Tugas Individu
VAKSIN HEPATITIS B
OLEH HERIANSYAH P1506209007
PROGRAM STUDI BIOMEDIK KONSENTRASI MIKROBIOLOGI UNIVERSITAS HASANUDDIN
MAKASSAR 2010 ABSTRAK
T Tuj ujua uan n penu penuli lisa san n maka makala lah h ini ini adal adalah ah untu untuk k meng menget etah ahui ui peranan peranan rekayasa rekayasa genetika genetika dalam dalam bidang bidang kesehata kesehatan n khusus khususnya nya dalam menangani menangani penyakit penyakit Hepatitis Hepatitis B. Salah satu produk rekayasa genet genetika ika adala adalah h Vaksin Vaksin Hepati Hepatitis tis B yang yang diha dihasil silkan kan oleh oleh yeast yeast Saccharomyces ces (Saccharomy
cerevice cereviceae ae)
mela melalu luii
tehn tehnik ik
reko rekomb mbin inan an
DNA
menggun menggunakan akan hepatit hepatitis is B surface surface antigen antigen (HBsAg). (HBsAg). Penggun Penggunaan aan vaksin ini telah meluas di seluruh dunia dan terbukti efektif dalam mene meneka kan n juml jumlah ah infe infeks ksii viru virus s Hepa Hepati titi tis s B (HVB (HVB). ). Jeni Jenis s vaks vaksin in rekombinan yang paling umum digunakan adalah Recombivax HB dan Energix-B, diberikan secara intramuscular pada bayi yang baru lahir, anak-anak, dan dewasa. Dosis pemberian vaksin sebanyak 3 kali.
Pemberian
vaksin
telah
dikembangkan
menyisipkannya ke dalam tanaman, misalnya pada pisang.
dengan
MAKASSAR 2010 ABSTRAK
T Tuj ujua uan n penu penuli lisa san n maka makala lah h ini ini adal adalah ah untu untuk k meng menget etah ahui ui peranan peranan rekayasa rekayasa genetika genetika dalam dalam bidang bidang kesehata kesehatan n khusus khususnya nya dalam menangani menangani penyakit penyakit Hepatitis Hepatitis B. Salah satu produk rekayasa genet genetika ika adala adalah h Vaksin Vaksin Hepati Hepatitis tis B yang yang diha dihasil silkan kan oleh oleh yeast yeast Saccharomyces ces (Saccharomy
cerevice cereviceae ae)
mela melalu luii
tehn tehnik ik
reko rekomb mbin inan an
DNA
menggun menggunakan akan hepatit hepatitis is B surface surface antigen antigen (HBsAg). (HBsAg). Penggun Penggunaan aan vaksin ini telah meluas di seluruh dunia dan terbukti efektif dalam mene meneka kan n juml jumlah ah infe infeks ksii viru virus s Hepa Hepati titi tis s B (HVB (HVB). ). Jeni Jenis s vaks vaksin in rekombinan yang paling umum digunakan adalah Recombivax HB dan Energix-B, diberikan secara intramuscular pada bayi yang baru lahir, anak-anak, dan dewasa. Dosis pemberian vaksin sebanyak 3 kali.
Pemberian
vaksin
telah
dikembangkan
menyisipkannya ke dalam tanaman, misalnya pada pisang.
dengan
BAB I PENDAHULUAN
Teknologi DNA rekombinan atau sering juga disebut rekayasa gene geneti tika ka
meru merupa pak kan
tekn tekno ologi logi
yang yang
mem memanfa anfaat atka kan n
pros proses es
replikasi, replikasi, transkripsi transkripsi dan translasi translasi untuk memanipulasi, memanipulasi, mengisolasi mengisolasi dan mengekspresikan suatu gen dalam organisme yang berbeda. Biasanya gen dari organisme yang lebih tinggi diekspresikan pada orga organis nisme me yang yang lebih lebih renda rendah. h. Te Tekno knolog logii ini ini juga juga member memberik ikan an kesempatan yang tidak terbatas untuk menciptakan kombinasi baru dari dari gen yang yang tidak tidak ada ada pada pada ko kond ndis isii norm normal. al. Melalu Melaluii rekay rekayas asa a genet genetika ika,, akan akan diha dihasil silkan kan kombi kombinas nasii baru baru dari dari mater materii geneti genetik k melalui melalui penyisi penyisipan pan molekul molekul asam asam nukleat nukleat kedalam kedalam suatu suatu sistem sistem DNA DNA vekto vektorr (plas (plasmid mid bakter bakteri, i, virus virus dan dan lain-l lain-lain ain)) dan dan ke kemu mudia dian n mema memasu sukk kkan an vekt vektor or ini ini ke keda dala lam m suat suatu u inan inang g sehi sehing ngga ga ak akan an dihasilkan suatu produk gen dalam jumlah banyak
Protein rekombinan merupakan protein yang diproduksi oleh sel yang DNA-nya telah dimodifikasi dengan rekombinasi genetik. Secara umum sistem produksi yang diadaptasi untuk pembuatan protein rekombinan adalah suatu proses yang berdasarkan pada: 1.
penggunaan vektor ekspresi (yang berfungsi sebagai pembawa gen pengkode protein yang diinginkan dan bertanggung jawab untuk replikasi, transkripsi dan translasinya.
