Este es un ejemplo de un problema que de puede resolver con el metodo de dijkstra.
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Descripción: Ruta mas corta de la materia cadena de suministros
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INTRODUCCION •
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Microsporidios son células eucariotas individuales Su taxonomía las ubican dentro del reino de los hongos Poco utilizado en programas de control microbiano –
Ciclo de vida complicado
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Requieren de un huésped intermediario
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Parásito obligado
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Tiene un efecto crónico en lugar de intenso
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Producción in vivo es costosa
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Difícil de almacenar a largo plazo plazo
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Baja persistencia persistencia
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Baja prevalencia enzootica en la población huésped
Papel en programa de control biológico Incidencia natural y uso como agente de control biológico clásico Reprime poblaciones en donde la aplicación de químicos no es factible •
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Microsporidios en el control de insectos •
La forma infectiva es una espora resistente al ambiente –
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Membrana interna ( Plasmalema) rodeada de esporoplasma Además la mayoría de las especies posee una capa de endoespora formada por una matriz de proteína-quitina entre la exoespora y plasmalema
La espora tiene un filamento polar en un extremo que se enrolla dentro del esporplasma –
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Exoespora proteinasea
El filamento polar es evertido desde la espora para infectar la célula huésped
Germinación se presenta en el lumen del intestino (espora ambiental) o dentro de la célula huésped Desarrollo y replicación se lleva a cabo en el citoplasma de la célula blanco del tejido del huésped Diferentes especies son específicos para uno o mas tejidos Dependiendo de la especie los efectos sobre el rango de huésped son desde benigno hasta una enfermedad aguda
Una espora germinada de microsporidio por everting del filamento polar e inyección del contenido de la espora a células del intestino medio del huésped
Efectos •
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La mayoría de las especies causan infección crónica Poco efecto significante en el huésped o la población Efecto nocivo incluye: –
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Aumento en la mortalidad de la larva Retraso en el desarrollo y reducción del crecimiento Reducción en la longevidad y fecundidad del adulto Aumento en la susceptibilidad al estrés ambiental
Producto comercial: –
Paranosema (Nosema=Antonospora) locustae
Insecto blanco •
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Plagas de insectos en dos grupos ecológicamente diverso Huésped acuático –
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Orden Diptera
Huésped terrestre –
Orden Coleoptera, Hymenoptera, Lepidoptera y Orthoptera
Insectos blanco para microsporidios patógenos Microsporidio por orden del insecto huésped
Tienen un papel importante como reguladores naturales de muchos dípteros acuáticos –
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Familia: Ceratopogonidae, Simuliidae, Chironomidae y Culicidae
Intentos para ser utilizados como agente de control biológico se centra en mosquitos Su atractivo se enfoca en su capacidad para causar epizootias (ciclo continua dentro de una población huésped) y propagación a nuevos sitios
Consideraciones ambientales •
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Depende de la liberación de la espora de tal forma que podrían encontrarse y ser ingeridas por el huésped blanco Factores en el establecimiento de la infección –
Viabilidad de la espora y dosis midiendo la
concentración de las esporas en el agua •
Reciclado del patógeno depende –
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Trasmisión horizontal en la población larval Transmisión vertical por hembras adultas infectadas dentro y entre sitios de crianza larval
Microsporidios como insecticidas microbianos •
Paranosema locustae Parásito de cuerpo graso Se reproduce lentamente en los tejidos del huésped Eventualmente agota las reservas de energía Incluido en MIP en el manejo de poblaciones de langosta Vairimorpha necatrix Una especie altamente virulenta que infecta diversas plagas de noctuidos Probada en campo como un insecticida microbiano Tiempo de aplicación y el costo de producción in vivo dificulta el interés de producción comercial –
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Reducción en tamaño en Schistocerca gregaria, 21 días después de ser infectados con Paranosema locustae en el
primer instar
Efecto subletal en Schistocerca gregaria en ninfas infectas con Paranosema locustae Malformación de alas y patas posterior
Microsporidios como enemigos naturales •
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Mas ampliamente utilizados Aumentación inoculativo o inundativa Introducción y establecimiento Manipulación como patógenos de origen natural –
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Nosema pyrausta en Ostrinia nubilalis barrenador del maíz europeo Nosema fumiferanae en Choristoneura fumiferana Poblaciones forestales del gusano de las yemas de
abeto
Consideraciones para el uso en los sistemas terrestres •
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Incertidumbre taxonómica Supervivencia de la espora Especificidad del huésped Persistencia en las poblaciones del huésped inoculado
Supervivencia de la espora •
Son sensibles –
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Radiación ultravioleta (UV) Temperaturas altas Congelación y descongelación repetida Degradación de bacterias y hongos
Factores de degradación e inviabilidad de esporas + ecología del huésped = utilización
como bioinsecticidas o en programas de control biológico clásico o aumentativos.
