Medio SIM: No hay movilidad, el color indica que no hay producción de H2S, además tampoco hay producción de indol.PRÁCTICA N°7. PRUEBAS BIOQUÍMICASBahena García Mauricio, Dominguez Valle Israel, Escobar Campos Jorge I., Flores Fernández Gimena G., García Mejía Carlos D.Resultados 21 de abril de 2016
Medio SIM: No hay movilidad, el color indica que no hay producción de H2S, además tampoco hay producción de indol.
PRÁCTICA N°7. PRUEBAS BIOQUÍMICAS
Bahena García Mauricio, Dominguez Valle Israel, Escobar Campos Jorge I., Flores Fernández Gimena G., García Mejía Carlos D.
21 de abril de 2016
Introducción:Gracias a las reacciones fisiológicas y químicas de los microorganismos, es posible llevar a cabo su estudio bioquímico como complemento de otros estudios bacteriológicos, puede ser un apoyo a la hora de diagnosticar infecciones por bacterias. Este conjunto de medios de cultivo son muy usados para la identificación de las bacterias y su siembra debe realizarse a partir de colonias aisladas, son enriquecidos con productos útiles para el metabolismo celular y que contienen un indicador que hace virar el color al efectuar los microorganismos sus funciones. Principalmente estos medios especiales son: TSI, citrato de Simmons, LIA, SIM, MIO, caldo peptonado y ureasa. Objetivo: Reconocer las reacciones bioquímicas relacionadas con la fisiología bacteriana así como la identificación de enterobacterias.
Introducción:
Gracias a las reacciones fisiológicas y químicas de los microorganismos, es posible llevar a cabo su estudio bioquímico como complemento de otros estudios bacteriológicos, puede ser un apoyo a la hora de diagnosticar infecciones por bacterias. Este conjunto de medios de cultivo son muy usados para la identificación de las bacterias y su siembra debe realizarse a partir de colonias aisladas, son enriquecidos con productos útiles para el metabolismo celular y que contienen un indicador que hace virar el color al efectuar los microorganismos sus funciones. Principalmente estos medios especiales son: TSI, citrato de Simmons, LIA, SIM, MIO, caldo peptonado y ureasa.
Objetivo: Reconocer las reacciones bioquímicas relacionadas con la fisiología bacteriana así como la identificación de enterobacterias.
Medio MIO: Negativo en movilidad, el color púrpura indica la presencia de ornitina decarboxilasa; al agregar R. de Erlich el cambio a amarillo indica que es negativo en producción de indol.Caldo peptonado: El color rojo indica la presencia de ácidos.
Medio MIO: Negativo en movilidad, el color púrpura indica la presencia de ornitina decarboxilasa; al agregar R. de Erlich el cambio a amarillo indica que es negativo en producción de indol.
Caldo peptonado: El color rojo indica la presencia de ácidos.
Discusión:
Con base en los resultados se afirma que las bacterias que contenía la muestra de ambroxol son bacilos gramnegativos, y por las características que presentan en las distintas pruebas bioquímicas existe una alta probabilidad que las enterobacterias contaminantes sean Escherichia coli ATCC 25922 o bien Klebsiella pneumoniae ATCC 700603; para poder corroborar el resultado es necesario repetir las pruebas bioquímicas para poder descartar algún falso positivo.Caldo urea: La actividad ureásica se considera positiva ya que se observa entre rojo y rosa.
Discusión:
Con base en los resultados se afirma que las bacterias que contenía la muestra de ambroxol son bacilos gramnegativos, y por las características que presentan en las distintas pruebas bioquímicas existe una alta probabilidad que las enterobacterias contaminantes sean Escherichia coli ATCC 25922 o bien Klebsiella pneumoniae ATCC 700603; para poder corroborar el resultado es necesario repetir las pruebas bioquímicas para poder descartar algún falso positivo.
Caldo urea: La actividad ureásica se considera positiva ya que se observa entre rojo y rosa.