2. penggunaan sel inang yang melaksanakan instruksi yang disediakan oleh gen tersebut untuk mensintesis gen yang diinginkan 3.
produksi massa protein yang diinginkan dengan menggunakan suatu inducer yang berfungsi untuk menginduksi produksi protein tersebut.
4.
pemisahan dan ekstraksi protein dari kulturnya dilanjutkan dengan purifikasinya. Rekayasa genetika telah banyak digunakan dalam berbagai
bidang diantaranya dalam bidang pertanian (tanaman transgenik), pangan,
pembuatan
antibiotic,
peternakan
(kloning
hewan),
pengolahan limbah, pembuatan protein rekombinan, pembuatan enzim
(streptokinase,tre
rekombinase),
pembuatan
hormone
(growth hormone) serta pembuatan vaksin (polio, hepatitis B, cacar). Infeksi virus hepatitis B dapat menyebabkan penyakit hati menahun, sirosis dan karsinoma hepatoselular. Di seluruh dunia diperkirakan ada lebih 200 juta orang sebagai carrier virus hepatitis B. Oleh karena itu, imunisasi diperlukan terutama bagi yang mempunyai resiko infeksi tinggi, antara lain berdasarkan pola epidemiologi,faktor sisio ekonomi, budaya dan lingkungan. Selain itu adanya transmisi perinatal virus hepatitis B di beberapa tempat menunjukan pentingnya imunisasi bayi, terutama yang lahir dari ibu karier. Tujuan vaksinasi hepatitis B antara lain untuk mencegah penyakit klinis dan transmisi virus hepatitis B ke individu lain. Faktor yang mempengaruhi imunogenisitas pada waktu imunisasi antara lain faktor host dan faktor imunisasi. Faktor host meliputi umur, lingkungan dan genetik, sedang faktor imunisasi meliputi tempat inokulasi, dosis, vaksin dan program imunisasi. Virus hepatitis B hanya hidup di dalam sel dan plasma manusia (dan simpanse). Virus ini tidak dapat berkembang biak pada media biakan standar yang biasa digunakan membiakkan
virus untuk pembuatan vaksin konvensional. Kesulitan ini sedikit menghambat perkembangan pembuatan vaksin hepatitis B.
BAB II ISI
A. Penyakit Hepatitis
Penyakit Hepatitis B banyak ditemukan diseluruh dunia, terutama di daerah Selatan, Timur Tengah.
Asia, Afrika, Pasifik Selatan, Amerika
Diketahui bahwa penyakit ini disebabkan oleh virus Hepatitis setelah ditemukan pada
liver mumi
anak kecil 500 tahun
yang lalu di Korea. Penyakit
hepatitis
merupakan
penyakit
infeksi
yang
menyerang hati dan disebabkan oleh virus hepatitis B (HVB). Virus ini berasal dari genus Orthohepadnavirus, dan familinya adalah Hepadnaviridae. Mula-mula, virus ini dikenal sebagai serum hepatitis. Bila dibandingkan dengan virus AIDS (HIV),
HBV seratus kali lebih ganas dan sepuluh kali lebih banyak menularkan. Di bawah mikroskop elektron, HBV tampak sebagai partikel dua lapis berukuran 42 nm yang disebut partikel Dane.
Lapisan luarnya terdiri atas antigen, yang disingkat HBsAg. Antigen ini membungkus bagian dalam virus yang disebut partikel inti atau core yang berukuran 27 nm. Masa inkubasi HBV kira-kira selama 6 sampai 25 minggu. Virus ini juga tidak dapat tumbuh dalam kultur jaringan, dan memiliki 7 genotip (A – G), serta 9 serotype ( ayw1, ayw2, ayw3, ayw4, ayr, adw2, adw4, adrq+, adrq-)
Gambar 1 : virus Hepatitis B (www.hon.ch/Library/Theme/HepB/virology.html ) HBV
terdapat
dalam
semua
cairan
tubuh
dari
penderitanya, baik dalam darah, sperma, cairan vagina dan air ludah. Virus ini mudah menular pada orang-orang yang
hidup bersama dengan orang yang terinfeksi melalui cairan tubuh tadi. Secara umum, seseorang dapat tertular HBV melalui: – Hubungan seksual – Penggunaan jarum suntik –
Penggunaan
alat
yang
terkontaminasi
darah
dari
penderita (pisau cukur, tato, tindik, dsb). – 90% berasal dari ibu yang terinfeksi HBV. – Transfusi darah yang terinfeksi HBV. –
Lewat peralatan dokter gigi dan peralatan dokter bedah, jika sterilisasi peralatannya kurang sempurna.