Especificidad del huésped •
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Reportado como patógenos generalistas o como patógeno específico Marcadas diferencias entre las especies respecto al rango de huésped Resultados de sobrevivencia en las poblaciones naturales de insectos y evaluaciones del rango de huésped en laboratorio sugieren que los rangos de huésped ecológico son probablemente mucho más restringida que la predicha laboratorio
Producción •
Se producen en células vivas
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Cultivo de tejidos –
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No se ha desarrollado para la producción masiva de esporas debido a los costos del medios de cultivo y baja producción de esporas
Insectos huésped –
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Concentraciones de esporas infectivas varían dependiendo de la especie de microsporidio y especies de huésped elegido para la producción El huésped debe ser criados en masa y de tamaño lo suficientemente grande como para producir grandes cantidades de esporas Es importante determinar la concentración de esporas a utilizar y determinar la etapa del huésped que serán inoculados
Almacenamiento •
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Las diferentes especies de microsporidios varían en su capacidad para tolerar los distintos métodos de almacenamiento Experimentación es necesaria para determinar el mejor método para cada especie Métodos –
En agua congelada, agua estéril a temperaturas de refrigeración (4-6°C), liofilizada o seco al vacío y nitrógeno líquido
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Almacenar por algún tiempo cadáveres secos, a temperatura ambiente o congelados Cadáveres frescos o secos pueden ser suspendido en agua o agua/glicerol y almacenados en nitrógeno líquido
Métodos de almacenamiento de microsporidios terrestres Método de almacenaje
Periodo de tiempo
In situ: mantenimiento de huésped vivo
Indefinido
infectados en colonia Cadáveres huésped seco, -80 a 30°C
Largos períodos de tiempo
Aislados y esporas purificadas, -80 a -20°C, añadir s/f y glicerol a la suspensión
Largos períodos de tiempo
Liofilizados
< de 2 años
Refrigeración de aislados, esporas purificadas, agregar s/f, suspensión de agua desionizadao purificada
3 meses a 10 años
Nitrógeno líquido: cadáveres, secos o frescos
Indefinido
Nitrógeno líquido: esporas en cultivo de células
Indefinido
Nitrógeno líquido: esporas aisladas en 1:1 agua/glicerol, s/f
Indefinido
Aproximadamente 5 µg de 1:1 estreptomicina : fungizona (s/f) por ml suspensión
Dosis, formulación y liberación •
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Paranosema locustae
Aplicado en concentraciones que van desde 1 x 10 8 a 5 x 109 esporas/ha; formulación estándar aprobada fue de 2.46 x 109 esporas/ha Reducción del 50-60% en las poblaciones de saltamontes y 35 a 50% de infección entre los supervivientes Formulación como un cebo en el salvado de trigo con hidroximetil celulosa como adherente Aplicación con equipos de turbina Buffalo® montada en un camión
Evaluación •
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Implican la evaluación de la reducción de daños en el producto de interés También incluye evaluaciones de la mortalidad del huésped –
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Comparación de las poblaciones de plagas en áreas de prueba con áreas similares no tratadas
En una aplicación aumentativos sería el ascenso en las epizootias y/o un aumento de la prevalencia de la enfermedad en las futuras generaciones de plagas en el área inoculada
