Descripción: Diferentes tipos de procesos fermentativos, aplicables en biotecnologia y microbiologia industrial.
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PROCESOS DIDÁCTICOS PARA LAS SESIONESDescripción completa
COLEGIO TABASCO ¡Fieles al deber! Sección Preparatoria QUÍMICO BIÓLOGO
Procesos Microbiolóicos PESE"TA# •
Lara Castañeda Ricardo Angel
No. de lista 16
POFESOES# Q$F$B$ Q$F$B$ Pa%ricia del Car&e' (aci'%o odr)*e+
,illa-er&osa. Tabasco$ Tabasco$ A /0 de 'o1ie&bre de 23/4
Los procesos fermentativos pueden considerarse como reacciones catalíticas las c!lulas " las en#imas promueven la reacción$ pero no son consumidas por ella. La velocidad de una reacción %io&uímica se limita generalmente por un sólo nutriente con los dem's añadidos en e(ceso. )n fermentaciones aeró%icas$ el nutriente limitante es usualmente el o(ígeno* mientras &ue en las anaeró%icas$ el limitante puede ser cual&uiera.
Carac%er)s%icas# )s un e(amen de la%oratorio para verificar si +a" %acterias u otros microorganismos en una muestra de sangre. La ma"oría de los cultivos verifican si +a" %acterias.
Medio de c*l%i1o *%ili+ado# ,riptosa so-a Colum%ia nfusión cere%ro cora#ón /rucella ,ioglicolato Caldo de peptona suplementado
To&a de &*es%ra# Se necesita una muestra de sangre. La sangre se e(trae típicamente de una vena$ por lo general de la parte interior del codo o del dorso de la mano. )l sitio se limpia con un desinfectante 0antis!ptico. )l m!dico envuelve una %anda el'stica alrededor de la parte superior del %ra#o con el fin de aplicar presión en el 'rea " +acer &ue la vena se llene de sangre. Luego$ el m!dico introduce suavemente una agu-a en la vena " recoge la sangre en un frasco +erm!tico o en un tu%o pegado a la agu-a. La %anda el'stica se retira del %ra#o. 2na ve# &ue se +a recogido la muestra de sangre$ se retira la agu-a " se cu%re el sitio de punción para detener cual&uier sangrado.
Procesa&ie'%o de la &*es%ra# Se reali#a asepsia so%re las cone(iones de los cat!teres$ cu%riendo un radio apro(imado de 3 cm. )n todas las direcciones$ tomando como punto de referencia el sitio de cone(ión. Se suspenden moment'neamente las infusiones$ se desconectan las tu%uladuras " se procede a la e(tracción de la sangre$ la cual$ al igual &ue en el +emocultivo$ de%e ser nstant'neamente inoculada en los frascos correspondientes$ para evitar su coagulación. Conectar nuevamente las tu%uladuras " recomen#ar las infusiones.
Carac%er)s%icas# )s un e(amen de la%oratorio para encontrar organismos en las +eces 0materia fecal &ue puedan causar enfermedad " síntomas gastrointestinales.
Medio de c*l%i1o *%ili+ado# Agar ac Con7e" Agar ent!rico 8e7toen Agar C+ristensen 5A
To&a de &*es%ra# Se necesita una muestra de materia fecal. 8a" muc+as formas de recolectar las muestras. 2na forma es recoger las +eces en un envoltorio pl'stico &ue se coloca suelto so%re la ta#a del inodoro " se sostiene en su lugar con el asiento. Luego$ se coloca la muestra en un recipiente limpio. 2n e&uipo para recolección de la muestra trae una gasa especial &ue se usa para recogerla. Luego$ se coloca la muestra en un recipiente limpio. Para %e%!s " niños pe&ueños en pañales$ cu%ra el pañal con un envoltorio pl'stico. ,rate de colocar dic+o envoltorio de tal forma &ue separe las +eces de la orina$ de manera &ue pueda o%tener una me-or muestra.