A. Vaksin Hepatitis 1. Sejarah pembuatan vaksin Hepatitis
Pada tahun 1965, Blumberg dan kawan- kawan di Philadelphia menemukan suatu antibodi pada pasien yang ditransfusi yang berasal dari suku Aborigin Australia, sehingga antigen tersebut dikenal dengan nama Antigen Australia. Pada tahun 1977, Blumberg mendapat hadiah nobel untuk penemuannya itu. Sekarang antigen tersebut
dikenal dengan nama hepatitis B surface antigen (HBsAg) (Zain, 2006). Vaksin hepatitis B pertama kali diperkenalkan oleh Krugman
dan
koleganya
pada
tahun
1971.
Mereka
menggunakan serum yang mengandung virus Hepatitis B. Serum diencerkan dan diinaktivasi panas 90 oC selama 1 menit. Vaksinasi dilakukan pada 29 orang anak, hasilnya separuh dari anak terlindung dari infeksi Hepatitis B. Pengembangan
vaksin
ini
selanjutnya
menggunakan
antigen lain untuk imunisasi aktif yaitu “Hepatitis B surface antigen (HBsAg)” . Vaksin HBsAg ini merupakan partikel yang berukuran 22 nm, diinaktivasi panas, diadsobsi alum dan bebas dari asam nukleat. Dimurnikan melalui tahap presipitasi,
ultrasentrifusasi,
gel
filtrasi
dan
afinitas
kromatografi. Tahun 1973 diketahui bahwa HBV dapat menginfeksi
simpanse,
tahun
1981
dibuatlah
vaksin
hepatitis B yang berasal dari plasma darah penderita, seiring dengan perkembangan teknologi maka pada tahun 1986 dibuatlah vaksin rekombinan dengan menggunakan yeast Saccharomyces cereviceae. Penggunaan vaksin ini secara besar-besaran pada tahun 1991 dan dianjurkan
pada bayi yang baru lahir dan tahun 1996 penggunaan vaksin secara umum untuk dewasa.
2. Vaksinasi terhadap Hepatitis B
Vaksin hepatitis B dapat mencegah penyebaran HBV termasuk kanker hati dan sirosis. Vaksin hepatitis B mulai dikomersialkan di Amerika Serikat
pada tahun 1982,
diproduksi dengan tehnik DNA rekombinan pada tahun 1986, dan produksi second recombinant-type hepatitis B vaccine pada tahun 1989 (Immunization Action Coalition, 2008).
Vaksinasi Hepatitis B rutin dilakukan di Amerika
sejak tahun 1991 dan dilaporkan terjadi penurunan tingkat infeksi HBV sebanyak 75% pada semua kelompok umur (anonym, 2007; O’shea, 2009) Pelaksanaan imunisasi aktif terhadap virus hepatitis B pada manusia, pertama kali dilakukan oleh Krugman dan koleganya tahun 1971 yaitu menggunakan sediaan serum yang diperoleh dari karier virus hepatitis B dan diinaktifasi menggunakan panas. Hasilnya 20 dari 29 anak terlindung dari infeksi virus hepatitis B. Imunitas dijumpai pada anak-anak yang mempunyai antibodi terhadap Hepatitis B Surface Antigen (HBsAg).
Hasil ini memacu perkembangan pembuatan vaksin hepatitis B lebih maju, terutama untuk produksi skala besar da ri plasma karier.
3. Pembuatan vaksin Hepatitis B Vaksin
HBsAg
yang
dimumikan
dari
plasma
karier
dan
inaktifasiformalin/panas telah diproduksi di beberapa laboratorium. Namun dengan terbatasnya persediaan plasma, perlunya seleksi dan kontrol yang ketat untuk mendapatkan vaksin murni dan bebas sumber infeksi lain, maka pendekatan lain terus dicari. Problem ini akhirnya dapat teratasi dengan pendekatan rekombinan DNA. Salah satu sintesis HBsAg yang telah berhasil dari sel ragi ( yeast ) rekombinan. Partikel ini memperlihatkan sifat imunogenik pada binatang percobaan; pengujian pada manusia telah berhasil menginduksi anti HBs dan melindungi dari infeksi virus hepatitis B Saat ini setidaknya ada 3 sumber partikel HBsAg yang digunakan untuk vaksinasi hepatitis B. Terutama HBsAgdimumikan dari plasma karier. Metode ini telah berhasil dan efikasinya tidak disangsikan. Dua sumber lain yaitu melalui pendekatan teknologi rekombinan DNA, dengan memasukan gen virus hepatitis B pengkode HBsAg ke dalam sel ragi dan
sel mamalia. Selain itu, HBsAg juga dapat disekresi oleh E coli, namun jumlahnya relatif kecil, demikian juga sifat antigeniknya
.
