MANUAL DE LABORATORIO DE FARMACOLOGÍA
VALORACIÓN DE LA ACTIVIDAD ANALGÉSICA PRÁCTICA No 1 INTRODUCCION: El síntoma que con mayor frecuencia frecuencia enfrenta enfrenta el médico durante su ejercicio profesional es probablemente, el dolor, síndrome de sensaciones desagradables que experimentan inevitablemente casi todos los seres humanos y la principal razón de que se consuman medicamentos. Afortunadamente, Afortunadamente, en el mayor porcentaje de los casos casos se le puede controlar controlar con fármacos fármacos capaces de inducir un estado de analgesia, analgesia, es decir, insensibilidad o disminución de la sensación de dolor. A los fármacos capaces de aliviar el dolor, sin alterar significativamente significativamente el estado de conciencia, se les denominan analgésicos. De hecho existe un gran número de fármacos fármacos que, a través de mecanismos mecanismos diversos, disminuyen disminuyen el dolor; sin embargo tradicionalmente solo se consideran como tales a los medicamentos que pertenecen a alguno de los siguientes grupos: 1.- Analgésicos-Antinflamatorios-Antipiréticos Analgésicos-Antinflamatorios-Antipiréticos (Ácido acetil salicílico). 2.-Opiáceos: 2a) Agonistas (morfina) 2b) Agonistas-Antagonistas Agonistas-Antagonistas (Pentazocina). 2c) Antagonista (Naloxone). El empleo de animales de laboratorio para la valoración de analgésicos se inicia en 1929 con el fin de resolver el problema que representaba la disponibilidad de una larga serie de sustancias químicas y mezclas de productos que se pretendía pretendía ensayar en en el hombre. Haffner Haffner propuso el empleo de un método sencillo y reproducible en el que el estímulo nociceptivo se generaba generaba por la aplicación de una pinza arterial en la base base de la cola del ratón y en el que se consideraba a la vocalización y al mordisqueo de la pinza como manifestaciones de una “experiencia dolorosa”.
OBJETIVOS: 1.- Identificar Identificar y describir describir las alteraciones alteraciones conductuales conductuales inducidas por la aplicación de un estímulo nociceptivo en en el ratón. ENERO - JUNIO 2013
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2.- Determinar si el tramadol, es capaz de disminuir o eliminar la respuesta conductual al estímulo nociceptivo. 3.- Si lo anterior ocurre, determinar el tiempo de efecto máximo. 4.- Para el tiempo de efecto máximo del tramadol, determinar la DE 50 analgésica. 5.- Determine si las sustancias problema tiene o no propiedades analgésicas y de ser así describa el patrón analgésico. PROCEDIMIENTO: 1.- Cada dos equipos deberán tener ocho ratones positivos al estímulo nociceptivo. 2.- Aplique la pinza a 1cm de la base de la cola del ratón, procurando que la cola quede en la parte media de la zona de presión de la pinza. El ratoncito puede: Vocalizar. Movimientos encaminados a encontrar la pinza. Morder la pinza. 3.- De los anteriores tomaremos como positivo el b y c, pero deberá ocurrir en un lapso de 10 segundos después de la aplicación del estímulo. 4.- Se deberán desechar los ratones que no respondan al estímulo. 5.- Pesar, numerar y designar una dosis, a cada ratón, al azar. 6.- Dosis: 20, 39, 52, 68 y 90 mg/Kg de Tramadol. Solución salina y soluciones problemas (x ,y). Todas a razón de 0.1ml/10 grs. de peso. 7.- Al administrar estas soluciones por vía IP se toma el tiempo, se observa la conducta y se hacen las anotaciones pertinentes. (Identificar efectos). 8.- Aplicar de nuevo el estímulo nociceptivo a los: 10, 20, 40 y 80 minutos. Si tiende a morder la pinza en cada valoración será positivo al estímulo nociceptivo (+) y si no es así es negativo al estímulo nociceptivo (-). Si el fármaco de prueba tiene efecto analgésico las respuestas deberán ser negativas . RESULTADOS: 1. Grafique porcentaje de respuesta contra tiempo, para cada dosis, y de aquí obtenga el tiempo en el que hubo mayor porcentaje de respuesta, (tiempo de efecto máximo). ENERO - JUNIO 2013
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2. Haga una curva dosis respuesta cuantal para obtener la DE 50 del tiempo de efecto máximo (% de respuesta acumulativa contra logaritmo de la dosis). 3. Llenar el siguiente cuadro con los resultados. Dosis mg/Kg Salina 20 39 52 68 90 Soln. X Soln. Y
Log10 1.3010 1.5910 1.7160 1.8325 1.9542 -
# animales con analgesia # animales por dosis
% de ratones con el efecto
10’
20’
40’
80’
10’
4/22 15/30 17/30 21/30 25/30 26/30 14/30 13/29
4/22 12/30 16/30 27/30 23/30 26/30 17/30 13/29
2/22 9/30 14/30 27/30 21/30 25/30 18/30 15/29
1/22 6/30 9/30 20/30 18/30 22/30 19/30 15/29
18.18 50 56.66 70 83.33 86.66 46.66 44.82
20’
40’
80’
18.18 9.09 4.54 40 30 20 53.33 46.66 30 90 90 66.66 76.66 70 60 86.66 83.33 73.33 56.66 60 63.33 44.82 51.72 51.72
BIBLIOGRAFÍA: 1. Manual Departamental de Farmacología. Facultad de Medicina. Universidad Nacional Autónoma de México, 1994-1995. 2. Katzung Bertram. Farmacología Básica y Clínica Cap. 31. 7ª Edición. Editorial El Manual Moderno. México, 1999. 3. Gerber W.D. , Nappi G. Update Non-Narcotic Analgesic Research. Birkhauser. Germany, 1993.
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