PEMBAHASAN
A. Uji Kelay Kelayaka akan n Giems Giemsa a Pewarnaan giemsa adalah pewarnaan yang digunakan untuk pewarnaan dengan material darah. Cat giemsa adalah campuran dari eosin yang berwarna merah metilen biru yang berwarna biru dan metilen a!ur yang berwarna ungu. "alam pewarnaan giemsa eosin ber#ungsi untuk memberi warna pada eritrosit perpaduan antara eosin dan metilen a!ur ber#ungsi untuk memberi warna merah pada pada inti inti sel paras parasit it dan metil metilen en biru biru ber#un ber#ungsi gsi untuk untuk membe memberi ri warna warna pada pada sitoplasma sel. "alam praktikum yang dilaksanakan di $aboratorium Parasitologi B%P%&' B%P%&'P P pada pada tangga tanggall (% )uni )uni %*(+ %*(+ pewa pewarna rnaan an giems giemsa a dila dilakuk kukan an untuk untuk mengidenti#ikasi adanya plasmodium dan mikro#ilaria dalam darah. Plasmodium dalam darah sebagai u,i laboratorium untuk diagnosis adanya in#eksi penyakit malaria sedangkan mikro#ilaria dalam darah dilakukan sebagai u,i laboratorium untuk diadnosis adanya in#eksi penyakit #ilariasis. Sebelu Sebelum m giemsa giemsa digun digunaka akan n sebaga sebagaii reage reagen n untuk untuk u,i u,i plasmo plasmodiu dium m dan dan mikro#ila mikro#ilaria ria giemsa giemsa yang akan dipakai dipakai harus harus diu,i diu,i kelayakan kelayakan terlebih terlebih dahulu. dahulu. -u,u -u,uan an dari dari u,i kelaya kelayakan kan giemsa giemsa adalah adalah untuk untuk menge mengetah tahui ui apaka apakah h giemsa giemsa tersebut masih layak untuk digunakan atau giemsa telah mengalami kerusakan. iemsa iemsa yang yang telah telah menga mengalam lamii kerusa kerusakan kan sebai sebaikny knya a tidak tidak diguna digunakan kan untuk untuk pemeri pemeriksa ksaan an paras parasit it dalam dalam darah darah karen karena a dapat dapat menye menyebab babkan kan kesal kesalaha ahan n pemeriksaan. Alat dan bahan yang digunakan untuk u,i kelayakan giemsa adalah giemsa metil alkohol kertas whatman pipet tetes dan gelas beaker. $angkah / langkah u,i kelayakan giemsa adalah sebagai berikut 0 (. $etakkan $etakkan kertas kertas whatma whatman n di atas atas gelas gelas beaker beaker.. %. Ambi Ambill giem giemsa sa deng dengan an pipe pipett tete tetes s kemu kemudi dian an tete tetesk skan an pada pada kert kertas as whatman sebanyak sebanyak 1 / + cc. 1. -ambah -ambahkan kan metil metil alkoho alkoholl sebany sebanyak ak 2 cc. cc. +. "iam "iamka kan n bebe bebera rapa pa saa saat. t. 2. Amati Amati warna warna yang muncul muncul pada pada lingkar lingkaran an 3 bidang bidang 4 yang telah telah ditetes ditetesii giemsa. iemsa iemsa yang yang masih masih layak layak untuk untuk dipaka dipakaii akan akan muncul muncul 1 warna warna saat saat u,i kelayakan. 5arna yang muncul yaitu warna merah pada bagian tepi dari bidang pewarnaan lingkaran cincin yang lebar berwarna ungu dan warna biru yang
terlihat pada bagian tengah bidang pewarnaan. Apabila ketiga warna tersebut tidak tidak muncul muncul kemungki kemungkinan nan telah telah ter,adi ter,adi kerusaka kerusakan n pada giemsa. giemsa. 6erusaka 6erusakan n pada pada giemsa giemsa antar antara a lain lain diseb disebabk abkan an karena karena panas panas dan cahay cahaya a matah matahari ari langsung tempat penyimpanan giemsa yang sering dibuka tutup 3memungkinkan 3memungkinkan adanya kontaminasi4 serta pipet yang digunakan untuk beberapa reagen secara berga berganti ntian. an. Hal Hal lain lain yang yang mungki mungkin n menye menyebab babkan kan giemsa giemsa tidak tidak layak layak untuk untuk digunakan adalah pengenceran giemsa sekaligus dalam ,umlah besar kemudian disimpan dalam ,angka waktu yang lama. iemsa yang sudah diencerkan harus segera digunakan 3tidak boleh disimpan lagi4. Pada u,i kelayakan giemsa yang dilakukan pada praktikum di $aboratorium Parasi Parasitol tolog ogii di B%P%&' B%P%&'P P terli terlihat hat 1 warna warna pada pada kerta kertas s u,i u,i whatm whatman an.. Hal Hal ini membuktikan bahwa giemsa tersebut masih layak digunakan untuk pemeriksaan sediaan darah.