a. Virus yang dilemahkan (imunisasi)
Untuk menghasilkan vaksin dibutuhkan HBsAg yang berasal dari virus Hepatitis B,
virus diperbanyak dalam
medium tertentu sehingga nantinya dihasilkan virus yang tidak menyebabkan penyakit namun mampu merangsang system imun. Strain ini selanjutnya dikultur pada kondisi yang sesuai dan virusnya diinaktifkan melalui pemanasan dan proses kimia. Tahapan berikutnya virus yang telah dilemahkan ini diinjeksikan ke dalam tubuh .
b. Vaksin DNA rekombinan
Vaksin hepatitis B yang diproduksi sel ragi rekombinan telah menjalani pengujian keamanan, imunogenisitas dan evaluasi klinis. Hasil menunjukkan bahwa vaksin ini aman, antigenik dan relatif bebas efek samping yang merugikan, bahkan vaksin ini telah dilisensikan dan diproduksi di berbagai negara. Salah satu keuntungan vaksin dari sel ragi dibanding dari plasma yaitu siklus produksinya dapat dikurangi, dan konsistensi dari batch ke batch lebih mudah diperoleh.
HBs Ag dilepaskan dari sel dengan homogeniser atau disruption menggunakan glass bead. Pemurnian melalui
tahap
klarifikasi,
ultrafiltrasi,
kromatografi
dan
ultrasentrifugasi serta diabsorbsi dengan alum hidroksida; sebagai
pengawet
ditambahkan
thiomerosal.
Karakterisisasi partikel dilakukan dengan membandingkan HBs Ag dari plasma antara lain meliputi berat molekul, komposisi
asam
amino,
densitas
dalam
CsC12
dan
sebagainya. Analisis imunologis menggunakan antibodi monoklonal memperlihatkan vaksin dari plasma dan ragi mengandung epitop yang berperan menginduksi antibodi setelah vaksinasi.
Vaksin
HBs
menggunakan
Ag
rekombinan
juga
diproduksi
sel mamalia yaitu sel Chinese Hamster
Ovary (CHO). Gen HBsAg dimasukkan ke dalam sel CHO
dan sel ini dapat mensintesis dan mensekresikan partikel HBs Ag 22 nm. Cell line CHO'dapat mensintesis HBs Ag 15 mcg/106 sel/hari. Bahkan bila cell line ditumbuhkan pada fase stasioner, mereka
dapat mensintesis secara terus
menerus dan isolasi HB Ag
dapat dilakukan berulang-
ulang dari supemat biakan sel selama 2 3 minggu. HBs Ag yang dimumikan dari supernatan biakan sel CHO terdiri dari patikel 22 nm yang sangat homogen dan
identik
dengan HBs Ag dari serum manusia. Pada percobaan
imunogenisitas
pada
guinea
pig,
temyata 50% binatang mempunyai antibodi HBs sesudah imunisasi HBs Ag 1,5 ug dari sel CHO dan 2 ug HBs Ag dari serum
manusia.
rekombinan dari sel
Pada
simpanse,
vaksin
HBs
Ag
CHO terlihat lebih imunogenik
daripada vaksin yang diperoleh
dari ragi. Selain itu
simpanse yang divaksinasi dengan vaksin
dari sel CHO
mempunyai respon imun seluler dan binatang
yang
divaksinasi dengan HBs Ag rekombinan (subtipe ad) terlindung dari infeksi virus HB subtipe ad dan ay
Pembuatan vaksin Hepatitis B dengan berbagai sumber yaitu: a. VAKSIN DARI PLASMA KARIER
Penggunaan vaksin hepatitis B yang diekstraksi dari
plasma
manusia
dimulai
sejak
keberhasilan
penelitian Krugman dan koleganya tahun 1971. Mereka menggunakan serum yang mengandung virus hepatitis B. Serum ini mereka encerkan 1:10 dan diinaktivasi panas 90o C selama 1 menit. Vaksinasi dilakukan pada 29 anak, hasilnya lebih dari separuh terlindung dari infeksi
hepatitis
B.
