PEWARNAAN PEWARNAAN SCHAEFFER SC HAEFFER FULTON FULTON dan KLEIN (BERSPORA)
Mata Kuliah Dosen pengajar
!ingkat $ Se%ester Kelo%pok $ Prodi 'ari 'ari , tang tangga gall pra prakt ktik iku% u% Materi pr praktiku% !ujuan praktiku% Prinsip praktiku%
: Bakteriologi : 1. Dwi Krihariyani , S.Si, M.Kes 2. Suliati , S.pd , S.Si, M.Kes 3. Pestariati , S.Si , M.Kes . !a"ik !a"ik #dayati , S.S! :1$2 : & $ D &nalis Kesehatan : Sen Senin in,, () Mare Marett 2(1* 2(1* : Pe Pe%+uatan preparat +e +erspora , pewarnaan s" s"haer ulton dan pewarnaan klein. : -ntuk %elihat adanya +akteri +erspora pada preparat. : 1. Metode pewarnaan klein Badan ku%an %engikat pewarnaan %enthylene +lue +erwarna +iru dan spora ku%an %engikat %engikat "ar+ol u"hsin +erwarna %erah. 2. Metode pewarnaan luton Badan ku%at %engikat saranin $ air u"hsin yang +erwarna %erah dan spora ku%an %engikat pewarnaan %al"hid green +erwarna hijau.
&. &lat &lat dan dan Baha Bahan n: &lat : 1. o+jek glass 2. ose lup 3. la%pu spirtus . rak ta+ung reaksi *. ta+ung reaksi . je%+atan pewarnaan /. %ikroskop 0. korek api
). pipet paestur 1(. +eaker glass 11. ter%o%eter 12. spidol per%anent 13. tissue 1. kapas Bahan : 1.p 2. Methyleen +lue 3. "ar+ol u"hsin . saranin *. %ala"hid green . oil i%ersi /. '2S 0. +iakan +akteri +erspora
B. angkah Kerja : Pe%+uatan preparat $ sediaan +akteri 4pewarnaan s"ha"er ulton5 : 1. 2. 3. . *. .
Menyiapkan alat dan +ahan yang akan digunakan Me%+ersihkan o+jek glass dengan alkohol, lalu %engeringkan o+jek glass. Me%+eri tanda lingkaran o+jek glass dengan spidol per%anent Me%iksasi o+jek glass se+anyak 36 lalu tunggu hingga dingin Meletakkan o+jek glass di dekat spirtus Me%iksasi ose lup dengan la%pu spirtus dari ujung sa%pai pangkal hingga %e%+ara
lalu %endinginkan ose. /. Menga%+il p dengan ose lup yang telah diiksasi , diletakkan pada preparat diratakan sesuai tanda lingkaran yang di+uat 0. Me%iksasi ke%+ali ose lup, lalu %endinginkannya ). Menga%+il koloni tunggal yang tu%+uh pada %edia padat nutrient agar 4 koloni +akteri5, %enggunakan ose lup yang sudah diiksasi 1(. Meletakkan pada o+jek glass, ratakan sesuai tanda lingkaran yang sudah di+uat ke%udian tunggu preparat sa%pai kering. 11. Me%iksasi preparat yang sudah kering se+anyak 36, tunggu preparat hingga kering 12. Ke%udian pewarnaan s"haeer ulton 7ara pewarnaan s"hae"er ulton : 1. Meletakkan preparat di atas je%+atan pewarnaan 2. Menetesi preparat dengan larutan %ala"hid green hingga seluruh o+jek glass tergenangi 3. Me%+uat pe%anas dari kasa yang dililitkan pada +esi ke%udian dipanaskan di +awah preparat s%apai ti%+ul uap sela%a * %enit , tetapi tidak +oleh sa%pai %endidih atau kering +ila kering dita%+ah pewarna lagi . Me%+uang sisa larutan %ala"hid green dari o+jek glass , dan +ilas dengan air
*. Menetesi preparatdengan air u"hsin $ saranin sa%pai seluruh per%ukaan preparat tergenangi dan tunggu sela%a 183 %enit . Me%+uang sisa air u"hsin $ saranin dari o+jek glass ke%udian +ilas dengan air +ersih /. Mengeringkan preparat dengan %enggunakan kertas saring $ tissue 7ara penga%atan +akteri : 1. Menyalakan %ikroskop 2. Meletakkan o+jek glass pada %eja preparat lalu %enetesi oil i%ersi 4 per+esaran 1((6 5 3. Mengatur per+esaran %ikroskop yaitu 1((" lalu %enga%ati +akteri
Ske%a $ 9a%+ar :
'asil penga%atan +akteri :
'asil penga%atan ketika praktiku% spora sudah terlepas dari egetati karena %asa inku+asi sudah le+ih dari 2 6 2 ja%. Badan ku%an +erwarna %erah dan spora +ewarna hijau.