B. Teknik eknik Pewar Pewarnaa naan n Giemsa Giemsa Pew Pewarna arnaan an iem iemsa sa 3ie 3iems msa a Stai Stain4 n4 adal adalah ah tekn teknik ik pew pewarna arnaan an untu untuk k pemeriksaan mikroskopis yang namanya diambil dari seorang peneliti malaria yaitu usta7 iemsa. Pewarnaan ini digunakan untuk pemeriksaan sitogenetik dan untuk diagnosis histopatologis parasit malaria dan parasit lainnya. Prinsip dari dari
pew pewarna arnaan an
giem giemsa sa
adal adalah ah
pres presip ipit itas asii
hita hitam m
yang ang
terb terben entu tuk k
dari dari
penambahan larutan metilen biru dan eosin yang dilarutkan di dalam metanol. Pewarn Pewarnaan aan giemsa giemsa digun digunaka akan n untuk untuk membed membedaka akan n inti inti sel dan dan mor#ol mor#ologi ogi sitoplasma dari sel darah merah sel darah putih trombosit dan parasit yang ada di dalam darah. Pewarnaan giemsa adalah teknik pewarnaan yang paling bagus diguna digunakan kan untuk untuk ident identi#i i#ikas kasii parasi parasitt yang yang ada ada di dalam dalam darah darah 3blood 3blood8bo 8borne rne parasite4. Sebelum digunakan untuk pemeriksaan parasit dalam darah giemsa harus diencerkan terlebih dahulu. iemsa diencerkan dengan menggunakan air bu##er atau air mineral. mineral. 9ntuk 9ntuk pemeriks pemeriksaan aan plasmod plasmodium ium ada 1 ,enis ,enis pengenc pengenceran eran giem giemsa sa
sesu sesuai ai
deng dengan an
,eni ,enis s
pew pewarna arnaan anny nya. a.
9ntu 9ntuk k
pew pewarna arnaan an
cepa cepat t
pengenceran dilakukan dengan mencampurkan ( cc giemsa dengan : cc air dengan dengan pewarn pewarnaan aan selama selama (* / (2 menit. menit. 9ntuk 9ntuk pewarn pewarnaan aan agak agak lambat lambat pengenceran dilakukan dengan mencampurkan ( cc giemsa dengan (* cc air dengan dengan pewa pewarna rnaan an selama selama (2 / %2 menit. menit. "an untuk untuk pewarn pewarnaan aan lamba lambat t pengenceran dilakukan dengan mencampurkan ( cc giemsa dengan %* cc air
dengan dengan pewarn pewarnaan aan selama selama +2 / ;* menit. menit. Sedan Sedangka gkan n untuk untuk penge pengence nceran ran giem giemsa sa
pada pada
peme pemeri riks ksaa aan n
#ila #ilari rias asis is
peng pengen ence cera ran n
dila dilaku kuka kan n
deng dengan an
mencampurkan ( cc giemsa dengan %* cc air dengan pewarnaan selama 1* menit. Alat dan bahan yang digunakan untuk membuat preparat darah dengan pewarnaan giemsa adalah kaca ob,ekti# giemsa material darah dan air untuk membilas. Pemeriksaan plasmodium untuk diagnosis malaria dengan pewarnaan giemsa giemsa dilakuk dilakukan an dengan dengan % cara cara yaitu yaitu dengan dengan mengguna menggunakan kan apusan apusan darah darah tebal tebal dan apusan apusan darah darah tipis. tipis. $angka $angkah h / langka langkah h membua membuatt prepa preparat rat untuk untuk pemeriksaan plasmodium adalah 0 (. Siapk Siapkan an semu semua a alat alat dan dan bah bahan. an. %. Ambil Ambil sampel sampel darah dari dari ,ari 3 pembulu pembuluh h darah kapiler kapiler 4 sebanya sebanyak k ( tetes 3darah 3darah pertam pertama a dibua dibuang ng kemudi kemudian an darah darah yang yang selan, selan,utn utnya ya kelua keluar r diteteskan langsung dari ,ari ke bagian tengah kaca ob,ekti# 4. 'atakan dan kumpulkan bagian tebal di tengah. 1. unakan unakan prepara preparatt lain untuk untuk membuat membuat sediaan sediaan darah darah tipis pada pada bagian bagian tepi preparat dengan cara dioleskan. dioleskan. +. "iamkan "iamkan dan dan tunggu tunggu hingga hingga kering kering kurang kurang lebih lebih selama selama + ,am. )angan )angan dikeringkan dengan menggunakan tissue. 2. -eteska -eteskan n giemsa giemsa yang telah dience diencerkan rkan ke sediaan sediaan darah darah secara secara merata merata 3hingga menutupi semua permukaan darah4. ;. Bila Bilas s deng dengan an air air.. :. "iam "iamka kan n hing hingga ga kura kurang ng labi labih h %+ ,am ,ika ,ika cuac cuaca a seri sering ng hu,a hu,an n atau atau selama (% ,am ,ika cuaca cerah tidak hu,an. <. Preparat Preparat yang yang telah telah selesai selesai dibuat dibuat diamati diamati di bawah bawah mikros mikroskop. kop. Sedangkan langkah / langkah untuk membuat preparat untuk pemeriksaan #ilariasis adalah 0 (. Siapk Siapkan an semu semua a alat alat dan dan bah bahan. an. %. Ambil Ambil sampel sampel darah dari dari ,ari 3 pembulu pembuluh h darah kapiler kapiler 4 sebanya sebanyak k 1 tetes 3 darah darah perta pertama ma dibua dibuang ng kemud kemudian ian darah darah yang yang selan selan,ut ,utny nya a keluar keluar diteteskan langsung dari ,ari ke bagian tengah kaca ob,ekti# 4. 'atakan dan kumpulkan bagian tebal di tengah. 1. $akuk $akukan an haemod haemodial ialisa isa dengan dengan cara cara menete meneteska skan n 2 cc air kemud kemudian ian keringkan selama 2 / (* menit. +. -eteskan teskan metil metil alkoh alkohol. ol.