Pengembangan
vaksin
ini
selanjutnya menggunakan antigen lain untuk imunisasi aktif yaitu "Hepatitis B Surface Antigen" (HBsAg). Antigen ini merupakan permukaan virus yang diambil dan dimumikan dari plasma manusia karier. Vaksin HBsAg ini merupakan partikel 22 nm mumi, diinaktifasi panas, diadsorbsi alum dan bebas dari asam nukleat; dimumikan melalui tahap presipitasi, ultrasentrifugasi, gelfiltrasi dan afinitas kromatografi Vaksin imunogenisitas
HBsAg baik.
mempunyai Setelah
keamanan
mengalami
dan
berbagai
perbaikan, lebih dari 30 juta dosis telah tersebar di dunia
dan
memperlihatkan
keamanan
yang
menggembirakan. Hal ini dicapai karena ketatnya inaktifasi dan purifikasi untuk memusnahkan sumber infeksi serta pengujian kontrol kualitas untuk menjamin kemurnian produk. b. VAKSIN DARI SEL YEAST DAN SEL MAMALIA
Kemajuan di bidang genetika molekuler dan kimia asam nukleat, telāhh memungkinkan identifikasi dan analisis gen pengkode substansi aktif, transfer di antara organisme dan memproduksinya di bawah kondisi terkontrol. Gen pengkode produk tertentu dapat diisolasi dan dibiakkan untuk memproduksi zat tersebut, dengan cara memasukkan molekul DNA (alami atau sintetik) ke dalam vektor yang sesuai, kemudian dimasukkan ke dalam host. Teknik rekombinan ini telah membuka jalan untuk mengembangkan produksi vaksin, terutama sumber infeksi yang belum tersedia vaksinnya dan untuk meningkatkan vaksin yang ada. Pendekatan baru terhadap perkembangan vaksin ini sangat berharga
terutama untuk mikroorganisme/virus yang tidak dapat dibialdcan dengan metoda yang ada, seperti virus hepatitis B. Teknologi rekombinan DNA ini telah berhasil digunakan untuk memproduksi HBs Ag dengan berbagai sel antara lain sel prokariot seperti E. coli dan B. subtilis, sel eukariot seperti sel S. cerevisiae, sel
CHO dan sebagainya Vaksin hepatitis
B yang diproduksi
sel ragi
rekombinan telah menjalani pengujian keamanan, imunogenisitas
dan
evaluasi
klinis.
Hasilnya
menunjukkan bahwa vaksin ini aman, antigenik dan relatif bebas efek samping yang merugikan, bahkan vaksin ini telah dilisensikan dan diproduksi di berbagai negara. Salah satu keuntungan vaksin dari sel ragi dibanding dari plasma yaitu siklus produksinya dapat dikurangi, dan konsistensi dari batch ke batch lebih mudah diperoleh. Bahkan antigen yang berasal dari sel ragi
juga
micellar.
telah
dicoba
disiapkan
dalam
bentuk
Vaksin polipeptida micelle ini di dalam
laboratorium dilaporkan lebih antigenik.
HBsAg dilepaskan dari sel dengan homogeniser atau disruption menggunakan glass bead. Pemurnian melalui tahap clarification, ultrafiltrasi, kromatografi dan ultrasentrifugasi serta diabsorbsi dengan alum hidroksida;
sebagai
pengawet
ditambahkan
thiomerosal. Karakterisisasi partikel dilakukan dengan membandingkan
HBsAg
dari
plasma
antara
lain
meliputi berat molekul, kompisiii asam amino, densitas dalam CsC12 dan sebagainya. Analisis imunologis menggunakan
antibodi monokional memperlihatkan
vaksin dari plasma dan ragi mengandung epitope yang berperan menginduksi antibodi setelah vaksinasi. Vaksin
HBsAg
rekombinan
juga
diproduksi
menggunakan sel mamalia yaitu sel Chinese Hamster Ovary (CHO). Gen HBsAg dimasukkan ke dalam sel
CHO dan sel ini dapat mensintesis dan mensekresikan partikel HBsAg 22 nm. Cell line CHO'dapat mensintesis HBsAg 15 mcg/106 sel/hari. Bahkan bila cell line Imunisasi dengan satu kali inokulasi merupakan salah satu cara vaksinasi yang sangat didambakan terutama untuk vaksinasi masal dengan populasi cukup besar.
Saat ini para peneliti telah berusaha mendapatkan vaksin hidup terhadap hepatitis B menggunakan virus vaccinia. Vaksin hidup ini sangat potensial dan telah
digunakan untuk memproduksi vaksin hepatitis B, herpes
simpleks,
rabies
dan
lain-lain
di
dalam
laboratorium. Percobaan menyimpulkan rekombinan
pendahuluan bahwa
untuk
pada
penggunaan vaksinasi
kelinci virus
sangat
telah
vaccinia
mungkin.
