DASAR BIOPROSES KINETIKA PERTUMBUHAN SACCHAROMYCES PERTUMBUHAN SACCHAROMYCES CERVISEAE CERVISEAE
LAPORAN Oleh Kelompok 6 Rizky Sukmariyansyah
111411026
Teguh Ta Taui!urohim
11141102"
#gi #gi $uha $uhamm mma% a% Apriy priyan an&o &o
11141 141102' 102'
(ina Puspi&a Asih
11141102)
(ina Sep&iana*a&i
1114110+0
Kelas 2A ,osen Pem-im-ing
. /r mmanuela $T
Tanggal Prak&ikum
. 1) No3em-er 2012
Tanggal Penyerahan
. + ,esem-er 2012
PROGRAM STUDI D3 TEKNIK KIMIA JURUSAN TEKNIK KIMIA POLITEKNIK NEGERI BANDUNG 2012 KINETIKA PERTUMBUHAN
Saccharomyces Saccharomyces cerviseae
A.PENDAHULUAN A1La&ar elakang $ikroorganisme yang %i&um-uhkan %alam me%ia yang mengan%ung nu&rien essensial kemu%ian %i&empa&kan pa%a kon%isi lingkungan seper&i suhu %an P5 yang &epa& &epa& akan akan segera segera -erkem -erkem-an -ang g -iak -iak Per&um Per&um-uh -uhan an mikromikro-aa %apa& %apa& %iama&i %iama&i %ari %ari kenaik kenaikan an konsen konsen&ras &rasii mikromikro-a a $elalu $elaluii serangk serangkaian aian proses proses enzima& enzima&is is mikromikro-aa melakukan melakukan -iosisn&esis -iosisn&esis molekukmo molekukmolekul lekul penyusun penyusun sel %an menggan%ak menggan%akan an selnya selnya Ke7epa Ke7epa&an &an per&um per&um-uh -uhan an mikromikro-aa merupa merupakan kan respon respon &erha% &erha%ap ap su-s&ra su-s&ra&& 8me%ia 8me%ia per&um-uhan9 yang %ise%iakan %an kon%isi kon%isi lingkungannya lingkungannya
A2Tu:uan Per7o-aan Tu:uan %ari per7o-aan ini a%alah . 1 $enguasai $enguasai &ahapan&aha &ahapan&ahapan pan perkem-angperkem-ang-iakan iakan -ak&eri -ak&eri 2 $eng $engua uasa saii %an %an &eram &erampi pill memmem-ua ua&& me%i me%iaa pa%a pa%a& & inok inokul ulum um;s& ;s&ar& ar&er er %an %an me%i me%iaa per&um-uhan -ak&eri + $eng $engua uasa saii %an %an &era &eramp mpil il memi memili lih h me&o me&o%e %e yang ang &epa &epa&& un&u un&uk k mene menen& n&uk ukan an kons konsen en&r &ras asii
-iom -iomas assa sa
-ak& -ak&er erii
87ou 87oun& n&in ing g
7ham 7ham-e -er r pla& pla&&i &ing ng kolo koloni ni
a&au a&au
spek&roo&ome&er9 4 $emaham $emahamii pola pola per&um per&um-uh -uhan an -ak&eri -ak&eri melalu melaluii graik graik konsen&r konsen&rasi asi mikro-a mikro-a 8<9 &erha%ap *ak&u 8&9 = $enguasai $enguasai %an %apa& menen&ukan menen&ukan asaasa per&um-uhan per&um-uhan -ak&eri -ak&eri 6 ,apa& menghi& menghi&ung ung %an %an menge3alu menge3aluasi asi nilai la:u la:u per&um-uh per&um-uhan an spesiik spesiik 8>9 -ak&eri -ak&eri
B. LANDASAN LANDASAN TEORI S&oikiome&ri %ari per&um-uhan sel sanga& kompleks &ergan&ung pa%a :enis mikro-a nu&rien& yang %igunakan %an kon%isi lingkungan seper&i p5 %an suhu Kerumi&an men:a%i nya&a:i nya&a:ika ka le-ih le-ih %ari %ari sa&u sa&u nu&rie nu&rien& n& mempen mempengar garuhi uhi la:u per&um per&um-uh -uhan an mikromikro-a a Se7ara Se7ara umum per&um-uhan mikro-a %apa& %inya&akan %alam reaksi se-agai -eriku& .