Pe%+uatan preparat +akteri 4pewarnaan klein5 : 1. 2. 3. .
Menyiapkan alat dan +ahan yang akan digunakan Me%+eri tanda lingkaran pada o+jek glass dengan spidol per%anent Me%iksasi o+jek glass se+anyak 36 lalu tunggu hingga dingin Me%+uat suspensi +akteri dengan pelarut steril seperti p ke dala% ta+ung reaksi ke%udian %enga%+il +iakan +akteri dengan %enggunkan ose lup yang telah diiksasi
dan %asukkan ke dala% ta+ung *. Mensuspensi +akteri dipanaskan pada wather+at dengan "ara %eletakkan suspensi +akteri pada +eaker glass yang +erisi air ke%udian dipanaskan %enggunakan pe%anas spirtus dengan suhu %en"apai /(; 7 8 0(; 7 sela%a 1* %enit ke%udian didinginkan
. Me%+uat sediaan suspensi +akteri yang sudah dingin 8 Menyiapkan ose , suspensi +akteri , o+jek glass yang sudah diiksasi dan pe%anas 8
spirtus Me%iksasi ose lup dengan la%pu spirtus dari ujung hingga pangkal kawat
8
%e%+ara lalu tunggu hingga dingin Menga%+il 1 ose lup p dan %eletakkan pada o+jek glass di satu titik pada area
8
yang di+eri tanda dengan spidol Me%iksasi %ulut ta+ung p dan %enutupnya lalu %e%iksasi ke%+ali ose lup
8
hingga %e%+ara dan tunggu dingin Menga%+il 1 ose lup suspensi +akteri yang telah diseterilkan ke%udian
8
%eletakkan di atas o+jek glass dan %eratakan p yang telah dioleskan Me%iksasi %ulut ta+ung dan %enutupnya lalu %e%iksasi ke%+ali ose lup
8
hingga %e%+ara dan tunggu sa%pai dingin Menunggu o+jek glass kering. Setelah kering +enar8+enar kering %e%iksasi
preparat se+anyak 36 /. Ke%udian dilanjutkan dengan pewarnaan klein 7ara pewarnaan klein : 1. Meletakkan o+jek glass +akteri di atas je%+atan pewarnaan 2. Menetesi '2S 1 < pada preparat sela%a 283 detik lalu %e%+uang '2S dan %en"u"i dengan air 3. Menggenangi preparat dengan %ethylene +lue sela%a * %enit . Me%+uang %ethylene +lue dan %en"u"i dengan air *. Mengeringkan preparat dengan kertas saring $ tissue 7ara penga%atan +akteri: 1. Menyiapkan %ikroskop 2. Meletakkan o+jek glass pada %eja preparat lalu %enetesi oil i%ersi 4per+esaran 1((65 3. Mengatur per+esaran %ikroskop yaitu 1((6 lalu %enga%ati +akteri Ske%a $ 9a%+ar :
'asil penga%atan :
Kesi%pulan : Pada preparat terlihat +akteri spora. Pada s"haeer ulton +akteri %erah dan spora hijau sedangkan pada klein +akteri +erwarna +iru dan spora hijau , +akteri +er+entuk +asil dan letak sporanya +isa "entral , ter%inal dan su+ ter%inal. Pada s"haeer ulton , spora +erwarna hijau karena %enyerap pewarna perta%a dan egetati +erwarna %erah karena %enyerap pewarna perta%a.