Karakteristik biofisik dan biokimia partikel antigenik yang disekresikan oleh virus ini identik dengan HBsAg asli. Kelinci dan binatang laboratorium lain yang diinokulasi
dengan
virus
hibrida
ini
mampu
memproduksi anti-HBs. Simpanse yang divaksinasi dengan virus vaccinia rekombinan terlindung dari infeksi virus hepatitis B. Beberapa keuntungan virus vaccinia rekombinan untuk
memproduksi
vaksin
antara
lain
biaya
produksinya relatif lebih rendah, cara vaksinasi relatif lebih mudah, stabilitas baik, mempunyai shelf life panjang, tidak onkogenik dan tidak bersifat laten.
c. VAKSIN POLIPEPTIDA DAN PEPTIDA SINTETIK
Partikel HBs Ag 22 nm telah terbukti merupakan imunogen yang baik, namun penelitian lebih lanjut telah memperlihatkan bahwa komponen imunogenik tersebut mungkin merupakan bagian dari HBs Ag komplek. Para ahli akhirnya dapat memperoleh 2 polipeptida dari partikel HBs Ag
murni.Kedua
polipeptida mengandung
determinan
antigenik hepatitis B. Pertama berupa polipeptida dengan BM 25.000 – 26.000 (P25) dan bentuk glikosilatnya dengan BM
28.000
–
30.000
(GP
30).
Keduanya
ternyata
merupakan antigen yang efektif. Dari purifikasi peptida ini akhirnya diperoleh antigen dalam bentuk micellar. Pada pengujian potensi pada mencit, vaksin polipeptida subunit ini ternyata menimbulkan respon antibodi lebih kuat daripada antigen partikel 22 nm utuh. Vaksin ini telah menjalani pengujian keamanan dan efrkasi pada primata non manusia dan sedang dikembangkan untuk uji klinis. Vaksin polipeptida micelle ini juga telah dibuat dari HBs Ag yang dihasilkan oleh sel ragi dan sel mamalia rekombinan. Keberhasilan isolasi polipeptida p25 dan gp30 dari HbsAg
murni
dan
bukti
bahwa polipeptida
tersebut
mengandung
determinan
antigen
yang
mampu
menginduksi anti HBs, telah mendorong para ahli untuk mensintesis peptida tersebut secara kimia. Di samping itu, dorongan juga diperkuat dengan keberhasilan peptida sintetik menginduksi antibodi penetral bakteri dan virus tanaman.Vaksin peptida sintetik pertama tersebut dibuat untuk tobacco mosaic, virus, sesudah mengidentifikasi determinan antigeniknya dan rangkaian asam aminonya. Rangkaian asam amino tersebut ternyata dapat dibuat sintetik dan mampu menginduksi antibodi dalam binatang percobaan. Beberapa laboratorium akhirnya berhasil membuat peptida sintetik yang mengandung rangkaian asam amino identik dengan molekul p25 HBs Ag. Respon antibodi terhadap peptida ini muncul 1 – 2 minggu sesudah imunisasi
primer
dan
semua
binatang
menginduksi
antibodi sesudah inokulasi kedua. Mencit yang diimunisasi secara intraperitoneal, menginduksi anti HBs setelah 7 – 14 hari inokulasi. Perkembangan vaksin polipeptida yang disintesis secara kimia memberikan banyak keuntungan antara lain dapat
memproduksi imunogen yang relatif murah, aman dan uniform
secara kimia, sehingga dapat menggantikan
vaksin yang ada saat ini, yang relatif kurang murni atau mungkin mengandung determinan antigen mikroba lain 1. Orang-orang yang perlu mendapatkan vaksin
a. Bayi yang baru lahir b. Anak-anak yang berusia di bawah 19 tahun yang belum divaksinasi c. Orang yang memiliki pasangan yang terinveksi HVB d. Orang yang sering berganti pasangan e. Pekerja kesehatan f. Penderita HIV dan Liver kronik g. Wisatawan yang akan berkunjung ke daerah endemik 1. Jenis-jenis vaksin Hepatitis B
Secara umum Ada dua macam vaksin Hepatitis B, yaitu : 1. Vaksin Hepatitis yang terbuat dari darah manusia yang
telah kebal Hepatitis B, disuntikkan kepada orang sehat sekali
sebulan
sebanyak
3
kali
(Immunoglobulin
Hepatitis B) 2. Vaksin Hepatitis yang dibuat dari perekayasaan sel ragi
(Recombivax, HB® dan Engerix-B),
diberikan kepada
penderita sebulan sekali sebanyak 2 kali, lalu suntikan yang ketiga diberi 5 bulan kemudian. Vaksin Hepatitis B rekombinan (Recombivax HB)
Recombivax
HB®
vaccine
mengandung
Hepatitis B, amorphous aluminum hidroksiphosfat, protein yang diberi formaldehid,
antigen yeast
dan thimerosal sebagai
pengawet. Vaksin Hepatitis B rekombinan ini berasal dari Hepatitis B surface antigen (HBsAg) yang diproduksi dalam sel yeast. Bagian virus yang mengkode HBsAg dimasukkan ke dalam yeast, dan selanjutnya dikultur. Antigen kemudian dipanen dan dipurifikasi dari kultur fermentasi yeast Saccharomyces cereviceae, antigen HBsAg mengandung
gen adw subtype. Proses fermentasi meliputi pertumbuhan Saccharomyces cereviceae pada medium kompleks yang
mengandung ekstrak Yeast, soy pepton, dextrose, asam amino, dan garam mineral. Protein dilepaskan dari sel yeast melalui
pengrusakan sel kemudian dipurifikasi
dengan metode fisika dan kimia. Selanjutnya
potein
dimasukkan ke larutan buffer posfat dan formaldehid, dipercepat
dengan
menggunakan
alum
(potassium
aluminium sulfat). Vaksin rekombinan ini memperlihatkan kesamaan dengan vaksin yang diperoleh dari plasma darah. Vaksin Hepatitis B rekombinan (Engerix-B)
Engerix-B
merupakan
dikembangkan
dan
GlaxoSmithKline virus
dipurifikasi
dan
Hepatitis dikultur
HBsAg
rekombinan
dibuat
Biological.
