MAKALAH IMUNOLOGI II “PEMERIKSAAN CRP (C – REAKTIVE – REAKTIVE PROTEIN)”
Diajukan Untuk Memenuhi Salah Satu Mata Kuliah Imunologi II Dosen : Rani Handriani, S.Si
Disusun : Ela Ratnasari
[1511E1020]
Nadia Aurora
[1511E1021]
Achmad Gilman Harish
[1511E1022]
Resha Chaerani Ayatulloh
[1511E1031]
Kelompok 3 D3A-Analis Kesehatan
SEKOLAH TINGGI ANALIS BAKTI ASIH BANDUNG
KATA PENGANTAR
Dengan menyebut nama Allah SWT yang Maha Pengasih lagi Maha Penyayang, Kami panjatkan puja dan puji syukur atas kehadirat-Nya, yang telah melimpahkan rahmat, hidayah, dan inayah-Nya kepada kami, sehingga kami dapat menyelesaikan makalah ilmiah tentang Imunologi II dan manfaatnya untuk masyarakat. Makalah ilmiah ini telah kami susun dengan maksimal dan mendapatkan bantuan dari berbagai pihak sehingga dapat memperlancar pembuatan makalah ini. Untuk itu kami menyampaikan banyak terima kasih kepada semu a pihak yang telah berkontribusi dalam pembuatan makalah ini. Terlepas dari semua itu, Kami menyadari sepenuhnya bahwa masih ada kekurangan baik dari segi susunan kalimat maupun tata bahasan ya. Oleh karena itu dengan tangan terbuka kami menerima segala saran dan kritik dari pembaca agar kami dapat memperbaiki makalah ilmiah ini. Akhir kata kami berharap semoga makalah ilmiah tentang Imunologi II dan manfaatnya untuk masyarakan ini dapat memberikan manfaat maupun inpirasi terhadap pembaca.
Bandung, Desember 2017 Penyusun,
Kelompok 3
i
DAFTAR ISI
KATA PENGANTAR ............................................................................................ i DAFTAR ISI .......................................................................................................... ii BAB I ...................................................................................................................... 1 PENDAHULUAN.................................................................................................. 1 1.1.
Latar Belakang..................................................................................................... 1
1.2.
Tinjauan Pustaka ................................................................................................. 1
1.3.
Rumusan Masalah ............................................................................................... 2
1.4.
Tujuan ................................................................................................................. 2
BAB II .................................................................................................................... 3 PEMBAHASAN .................................................................................................... 3 2.1.
Pengertian CRP.................................................................................................... 3
2.2.
Fungsi CRP ........................................................................................................... 3
2.3.
Pemeriksaan Kadar CRP ...................................................................................... 4
2.4.
Metode Pengukuran CRP .................................................................................... 4
BAB III ................................................................................................................... 6 METODOLOGI .................................................................................................... 6 BAB IV ................................................................................................................. 11 PENUTUP ............................................................................................................ 11 4.1.
Kesimpulan........................................................................................................ 11
4.2.
Saran ................................................................................................................. 11
DAFTAR PUSTAKA .......................................................................................... 12
ii
BAB I PENDAHULUAN
1.1.
Latar Belakang
CRP merupakan salah satu dari beberapa protein yang sering disebut sebagai protein fase akut dan digunakan untuk memantau perubahan-perubahan dalam fase inflamasi akut yang dihubungkan dengan banyak penyakit infeksi dan penyakit autoimun. Beberapa keadaan dimana CRP dapat dijumpai meningkat adalah radang sendi (rheumatoid arthritis), demam rematik, kanker payudara, radang usus, penyakit radang panggung (pelvic inflammatory disease, PID), penyakit Hodgkin, SLE, dan infeksi bakterial. CRP juga meningkat pada kehamilan trimester terakhir, pemakaian alat kontrasepsi intrauterus dan pengaruh obat kontrasepsi oral (Bellanti, 1993). C-reactive (C-reactive protein, CRP) dibuat oleh hati dan dikeluarkan ke dalam aliran darah. CRP beredar dalam darah selama 6-10 jam setelah proses inflamasi akut dan destruksi jaringan. Kadarnya memuncak dalam 48-72 jam. Seperti halnya uji laju endap darah (erithrocyte sedimentation rate, ESR), CRP merupakan uji non-spesifik tetapi keberadaan CRP mendahului peningkatan LED selama inflamasi dan nekrosis lalu segera kembali ke kadar normaln ya (Rose et al., 1979). Tes CRP seringkali dilakukan berulang-ulang untuk mengevaluasi dan menentukan apakah pengobatan yang dilakukan efektif. CRP juga digunakan untuk memantau penyembuhan luka dan untuk memantau pasien paska bedah sebagai sistem deteksi dini kemungkinan infeksi. Tes CRP dapat dilakukan secara manual menggunakan metode aglutinasi atau metode lain yang lebih maju, misalnya sandwich imunometri. Tes aglutinasi dilakukan dengan menambahkan partikel latex yang dilapisi antibodi anti CRP pada serum atau plasma penderita sehingga akan terjadi aglutinasi. Untuk menentukan titer CRP, serum atau plasma penderita diencerkan dengan buffer glisin dengan pengenceran bertingkat (1/2, 1/4, 1/8, 1/16 dan seterusnya) lalu direaksikan dengan latex. (Boediana, 2001).
