líquida de 3 a 5 mL. Para bebés y niños pequeños que usan pañales, se puede cubrir el pañal con un envoltorio plástico. - Frasco estériles de boca ancha - Hisopo rectal - Envolturas plásticas Heces: - Recipientes limpios de boca ancha (necesariamente estéril) y con cierre hermético. - Seleccionar zonas con sangre, moco o pus - Heces pastosas: usar espátula del recipiente (no papel higiénico). Hisopo rectal: - Introducir el hisopo sobrepasando un poco el esfínter anal. - Luego introducir el hisopo en medio de transporte Cary-Blair y enviar al laboratorio. - Etiquetar muestra adecuadamente. - Trasladar prontamente la muestra a laboratorio, pues la rápida proliferación de las bacterias comensales llevan a la destrucción de los Enteropatógenos, en especial si se trata de gérmenes lábiles como la Shigella. - Cary-Blair es un medio de conservación para el coprocultivo, tiene como máximo de tiempo de 5 días a temperatura ambiental. - Si la muestra no se procesa en 2h, se mantiene en refrigeración sólo hasta 48h. - Antes de recoger las heces evitar tomar medicamentos (antiácidos, antidiarreicos, antiparasitarios, antibióticos y laxantes), dependiendo del motivo del análisis. - Evitar que las heces se contaminen con la orina. - No se deben recoger las heces del sanitario o mezcladas con papel higiénico. - Incluir en la muestra de deposición los trozos de epitelio o moco, sangre y pus. - Datos clínicos del paciente: Edad, síntomas, tiempo de evolución del cuadro diarreico, tipo de alimentos ingeridos, contacto con animales y cuáles, procedencia, ocupación. - Salmonella, Shigella, bacilos tuberculosos, es preciso que se encuentren en grandes cantidades y se hallen en varios exámenes. - La presencia de sangre, suponer infección de E. coli, Shigella, Yersinia, etc. - Presencia de sangre o pus, suponer proceso inflamatorio más o menos intenso (enteritis y colitis)



CODIGO:

BA – BJ – LC - 01

VERSIÓN:

01

PÁGINA:

7 - 20

2. CONTROL DE CALIDAD DE LA FASE PRE-ANALÍTICA Supervisar que la toma muestra se haya tomado de forma correcta, observando sus características macroscópicas de la muestra. Conocer el verdadero tiempo transcurrido después de la toma de muestra, según la supervisión en el laboratorio. Los frascos e hisopos rectales se le haya proporcionado al paciente, estén en condiciones estériles. Supervisar de qué manera estaba conservado la muestra, para su traslado al laboratorio de microbiología clínica. Comprobar la efectividad del medio Cary-Blair, utilizando cepas patrón ATCC de Salmonella y Shigella.


LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA CLINICA REGISTROS REGISTRO DE LA FASE PRE-ANALÍTICA DE COPROCULTIVO SISTEMA DE GESTON DE CALIDAD

CODIGO:

BA – BJ – LC - 01

VERSIÓN: PÁGINA:

01 8 - 20

3. REGISTRO DE LA FASE PRE-ANALÍTICA

CLAW LABORATORIO

REGISTRO N°

REGISTRO DE FASE PRE-ANALÍTICA

COP/PA-001

COPROCULTIVO Apellidos y nombre: ……………………………………………..………………………………………..…. Edad: ….……………. Cama: ……………………… H.Cl.: …………………… Servicio: …………..…………………………. Fecha: ……………… Procedencia: ……………………………………………… Ocupación: …………………………………... Sexo: ……………….

