Preguntas HPLC

UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS Nombre: David Lagla Curso: Qui!o "Qu#mi$a Farma$%u!i$a&  Tema:  Tema: 'regu!as 'regu!as ('LC ¿Cuá ¿Cuáll es la dife difere renc ncia ia fund fundam amen enta tall en lo que que se ree reere re a los los detectores que inuye en la fase móvi óvil del HPLC y de CG (cromatografía de gases! E el C) es mu* sim+le e$o!rar de!e$!ores ,ue di-ere$ie la mues!ra de la -ase m.vil *a ,ue es u gas ier!e/ E ('LC es e$esario e$o!rar dis+osi!ivos ,ue di-ere$ie el solu!o e solu$i. de la -ase m.vil/ El m0s sesible es el de!e$!or de 1uores$e$ia 2+ag 3 I!rodu$$i. al ('LC4 ¿Cóm ¿Cómo o se mide mide la eca ecaci cia a de un una a colu column mna a crom cromat atog ogra rafí fía a en el equi"o de HPLC! R: Se mide +or el 5mero de +la!os !e.ri$os +or me!ro La medida $ua!i!a!iva de la e6$ie$ia es el 5mero de +la!os !e.ri$os7 obviame!e el 5mero de +la!os !e.ri$os e-e$!ivos aume!a $o la logi!ud de la $oluma7 +or lo !a!o +ara $om+arar di-ere!es -ases es!a$ioarias es m0s $oveie!e $osiderar la al!ura del +la!o e,uivale!e/ ¿#u$ función cum"le la "recolumna! R: Se la u!ili8a $o el 6 de ,ue se ,uede a9# +ar!#$ulas o su$iedades ,ue +odr#a a-e$!ar a la $oluma/ ¿Para el funcionamiento continuo y en %uenas condiciones de la %om%a que se recomienda! R: Debe 6l!rarse +reviame!e los disolve!es $o u 6l!ro de 7; </= um Si el 6l!ro se blo,uea * la bomba $o!i5a !raba>ado +ero o +uede as+irar disolve!e7 la bomba $ome8ar0 a as+irar aire/ Eso +rodu$ir0 +er!urba$ioes +eri.di$as e la l#ea base7 1u>o ies!able * 9as!a -allo $om+le!o e la bomba ¿Cómo com"ro%ar si un ltro está %loqueado! R: Des$o Des$oe$ e$!0 !0dol dolo o del desgasi6 desgasi6$a $ador dor * ver si sale sale dv/7 dv/7 2*a , u 6l!ro 6l!ro blo,ueado o a-e$!a a la le$!ura de 'resi. e la bomba/4 ¿#u$ característica tienen los disolventes en HPLC! R: Debe ser $om+a!ible $o el de!e$!or/ Adem0s •

'u!os de Ebulli$i. i!ermedios i!ermedios

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Al!a 'ure8a

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Mis$ible $o o!ros solve!es +ara -ormar me8$las 5!iles

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No degradar o disolver la -ase es!a$ioaria

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 Teer ba>a vis$osidad +ara redu$ir las $a#das de +resi.

¿Cuáles son los %enecios de utili&ar metanol en fase reversa!  Tiee u ma*or +oder de disolve!es de sales * rea$!ivos de a+areamie!o i.i$o7 es u solve!e bara!o * +o$o !o?i$o +ara ('LC ¿Para o%tener %uenos resultados "or el m$todo de gradiente que se de%e tomar en cuenta! •

De!ermiar la $om+osi$i. ii$ial * 6al del solve!e/

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A>us!ar el !iem+o del gradie!e/

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De!ermiar la -orma del gradie!e 2lieal7 $.$ava o $ove?a4/

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A>us!ar la velo$idad del 1u>o +ara me>orar la resolu$i./

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Regresar a las $odi$ioes ii$iales la $oluma/

¿Por qu$ se ensanc'an los "icos a medida cromatografíca se des"la&a "or la columna!

que

la

%anda

 Tiee lugar $uado se !ras+or!a el solu!o a !rav%s de !ubos $omo los ,ue se u!ili8a e los sis!emas de i*e$$i.7 e los de!e$!ores * e los !ubos ,ue $oe$!a los dis!i!os $om+oe!es del sis!ema El esa$9amie!o +roviee de la di-ere!e velo$idad de 1u>o ,ue 9a* e!re las $a+as de l#,uido ad*a$e!es a las +aredes del !ubo * las del $e!ro/ Como $ose$ue$ia7 la +ar!e $e!ral de ua bada de solu!o se mueve $o m0s ra+ide8 ,ue la +eri-eria/ ¿ que se denomina una columna de guarda o "recolumna! Ua $oluma rellea de -ase es!a$ioaria dis+ues!a a!es de la $oluma aal#!i$a +ara evi!ar la disolu$i. * de!erioro de %s!a * debe es!ar $om+ues!a del mismo ma!eria ,ue la $oluma )na muestra de un ácido d$%il tiene un "*a de +,-. /i queremos aumentar su retención so%re una columna de octadecíl sílice ¿#u$ de%eríamos 'acer!  Tam+oar a +( @ ;7= la -ase m.vil U rago de +( e!re ; * 3 suele o-re$er las $odi$ioes de re!e$i. m0s es!ables -re!e a +e,ueos $ambios de +( * es el re$omedado $omo +u!o

de +ar!ida del desarrollo de m%!odos +ara la ma*or#a de las mues!ras7 i$luidos los $om+ues!os b0si$os * los 0$idos d%biles !#+i$os/

La selectividad o factor de se"aración en HPLC está relacionado! Co la a!urale8a de la -ase m.vil * de la -ase es!a$ioaria demás de sistema de inyección "or 0eringas como se lo "uede rem"la&ar! Se lo +uede 9a$er media!e v0lvulas de i*e$$i. o loo+ ,ue so de 1u>o $os!a!e * de+ede de la medida del loo+ ,ue se $oe$!e e el e,ui+o/