permukaan
cereviceae.
DNA
oleh
perusahaan
Mengandung B
(HBsAg)
dalam yang
sel
yang
antigen
yang
telah
Saccharomyces
diekspresikan
oleh
Saccharomyces cereviceae dipurifikasi dengan cara fisika-
kimia dan aluminium hidroksida Engerix-B®
vaccine mengandung antigen hepatitis B
yang telah dimurnikan, aluminum
hidroksida, sejumlah
yeast protein dan thimerosal yang digunakan dalam proses produksi, serta 2-phenoxyethanol sebagai pengawet. Dosis pemberian vaksin Engerix-B Remaja : 0,5 ml vaksin mengandung 10 mcg HBsAg dan
0,25
mg
aluminium
hidroksida.
Formula
pediatrik
mengandung sodium klorida (9 ml /ml) dan buffer posfat
(disodium phosfat dyhidrate 0,9 mg/ml; sodium dihidrogen phosfat dihidrate 0,71 mg/ml) Dewasa : 1 ml vaksin mengandung 20 mcg HBsAg dan 0,25
mg aluminium hidroksida. Formula pediatrik mengandung sodium klorida (9 ml /ml) dan buffer posfat
(disodium
phosfat dyhidrate 0,9 mg/ml; sodium dihidrogen phosfat dihidrate 0,71 mg/ml)
Dosis pemberian vaksin pada manusia
Infants
Recombivax HB
Engerix-B
Dose (mcg)
Dose (mcg)
and 0.5 mL (5)
0.5 mL (10)
children <11 years of age
Adolescents 11- 0.5 mL (5)
0.5 mL (10)
19 years
Adults years
>20 1.0 mL (10)
1.0 mL (20)
Umu
Umumnya vaksin hepatitis diberikan pada bayi (sampai usia 12 bulan )melalui injeksi pada otot paha dan lengan atas pada anak-anak
(Poland and Jacobson, 2009).
Vaksin Hepatitis B tidak mengandung komponen hidup, aman diberikan kepada bayi yang baru lahir, anak-anak dan orang dewasa. Efek dari pemberian vaksin ini adalah pembengkakan pada daerah injeksi dan demam pada bayi. Pemberian vaksin Hepatitis B pada manusia dapat dikombinasikan misalnya
Twinrx
dengan (komb.
vaksin
untuk
Hepatitis
A)
penyakit atau
lain
Pediarix
(diphtheria, pertussis, tetanus dan polio) (Chang, 2000). Perkembangan vaksin hepatitis B
Saat ini pemberian vaksin tidak terbatas hanya pada injeksi ke dalam otot tetapi telah berkembang melalui
makanan. Di Amerika Serikat dikembangkan tanaman kentang yang mengandung vaksin Hepatitis B (Isbagyo, 2005). Penelitian pada tahun 1992 menunjukkan bahwa tanaman
tembakau
dapat
mengekspresikan
hepatitis B. dan juga akan dikembangkan
vaksin
penggunaan
kedelai dan pisang sebagai vektor vaksin.