CARACTERÍSTICAS ANTES DE LA TOMA DE MUESTRA

RESPUESTA DEL PACIENTE

Datos clínicos del paciente: Síntomas, Tiempo de evolución. ¿Qué tipo de alimentos ha ingerido? ¿Tuvo contacto con animales? y cuáles son. ¿Cuándo se tomó la muestra: fecha y hora ¿Qué medio de conservación usó? ¿La muestra estaba en refrigeración? Antes de recoger la muestra ¿Evitó tomar medicamentos, cuáles fueron? ¿Evitó que las heces se contaminen con la orina? ¿Recogió las heces del sanitario o mezcló con papel higiénico? ¿Observó presencia de moco, sangre y pus en toma de muestra? ¿Observó que el recipiente se encontraba limpio y estéril con cierre hermético de boca ancha? Observaciones: _____________________________________________________________________ __________________________________________________________________________________ ……..………………………..

Bioanalista

………………………………….

Fecha:

/

/

Jefe



CODIGO:

BA – BJ – LC - 01

VERSIÓN:

01

PÁGINA:

9 - 20

5.1.2. FASE ANALÍTICO

1. COPROCULTIVO Objetivo Muestra

Materiales

Criterios

Protocolo

Identificar agentes infecciosos patógenos y oportunistas en estados agudos o crónicos del tracto intestinal. - Recolectar la muestra de heces, en frasco de boca ancha. - En ciertos casos la muestra se toma por hisopado rectal en medio Cary-Blair. - 01 Tubo con medio Cary-Blair - 5 mL de Solución Salina Fisiológica - 5 mL de Caldo Selenito o Tetrationato - 5 mL de Agua Peptonada Alcalina - 01 Placa con Agar MK (Mac Conkey) - 01 Placa con Agar XLD (Xilosa-Lisina-Desoxicolato) - 01 Placa con Agar SS (Salmonella-Shigella) - 01 Placa con Agar TCBS (Tiosulfato-Citrato-Sales Biliares) - 01 Placa con Agar Tripticasa Soya (TS) - Reactivo para las pruebas Bioquimicas (TSI, LIA, SIM, Urea, Citrato, etc) - Azul de metileno. Set de Gram - Placa con Agar Mueller Hinton - Discos de antibióticos - 01 Microscopio y 01 estufa - 01 Mechero de Bunsen, portaobjeto, cubreobjeto, otros. Antes de pasar a las placas con medios selectivo y diferenciales realizar: - Tinción Gram (Para observar bacterias) - Tinción de Azul de Metileno (Para observar levaduras). Después proseguir con el protocolo Sembrar con una pipeta de Pasteur aproximadamente 1ml de heces en Solución Salina Fisiológica, Caldo Selenito y o Caldo Tetrationato y en Agua Peptonada Alcalina. 1. Suspensión fecal con SSF (siembra directa a los medios) Tomar una asada y sembrar por agotamiento de superficie a los siguientes medios de cultivo selectivos y diferenciales: - Placa con Agar MK (Mac Conkey), incubar a 37°C por 24h en aerobiosis. - Placa con Agar XLD (Xilosa-Lisina-Desoxicolato) , incubar a 37°C por 24h en aerobiosis. - Placa con Agar CIN (Cefsulodin-Irgasan-Novoviocina), incubar a 25°C o temperatura ambiente por 48 Hrs. - Placa con Agar PM (Preston Modificado), incubar a 42°C por 48h en microaerofilia. 2. Caldo Selenito o Tetrationato Incubar 6-8 horas a 36°C y sembrar en placas con Agar Salmonella-Shigella, debe ser sembrada paralelamente por el método de estrías por agotamiento por 24 horas a 37° en aerobiosis. Agua Peptonada Alcalina Incubar 6-8 horas a 36°C y sembrar en placas con Agar Tiosulfato Citrato Sale Biliares, debe ser sembrada paralelamente por el método de estrías por agotamiento por 24 horas a 37° en aerobiosis. Después de la incubación de todas las placas, inocular por 18h por estrías al medio Agar Soya Tripticasa, para identificar con las



CODIGO:

BA – BJ – LC - 01

VERSIÓN:

01

PÁGINA:

10 - 20

pruebas bioquímicas, de la siguiente forma:

Identificación

Pruebas bioquímicas - Agar Mac Conkey (TSI, LI, SIM, MIO, Citrato, Urea, Fenilalanina, RM) - Agar XLD (TSI, LI, SIM, MIO, Citrato, Urea, Fenilalanina, RM) - Agar CIN (Manitol, Kligler, Oxidasa, SIM 36 y 22°C) - Agar PM (Oxidasa, Catalasa) - Agar Salmonella-Shigella (TSI, LI, SIM, Citrato, Urea) - TCBS (Kligler, LIA MIO, Fermen. inositol) Preparación del Agar Mueller Hinton - Inocular la superficie seca de la placa de Mueller Hinton, estriando con el hisopo en tres direcciones para asegurar una distribución uniforme del inóculo. Antes de colocar los discos dejar secar la placa a temperatura ambiente durante 3 a 5 minutos para que cualquier exceso de humedad superficial sea absorbido. - Colocar los discos individuales o multidiscos sobre la superficie del agar con la ayuda de una pinza estéril o la punta de una aguja presionando suavemente sobre cada disco para asegurar un contacto completo con la superficie del agar. - Incubar lar placas en posición invertida a 35°C dentro de los 15 minutos posteriores a la aplicación de los discos.

Antibiograma Nota: Distribuir los discos uniformemente, de modo que estén a una distancia

mínima de 25 mm uno del otro. No deben colocarse más de 12 discos en una placa de 150 mm, ni más de 6 en una placa de 100 mm de diámetro interno, para evitar la superposición de las zonas de inhibición. Un disco no debe ser removido una vez que tomó contacto con la superficie del agar debido a que algunos antibióticos se difunden rápidamente.

2. CONTROL DE CALIDAD DE LA FASE ANALÍTICO 2.1. CONTROL DE REACTIVOS: Medios de Cultivos Para conocer la efectividad de los medios selectivos y diferenciales, en caso que haya expirado o sufrido algún cambio por la temperatura o almacenamiento del reactivo, entonces es necesario enfrentar cepas patrón ATCC bien conocidas disponibles para el crecimiento positivo de los siguientes medios: Agar Mac Conkey, Agar XLD , Agar CIN, Agar PM, Agar SS , Agar TCBS y Agar Tripticasa Soya .


LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA CLINICA PROCEDIMIENTO

CODIGO:

BA – BJ – LC - 01

PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDARIZADOS DE VERSIÓN: 01 ANÁLISIS COPROLÓGICO SISTEMA DE GESTON DE CALIDAD PÁGINA: 11 - 20 Solución salina fisiológica Dependiendo del lugar de almacenamiento de la solución salina fisiológica (NaCl al 0.85%), sufren cambios estructurales en su composición química, teniendo un tiempo determina de uso. Para hacer el control respectivo de este reactivo no basta con fijarse la fecha de vencimiento, en qué condiciones se almacena dicho reactivo. Set de Gram Para poder conocer la efectividad de los colorantes, en caso que haya expirado o sufrido algún cambio molecular por la temperatura o almacenamiento, entonces es necesario tener a nuestra disposición dos cepas patrón ATCC bien definidas, que sean Gram positivos o Gram negativos respectivamente. Luego enfrentarlos con nuestros colorantes y después observar al microscopio. De esta manera conoceremos en realidad que tan confiables son nuestros colorantes Gram. 2.1. EQUIPOS: Microscopio compuesto binocular Para conocer el estado actual de nuestro microscopio, es muy importante verificar los lentes oculares (limpiarlo con paños especiales), regular la intensidad del foco, también la mesa de desplazamiento debe correr gradualmente a medida que se giran los tornillos de desplazamiento, el micrométrico y el macrométrico. Para tal efecto es importante tener a nuestra disposición lentes oculares y lentes objetivos de repuesto compatible a nuestro microscopio compuesto. De esta manera nos permita distinguir las diferencias que existen con los lentes anteriores.


LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA CLINICA REGISTROS

CODIGO:

BA – BJ – LC - 01

VERSIÓN: PÁGINA:

REGISTRO DE LA FASE ANALÍTICA DE COPROCULTIVO SISTEMA DE GESTON DE CALIDAD

01 12 - 20

4. REGISTRO DE LA FASE ANALÍTICA

CLAW LABORATORIO

REGISTRO N°

REGISTRO DE FASE ANALÍTICA

COP/AN-001

COPROCULTIVO - CANTIDAD DE UTILIZACIÓN DE INSUMOS (grs) POR MES Nombre del laboratorista: ……………………………………………………………………………………..………………………………………….…….………… Mes: …………………………….. Distrito: …………………………….. Provincia: ………..………………………. Dpto.: ……………………………………..

FECHA

Caldo Selenito

Agar MK

Agar XLD

Agar CIN

Agar PM

Agar TCBS

Agar TS

Agar MH

Agar SS

Gram

Disc. ATB

Azul de Metilo

FECHA

Agar TSI

Agar LIA

Agar SIM

Agar MIO

Agar Urea

Agar Indol

Agar Citrat.

Agar Kligler

Agar Rojo M

Agar Fenil.

Agar Manitol

Agar VP

Observaciones: ___________________________________________________________________ ……..………………………..

Laboratorista

………………………………….

Fecha:

/

/

Jefe



CODIGO:

BA – BJ – LC - 01

VERSIÓN:

01

PÁGINA:

13 - 20

5.1.3. FASE POST-ANALÍTICO

1. REPORTE DE LOS RESULTADOS

Examen Macroscópico Crecimiento en Placas

- Agar MK: Si el crecimiento de colonias es de color rosa, se trata de Escherichia coli ; Cuando el crecimiento de colonias es incoloras, inhibición (parcial de proliferación) se trata de Proteus mirabilis; si el crecimiento de las colonias son pequeñas, magenta es Enterococcus faecalis; si el crecimiento de colonias de color rosa a verde se trata de Pseudomonas aeruginosa; si el crecimiento de colonias de incoloras a color rosa trata de Shigella dysenteriae; si el crecimiento de colonias es pequeñas opacas, rosa se trata de Staphylococcus aureus. - Agar XLD Cuando el crecimiento de colonias es grandes, planos, de color amarillo, pueden haber algunas cepas inhibidas es Escherichia coli ; Si el crecimiento de las colonias son mucoides, amarillos son Enterobacter/Klebsiella; Si el crecimiento de colonias de color rojo a amarillo, la mayoría tienen centros de color negro se trata de Proteus; si el crecimiento es de color rojo a amarillo con centros de color negro se trata de Salmonella, positiva a H2S ; si el crecimiento es de color rojo de colonias se trata de Pseudomonas/Shigella. Crecimiento escaso o nulo son bacterias Gram positivas. - Agar CIN: Presencia de colonias típicas es Yersinia sp. Si da colonias no fermentadoras y mucosas se trata de Aeromonas sp. - Agar Preston Modificado: Las colonias de Campylobacter sp. son redondos irregular con bordes lisos. Ellos pueden tener colonias translúcidas, de color blanco a la difusión, el crecimiento plano, transparente. Algunas cepas parecen tan o ligeramente rosado. - Agar SS: Cuando el crecimiento de colonias es de color de rosa claro a incoloras se trata de Shigella sp. Mientras el crecimiento de colonias sea incoloro, generalmente con centro de color negro se trata de Salmonella sp. Pero sin inocular es de color rojo anaranjado, tono rosado. - Agar TCBS: Dan colonias de tamaño mediano, lisas, opacas, de color amarillo es el crecimiento de Vibrio sp. - Agar Tripticasa Soya: Dan crecimiento para organismo aerobios y anaerobios, Gram positivo y negativo, levaduras y hongos. Utilizados para diferenciar especies de Haemophylus.

