PRÁCTICA N 1 Bioquimica Microbiana

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Estudio de la bioquímica microbiana

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INFORME PRACTICA 8 -

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Universidad Nacional de San Agustín de Arequipa Facultad de Ingeniería de Procesos Escuela Profesional de Ingeniería de Industria Alimentaria Asignatura: Biotecnología de Alimentos Docente: Ing. Sonia Jackeline Zanabria Gálvez, Mg. Sc.

PRÁCTICA N° 1 BIOQUÍMICA MICROBIANA I.

OBJETIVOS 

Establecer la bioquímica de los microorganismos a través del proces reproductivo de Saccharomyces Cerevisiae.



Establecer la bioquímica microbiana a través del proceso fermentativo d Saccharomyces Cerevisiae.

II. FUNDAMENTO TEÓRICO Levaduras. Generalidades:

Levadura es un nombre genérico que agrupa a una variedad de organismo

unicelulares, incluyendo especies patógenas para plantas y animales, así com especies no solamente inocuas sino de gran utilidad.

Las levaduras han sido utilizadas, desde la antigüedad, en la elaboración de cerveza

pan y vino, pero los fundamentos científicos de su cultivo y uso en grande

cantidades fueron descubiertos por el microbiólogo fr ancés Louis Pasteur en el sig

XIX (10 y 11). Se conocen cepas diferentes y específicas para cada labor (panificació destilería, producción de extractos de levadura y uso en animales).

Las levaduras son organismos eucariotas con gran diversidad respecto a su tamañ

forma y color. Son consideradas hongos unicelulares y generalmente sus células so  Sign up to vote on this title

ovaladas, pero también pueden encontrarse en forma o elíptic Usefulesférica, Notcilíndrica useful



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Son mayores que las bacterias, alcanzando un diámetro máximo de entre cuatro

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Saccharomyces cerevisiae. Características generales:

Saccharomyces cerevisiae, es una levadura que constituye el grupo d microorganismos más íntimamente asociado al progreso y bienestar de humanidad; su nombre deriva del vocablo Saccharo (azúcar), myces (hongo)

cerevisiae (cerveza). Es una levadura heterótrofa, que obtiene la energía a partir d

la glucosa y tiene una elevada capacidad fermentativa. Puede aislarse con facilida

en plantas y tierra, así como del tracto gastrointestinal y genital humano. Es u

producto del proceso de producción de alcohol, que a su vez constituye una valio

fuente de proteínas y vitaminas para la alimentación animal, citado por Solano Carro. Por su parte García, destaca que en la formulación de piensos para aves

cerdos se emplea la levadura de recuperación de la fermentación alcohólica, por s un componente rico en proteínas. El uso más extendido está enmarcado en

panificación y en las industrias de fabricación de cerveza, vinos y alcohol. La levadu

Reading Preview inactivada por temperaturaYou're se usa como afuente de nutrimentos en alimentació

Unlock full access with a free trial. animal y humana, tanto en forma de levadura íntegra como a partir de sus derivado

Download With Free Trial

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Sign up vote on this title Factores a tener en cuenta para el crecimiento y todesarrollo de la levadur



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 Not useful

Presión osmótica: la nutrición de la levadura es un proceso puramente osmótico, e

importante evitar medios hipertónicos o hipotónicos para evitar la plasmoptisis

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Desecación: es uno de los principales agentes que inhiben las actividades desarrollo de los microorganismos.

Luz: en general la luz es perjudicial para los microorganismos que carecen d

clorofila, o cualquier otro pigmento que les permita usar la energía de las radiacion en el proceso de fotosíntesis.

pH: el pH óptimo en el cual se desarrollan mejor los microorganismos, está entre

y 5. Las levaduras tienen la ventaja de soportar, medios más ácidos, que otro

microorganismos, lo que es aprovechado en los procesos industriales para manten el medio controlado de bacterias que puedan competir por el sustrato.

Alcohol: el efecto del etanol en la célula es una combinación de inhibición d crecimiento y disminución de la viabilidad, puede actuar como inhibidor de

fermentación a partir de un 8 %. Riegel afirma, que no es recomendable terminar fermentación con un grado alcohólico muy elevado.

III. MATERIALES Y MÉTODOSYou're Reading a Preview full access with a free trial. 3.1 Material, InstrumentalUnlock y Equipos:

Materiales:




Algarrobina



Levadura (Saccharomyces cerevisiae)



Peptona



Azucares: glucosa, fructosa, maltosa, sacarosa.