Material:Un portaobjetos, kit para tinción de Gram, microscopio compuesto, mechero bunsen, aceite de inmersión. Cultivo del Ambroxol en XLD, Nutritivo y Sabouraud (realizada en la práctica anterior), batería para pruebas bioquímicas (TSI, citrato de Simmons, LIA, SIM, MIO, caldo peptonado y ureasa).Método: Contar las UFC obtenidas en el agar nutritivo, Sabouraud y XLD. Con ayuda del asa bacteriológica, tomar una muestra del crecimiento obtenido en el agar nutritivo (la colonia aislada más grande), con el portaobjetos realizar una tinción de Gram (con cristal violeta, lugol, alcohol, safranina), observar resultados en el microscopio compuesto. De la muestra estudiada con la tinción de Gram, tomar con el asa bacteriológica una muestra para su inoculación en el agar TSI, Citrato de Simons y LIA (con la técnica de punción y estría), SIM y MIO (técnica de punción), y el caldo peptonado y ureasa (técnica de enjuague). Observar resultados a las 48 hrs. Resultados:Pruebas bioquímicas:
Material:
Un portaobjetos, kit para tinción de Gram, microscopio compuesto, mechero bunsen, aceite de inmersión. Cultivo del Ambroxol en XLD, Nutritivo y Sabouraud (realizada en la práctica anterior), batería para pruebas bioquímicas (TSI, citrato de Simmons, LIA, SIM, MIO, caldo peptonado y ureasa).
Método:
Contar las UFC obtenidas en el agar nutritivo, Sabouraud y XLD. Con ayuda del asa bacteriológica, tomar una muestra del crecimiento obtenido en el agar nutritivo (la colonia aislada más grande), con el portaobjetos realizar una tinción de Gram (con cristal violeta, lugol, alcohol, safranina), observar resultados en el microscopio compuesto.
De la muestra estudiada con la tinción de Gram, tomar con el asa bacteriológica una muestra para su inoculación en el agar TSI, Citrato de Simons y LIA (con la técnica de punción y estría), SIM y MIO (técnica de punción), y el caldo peptonado y ureasa (técnica de enjuague). Observar resultados a las 48 hrs.
Resultados:
Pruebas bioquímicas:
Se obtuvieron 16 colonias en el agar nutritivo, 2 en el Sabouraud y ninguna en el agar XLD. En el microscopio compuesto se lograron observar bacilos Gram negativo.
Se obtuvieron 16 colonias en el agar nutritivo, 2 en el Sabouraud y ninguna en el agar XLD. En el microscopio compuesto se lograron observar bacilos Gram negativo.
Conclusión: Las pruebas bioquímicas realizadas a los microorganismos que contaminaron el Ambroxol, nos ayudaron a identificar sus diferentes características fisiológicas, pudiendo determinar así su identidad, y reconociendo la importancia de la debida esterilidad de los medicamentos. Medio TSI: El color rojo en pico y fondo indica alcalinidad y que no hubo fermentación; fue negativo en producción de gas y H2S.
Conclusión:
Las pruebas bioquímicas realizadas a los microorganismos que contaminaron el Ambroxol, nos ayudaron a identificar sus diferentes características fisiológicas, pudiendo determinar así su identidad, y reconociendo la importancia de la debida esterilidad de los medicamentos.
Medio TSI: El color rojo en pico y fondo indica alcalinidad y que no hubo fermentación; fue negativo en producción de gas y H2S.
Citrato de Simmons: Se observa un cambio de color a azul muy tenue en el pico, sin embargo, al ser una parte color verde se considera negativa la presencia de citrato permeasa.
Citrato de Simmons: Se observa un cambio de color a azul muy tenue en el pico, sin embargo, al ser una parte color verde se considera negativa la presencia de citrato permeasa.
Referencias bibliográficas:Tortora J.G, et al. (2007). INTRODUCCION A LA MICROBIOLOGIA, 9ª edición., Argentina: Editorial Médica Panamericana S.A. pp178.Montoña Villafañe H.H. (2008). MICROBIOLOGIA BÁSICA PARA EL ÁREA DE SALUD Y A FINES. 2ª edición. Colombia: Universidad de Antioquia. pp 73.
Referencias bibliográficas:
Tortora J.G, et al. (2007). INTRODUCCION A LA MICROBIOLOGIA, 9ª edición., Argentina: Editorial Médica Panamericana S.A. pp178.
Montoña Villafañe H.H. (2008). MICROBIOLOGIA BÁSICA PARA EL ÁREA DE SALUD Y A FINES. 2ª edición. Colombia: Universidad de Antioquia. pp 73.
Medio LIA: El pico y el fondo violeta indican que es positivo en descarboxilación de lisina; negativo en desaminación de lisina y en producción de ácido sulfhídrico.
Medio LIA: El pico y el fondo violeta indican que es positivo en descarboxilación de lisina; negativo en desaminación de lisina y en producción de ácido sulfhídrico.
