Senyawa steviol glikosida dapat memberikan rasa manis pada tanaman stevia (Stevia (Stevia rebaudiana). rebaudiana). Senyawa ini memiliki tingkat kemanisan berkisar 40 sampai 300 kali lebih manis dibandingkan dengan gula tebu. Senyawa ini pun memiliki sifat stabil terhadap panas, stabil terhadap pH, dan tidak mengalami proses fermentasi, serta tidak mempengaruhi respon glikemik atau kenaikan kadar gula darah apabila dikonsumsi oleh penderita diabetes sehingga steviol glikosida sekarang diproduksi dan digunakan sebagai produk pengganti gula untuk penderita diabetes. iterpena atau yang dikenal dengan steviol adalah aglikon dari glikosida pada tanaman stevia yang memiliki rasa manis dan tersusun oleh pergantian atom hidrogen karboksil steviol dengan glukosa untuk membentuk ester dan menggantikan hidrogen hidroksil dengan penggabungan glukosa dan ramnosa untuk pembentukkan eter. ua senyawa utamanya yaitu steviosida mempunyai dua molekul glukosa yang terikat pada bagian hidroksil dan rebaudiosida ! mempunyai tiga molekul dengan tiga glukosa ditengah" tengah dari triplet yang tersambungk tersambungkan an pada struktur steviol steviol pusat. #asa dari senyawa rebaudioside ! lebih mirip dengan rasa sukrosa, sedangkan rasa dari senyawa steviosida memiliki rasa yang sedikit pahit. !da !da bebe bebera rapa pa publi publika kasi si terb terbar aru u meng mengena enail il anali analisi siss pengg pengguna unaan an senya senyawa wa stev stevio ioll glikosida. glikosida. $erbagai metode digunakan digunakan untuk proses optimalis optimalisasi asi senyawa senyawa ini. Salah satu satuny nyaa meng menggun gunak akan an meto metode de %H&' %H&' (Ultra High Performance Liquid Chromatography) Chromatography) untuk mengukur senyawa steviol glikosida dalam ekstrak daun stevia yang yang kini kini menad menadii salah salah satu komoditas komoditas unggulan unggulan di negara negara *tali *talia. a. +etode +etode %H&' dila dilaku kuka kan n pada pada dua inst instru rume men n yang yang berbed berbedaa dari dari ione ione dan dan !gile !gilent nt.. +eto +etode de ini ini merupakan salah satu enis metode kromatografi yang digunakan untuk proses pemisahan steviol glikosida pada dua kolom - dan /0 m seara seri (dp 1 2,0 m) dan untuk menun menunukka ukkan n adanya adanya -/ senyawa senyawa yang ada pada tanama tanaman n stevia stevia.. $ebera $eberapa pa senyaw senyawaa mungkin mungkin tidak terlihat terlihat pada instrumen, instrumen, karena senyawa tersebut tersebut tersembunyi tersembunyi di bawah punak yang lebih besar, atau karena senyawa tersebut sangat terlambat sehingga tidak terdeteksi. &ersamaan an eemter memprediksi peningkatan dramatis analisa senyawa yang teradi didalam kinera kolom karenanya resolusi dengan menggunakan diameter partikel yang lebih keil untuk mengemas kolom. 5amun, kolom ini akan menghasilkan tekanan balik yang auh lebih besar darisistem, sehingga diperlukan pompa yang dapat memberikan memberikan tekanan pada proses ini. 6leh karena itu nama teknik yang digunakan ini adalah teknik %ltra"Hig %ltra"High h &erforman &erformanee 'i7uid 'i7uid hromatogra hromatography phy (%H&'). (%H&'). Selain Selain itu, tekanan inlet yang tinggi memungkinkan penggunaan panang kolom yang lebih panang karena karena semaki semakin n mening meningkat katkan kan resolu resolusi si pemisa pemisahan. han. &erangk &erangkat at penggan penggandeng deng kolom kolom otomatis yang dipasang pada !gilent *nfinity %H&' sistem dengan tekanan saluran masuk maksimum -./00 bar digunakan untuk beberapa pasangan !7uity $8H - olu olumn mnss ukur ukuran an part partik ikel el99 -.: -.: m sea seara ra seri seri.. &eng &engat atur uran an ini ini digu diguna naka kan n untu untuk k mengevaluas mengevaluasii pemisahan pemisahan sampel sampel glikosida glikosida steviol pada panang panang kolom yang berbeda berbeda berkisar antara 2 m dan /2 m. $erbagai gradien asam format berair (0,-;) " asetonitril pertama kali dialankan pada panang kolom terpendek yakni 2 m dan akan memu memungk ngkin inkan kan ter terad adin inya ya sele seleks ksii kondi kondisi si grad gradie ien n terb terbai aik k dala dalam m wakt waktu u sesi sesingk ngkat at mungkin.