Kinetika Pert!"#an Saccharo Pert!"#an Saccharomyces myces cerviseae cerviseae $ $ 1
selsel ? su-s&ra&
selsel yang le-ih -anyak ? pro%uk
sum-er kar-on
me&a-oli&
ni&rogen
@O2
oksigen
52O
osor
enzim
mineral
Konsen&rasi mikro-a %apa& %ilakukan melalui penen&uan :umlah sel 8sel;3ol9 a&au pengukuran massa sel 8gr;3ol9 Per&um-uhan mikro-a %alam reak&or -a&7h akan melalui &ahap&ahap -eriku& . 1 ase lag 2 ase logari&mik;eksponensial + ase perlam-a&an per&um-uhan 4 ase s&asioner = ase kema&ian
ase lag segera &er:a%i se&elah inokulasi %ise-u& :uga se-agai masa a%ap&asi &erha%apa lingkungan yang -aru $ikroorganisme mereorganisasi komponen molekulnya pa%a saa& menyerap nu&rien -aru Komposisi%an :enis nu&rien& akan mempengaruhi :enis enzim yang %isin&esa enzim yang %i-u&uhkan akan %i-en&uk enzim yang &i%ak %iperlukan akan %i&ekan B$esinC proses %i %alam sel menyesuaikan %iri %engan kon%isi lingkungan -aru Peru-ahan ini akan &ereleksikan %alam mekanisme sel melalui penga&uran proses me&a-olisme Selama ase ini massa sel -er&am-ah se%iki& &anpa meru-ah %ensi&as sel Konsen&rasi yang ren%ah akan menghasilkan ase lag yang pan:ang Perio%a ase lag sanga& -ergan&ung pa%a umur %ari inokulum /nokulum yang op&imum akan menghasilkan ase lag yang minimum #n&uk mempersingka& ase lag sel harus %i&um-uhkan pa%a me%ia %an kon%isi per&um-uhan yang op&imum sel harus ak&i %an 3olume inokulum -erkisar an&ara =D sampai 10D 8Shuler %an Kargi 1))29 Pa%a ase eEponensial sel &elah -era%ap&asi %engan lingkungan yang -aru Sel akan &um-uh %engan 7epa& sehingga massa sel %an :umlah sel akan -er&am-ah se7ara eEponensial &erha%ap *ak&u &er:a%i -alan7e gro*&h yai&u semua komponen %alam sel &um-uh %engan ke7epa&an yang sama Komposisi se-uah sel men%eka&i kons&an Kinetika Pert!"#an Saccharomyces cerviseae $ 2
Per&um-uhan mikro-a pa%a ase eEponensial %apa& %i%eka&i %engan mo%el &ak -ers&ruk&uryang menganggap la:u per&um-uhan sel merupakan ungsi %ari massa selular sa:a rX =
rX :
dX = µ X dt
la:u per&um-uhan mikro-a 8gr;l:am9
X . konsen&rasi -iomassa 8gr;l9
t . *ak&u 8:am9 . la:u per&um-uhan mikro-a spesiik 81;:am9
/n&egrasi persamaan %ia&as a%alah . ln X =µ t + ln X
Fika plo&kan ln X &erha%ap
0
t akan %iperoleh garis lurus %engan slope >
ase perlam-a&an per&um-uhan &er:a%i se&elah ase eEponensial Pa%a ase ini perlam-a&an per&um-uhan &er:a%i karena -erkurangnya konsen&rasi sa&u a&au le-ih nu&rien& esensial %an &erakumulasinya pro%uk yang -ersia& &oksik &erha%ap per&um-uhan Peru-ahan lingkunagn yang 7epa& menye-a-kan &er:a%inya im-alan7e gro*&h Pa%a ase eEponensial sis&em pengen%ali proses me&a-olisme sel %i&un:ukan menghasilkan la:u repro%uksi yang maksimum namun pa%a ase perlam-a&an per&um-uhan &ekanan yang %iaki-a&kan oleh &er-a&asnya nu&rien& %an lingkungan yang &oksik akan meru-ah sis&em pengen%ali proses me&a-olisme sel agar -isa &e&ap -er&ahan pa%a kon%isi yang &i%ak mengun&ungkan 8Shuler %an Kargi 1))29 Se&elah ase perlam-a&an per&um-uhan selesai %imulailah ase s&asioner Pa%a ase ini la:u perum-uhan a%alah nol 8&i%ak a%apem-elahan sel9 a&au la:u per&um-uhan sama %engan la:u kema&ian Konsen&rasi massa sel &e&ap namun :umlah sel yang hi%up akan -erkurang &er:a%i lisis sel %an se-agian sel %apa& &um-uh pa%a pro%uk hasil lisis sel &erse-u& (alaupun la:u per&u-uhan a%alah nol selama ase s&asioner &e&api me&a-olisme