2. -etesi -etesi sediaan sediaan darah darah dengan dengan giemsa. giemsa. ;. Bila Bilas s deng dengan an air air.. :. "iam "iamka kan n hing hingga ga kura kurang ng labi labih h %+ ,am ,ika ,ika cuac cuaca a seri sering ng hu,a hu,an n atau atau selama (% ,am ,ika cuaca cerah tidak hu,an. <. Preparat Preparat yang yang telah telah selesai selesai dibuat dibuat diamati diamati di bawah bawah mikros mikroskop. kop. 9ntuk pengambilan sampel darah pada bayi yang berusia kurang dari ( tahun darah diambil pada bagian tumit dan untuk anak usia ( hingga 1 tahun sampel darah diambil pada bagian ibu ,ari kaki. Hal ini disebabkan karena kulit dari bayi dan anak / anak yang masih sangat tipis. Preparat yang telah dibuat ini dapat bertahan selama (% tahun ,ika proses pembuatannya tepat. =ang dapat menyebabkan kerusakan pada preparat adalah pembilasan yang terlalu cepat atau preparat yang belum kering langsung disimpan pada rak preparat. Pada daerah endemis malaria biasanya ,uga merupakan daerah endemis #ilarias #ilariasis. is. >leh karena karena itu biasany biasanya a pengamb pengambilan ilan sampel sampel untuk untuk pemeriks pemeriksaan aan plasmodi plasmodium um ,uga disertai disertai dengan dengan pengambi pengambilan lan sampel sampel untuk pemeriks pemeriksaan aan mikro#ilaria kecuali pada sampel yang berusia kurang dari (1 tahun. Hal ini disebabk disebabkan an karena karena masa sirkulasi sirkulasi mikro#il mikro#ilaria aria adalah (1 tahun tahun ,adi ,adi selama selama kurang dari (1 tahun biasanya mikro#ilaria tidak dapat terdeteksi. Selain dengan apusan darah tipis dan apusan darah tebal pemeriksaan plasmodium dalam darah untuk diagnosis malaria ,uga dapat dilakukan dengan cara rapid dianosa test 3 '"- 4. 'apid "iagnosa -est 3 '"- 4 ini dilakukan dengan alat khusus '"-. 'apid "iagnosa -est ini hanya e#ekti# dilakukan untuk daerah endemis malaria yang kepadatan plasmodium ? 2 per ml darah. )ika kurang dari itu maka hasil '"- kurang 7alid 3 plasmodium tidak terdeteksi 4. 6elem 6elemaha ahan n dari dari '"'"- adala adalah h masih masih perlu perluny nya a pemer pemeriks iksaa aan n lan,u lan,utt secara secara mikroskopik untuk mendapatkan kepastian sehingga dianggap seperti ker,a dua kali. 6elebihan dari 'apid "iagnosa -est 3 '"- 4 antara lain adalah sebagai berikut 0 (. "apat "apat digunaka digunakan n untuk tes cepat cepat saat menghad menghadapi api wabah wabah di lapangan lapangan.. %. -es -es dilakukan dilakukan tanpa tanpa harus mengguna menggunakan kan sampel sampel sediaan sediaan darah darah 3 hanya dengan mengambil darah dari pembuluh kapiler di u,ung ,ari 4. 1. Pemakaia Pemakaianny nnya a mudah tanpa tanpa harus dilak dilakukan ukan oleh oleh orang terlati terlatih. h.
