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Capìtulo 13: ¡Positivo! Pruebas diagnósticas de la infección VIH/SIDA
¡Positivo! Pruebas diagnósticas de la infeccíon VIH/SIDA
vez, se recomienda una consejería pre-prueba y post-prueba apropiada, apropiada, mediante la cual se educa en prevención y tratamiento de la enfermedad.
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xisten dos procedimientos básicos para el diagnóstico por el laboratorio de la infección VIH/SIDA: el uno parte del proceso de detección de los anticuerpos en contra del VIH en sangre y diversos fluidos del cuerpo humano, en tanto que el otro detecta las estructuras microscópicas microscópicas del virus. En el entorno global se han estandarizado dos tipos de exámenes encargados de la detección de anticuerpos en la sangre: el examen exame n ELISA y Wester estern n Blot. A la vez se ha diseñado un examen para cuantificar la unidades de virus circulantes en el torrente sanguíneo, la llamada Carga Viral. Por último, no debemos olvidar que un examen fundamental para definir el grado de inmunodeficiencia y la evolución clínica de la infección VIH es el contaje absoluto de Células CD4 circulantes. Consentimiento Informado: ¡Un derecho a cumplir!
Toda prueba relacionada con el diagnóstico de la infección VIH/SIDA debe ser voluntaria y un consentimiento informado por parte del paciente, generalmente es requerido; cuya firma es la garantía del cumplimiento de los derechos que tenemos los ciudadanos en relación al diagnóstico del VIH y a la confidencialidad de sus resultados. A la
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Figura 13.1. Se debe exigir la firma de un consentimiento informado para la realización de las pruebas de diagnóstico del VIH/SIDA
Las Pruebas ELISA y Western Blot: detectando los anticuerpos
La pruebas encargadas de evidenciar los anticuerpos circulantes se han desarrollado para medir anticuerpos humanos generados en contra de varios componentes estructurales del VIH (seroconversión). Dentro de estas pruebas tenemos dos análisis muy conocidos en el mundo entero:
ELISA (Enzyme-Linked Immunoabsorbent Assay). Es una prueba cuyo cuyo objetivo es el tamizaje de portadores portadores del VIH con una prueba prueba sanguínea de bajo costo. La positividad de esta prueba prueba obliga a la realización de una una prueba confirmatoria.
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Figura 13.2. Esquema de una prueba ELISA
Western Blot. Esta prueba de carácter confirmatorio, y por lo tanto más costosa, detecta anticuerpos en contra de las proteínas virales virales del núcleo, la polimerasa polimerasa y la envoltura. Es una prueba muy sensi ble (detecta mayor número de verdaderos positivos) y específica (detecta mayor número de verdaderos negativos) con un índice de error menor a 1 x 10000 pruebas.
anticuerpos detectables (Falso Negativo), debido a que éstos aun no se han generado luego de la exposición al VIH. Los anticuer pos en la infección VIH se tornan positivos en un período no menor de 10 –14 días, pero virtualmente todos los pacientes infectados seroconvierten dentro de seis meses. Estos pacientes se les debe realizar rea lizar una prueba de detección de Carga Viral Pruebas Rápidas. Existen tres tipos de pruebas sanguíneas sanguíneas (serológicas) denominadas rápidas y cuyos resultados se disponen en no más de 30 minutos y tiene una alta sensibilidad y especificidad. Se las aplica en situaciones especiales como servicios de urgencias, urgencias, centros de trauma, campañas de diagnóstico etc. Por último es necesario mencionar mencionar que se han desarrollado algunas pruebas para detectar los anticuerpos en contra del VIH en orina, saliva y fluidos genitales, pero que no se comercializan en nuestro medio.
Figura 13.3. Prueba de Wester Blot con sus respectivas bandas de positividad
“El período de Ventana”. Se denomina al período de tiempo, al inicio de la infección VIH, en que el pacienpaciente a pesar de estar infectado no presenta
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Carga Viral: Viral: contando el número número de virus
El análisis de carga viral mide la cantidad de virus circulantes en la sangre y se expresan como número de copias por mililitro (ml). La detección de la
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carga viral es un método que sirve para el diagnóstico precoz de la infección VIH aguda, predecir la probabilidad de transmisión, predecir la progresión de los pacientes infectados crónicamente y para el monitoreo terapéutico. Se cuantifica la carga carga viral hasta un tope tope máximo que oscila en varios millones de copias y el mínimo depende de la sensibilidad de la prue ba, siendo en la actualidad de hasta 50 copias/ ml y de 5 copias /ml en pruebas pruebas de investigación. No hay que olvidar que los laboratorios también reportan la carga viral en una escala logarítmica de base 10 que se utiliza de mejor manera para vigilar la respuesta al tratamiento antiretroviral. Se han desarrollado tres técnicas para cuantificar los virus a partir de sus ácidos nucleicos:
-PCR (Polymerase Chain Reaction). Utiliza una enzima para multiplicar al VIH de la muestra de sangre. Luego una reacción química marca al virus. Los marcadores son medidos y se calcula la cantidad de virus. Este método es el más usado en nuestro medio.
Antígeno p 24. Cabe añadir que existe una prueba que detecta el antígeno p24 a través de la cuantificación de su antigenemia. Esta prue ba es barata y permite una detección precoz de una de las partículas partículas virales del VIH.
CD4: Cuantificando nuestras defensas
El cuantificar las células CD4 encargadas de la inmunidad celular es un análisis que nos permite evaluar el pronóstico de la progresión del enfermo al SIDA o a la muerte, definir el estadío y diagnóstico diferencial en un paciente asintomático, y definir las decisiones terapéuticas en relación al tratamiento antiviral o profilaxis para las enfermedades oportunistas. La técnica recomendada para esta prueba usa un analizador hematológico de citometría de flujo, que cuantifica a los CD4 en un rango de 800 a 1050 células/ml. No debemos olvidar que un control control de CD4 puede tener una variabilidad analítica de alrededor de +/- 50 células en cada medición, por por lo que es necesario ser muy cuidadoso al interpretar las oscilaciones pequeñas en el contaje de CD4. El contaje de CD4 debe realizarse cada 3-6 meses en pacientes con o sin tratamiento. Algunos laboratorios expresan la cuantificación de los CD4 en porcentaje como en la siguiente tabla:
Figura 13.4 Máquina para realización de PCR del VIH/SIDA
-bDNA (branched DNA). Combina la muestra con un material que emite luz. Este material se conecta con las partículas del VIH. Luego se mide la cantidad de luz y se calcula la cantidad de virus. -NASBA (Amplificación Basada en la Secuencia del Acido Nucleico). Amplifica las proteínas virales para producir un conteo.
Tabla 13.1. Correlación de contaje absoluto y porcentual de las Células CD4
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