Procesa&ie'%o de la &*es%ra# Se procede a reali#ar la siem%ra$ en estría m9ltiple$ con la a"uda de un asa de siem%ra$ tomando una pe&ueña cantidad de incóculo de las +eces$ previamente diluido en suero$ teniendo en cuenta de tra%a-ar en condiciones lo m's as!pticas posi%les. Se tapa la placa " se mete en la estufa en un periodo de :;4;< +oras.
Carac%er)s%icas# )s una prue%a de la%oratorio &ue se +ace para identificar microorganismos &ue pueden causar una infección en la garganta. Casi siempre se utili#a para diagnosticar faringitis estreptocócica.
Medio de c*l%i1o *%ili+ado# Colum%ia ANC > 3? sangre de cordero C+ocolate Pol" =ite( /acitracina Sa%ouraud @entamicina Cloranfenicol C+apman
To&a de &*es%ra# A usted se le solicitar' &ue incline la ca%e#a +acia atr's con la %oca %ien a%ierta. )l m!dico frotar' con un +isopo o aplicador de algodón est!ril a lo largo de la parte posterior de la garganta cerca de las amígdalas. 2sted de%e contener las n'useas " cerrar la %oca mientras el aplicador toca esta #ona. )s posi%le &ue el m!dico necesite raspar la parte posterior de la garganta varias veces. )sto me-ora las pro%a%ilidades de detectar %acterias.
Procesa&ie'%o de la &*es%ra# Se procede a sem%rar cada uno de los medios por la t!cnica de los cuatro cuadrantes$ " así o%tener un me-or aislamiento de las colonias. )l primer día se incu%aron todos los medios en aero%iosis$ e(cepto el de agar sangre$ &ue se incu%ó dentro de una campana de anaero%iosis. Para crear dic+o am%iente de anaero%iosis$ se introdu-o en la campana un so%re &ue tiene como función &uedar el o(ígeno disponi%le$ tanto en el espacio interno de la campana como en el de la placa. Para compro%ar &ue estas condiciones anaeró%icas se +an dado$ se introdu-o tam%i!n dentro de la campana una tira$ la cual en un principio es de color a#ul$ " tras el periodo de incu%ación$ si efectivamente se +an dado dic+as condiciones$ esa coloración cam%iar' a transparente. La incu%ación tuvo una duración de :; +oras a B⁰C. )l segundo día$ todos los medios &ue anteriormente fueron incu%ados en aero%iosis$ se incu%aron en anaero%iosis como "a se e(plicó en el p'rrafo anterior. Adem's se sem%ró otra placa de agar sangre$ pero esta ve# se incu%ó en aero%iosis. )sta segunda incu%ación tuvo una duración de :; +oras a B ⁰C. •
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)n segundo lugar$ se reali#ó la visuali#ación macroscópica a las placas en las &ue se produ-o crecimiento %acteriano$ !stas placas corresponden con las dos de agar sangre$ una incu%ada en condiciones de aero%iosis " otra en anaero%iosis. )n am%as placas se o%servó &ue las colonias tenían un +alo de +emólisis correspondiente a la %eta +emólisis. )n un 9ltimo momento se visuali#aron las dos placas con la lu# ultravioleta$ para así diferenciar entre diferentes g!neros de microorganismos.
)n tercer lugar$ se reali#aron dos tinciones de @ram$ una de cada placa$ para así diferenciar tanto la forma$ agrupación$ morfología de estos microorganismos$ así como las características de su pared %acteriana$ @ram positivos o @ram negativos.
Por 9ltimo$ se reali#aron dos prue%as %io&uímicas$ catalasa " o(idasa a las dos placas.
4 Placa aar sa're e' aerobiosis La catalasa se reali#ó con el fin de diferenciar el g!nero Streptococcus del g!nero Staphylococcus; "$ la o(idasa se reali#ó para confirmar el g!nero Streptococcus. 4 Placa aar sa're e' a'aerobiosis la catalasa " la o(idasa se reali#aron para confirmar &ue el microorganismo presente en esta placa es la Veillonella.
