LABORATORIO N° 3 1. TEMA: MONTAJE DE PREPARACIONES PREPARACIONES FRESCAS Y TEMPORALES 2. OBJETIVOS: 2.1. OBJETIVOS GENERALES
Aprender a montar montar preparaciones preparaciones frescas frescas y temporales. temporales. Identificar cada una de las estructuras en cada placa.
2.2. OBJETIVOS ESPECÍFICOS
Observar los microorganismos existentes en las muestras realizadas. Analizar si existe vida en muestras muestras de agua estancada. estancada. Aprender a realizar una preparación temporal, útil en la observación de diversos tipos de muestras.
3. MARCO TEÓRICO: Para realizar una preparación microscópica, la muestra se coloca sobre un portaobjetos, al que habremos añadido el medio de montaje adecuado, y sobre ella se dispone el cubreobjetos. Los medios de montaje pueden ser líquidos (agua, agua-glicerina) o sólidos (bálsamo de Canadá: resina de Abies balsámica; gelatina-glicerinada; resinas sintéticas: entellan). (Siurana, Roselló, & García, 2004) Existen dos tipos de preparaciones microscópicas, microscópicas, éstas corresponden a las preparaciones permanentes y a las preparaciones preparaciones temporales. Ambas deben ser lo más delgadas posible para dejar pasar la luz a través de él y así lograr una buena observación
Preparaciones temporales Los preparados temporales se realizan generalmente con agua destilada, glicerina o simplemente agua corriente (un medio liquido), la utilidad es simple observar alguna estructura u organismo "in vivo", por ejemplo para observar los protozoos que habitan en cuerpos de agua dulce se utiliza estos preparados; solo se toma una gota de agua de ese cuerpo de agua, se la coloca entre porta y cubreobjetos y se la mira al microscopio, tienen una duración limitada. Las preparaciones temporales corresponden a cortes frescos del material a observar, los que se se realizan realizan en el momento y tienen tienen una una corta corta duración. duración. Una vez realizados realizados los cortes, se coloca una gota de agua en un portaobjetos, y en ella se ubica un trozo del material a observar, observar, el que debe quedar completamente cubierto cubierto por el agua. Sobre esta preparación se coloca cuidadosamente un cubreobjetos, evitando la formación de burbujas que interfieren interfieren en la observación microscópica. microscópica. Finalmente, se elimina elimina exceso de agua, y la preparación puede teñirse para ser observada.
Preparaciones Preparaciones fijas
Los preparados definitivos requieren de un medio de montaje, como alguna resina, que se endurezca, (por ejemplo utilizar Hoyer) que depende del tipo de preparado que estés realizando y del organismos con el que estés trabajando. Se utilizan para observar en detalle estructuras que de otro modo no pueden ser vistas (puede ser porque requieren de inmersión) o porque se requiere de tinciones o cortes muy finos. También se utilizan para albergar organismos en colecciones permanentes. Las preparaciones permanentes son aquellas que se han sometido a un proceso largo de preparación, el que permite que se mantengan en buenas condiciones para su observación por periodos prolongados de tiempo. La preparación de estas muestras incluye etapas de fijación del material, deshidratación, inclusión en parafina, corte de la muestra en capas muy finas con un micrótomo, colocación de estas capas que contienen la muestra en un portaobjetos, disolución de la parafina, tinción de la muestra para contrastar las diferentes estructuras celulares y colocación de un cubre objetos para proteger la preparación. Existen numerosas tinciones que se utilizan en microscopía y permiten una mejor observación de las estructuras celulares al contrastar en forma selectiva moléculas determinadas. Generalmente se usan diferentes colorantes, algunos ejemplos de ellos son el lugol que tiñe los granos de almidón de color azul-morado, la floroglucina que tiñe de rojo violeta las paredes celulares lignificadas, el azul de metileno que t iñe el protoplasma y las paredes celulares celulósicas, etc.
4. PARTE EXPERIMENTAL 4.1 MATERIALES Y REACTIVOS:
4.2
Microscopio Porta y cubreobjetos Cotonete Barniz de uñas Solución fisiológica Aguja de disección Agua de charco Moho de pan o de fruta
PROCEDIMIENTO
MONTAJE DE PREPARACIONES FRESCAS Y TEMPORALES
PARA PREPARACIONES FRESCAS
Una gota de agua de charco.
COLOCAR O Una muestra pequeña de moho.
SI EL MATERIAL ES EL MOHO
COLOCAR sobre la muestra una gota de suero fisiológico.
