Metodos de Tincion

CICLO UNIVERSITARIO

TUTORÍA HISTOLOGÍA

MÉTODOS DE TINCIÓN La preparación de muestras histológicas tiene como objetivo observar estas al microscopio óptico e identificar las estructuras que conforman el tejido en estudio; sin embargo, la mayoría de tejidos animales y humanos, utilizados en la preparación de láminas histológicas, son incoloros; por lo tanto, sería difícil diferenciar qué estructuras los conforman. Por ello, se utilizaron varios métodos basados en el uso de colorantes para contrastar las estructuras que integran el tejido en estudio, llamando a estos métodos como métodos de tinción. ¿Qué son los colorantes? Son compuestos químicos que tienen la capacidad de unirse a estructuras celulares y componentes tisulares, y teñirlas. ¿Cuáles son sus componentes? Generalmente, los colorantes poseen: Un esqueleto incoloro, conformado por un anillo aromático. Un radical cromóforo, que confiere al colorante la capacidad de teñir. Un radical auxocromo, que confiere al colorante la capacidad de unirse a estructuras celulares y componentes tisulares. El esqueleto incoloro más el radical cromóforo forman el cromógeno.

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¿Qué tipos de colorantes existen? Según su origen: Naturales: Hematoxilina, carmín, azafrán, orceína, etc. Artificiales: Azul de metileno, safranina, azul de anilina, naranja G, etc. Según el radical auxocromo: Ácidos: Tiñen estructuras de tipo básico. Ej.: eosina. Básicos: Tiñen estructuras de tipo ácido. Ej.: azul de toluidina Neutros: Se une tanto al colorante ácido como básico. Indiferentes: No tiñen por unión de una molécula u otra sino que se disuelven en ellos. Según el radical cromóforo: Nitrados y nitrosados Azoicos Derivados de la antraquinona Derivados del difenilmetano y del trifenilmetano Derivados de las ftalocianinas Derivados del xanteno Derivados de la acridina Derivados de iminas quinónicas ¿Cómo se unen los colorantes al tejido? Los colorantes se unen al tejido mediante diversos mecanismos como enlaces coordinados, mordientes y quelantes, enlaces covalentes, puentes de hidrógeno, interacciones hidrófobas, fuerzas de Van der Waals, unión ácido-base, impregnaciones, agregados metálicos, etc.

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¿Cuáles son los métodos de tinción más comunes?


Tinción

¿Para qué se utiliza?

Hematoxilina/Eosina

Reconocimiento de tipo de tejidos.

Ácido Peryódico de Schiff (PAS)

Detección de hidratos de carbono presentes en los tejidos tales como el hígado, músculos, etc.

Distintas estructuras compuestas por hidratos de carbono (membranas basales, mucinas, etc) se tiñen de color magenta. Núcleo de color azul.

Azul de toluidina

Identificación de mastocitos.

Mastocitos de color violeta. Los demás elementos tisulares se tiñen de varios tonos de azul.

Luxol Fast Blue

Identificación de las estructuras neuronales en el tejido cerebral y tejido de la médula espinal.

Estructuras que contengan mielina se tiñen de color azul. Neurópilo de color rosa. Células nerviosas de color morado.

Orceína

Identificación elásticas.

de

fibras

Fibras elásticas de color pardo.

Weigert

Identificación elásticas.

de

fibras

Hematoxilina Férrica de Heidenhain

Identificación estriado.

de

músculo

Resultado Núcleo de color azul-violeta, citoplasma basófilo púrpura, citoplasmawww.programavesalius.edu.pe acidófilo de color rosa-rojo, fibras colágenas rosa pálido, fibras musculares rosa oscuras, eritrocito rojo cereza.

Fibras elásticas de color azul

Estriaciones de músculo, núcleos y eritrocitos de color negro.

Impregnación Argéntica

Identificación de reticulina y colágeno.

Fibras reticulares de color negro

Aldehído fucsina de Gomori

Identificación de fibras elásticas, células beta, mastocitos y células de los islotes pancreáticos

Fibras elásticas, gránulos de mastocitos, células beta, células de los islotes pancreáticos de color púrpura. Otros tejidos, son de color verde.

Tricrómica de Pollack

Diferenciar entre fibras colágenas y tejido muscular.

Núcleo negro, eritrocito amarillo. Citoplasma y músculos de color rojo. Colágeno de color azul.

Tricrómica de Gomori


Núcleo azul oscuro. Fibras musculares, queratina y citoplasma de color rojo, haz de fibras colágenas de color verde.


Núcleo de color azul oscuro. Citoplasma, queratina, fibras musculares y eritrocitos de color rojo. Haces de fibras colágenas de color azul. Mucinógeno azul claro.

Tricrómica de Masson

Wrigth-Giemsa

Eritrocitos de color rojo-rosa. Neutrófilos con núcleo púrpura oscuro, citoplasma rosa pálido. Observación de frotis Eosinófilos con núcleo azul, citoplasma rosa pálido, sanguíneos. gránulos rojo-naranja. Tinciones diferenciales de Basófilos con núcleo azul oscuro, gránulos púrpura hemáticas Av.células España 2335 (5to piso), frente oscuros. al C.C. Boulevard  Teléf. : 244843 Linfocitos con núcleo azul púrpura, citoplasma azul - 4 -cielo. Plaquetas con gránulos de color púrpura. VECS11I-MEPA01


En el campo se observa un glomérilo de una muestra de riñón teñida con el método de Hematoxilina y Eosina.



Corte de intestino delgado teñido con el método PAS. Se observa que el citoplasma de las células caliciformes se tiñe de color magenta, ya que poseen gránulos de mucina, la cual está conformada por hidratos de carbono).

Corte de cerebro teñido con el método Luxol Fast Blue. Se observa que la sustancia gris se tiñe de color rosa, debido a la presencia de neurópilo en esta en esta zona; y la sustancia blanca se tiñe de color azul, ya que en ella se encuentran abundantes axones mielínicos.

Corte de lengua teñida con el método Tricrómica de Masson. Se observa de arriba abajo: El epitelio lingual, que adopta un color rojo debido a la tinción de los citoplasmas de sus células. Debajo de este epitelio, está es tejido conjuntivo, cuyos haces de fibras colágenas se han teñido de color azul; seguido de los haces musculares estriados viscerales teñidos de color rojo.



Frotis de sangre periférica teñido con el método Wright-Giemsa.

En el método de Azul de toluidina, ocurre algo especial. Este método utiliza un solo colorante para teñir las estructuras histológicas, y se debería esperar que todas las estructuras adopten el mismo color que el colorante (Ortocromasia), pero ocurre algo al teñir los mastocitos presentes; los mastocitos adoptan un color distinto al colorante utilizado (Metacromasia) que se debe a la presencia de polianiones la estructura de estas células.


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