SEMINARIO LIPIDOS de usmp biologiaDescripción completa
PRACTICA N° 2 ANALISIS DE LIPIDOS
Objetivo Determinar Determin ar el índice de saponifcación de los aceites Dete Determinar el índice de acidez Determinación de solubilidad Fundamento Fundamento teórico Parte e!erimenta" #ateria" Tubos Tubos de ensayo ensayo Pipetas Mechero Matraz Beaker Gradilla
Reactivo$ Alcohol Acetona Éter dieltílico loro!ormo Bisul!ato pot"sico #$%&'() *enol!taleína al +, $'% -.+ / &olución de $'% alcohólico -.0 / %l -.0 / Aceite de oli1a Mante2uilla u otra 3rasa
E%PERI#ENTO N° &' So"ubi"idad de "o$ "(!ido$ 4os 3rupos principales de los lípidos tienen características di!erentes y esta 5propiedad se usa en su e6tracción y purifcación a partir de materiales bioló3icos7 4a mayoría de los lípidos son solubles en etanol al 80, paro !orman una emulsión de 3otas pe2ue9as cuando se les a3re3a a3ua7 :sto a la suspensión una apariencia lechosa característica y constituye una prueba muy sencilla para 3rasas Procedimiento Prepare el si3uiente sistema T;B'& + < = ( 0 A3ua destilada <7> > > > #ml) Alcohol !rio #ml) > <7> > > Alcohol caliente > > <7> > #ml) Éter #ml) > > > <7> Acetona #ml) > > > > <7Aceite de oli1a (7- (7- (7- (7- (7#ml) A3itar ener3?ticamente. de@ar en reposo7 'bser1ar y anotar los resultados obtenidos en cada uno de los tubos7 )A *u+ $e debe "a $o"ubi"idad o in$o"ubi"idad de" aceite de o"iva en cada uno de "o$ $o"vente$ uti"i,ado$)En cu." de "o$ $o"vente$ e$ m.$ $o"ub"e e" aceite- )Por *u+E%PERI#ENTO N° 2 Prueba !ara /"icero" uando se calienta 3licerol con bisul!ato pot"sico se produce deshidratación y se !orma el aldehído acroleína. el cual tiene un olor característico7 :sta reacción acurre cuando tanto e 3licerol libre como con los esteres de 3licerol Procedimiento olo2ue una capa de apro6imadamente -70 cm de $%&'( en un tubo de ensayo a3re3ue 0 3otas de aceite de oli1a. cubra con mas $%&'( y caliente lentamente en un mechero #e1itar 2ue se carbonice)7 /ote el olor picante característico de la acroleína7 :n otro tubo en lu3ar de aceite a3re3ue 0 3otas de 3licerol y proceda como en el caso anterior7 :scriba la reacción mediante el cual el 3licerol se trans!orma en acroleína7 E%PERI#ENTO N° 0 Determinación de" va"or de acide, de una /ra$a 4as 3rasas almacenadas pueden su!rir enranciamiento debido a la o6idación de los dobles enlaces para !ormar peró6idos y a su hidrólisis por microor3anismos con liberación de "cidos 3rasos7 4a cantidad de "cidos 3rasos libres da por lo tanto un índice de la !rescura y la calidad de la 3rasa
:l presente e6perimento consiste en disol1er la muestra con un sol1ente neutralizado y en titular la acidez con una solución de $'% de normalidad conocida7 :s decir se titulan los "cidos 3rasos libres Procedimiento Proceder de la si3uiente manera +7 /eutralización de los sol1entes en un matraz se mezclan 0 ml de cloro!ormo y +- ml de alcohol. se a3re3an ( 3otas de !enol!taleína. se3uidamente se titula con $'% hasta 2ue aparezca un le1e color rosado 2ue persista durante =- se3undos7 <7 :n un Beaker pre1iamente tratado pesar + 3 de 3rasa #aceite de oli1a u otra 3rasa). a3re3ar la mezcla de alcohol>cloro!ormo neutralizado. mezclar bien la 3rasa con los disol1entes7 &e a3re3a ( 3otas de !enol!taleína y se 1alora inmediatamente con $'% hasta 2ue el color rosado p"lido permanezca por m"s de =- se3undos7 Anote el nmero de mililitros 3astados de "lcali7 Muestra
Aceite rancio Gasto de $'% -7C #ml) A E
de
( n ) ( 0.056 ) ( 1000 ) P
oli1a Aceite !resco -78
E
de
oli1a
( n ) (5.6 ) P
Donde A E índice de acidez nE ml de $'% -7+ / usados en la titulación +ml de esta solución es i3ual a -7--0C 3 de $'% P E peso de la muestra problema &i se desea e6presar en t?rminos de , de los "cidos 3rasos libres. re!erido a acido oleico con los mismos datos tendremos
( n ) (0.0282 ) ( n ) (2.82) 100 ∗ , de acidez E E P P -7-
tri3lic?rido re2uiere = mol?culas de $'% #PM E 0C). para saponifcarse independientemente del peso molecular de los acido 3rasos presentes. este hecho ha sido usado para tener una in!ormación del peso molecular medio de los acido 3rasos presente en una 3rasa7 Procedimiento Proceda como se indica a continuación Beaker + < = Aceite de oli1a #3) +7> > Mante2uilla #3) > +7> &ol7 $'% en alcohol +-7 +-7 +-7 -70 / olocar los beakers en ba9o de a3ua hir1iente durante =- o (0 minutos. a3re3ar continuamente para !a1orecer un me@or contacto7 Transcurrido el tiempo indicado se de@a en!riar7 &e3uidamente se a3re3a ( 3otas de !enol!taleína en cada beaker y se titula con %l Anotar los mililitros 3astados en cada una de las titulaciones7 Aceite oli1a
de mante2uilla
&ol7 $'% alcohol
en
Gasto de %l #ml) alcule el índice de saponifcación usando la si3uiente !órmula & E
( V −V ´ ) (28.05 ) P
Donde & E índice de saponifcación E ml 3astados en el blanco 5E ml 3astados en la muestra +ml de solución de $'% E -7
( 3 ) ( 56 )( 1000) IS
)Cu." e$ e" de "a /ra$a uti"i,ada- )Cu." e$ $u uti"idadC7ESTIONARIO &8
2='4c<>;&&&4 28 Durante "a reacción de $a!oni6cación )*u+ ti!io de en"ace$ de "o$ tri/"ic+rido$ $e rom!en- )Por *u+ $e u$a $o"ución a"co?ó"ica de @O08 7na mue$tra de 2>= m/ de aceite !uro de o"iva re*uiere 4B8> m/ de @O !ara $er $a!oni6cada com!"etamente8 Ca"cu"ar e" !e$o mo"ecu"ar medio de "o$ tri/"ic+rido$ en e" aceite de o"iva 48 E" (ndice de $a!oni6cación de una mue$tra de /ra$a de "a mante*ui""a e$ 20= m/8 Ca"cu"ar e" !e$o mo"ecu"ar medio de "o$ tri/"ic+rido$ !re$ente$ >8 E" (ndice de 3odo de una mue$tra de /ra$a de "a mante*ui""a e$ ;8 Si e" (ndice de $a!oni6cación de "a mue$tra e$ 2&=8 Cuanto$ dob"e$ en"ace$ como !romedio ?a3 en una mo"+cu"a de tri/"ic+ridoC7 7n tri/"ic+rido $aturado $im!"e 3 de$conocido tiene un (ndice de $a!oni6cación de &;:8 )Cu." e$ $u !e$o mo"ecu"ar )Cómo $e ""amad8