TSI (AGAR TRIPLE AZÚCAR HIERRO) Reporte de resultados: 1. K/A (Fermentación sólo de glucosa) = Pico de flauta alcalina/profundidad ácida. 2. A/A (Fermentación de glucosa y lactosa) = Pico de flauta ácida/profundidad ácida. 3. K/K (No fermentación de glucosa y lactosa) = Pico de flauta alcalina/profundidad alcalina. 4. K/A/H2S (Fermentación de glucosa solamente producción de H 2S) = Pico de flauta alcalina/profundidad ácida (negra).



Especie bacteriana Enterobacter sp. Hafnia sp. Klebsiella Escherichia coli Shigella sp. Salmonella typhi Citrobacter sp. Edwarsiella Serratia sp. Proteus vulgaris Providencia sp.

Superficie inclinada A K A A K K K K K K K

CODIGO:

BA – BJ – LC - 01

VERSIÓN:

01

PÁGINA:

14 - 20

Fondo

Gas

H2S

K A A A A A A A A A A

++ + ++ + + + + + +o-

+++ +++ +++ -

RESULTADOS DEL MEDIO TSI

LIA (AGAR LISINA HIERRO) Interpretación: A = Ácido K = Alcalino N = Neutra R = Rojo (desaminación oxidativa) Reporte de resultados: 1. 2. 3. 4.

K/K = Azul de Prusia / azul de Prusia (Desaminación oxidativa/descarboxilación) K/A = Azul de Prusia / lila ( No desaminación) Producción de H2S = Ennegrecimiento del medio Producción de gas = Burbujas o levantamiento del medio de cultivo de las paredes del tubo.



Especie bacteriana

Superficie inclinada K K K K K K K K K R R

E. coli Shigella Salmonella typhi Salmonella paratyphi Arizona sp. Citrobacter sp. Edwarsiella sp. Klebsiella sp. Enterobacter cloacae Proteus vulgaris Proteus mirabilis

CODIGO:

BA – BJ – LC - 01

VERSIÓN:

01

PÁGINA:

15 - 20

Fondo

Gas

H2S

KoN A K A KoN A K KoN A A A

-o+ +o-o+ -o+ +o+o-

+o+o+ -o+ -

RESULTADOS DEL MEDIO LIA

MIO (Movilidad, Indol y Ornitina) Fundamento: 1 = Descarboxilación de ornitina 2 = Producción de indol 3 = Movilidad Reporte de resultados Prueba Positivo Negativo

Movilidad + -

Indol + -

Ornitina + -



CODIGO:

BA – BJ – LC - 01

VERSIÓN:

01

PÁGINA:

16 - 20

APLICACIÓN Especies Bacterianas Enterobacter Proteus mirabilis Proteus morganii Yersinia enterocolitica

Microorganismos Ornitina Positivo + + + +

Especies Bacterianas Klebsiella Enterobacter aglomerans Proteus vulgaris Yersinia pestis Yersinia pseudotuberculosis

Microorganismos Ornitina negativo -

RESULTADOS DEL MEDIO MIO

2. CONTROL DE LA FASE POST-ANALÍTICA Los resultados obtenidos después de procesar la muestra, pasa por un control de calidad interno, que consiste en relacionar los valores obtenidos con los valores establecidos permisibles, implantada por el gobierno MINSA. Si el resultado no coincide con valores establecidos y la evidencia del paciente es sintomática, se deben realizar una nueva prueba, para el descarte de un falso negativo.


LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA CLINICA REGISTROS

CODIGO:

BA – BJ – LC - 01

REGISTRO DE LA FASE POST -ANALÍTICA DE COPROCULTIVO

VERSIÓN:

01

SISTEMA DE GESTON DE CALIDAD

PÁGINA:

17 - 20

3. REGISTRO DE LA FASE POST-ANALÍTICA

CLAW LABORATORIO

REGISTRO N°

REGISTRO DE FASE POST-ANALÍTICA

COP/PA-001

RESULTADO DEL COPROCULTIVO Apellidos y nombre: ……………………………………………..……………………………………………………..…. Edad: ….……………. Cama N°: ……………………… H.Cl.: …………………… Servicio: …………..…………………….……………. Fecha: ……………… Procedencia: ……………………………………………… Ocupación: ………………………………………………... Sexo: ………………. Tipo de muestra:

(

) Heces sólida

( ) Heces líquida

Toma de muestra: ancha

(

) Hisopo rectal

( ) Frasco de boca

EXAMEN FÍSICO Color: Aspecto: Mucosidad: Sangre:

( ) Heces disentérica

RESULTADO COPROCULTIVO __________________________________

Leuc. Polimorfonucleares:……………………..

__________________________________

Bacilos Gram negativos………………………….

__________________________________

Bacilos cortos Gram negativos:………………

__________________________________

Diplococos Gram Negativos:…………………..

__________________________________ __________________________________ __________________________________ __________________________________

TINCIÓN GRAM

TINCIÓN AZUL DE METILENO Epitelio por Campo:………………………………. Levaduras:…………………………………………….. Piocitos:…………………………………………………

Observaciones: ____________________________________________________________________ __________________________________________________________________________________ ……..………………………..

Laboratorista

………………………………….

Fecha:

/

/

Jefe


LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA CLINICA PROCEDIMIENTO PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDARIZADOS DE ANÁLISIS COPROLÓGICO SISTEMA DE GESTON DE CALIDAD VI. ANEXOS

CODIGO:

BA – BJ – LC - 01

VERSIÓN:

01

PÁGINA:

18 - 20

FLUJOGRAMA N° 01: PROCEDIMIENTO COPROLÓGICO EN BACTERIOLOGÍA


LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA CLINICA PROCEDIMIENTO

CODIGO:

PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDARIZADOS DE ANÁLISIS COPROLÓGICO SISTEMA DE GESTON DE CALIDAD

BA – BJ – LC - 01

VERSIÓN:

01

PÁGINA:

19 - 20

COPROCULTIVO Hisopado rectal (3cm ampolla rectal)

Transporte

Medio Cary Blair

Aislamiento Secundario

Primario

Siembra en caldo selenito 37° C / 24 hrs

Se realiza la siembra en agar Mac conkey o XLD

37°C / 24 hrs

Crecimiento de colonias de shigella- transparente E. coli - amarillo

Siembra en medio SS selenito 37° C / 24 hrs

MEDIOS DIFERENCIALES

TSI

LIA Colonias de salmonella transparente + puntos negros (H2S)

TSI Repicar las colonias características

LIA

K = Alcalino (rojo)

K= alcalino (lila)

A= Acido (amarillo) A= Acido (amarillo)


PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDARIZADOS DE ANÁLISIS COPROLÓGICO SISTEMA DE GESTON DE CALIDAD VII.

VERSIÓN:

01

PÁGINA:

20 - 20

BIBLIOGRAFIA.   

http://www.google.com.pe/search?q=coprocultivo+pdf&bav=on. http://procedimientosmicrobiologicos.wikispaces.com/COPROCULTIVO http://www.ins.gob.pe/insvirtual/images/otrpubs/pdf/Manual%20Hongos .pdf




UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN CRISTOBAL DE HUAMANGA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS

CODIGO:

BA – BJ – LC - 01

ESCUELA DE FORMACION PROFESIONAL DE BIOLOGIA

PRACTICA N°4 MICROBIOLOGIA CLININCA BM 544

VERSIÓN: PÁGINA:

01 1-1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS DE COPROCULTIVO

Elaborado por:

Revisado por:

Aprobado por:

Baneza Katy Janampa Coras

Nilda Aurea Apayco Espinoza

Homero Ango Aguilar



Bioanalitic Poe. de Copro

Recommend Documents