KESIMPULAN
Tidak dapat dipungkiri, betapa besar minat para ahli untuk mengembangkan vaksin hepatitis B. Hal ini dapat dimengerti, karena hepatitis B merupakan penyakit yang tersebar di berbagai penjuru
dunia
dan akibat yang dapat
diitimbulkannya
bagi
penderita penyakit ini seperti sirosis, penyakit hati kronis, kanker dan sebagainya. Pengembangan vaksin ini menjadi lebih menarik dengan kemajuan bidang pendukung yang begitu pesat seperti rekombinan DNA, antibodi monoklonal, sintesis kimia oligopeptida,
pemrograman komputer, kristalografi, sehingga struktur protein mudah digambarkan dan determinan antigen mudah ditentukan. Berangkat dari antigen virus yang diekstrak dari plasma manusia karier, vaksin hepatitis B mulai dikembangkan. Antigen yang lebih spesifrk diidentifikasi dan diisolasi, sehingga diperoleh partikel HBsAg 22 nm yang mempunyai sifat imunogenik dan dapat digunakan
untuk
rumitnyapurifikasi
vaksinasi. serta
Karena
keamanan
terbatasnya yang
masih
donor
dan
disangsikan
walaupun tak terbukti, para ahli mulai memanfaatkan teknologi rekombinan DNA untuk membuat vaksin hepatitis B. Vaksin rekombinan pertama yang dipasarkan yaitu antigen HbsAg yang diproduksi oleh sel ragi rekombinan. Vaksin ini sudah terbukti manfaatnya. Untuk mencari vaksin yang imunogenik lebih kuat, maka dicoba sel lain sebagai host dan didapatkan sel mamalia Chinese Hamster Ovary. Sel E. coli juga dapat mengekspresikan
HBsAg, tetapi titernya terlalu rendah. Dengan vaksin yang sudah ada, para ahli masih disibukkan mencari kemungkinan lain untuk memproduksi vaksin ini. Dari hasil analisa
HBs
Ag,
didapatkan
polipeptida
p25
dan
bentuk
glikosilatnya gp30 yang mengandung determinan antigen, sehingga dapat digunakan sebagai vaksin. Dengan mengetahui rangkaian
asam amino penyusunnya, maka para ahli dapat membuat peptida secara kimia. Dalam berbagai pengujian ternyata peptida sintetik mampu menginduksi antibodi terhadap antigen hepatitis B. Tentu keberhasilan ini sangat menggembirakan, karena bila vaksin ini dibuat secara kimia, maka homogenitas dan kemumiannya tak perlu diragukan. Vaksin hidup menggunakan virus rekombinan juga telah diuji. Mereka menggunakan virus vaccinia sebagai vektor. Vaksin ini sudah diuji dengan berbagai hewan percobaan dan hasilnya cukup menggembirakan. pembuatan
vaksin
Apabila
pendekatan
komersiil,
tentu
ini
akan
berhasil memberi
untuk banyak
keuntungan seperti cara inokulasi yang relatif mudah, stabilita, shelf – life dan sebagainya.
Selain itu ada lagi pendekatan pembuatan vaksin hepatitis B menggunakan antibodi sebagai imunogen vaksin. Antibodi ini diproduksi dengan mengimunisasi binatang menggunakan antibodi yang mengenai virus HE sebagai antigennya. Vaksin ini dikenal dengan istilah Anti – idiotypes. Pada berbagai percobaan, antibodi (imunogen) ini mampu menginduksi respon kekebalan terhadap antigen asli pada mencit dan hamster. Simpanse yang diimunisasi dengan antibodi ini, dapat terlindung dan serangan virus HB.
Gencarnya
para
ahli
mencari
vaksin
alternatif
untuk
menggantikan vaksin yang sudah ada bukan berarti vaksin yang ada ini kurang layak digunakan, tetapi untuk mencari vaksin yang paling baik dipandang dari berbagai segi
DAFTAR ISI
Anonym, 2009. Hepatitis B vaccine (Recombivax HB ® and
Engerix-B
®).
Saskatchewan
Ministry
Health.
http://www.health.gov.sk.ca/hepatitis-b-tearsheet
Anonim, 2007. Hepatitis B Vaccine. Departement of Health and Human Service Center For Disease Control and Prevention. Vis-hep-b.pdf.
Chang, Mei-Hwei. 2000. Hepatitis B Vaccination and Control of
Hepatitis B-Related Liver Disease. Journal
of Pediatric Gastroenterology and Nutrition Immunization Information
Action for
www.imunize.org
public
Coalition, and
2008.
health
Vaccine
professional.
Isbagyo, Widyaningroem,
Dyah, 2005.
Masa
Depan
Pengembangan Vaksin Baru. Cermin Dunia Kedokteran.
Jakarta
O’shea,
Robert,S.,
Hepatitis
2009.
B.
http://www.clevelandclinicmeded.com/medicalpubs/diseas emanagement/hepatology/hepatitis-B/
Poland, A. Gregory and Jacobson, M. Robert, 2009. Prevention of Hepatitis B with the Hepatitis B Vaccine. The new england journal Of medicine. N Engl J
Med 2004;351:2832-8. Copyright © 2004 Massachusetts Medical Society.
Zain,
Lukman,
H.,
2006.
Hepatits
B
dan
Permasalahannya.
http://www.usu.ac.id/id/files/pidato/orasi_ilmiah_dies_natali s_54_2006.pdf