Kinetika Pert!"#an Saccharomyces cerviseae $ 3
sel masih ak&i %an menghasilkan me&a-oli& sekun%er se-agai hasil %ari peru-ahan pengen%alian selular karena &er-a&asnya konsen&rasi nu&rien esensial Pro%uksi me&a-oli& sekun%er 8an&i-io&ik hormon9 :us&ru meningka& pa%a ase s&asioner sel mengka&a-olismenu&risi yang &ersimpan %alam sel sehingga %iperoleh energi un&uk pemeliharaan mem-ran sel &ranspor&asi nu&rien gerak %an per-aikan s&ruk&ur sel yang rusak Per&um-uhan mikro-a akan &erhen&i se&elah selain %ise-a-kan oleh &er-en&uknya pro%uk yang mengham-a& per&um-uhan Pengham-a&an ini &ergan&ung pa%a :enis %an konsen&rasi pro%uk pengham-a&nya Pro%uksi e&anol oleh ragi merupakan 7on&oh pro%uk pengham-a& per&um-uhan ,apa& %i7egah %engan 7ara mengen7erkan me%ium yang &er7emar &oksik %an memin%ahkan se7ara -erkesinam-ungan pro%uk pengham-a& %ari %alam reak&or 8Shuler %an Kargi 1))29 Pa%a ermen&asi -a&h la:u per&um-uhan spesiik a%alah kons&an %an %ipengaruhi oleh peru-ahan konsen&rasi nu&rien Pa%a konsen&rasi nu&rien a*al yang ren%ah akan menghasilkan la:u per&um-uhan yang le-ih ke7il %ari la:u per&um-uhan spesiiknya $o%el uns&ru7&ure% yang sering %igunakan un&uk menggam-arkan kine&ika per&um-uhan a%alah persamaan $ono% $engekspresikan -ah*a la:u per&um-uhan la:u per&um-uhan spesiik mikro-a akan meningka& :ika konsen&rasi sus&ra& meningka& Namun la:u per&um-uhan spesiik akan &urun pa%a konsen&rasi sus&ra& yang &erlalu &inggi Persamaan ini menggam-arkan la:u per&um-uhan spesiik merupakan ungsi %ari konsen&rasi su-s&ra& pem-a&as 8S9 .
µ =µm
[
S Ks + S
]
Ks a%alah &e&apan ke:enuhan yai&u konsen&rasi su-s&ra& pa%a > G H >m Nilai Ks -ergan&ung pa%a :enis mikro-a %an :enis suss&ra& yang %igunakan
Kinetika Pert!"#an Saccharomyces cerviseae $ %
&.ALAT DAN BAHAN •
A'at rlenmeyer 2=0 mL
•
rlenmeyer 100 mL
•
Pipe& #kur S&eril 10 mL 2 -uah
•
$e%ia @air S&ar&er;/nokulum 20 mL
•
Ta-ung Reaksi S&eril 1= -uah
•
$e%ia Per&um-uhan 1'0 mL
•
Pem-akar Spir&us
•
Laru&an langko =0 mL
•
Farum Ose
•
•
Ba#an Kul&ur $urni ak&eri saccharomyces
cerviseae
Incubator Shaker
•
Ku3e& Spek&roo&ome&ri
•
Spek&roni7 20
•
Ielas Kimia =00 mL
•
o&ol Sempro&
Kinetika Pert!"#an Saccharomyces cerviseae $ (
D.PROSEDUR KERJA $empipe& = mL me%ia 7air %ari me%ia 7air un&uk inokulum ke%alam &a-ung reaksi yang -erisi kul&ur murni -ak&eri saccharomyces cerviseae
$elepaskan -ak&eri yang menempel pa%a agar miring %engan menggunakan :arum ose hin a &erlaru& semua
$enuangkan laru&an &erse-u& ke%alam erlenmeyer yang -erisi inokulum $enginku-asi %alam incubator shaker selama 12 :am pa%a suhu +" o@ 1=0 rpm