1 2
Dejar
CUBRIR la muestra con el
suavemente para que
cubreobjetos
no
Duración
1 hora
PARA PREPARACIONES TEMPORALES 1
COLOCAR una muestra sobre el portaobjetos y añadir agua o
Duración
colorante. Un mes o mas
dependiendo de
2
la
CUBRIR la muestra con el cubreobjetos
3
CUBRIR los 4 lados del cubreobjetos con el barniz de uñas.
4
caer
Dejar secar
se
formen
4.3 OBSERVACIONES Y GRÁFICOS
4.4
CONCLUSIONES
Identificamos cada una de las estructuras en cada placa ya que en ellas contenían organismos vivos con diferentes formas de vida. Observamos los microorganismos existentes en las muestras realizadas, su forma verdadera. Analizamos y concluimos que si existe vida en las muestras de agua estancada.
5. Bibliografía Báez Pacheco, J. W. (2008). Pre paración de placas histológicas. En Laboratorio de Histología. Scribd . (23 de 01 de 2012). Obtenido de es.scribd.com/doc/79141257/5/Preparaciones-
temporales Siurana, P. S., Roselló, J., & García, F. (2004). Tecnicas Histológicas: La preparación microscópica.Microtomo de congelación. En P. Suirana, Practicas de Biología y Botanica. Valencia: Universidad Politecnica de Valencia.
6. CUESTIONARIO 1. ¿Qué tipos de asociaciones biológicas existen? Existen dos tipos asociaciones intraespecíficas e interespecíficas: Las asociaciones intraespecíficas se da entre los organismos de la misma especie. En esta asociación tienden a reunirse para facilitar la reproducción y disponer de más territorio y alimentos. Pueden ser:
Familiares relaciones de reproducción y cuidado. Gregarias sin relaciones de parentesco, pero con objetos de protección mutua frente a los depredadores y la búsqueda de alimento. Estatales división del trabajo entre los individuos que integran la población. Coloniales la población de individuos unidos físicamente entre si forman un organismo comun.
Territoriales inclinación que tiene cada individuo de la población a ocupar un espacio y defenderlo de los demás individuos de su especie.
Las asociaciones interespecíficas, se da entre organismos de distinta especie, que pueden realizarse en diversos grados, se distinguen, en orden creciente, el comensalismo, el inquilinismo , la simbiosis y el parasitismo. En el comensalismo, el comensal vive sobre el cuerpo o bien en el interior del huésped, alimentándose de los desechos de éste, como hacen las bacterias que viven en las heces intestinales. En el inquilinismo, el inquilino busca guarida o protección, como es el caso del pez aguja, Fierasfer acus , que se aloja al menor peligro dentro de las holoturias, y los cangrejos que buscan refugio dentro de los mejillones. La simbiosis consiste en la asociación de dos organismos con beneficio mutuo, como sucede en los líquenes, formados por la unión de un alga verde y un hongo; el alga sintetiza materia orgánica que pasa al hongo, mientras que éste proporciona al alga humedad y sales.
2. Utilidad de las preparaciones frescas, temporales y definitivas, ventajas y desventajas de cada una de ellas Preparaciones frescas: en las preparaciones frescas se utilizan una porción del material vivo, ya sea animal o vegetal, o una gota con microorganismos. Las desventajas son más que las ventajas entre las desventajas figura que su tiempo de duración no es mayor de una hora puesto que el calor desprendido por la fuente de iluminación evapora rápidamente la muestra.
Preparaciones temporales: se realizan generalmente con agua destilada, glicerina o simplemente agua corriente (un medio liquido), la ventaja es simple observar alguna estructura u organismo "en vivo", por ejemplo para observar los protozoos que habitan en cuerpos de agua dulce se utiliza estos preparados; solo se toma una gota de agua de ese cuerpo de agua, se la coloca entre porta y cubreobjetos y se la mira al microscopio, la desventaja es que tienen una duración limitada y si no se cubre cuidadosamente con el cubreobjetos se forman burbujas lo que impide alcanzar el éxito de la observación.
Preparaciones definitivas: los preparados definitivos requieren de un medio de montaje, como alguna resina, que se endurezca, (por ejemplo utilizar Hoyer) que depende del tipo de preparado que estés realizando y del organismos con el que estés trabajando. Como ventaja nos permite observar en detalle estructuras que de otro modo no pueden ser vistas (puede ser porque requieren de inmersión) o porque se requiere de tinciones o cortes muy finos. También se utilizan para albergar organismos en colecciones permanentes. El tiempo de duración es más largo que en las preparaciones temporales. La desventaja es que para realizarla se necesita que las muestras sean lo más delgadas caso contrario no se logra una buena observación.