Agua destilada

Equipos e instrumental: 

Matraz de 500 ml

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Universidad Nacional de San Agustín de Arequipa Facultad de Ingeniería de Procesos Escuela Profesional de Ingeniería de Industria Alimentaria Asignatura: Biotecnología de Alimentos Docente: Ing. Sonia Jackeline Zanabria Gálvez, Mg. Sc. 

Termómetro



Centrífuga



Baño María (shaker)



Equipo de destilación



Balanza



Cocina



Mechero



Refractómetro



Arena bacteriológica

3.2 Procedimiento: a) Caracterización de levaduras: 

Preparar el medio de incubación; midiendo 110 ml de agua destilada agregarle 1% de peptona (1.1 gr).



You're Reading a Previewen 9 tubos de ensayo y lueg Separar 10 ml de la preparación anterior

Unlock full access with a free trial. agregar a cada tubo 1% de cada tipo de azúcar; en este caso se trabajó co

cada azúcar por duplicado. uno Free de los tubos no se le agregara ningun DownloadA With Trial

azúcar y será considerado como blanco para hacer los comparativo correspondientes. 

A cada tubo le será colocado tapones y será cubierto con papel Graf la par

superior del tubo, para mantener el papel se amarrará con pabilo d algodón. 




Llevar a esterilizar por 15 minutos, luego ello bajar la temperatura de useful deUseful  Not tubos a 30°C para inocular el 1% de levadura (0.1 gr) a cada tubo.

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Con el refractómetro medir los grados °Brix de la algarrobina, y según

resultado obtenido, hacer los cálculos para estandarizar el medio a 18 °Br de la algarrobina en un volumen de 300 ml. 

Rectificar el pH a 4.5, de ser necesario agregar ácido cítrico para obtener pH deseado.



Separar el 5 % del medio en un matraz de menor volumen pa posteriormente activar en él la levadura.



Ambos matraces llevar a esterilización por 15 minutos.



Se inocula 1% de levadura (3gr) en el matraz pequeño; para inocular levadura el medio debe estar a una temperatura de 30 °C. Agregar levadura activada en el primer matraz.



Llevar a incubación a una temperatura de 30 °C por 4 días.



Luego de transcurrido los 4 días retirar de la estufa y mantener las muestr en refrigeración.

You're Reading a Preview

Unlock full access with a free trial. Segunda parte: Obtención de Biomasa y Alcohol



La muestra refrigerada será centrifugada por 15 minutos. Se decantará Download With Free Trial

sobrenadante y el precipitado, para ser pesados respectivamente y a registrar la cantidad total de biomasa que se obtuvo al final del proceso. 

Separar 3 gr de biomasa y 3 gr de sobrenadante, colocarlos en dos placa

Petri, más 3 gr de arena bacteriológica en cada placa luego llevarlos a estu para obtener la cantidad de materia en base seca de cada muestra.  Sign up to vote on this title



Por otro lado llevar a destilación 200 ml  delUseful sobrenadante, para verificar  Not useful el alcoholímetro, el porcentaje de alcohol producido.

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10 ml de caldo nutritivo para cada tubo. 1% de azúcar = 0.1 gr de cada azúcar a usar. 1% de levadura = 0.1 gr Saccharomyces Cerevisiae para cada tubo. Resultado visual de la producción de CO2 de las muestras y el blanco:

Imagen 1: muestras de azúcares con su producción de CO2

You're Reading a Preview Unlock full access with a free trial. Imagen 2: muestra "blanco" Download

Imagen 3: Muestra por duplicado de

With Free Trial Sacarosa y su producción de CO2


 Imagen 4: Muestra por duplicado de Glucosa y su producción de CO2

Useful

 Not useful

Imagen 5: Muestra por duplicado de Fructosa y su producción de CO2

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Según el criterio de comparación visual se pudo determinar que: la sacaro

tuvo mayo producción de CO2, seguido de la glucosa; los azucares qu registraron menor producción de CO2 fueron la maltosa y la fructosa. blanco no registró producción de CO2 . 

El desprendimiento de CO2 como desecho metabólico de la fermentació

nos ayuda de manera importante a entender el funcionamiento de es proceso metabólico en S. cerevisiae, ya que este producto evidencia

cantidad de sustrato fermentado por la levadura, lo que ofrece informació valiosa sobre el alimento que favorece el crecimiento de este organismo. b) Producción de Biomasa y Alcohol: Datos de los pesos y volúmenes de los materiales: 

Medición con Refractómetro de la algarrobina = 78.9° Brix.