$emasukkan inokulum ke%alam erlenmeyer yang -erisi me%ia per&um-uhan $emasukkan = mL pa%a 1= &a-ung reaksi $enginku-asi %alam incubator shaker
$engukur a-sor-ansi se&iap sampel %engan menggunakan spek&roni7 20 %engan menggunakan laru&an -langko me%ia 7air pa%a pan:ang gelom-ang 620 nm
$em-ua& kur3a per&um-uhan a-sor-ansi &erha%ap *ak&u %an -era& sel kering &erha%ap *ak&u
Kinetika Pert!"#an Saccharomyces cerviseae $ )
E. DATA PENGAMATAN
(ak&u 0 4= 1'0 22= 2"0 +1= +60 40= 4=0 4)= =40 ='= 6+0 6"=
A-sor-ansi 02"" 0211 02=4 02") 0+=0 04+' 0=+6 0==6 0"2) 0"41 0"4= 0"46 0"+4 0"+0
*. PENGOLAHAN DATA 1. Penentan Berat Se' Kerin+ A",-r"an,i a/a )20 n! 006 01' 02' 0+) 0=" 0'+ 0)2 10' 121 1+4
•
Berat Se' Kerin+ !+!L 040 10) 1'1 2=0 +"2 =+1 =') 6)0 "") '40
A G 02""
Kinetika Pert!"#an Saccharomyces cerviseae $
x −1,09 •
1,81 − 1,09
•
E G 22=
G •
A G 04+' x −2,50
0,277−0,180
•
3,72 − 2,50
G
0,280−0,180 •
•
E G 1")
0,438−0,390 0,570−0,390
A G 0211 x −1,09 •
1,81 − 1,09
•
E G 2"1
G •
A G 0=+6 x −2,50
0,211 −0,180
•
3,72 − 2,50
G
0,280−0,180 •
•
E G 1+1
0,536−0,390 0,570−0,390
A G 02=4 x −1,09 •
1,81 − 1,09
•
E G +4)
G •
A G 0==6 x −2,50
0,254− 0,180
•
3,72 − 2,50
G
0,280−0,180 •
•
E G 162
0,556−0,390 0,570−0,390
A G 02") x −1,09 •
1,81 − 1,09
•
E G +6+
G •
A G 0"2) x −3,72
0,279−0,180
•
5,31 − 3,72
G
0,280−0,180 •
•
E G 1'0
0,729−0,570 0,830−0,570
A G 0+=0 x −1,81 •
2,50 − 1,81
•
E G 46)
G •
A G 0"41
0,350−0,280 0,390−0,280
Kinetika Pert!"#an Saccharomyces cerviseae $ 4
x −3,72 •
•
E G 4'0
G
5,31 − 3,72
•
A G 0"+4 x −3,72
0,741−0,570
•
5,31 − 3,72
G
0,830−0,570 •
•
E G 4""
0,734− 0,570 0,830−0,570
A G 0"4= x −3,72 •
•
E G 4"2
G
5,31 − 3,72
•
A G 0"+0 x −3,72
0,745−0,570
•
5,31 − 3,72
G
0,830−0,570 •
•
E G 4")
0,730−0,570 0,830−0,570
A G 0"46 x −3,72 •
•
E G 4"0
G
5,31 − 3,72
0,746−0,570 0,830−0,570
2. 3. %. (. ). . 4. 5. 10. 11. 12. Kr6a Pert!"#an A",-r"an,i Ter#a/a 7akt 13. ( ak &u 1(. 0
1%. A-sor-ans i 1). 02""
Kinetika Pert!"#an Saccharomyces cerviseae $ 5
1. 4= 15. 1' 0 21. 22 = 23. 2" 0 2(. +1 = 2. +6 0 25. 40 = 31. 4= 0 33. 4) = 3(. =4 0 3. =' = 35. 6+ 0 %1. 6" =
14. 0211 20. 02=4 22. 02") 2%. 0+=0 2). 04+' 24. 0=+6 30. 0==6 32. 0"2) 3%. 0"41 3). 0"4= 34. 0"46 %0. 0"+4 %2. 0"+0
%3.
Kinetika Pert!"#an Saccharomyces cerviseae $ 1
%%.
Kurva Pertumbuhan Saccharomyces cerviseae Absorbansi Terhadap Waktu 0.8 f(x) = 0x + 0.17 0.7 R² = 0.87 0.6 0.5
Absorbansi
0.4 0.3 0.2 0.1 0 0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 500 550 600 650 700
Waktu (Menit)
%(. %). %. %4. %5. (0. Kr6a Pert!"#an Berat Se' Kerin+ Ter#a/a 7akt (1. ( ak &u (%. 0 (. 4= )0. 1'
(2. A-sor-ans i ((. 02"" (4. 0211 )1. 02=4
(3. era& Sel Kering 8E9 (). 1") (5. 1+1 )2. 162
Kinetika Pert!"#an Saccharomyces cerviseae $ 2
0 )3. 22 = )). 2" 0 )5. +1 = 2. +6 0 (. 40 = 4. 4= 0 41. 4) = 4%. =4 0 4. =' = 50. 6+ 0 53. 6" =
)(. 1'0 )%. 02") )4. 22= ). 0+=0 1. 2"1 0. 04+' %. +4) 3. 0=+6 . +6+ ). 0==6 40. 46) 5. 0"2) 43. 4"" 42. 0"41 4). 4") 4(. 0"4= 45. 4'0 44. 0"46 52. 4"2 51. 0"+4 5(. 4"0 5%. 0"+0
5).
Kinetika Pert!"#an Saccharomyces cerviseae $ 3
5.