Carac%er)s%icas# )l frotis vaginal es una prue%a tan sencilla como fundamental para adelantarse al diagnóstico de una posi%le infección viral o %acteriana en los órganos reproductores femeninos.
Medio de c*l%i1o *%ili+ado# Agar sangre anitol salado accon7e" ,+a"er martin /igg"
To&a de &*es%ra# La muestra de%e tomarse usando un esp!culo vaginal " o%tener el e(udado vaginal con un esco%illón. )n estudios comparando la sensi%ilidad de diferentes locali#aciones$ la toma del e(udado vaginal del forni( posterior es m's sensi%le " e(acta para reali#ar el diagnóstico.
Procesa&ie'%o de la &*es%ra# Para el cultivo$ se toma otro +isopo " se repite la operacion " se deposita en un tu%o con solucion salina esteril$ atemperada a BDC$ se incu%a 1 +r a la misma temperatura$ se toma otro +isopo " se +ace una e(tension en un vidrio llamado portao%-etos$ para la tincion de gram$ luego "a &ue se tomaron las muestras$ se siem%ra el +isopo en el medio de stuart$ en los medios de agar sangre$ manitol salado$ maccon7e"$ t+a"er martin " %igg"$ para aislar estreptococos$ estafilococos$ %acilos gram negativos$ gonococos " levaduras del genero candida$ respectivamente$ en el e(amen en fresco se ve como la cantidad de %acterias presentes " las celulas$ " en la tincion de gram se reconocen &ue tipo de %acterias estan presentes$ mas o menos el resultado esta en dias despues de tomada la muestra
Carac%er)s%icas# )s un e(amen de la%oratorio para anali#ar si +a" %acterias u otros micro%ios en una muestra de orina. Puede ser utili#ado para %uscar una infección urinaria en adultos " niños.
Medio de c*l%i1o *%ili+ado# CL)E CPS CNA Agar nutritivo
To&a de &*es%ra# La ma"oría de las veces$ la muestra se recoger' como una muestra de orina limpia en el consultorio su proveedor de atención m!dica o en la casa. 2sted usar' un e&uipo especial para recolectar la orina. 2na muestra de orina tam%i!n puede tomarse introduciendo una sonda 0tu%o de cauc+o delgada 0cat!ter a trav!s de la uretra +asta la ve-iga. )sto lo +ace alguien en el consultorio de su proveedor de atención m!dica o en el +ospital. La orina se vacía en un recipiente est!ril " luego se retira la sonda. )n raras ocasiones$ su proveedor puede recolectar una muestra de orina introduciendo una agu-a a trav!s de la piel de la parte %a-a del a%domen +asta la ve-iga. La orina se lleva luego a un la%oratorio para determinar si +a" %acterias u +ongos en la orina. Los resultados tardan de :; a ;< +oras.
Procesa&ie'%o de la &*es%ra# Para reali#ar esta prue%a vamos a introducir la tira reactiva dentro del recipiente con la a"uda de unas pin#as. Luego la tira la depositaremos so%re un papel de filtro " procederemos r'pidamente a su lectura$ comparando los colores con los del %ote.
Eespu!s vamos a reali#ar un e(amen microscópico. Para ello vamos a utili#ar la t!cnica de la tinción de @ram para conocer la presencia de %acterias @ram > " @ram4. 2na ve# se +allan autoclavado los medios$ los de-aremos solidificar " reali#aremos la siem%ra con asas desec+a%les en los correspondientes medios de cultivo. Luego los rotulamos con la fec+a " el n9mero de la muestra 0en este caso 1 ó : " los incu%amos a BDC durante :; +oras. Por otra parte utili#aremos la t!cnica +"gicult tpc para o%tener el recuento de %acterias &ue apro(imadamente +a" en la orina$ para ello$ impregnamos el cultivo específico$ colocado en forma de gel$ dentro de la muestra " lo ponemos a cultivar de 1<4:; +oras.