dipisahkan pada kolom terpanang panang menyambungkan dua kolom /,- -00 mm.
yakni
/0 m,
diperoleh dengan
%ntuk beberapa kolom dalam seri, kedua sistem dilengkapi dengan pengganda kolom khusus. >apasitas dari sistem ini memungkinkan terbentuknya kolom hingga empat kolom sehingga setiap kolom akan mudah digabungkan. >olom"kolom tersebut dapat digabungkan dengan ara menghubungkan setiap kolom dengan port yang sesuai melalui pemutar rotor menuu sistem. Sistem ione %H&' merupakan sistem %ltimate 3000 (ione orporation) yang dilengkapi dengan pompa biner ganda, autosampler, oven udara dengan suhu maksimum --0 ? dan variabel detektor panang gelombang dengan sel aliran 42 n' untuk panang lintasan - m. >apasitas volume dari sistem ini adalah =00 ' dan tekanan maksimum 00 bar. Sistem ini dioperasikan dengan perangkat lunak hromeleon (ione). Sistem %H&' dilengkapi dengan katup switching tekanan tinggi dengan batas tekanan -000 bar (@itanH@, H@:-2"000) dari #heodyne. #otor terdiri dari = port periferal dengan satu port sentral dan memiliki volume port-to-port 300 n'. Stator dibuat khusus untuk memungkinkan katup digunakan dalam posisi berbeda. >atup" katup dioperasikan dengan soft ware Chemstation. Senyawa asetonitril, asam fosfat dan asam format adalah senyawa untuk menentukan kualitas %H&' dan digunakan tanpa pemurnian lebih lanut. !ir disiapkan menggunakan aparatur +illi"A. Sampel stevia yang digunakan memiliki keuntungan seara karakteristik yang baik seara kualitatif maupun kuantitatif.
Namun, penelitan ini eruama diujukan unuk yang cepa analisis, cocok unuk konrol rutn. Dalam konribusi ini, kami melaporkan analisis seviol glikosida dengan UHPLC. erenangan dengan kebanyakan publikasi lain, kami mencoba menemukan banyak senya!a di dalamnya sampel kami mungkin. "arena #asilnya masi# cukup a!al, yang belum dikenal belum dapa diident$kasi pada saa penulisan.
. %ni ba#kan lebi# pentng, sebagai HPLC rutn analisis glikosida seviol biasanya mengkuant$kasi #anya & aau ' sisi glyco seviol yang berbeda dari lebi# dari () yang ela# dijelaskan #ingga saa ini *+eun, )()assank, )()/. 0elain iu, kami melaporkan di empa lain *1mery e al., )()/ di analisis glikosida seviol dalam produk susu, dan emukan setdaknya sau amba#an puncak yang secara konsisen #adir dalam kromaogram kami. 2le# karena iu, 3aka iu ada a#kan lebi# banyak senya!a ak dikenal yang #adir tdak dapa dikecualikan. 0elanjunya kia tdak dapa mengesampingkan kemungkinan ba#!a setdaknya sebagian dari rasa tdak enak dari beberapa sevia.