Kurva Pertumbuhan Saccharomyces cerviseae Berat Sel Kering Terhadap Waktu 6 5 f(x) = 0.01x + 1.06 R² = 0.87 4
Berat Sel Kering (mgm!)
3 2 1 0 0 50 100150200250300350400450500550600650700
Waktu (Menit)
54. 55. 100. 101. 102. 103.
*a,a89a,a Pert!"#an
a9 asa A%ap&asi
G &er:a%i pa%a &o sampai &+
-9 asa Per7epa&an
G &er:a%i pa%a &+ sampai &4
79 asa ksponensial G &er:a%i pa%a &4 sampai &10 %9 asa Perlam-a&an G &er:a%i pa%a &10 sampai &11 e9 asa S&asioner
G &er:a%i pa%a &11 sampai &1+ Kinetika Pert!"#an Saccharomyces cerviseae $ %
9 asa Kema&ian
G &er:a%i pa%a &1+ sampai &1=
10%. 10(.
Kr6a 'n : Ter#a/a 7akt 10). (ak&u 110. 0 11%. 4= 114. 1'0 122. 22= 12). 2"0 130. +1= 13%. +60 134. 40= 1%2. 4=0 1%). 4)= 1(0. =40 1(%. ='= 1(4. 6+0 1)2. 6"=
A-s 10. or-ansi 02" 111. " 021 11(. 1 02= 115. 4 02" 123. ) 0+= 12. 0 04+ 131. ' 0=+ 13(. 6 0== 135. 6 0"2 1%3. ) 0"4 1%. 1 0"4 1(1. = 0"4 1((. 6 0"+ 1(5. 4 0"+ 1)3. 0
era& 104. Sel Kering 8E9 1") 112.
105.
ln E
113.
0='
11).
1+1
11.
02"
120.
162
121.
04'
12%.
1'0
12(.
0=)
124.
22=
125.
0'1
132.
2"1
133.
0))
13).
+4)
13.
12=
1%0.
+6+
1%1.
12)
1%%.
46)
1%(.
1=4
1%4.
4""
1%5.
1=6
1(2.
4")
1(3.
1="
1().
4'0
1(.
1=)
1)0.
4"2
1)1.
1==
1)%.
4"0
1)(.
1==
1)). 1). 1)4. 1)5. 10. 11. 12. 13. 1%. Kinetika Pert!"#an Saccharomyces cerviseae $ (
1(. 1). 1. 14. 15.
Kurva ln " Terhadap Waktu f(x) = 0x + 0.32 R² = 0.87
ln "
0
50
100 150 200 250 300 350 400 450 500 550 600 650 700
Waktu (Menit)
140. 141.
y G 0002E ? 0+22
142.
:a%i la:u per&um-uhan spesiik 8 μ 9 G 0002 ;meni&
143.
G.PEMBAHASAN 1. Pe!"a#a,an O'e# Ri;k< Sk!ari
14%.
Pa%a prak&ikum ini %ilakukan per7o-aan un&uk meliha& kine&ika
per&um-uhan %ari Saccharomyces cerviseae Sehingga akan %ike&ahui asaasa per&m-uhan ser&a la:u spesiiknya 8>9 Proses %ilakukan %engan memasukkan kul&ur murni -erisi mikro-a Saccharomyces cerviseae ke %alam me%ia per&m-uhan 14(.
Selan:u&nya me%ia per&um-uhan &erse-u& %i inku-asi %an %iam-il
sampel se&iap 4= meni& sekali #n&uk meliha& kine&ika per&um-uhannya maka %ilakukan me&o%e spek&roo&ome&ri ,ari se&iap sampel yang %i%apa& akan %iukur nilai a-sor-ansinya 14).
#n&uk meliha& asa per&um-uhan %ari mikro-a &erse-u& maka %i-ua&lah
graik an&ara nilai A 8a-sor-ansi9 &erha%ap & 8*ak&u9 ,ari sana maka akan %i%apa&kan asa per&um-uhan %ari miko-a %engan rin7ian se-agai -eriku& . a asa A%ap&asi
G &er:a%i pa%a &o sampai &+
- asa Per7epa&an
G &er:a%i pa%a &+ sampai &4
7 asa ksponensial G &er:a%i pa%a &4 sampai &10 % asa Perlam-a&an G &er:a%i pa%a &10 sampai &11 e asa S&asioner
G &er:a%i pa%a &11 sampai &1+
G &er:a%i pa%a &1+ sampai &1=
asa Kema&ian
14. 144.