Para un volumen de 300 ml de sustrato con 18° Brix y 4.5 de pH: You're Reading a Preview Cuadrado de Pearson: Unlock full access with a free trial. 78.9 ° Brix

18

Download With Free Trial 18° Brix

0° Brix

60.9 78.9

18 x 100 78.9

= 22.81 %

60.9 x 100 = 77.19 % Sign up to vote on this title 78.9



Useful

22.81% x 300 ml = 68.43 ml (algarrobina)

 Not useful

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Entradas y salidas según los procesos realizados:

Entra

Proceso

Sale

271.33 gr

Incubación

274.05 gr

274.05 gr

Centrifugación

200 ml

Destilación



Sólido = 9.88 gr Líquido = 267.17 gr 160 ml

Controles realizados:

Control

Observaciones La formación de gas por la producción

Producción de CO2

de CO2 es debido a la fermentación por el proceso anaeróbico de las levaduras. 

En la esterilización.

En la incubación. You're Reading a Preview Tiempos

centrifugación.  a En Unlock full access with free la trial.  En la estufa. Download With Free Trial  En la inoculación de la levadura a

30° C, ya que si es mayor la levadura se inactivará. Temperatura



En la incubación, a 30° C para un correcto trabajo de la levadura Sign up to vote on this title

durante este proceso.





Useful

En la estufa.

 Not useful

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



Peso de placa = 43.62 gr



Peso de placa + biomasa + arena = 49.62 gr



Peso Final total= 47.28 gr



Peso en base seca de la Biomasa = 2.34 gr

…..

(a)

Sobrenadante: o

Peso de placa = 43.52 gr

o

Peso de placa + sobrenadante + arena = 49.52 gr

o

Peso Final total= 46.88 gr

o

Peso en base seca del sobrenadante= 2.64 gr

…..

(b)

Masa seca total = a+b M.s.T = 4.98 gr/L Determinación de alcohol: 

You're Reading a Preview Se mandó a destilación 200 ml de sobrenadante, donde al final del Unlock with a free trial. proceso se obtuvo 160full mlaccess de alcohol.



Con el alcoholímetro se midió los grados alcohólicos de la muestra, Download With Free Trial dando una lectura de 7° de alcohol.



El rendimiento de alcohol fue de 80% obtenido.

c) Puntos críticos observados durante el proceso: 

Durante el proceso de inoculación de la levadura, se debe cuidar que el

ambiente esté esterilizado, se debe trabajar con la indumentaria adecuada  Sign up to vote on this title

para no alterar los resultados del proceso.  Useful 

 Not useful

Es importante controlar la temperatura al momento de la inoculación de la



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V. CONCLUSIONES

Se pudo observar el funcionamiento del proceso metabólico de cada azúca según la producción de CO2.

Se determinó la producción de biomasa por la levadura Saccharomyce Cerevisiae.

Se pudo cuantificar la producción de biomasa y sobrenadante obtenidos duran el proceso.

VI. RECOMENDACIONES 

Trabajar todo el Proceso cuidando la esterilidad del ambiente, para no alterar lo resultados.

VII. BIBLIOGRAFIA 

Artículo: Levadura Saccharomyces cerevisiae y la producción de alcohol. Revisió

bibliográfica / Caridad Suárez-Machín, Norge Antonio Garrido-Carraler

You're ReadingInstituto a Preview Carmen Amarilys Guevara-Rodríguez Cubano de Investigaciones sob Unlock full access with a free trial. los Derivados de la Caña de Azúcar (ICIDCA). 

http://www.feriadelasciencias.unam.mx/anteriores/feria21/feria283_01_efecto_ Download With Free Trial el_sustrato_en_la_liberacion_de_co2_por_s_.pdf.


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VIII.ANEXOS 8.1 Galería Fotográfica

Imagen 8:Agua Peptonada

Imagen 9: Inoculación de la Levadura

You're Reading a Preview Unlock full access with a free trial.

Imagen 10: Diales conteniendo la biomasa y el sobrenadante

Imagen 11: Preparación de Muestra para ser llevada a estufa


Sign up to vote on this title Useful Imagen 12: Lectura  de Alcohol

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