,ari kur3a yang %i-ua& %i%apa&kan -ah*a nilai R nya se-esar 0'"+
Nilai R yang -aik ialah apa-ila men%eka&i 1 ,alam per7o-aan nilai R yang %i%apa& kurang maksimal hal ini %ikarenakan a%anya kesalahan prose%ur Semes&inya me%ia per&um-uhan %ishaker %alam in7u-a&or lalu se&iap 4= meni& sekali %iam-il sampel Te&api %alam prak&iknya prak&ikan langsung mengam-il sampel se-anyak 1= &i&ik ke %alam &a-ung reaksi lalu memasukannya ke %alam in7u-a&or 5al %ia&as menye-a-kan a%anya kemungkinan laru&an pa%a &iap sampel &i%ak homogen sehingga -erpengaruh pa%a nilai a-sor-ansi yang %i%apa& 145.
Selain i&u %ari kur3a ln < &erha%ap & 8*ak&u9 %i%apa&kan nilai la:u
per&um-uhan spesiiknya 8>9 a%alah 0002;meni& 150. 2. Pe!"a#a,an O'e# Te+# Ta9i=r-#i! 151.
Pa%a prak&ikum ini %ilakukan per7o-aan kine&ika per&um-uhan -ak&eri
un&uk menge&ahui kur3a per&um-uhan -ak&eri Saccharomyces cerviseae. ,ari kur3a
Kinetika Pert!"#an Saccharomyces cerviseae $
per&um-uhan %apa& %ike&ahui asaasa yang %ialami oleh -ak&eri &erse-u& sehingga %apa& %ike&ahui kapan -ak&eri &erse-u& menghasilkan pro%uk yang maksimal 152.
Per7o-aan %ilakukan %engan mem-iakan &erle-ih %ahulu -ak&eri
Saccharomyces cerviseae pa%a me%ia s&ar&er;inokulum Se&elah %i-iakan kemu%ian inokulum &erse-u& %imasukkan ke%alam me%ia per&um-uhan agar -ak&eri &erse-u& %apa& &um-uh %alam me%ia &erse-u& $e%ia yang %igunakan a%alah IJA Se&elah %i7ampurkan kemu%ian %imasukkan pa%a se&iap 1= &a-ung reaksi %an %i-iakan ke%alam incubator shaker. Se&iap 4= meni& %iam-il sampel %an %ihen&ika per&um-uhannya %engan 7ara %i%inginkan 153.
Se&elah semua sampel selesai %i-iakan %ilakukan pengukuran &erha%ap
sel yang %ihasilkan pa%a se&ian *ak&u &er&en&u %engan menggunakan me&o%a spek&roo&ome&ri %engan %i-an%ingkan %engan laru&an -langko yang -erisi me%ia 7air IJA pa%a pan:ang gelom-ang 620 nm ,ari pengukuran &erse-u& %iukur a-sor-ansi se&iap sampel %an %i-ua& kur3a per&um-uhan a-sor-ansi &erha%ap *ak&u Selain i&u %ari a-sor-ansi yang %i%apa& %iu-ah ke%alam -era& sel kering 8E9 ,i-ua& :uga kur3a per&um-uhannya an&ara -era& sel kering 8E9 &erha%ap *ak&u ,apa& %iliha& asaasa per&um-uhan -ak&eri &erse-u& Selain i&u %i&en&ukan :uga la:u per&um-uhan spesiik %ari kur3a an&ara ln E &erha%ap *ak&u 15%. 3. Pe!"a#a,an O'e# U+i M#a!!a/ Ari
Pa%a prak&ikum -ioproses ini %ilakukan pengama&an &erha%ap kine&ika
per&um-uhan khamir -er:enis Saccharomyces Cervisiae %alam me%ia 7air Penen&uan konsen&rasi mikro-a %ilakukan melalui pengukuran a-sor-ansi %an :uga -era& kering sel 8massa;3olume9 Sehingga %i%apa& kur3a kine&ika per&um-uhan Saccharomyces Cervisiae. Fenis reak&or yang %igunakan %alam prak&ikum merupakan reak&or -a&7h -erupa &a-ung reaksi yang %isimpan %alam shake incubator %engan ke7epa&an pu&ar 1=0 rpm %engan suhu +0 o@ Suhu op&imum un&uk khamir -er%asarkan li&era&ur a%alah 2=+0o@ 15).
Se-elum prak&ikum %ilakukan pem-ua&an me%ia per&um-uhan khamir
-er%asarkan ke-u&uhan pro&ein %an sum-er @ yang %i-u&uhkan oleh Saccharomyces Cervisiae. $e%ia &erse-u& -erupa Glucose Yeast Extract #n&uk memperoleh %a&a se-anyak = mL me%ia pro%uksi yang &elah -erisi -iakan Saccharomyces Cervisiae %i&empa&kan pa%a se:umlah &a-ung reaksi #n&uk men%apa&kan kur3a kine&ika perum-uhan yang i%eal se-anyak 1= &i&ik pengama&an
-erupa 1= &a-ung reaksi
Kinetika Pert!"#an Saccharomyces cerviseae $ 4
%i&an%ai %ari &1&1= lalu %iak&i3asi pa%a shake incubator ,a&a %iperoleh %engan 7ara mengam-il &a-ung reaksi yang a%a pa%a shake incubator se&iap 4= meni& sekali lalu %imasukkan ke %alam lemari es se%angkan &a-ung & 0 %iam-il se-elum mikro-a %iak&i3asi un&uk menge&ahui konsen&rasi mikro-a a*al Pengukuran konsen&rasi mikro-a %ilakukan %engan menggunakan spek&roo&ome&er &ipe spectronic 20 %engan pan:ang gelom-ang 620 nm ,ari %a&a a-sor-ansi yang %i%apa&kan &erha%ap *ak&u maka %apa& 15. %i-ua& kur3a per&um-uhan khamir Sehingga -isa %iliha& asease per&um-uhannya ,ari kur3a maka %i%apa&kan. 1 ase Lag 8&er:a%i pa%a &0&+9 pa%a ase ini mikro-a mem-u&uhkan *ak&u seki&ar 1+= meni& un&uk -era%ap&asi %engan lingkungan -aru (ak&u a%ap&asi &erse-u& &er-ilang 7ukup lama /ni %iaki-a&kan kemungkinan konsen&rasi nu&rien yang &i%ak 7ukup -esar 2 ase Akselerasi 8&er:a%i pa%a &+&49 se&elah masa a%ap&asi pa%a ase ini khamir memulai per&um-uhannya menu:u ase log a&au eksponensial + ase ksponensial 8&er:a%i pa%a &4&109 pa%a ase ini -iomassa yang %alam hal ini Saccharomyces Cervisiae mengalami balance growth %imana komponen %alam sel &um-uh %engan ke7epa&an yang sama %an komposisi selnya men%eka&i kons&an 4 ase Perlam-a&an 8&er:a%i pa%a &10&119 mikro-a mengalami imbalance growth %imana perlam-a&an per&um-uhan &er:a%i karena -erkurangnya nu&rien essensial %an lingkungan men:a%i &oksik aki-a& akumulasi pro%uk = ase S&asioner 8&er:a%i pa%a &11&1+9 pa%a ase ini per&um-uhan mikro-a &e&ap namun :umlah sel hi%up -erkurang %an mengalami lisis sel 6 ase Kema&ian 8&er:a%i pa%a &1+&1=9 pa%a ase ini la:u per&um-uhannya -erkurang aki-a& me&a-oli& yang &er-en&uk saa& ase s&asioner 154.
Selain kur3a a-sor-ansi &erha%ap *ak&u %apa& %i&en&ukan pula kur3a
-era& kering sel &erha%ap *ak&u A-sor-ansi yang %i%apa& kemu%ian %i7o7okan %an %iin&erpolasikan %engan %a&a pa%a &a-el +2 8halaman /' !obsheet -ioproses9 sehingga %i%apa&kan -era& kering selnya 8E9 kemu%ian %iu-ah ke lnE ,ari kur3a %i%apa&kan la:u per&um-uhan spesiik yai&u se-esar 0002;meni& La:u per&um-uhan spesiik &erse-u& %ipengaruhi oleh :enis nu&risi &empera&ur rpm penga%ukan p5 ka%ar air %an oksigen 155. %. Pe!"a#a,an O'e# 7ina P,ita A,i# Kinetika Pert!"#an Saccharomyces cerviseae $ 5
200.
Pa%a per7o-aan kali ini -er&u:uan un&uk menge&ahui asaasa
per&um-uhan %ari ragi %an la:u per&um-uhan spesiiknya 8 > 9 Ragi yang %igunakan pa%a
per7o-aan
ini
a%alah
Saccharomyces
cereviseae.
Per7o-aan
kine&ika
per&um-uhan ragi saccharomyces cereviseae ini menggunakan me%ia per&um-uhan IJA 8Glukose Yeast Extract "gar 9 %engan komposisi pep&on 2= gr yeas& eE&ra7&12=gr glukosa =gr agar 4=gr a!ua%es& 2=0 ml Per7o-aan ini menggunakan me&o%e pengukuran massa sel %engan 7ara 201. mengukur me%ia kul&urnya menggunakan ala& spek&roo&ome&er Pengukuran ini -iasa %ilakukan pa%a M an&ara600"00nm &api prak&ikan menggunakan M 620 nm $e&o%e ini merupakan me&o%e yang paling sering %igunakan un&uk perhi&ungan per&um-uhan ragi a&aupun -ak&eri #n&uk menge&ahui kenaikan per&um-uhan %ari Saccharomyces cereviseae ini prak&ikan mengam-il 1= &i&ik sampel #n&uk men%apa&kan kur3a per&um-uhan %iperoleh kur3a an&ara -era& 202. sel kering &erha%ap *ak&u un&uk menge&ahui konsen&rasi -iomassa 8<9 %ari se&iap sampel Kemu%ian mem-ua& kur3a an&ara konsen&rasi -iomassa 8<9 &erha%ap *ak&u per7o-aan agar %apa& %ike&ahui asaasa per&um-uhan yang &er:a%i Ter%apa& = asa an&ara lain . 1 asa a%ap&asi 8 #ag $hase 9 203. asa a%ap&asi &er:a%i %ari &o sampai &+ 5al ini %ikarenakan Saccharomyces
cereviseae
akan
mem-u&uhkan
*ak&u
un&uk
menyesuaikan
lingkungannya Sehingga Saccharomyces cereviseae
%iri
%engan
ini -elum siap un&uk
-erpro%uksi 2 asa ksponensial 8 #og $hase 9 20%. asa ini &er:a%i pa%a &4 sampai &10 Pa%a asa ini sel mempunyai a%ap&asi
&erha%ap lingkungannya %an &er:a%i peningka&an :umlah sel ser&a mengalami pem-elahan %iri massa men:a%i %ua kali lipa& 5al ini -erpengaruh &erha%ap nilai a-or-ansi + asa Perlam-a&an 8 %eceleration $hase 9 20(. Pa%a asa ini per&um-uhan melam-a& yang %ikarenakan nu&rien yang &erse%ia
semakin menipis %an &er:a%inya penumpukan ra7un aki-a& me&a-olisme sel sehingga mengaki-a&kan &er:a%inya kompe&isi nu&risi yang mengaki-a&kan -e-erapa sel ma&i asa ini &er:a%i &10 sampai &11 4 asa Te&ap 8 Stationer $hase 9
Kinetika Pert!"#an Saccharomyces cerviseae $ 10
20). Pa%a asa ini &er:a%i konsen&rasi -iomassa nya maEimum namun la:u
per&um-uhaanya men%eka&i 0 ,i asa ini komposisi sel su%ah -eru-ah yang %ise-a-kan karena sel su%ah &ua %an ren&an oleh lingkungan ariasi me&a-olisme yang %ihasilkannya pun %ise-u& me&a-oli& sekun%er $e&a-oli& sekun%er ini merupakan ra7un -agi mikroorganisme &api %ipro%uksi selalu asa s&asioner ini &er:a%i pa%a &11 sampai &1+ = asa Kema&ian 8 %eath $hase 9 20.
Perse%iaan energi su%ah ha-is i&ulah se-anya sel pa%a asa ini men:a%i ma&i
/ni &er:a%i pa%a &1+ sampai &1= 204. 205.
#n&uk memperoleh la:u per&um-uhan spesiik -ak&eri 8>9 prak&ikan
mem-ua& kur3a an&ara ln < &erha%ap *ak&u per7o-aan ,engan mem-ua& garis eksponensial %ari kur3a &erse-u& %i%apa& persamaan y G 0002E ? 0+22 Sehingga %iperoleh nilai la:u per&um-uhan spesiik -ak&eri 8>9 se-esar 0002 ;meni& 210. (. Pe!"a#a,an O'e# 7ina Setiana>ati 211.
H.KESIMPULAN 1 Pola per&um-uhan -ak&eri %apa& %iliha& %ari kur3a per&um-uhan A-sor-ansi &erha%ap *ak&u 8meni&9 -era& sel kering 8mg;mL9 &erha%ap *ak&u 8meni&9 %an ln E &erha%ap *ak&u 8meni&9 2 asa per&um-uhan -ak&eri Saccharomyces cerviseae a9 asa A%ap&asi
G &er:a%i pa%a &o sampai &+
-9 asa Per7epa&an
G &er:a%i pa%a &+ sampai &4
79 asa ksponensial G &er:a%i pa%a &4 sampai &10 %9 asa Perlam-a&an G &er:a%i pa%a &10 sampai &11 e9 asa S&asioner
G &er:a%i pa%a &11 sampai &1+
9 asa Kema&ian
G &er:a%i pa%a &1+ sampai &1=
+ La:u per&um-uhan spesiik 8 μ 9 G 0002 ;meni& 212.
I. DA*TAR PUSTAKA
Kinetika Pert!"#an Saccharomyces cerviseae $ 11
#$%& !eoanggraini' nung' dkk&#$$&*Buku Bahan A+ar Praktikum Bioproses*&Bandung , #$-&
Politeknik .egeri Bandung
#$/&
Kinetika Pert!"#an Saccharomyces cerviseae $ 12