1.2.
Tinjauan Pustaka
C-Reaktive protein adalah salah satu dari protein f ase akut yang didapatkan dalam serum normal walaupun dalam jumlah yang kecil. Pada keadaan-keadaan tertentu dimana didapatkan adanya reaksi radang atau kerusakan jaringan
1
(nekrosis), yaitu baik yang infektif maupun yang tidak infektif. Kadar CRP dalam serum dapat mengikat sampai 1000 kali (Handojo, 1982). Banyak protein plasma mengikat secara akut sebagai respon terhadap penyakit, infeksi dan nekrosis jaringan. Protein- protein ini mencakup glikoprotein α-1-asam, α-1-anti tripsin, serum plasma haptoglogin. Fibrinogen dan protein CReaktif (CRP). Yang paling bermanfaat dari zat-zat tersebut adalah CRP karena berdasarkan cepatnya peningkatan sebagai respon terhadap penyakitakut dan cepatnya pembersihan setelah stimulus mereda (Sacher et al., 2004). CRP adalah globula alfa abnormal yang cepat timbul adalah serum penderita dengan penyakit karena infeksi atau karena sebab-sebab lain. Protein ini tidak terdapat dalam darah orang sehat. Protein ini dapat menyebabkan pesipitasi hidrat arang C dari Pneumococcus (Bonang, 1982). CRP merupakan fase, keadaannya meningkat 24 jam pasca infeksi, peradangan akut kerusakan jaringan. Unsur pokok dari mikroorganisme dan juga struktur sex manusia disebut juga CRP karena mempunyai kemampuan untuk berikatan dengan C-pneumococcus polisakarida (Starr, 2000).
1.3.
Rumusan Masalah
1. 2. 3. 4.
1.4.
Apa fungsi CRP di dalam tubuh ? Bagaimana pemeriksaan kadar CRP ? Bagaimana prosedur pemeriksaan CRP ? Apa saja yang dapat mempengaruhi pemeriksaan CRP ?
Tujuan
Mengetahui fungsi CRP di dalam tubuh. Mengetahui cara pemeriksaan CRP. Mengetahui faktor yang dapat mempengaruhi pemeriksaan CRP.
2
BAB II PEMBAHASAN
2.1.
Pengertian CRP
CRP merupakan salah satu dari beberapa protein yang sering disebut sebagai protein fase akut dan digunakan untuk memantau perubahan-perubahan dalam fase inflamasi akut yang dihubungkan dengan banyak penyakit infeksi dan penyakit autoimun. Beberapa keadaan dimana CRP dapat dijumpai meningkat adalah radang sendi (rheumatoid arthritis), demam rematik, kanker payudara, radang usus, penyakit radang panggung (pelvic inflammatory disease, PID), penyakit Hodgkin, SLE, dan infeksi bakterial. CRP juga meningkat pada kehamilan trimester terakhir, pemakaian alat kontrasepsi intrauterus dan pengaruh obat kontrasepsi oral.
2.2.
Fungsi CRP
Fungsi dan peranan CRP di dalam tubuh (in vivo) belum diketahui seluruhnya, banyak hal yang masih merupakan hipotesis. Meskipun CRP bukan suatu antibodi, tetapi CRP mempunyai berbagai fungsi biologis yang menunjukkan peranannya pada proses peradangan dan mekanisme daya tahan tubuh terhadap infeksi. Beberapa hal yang diketahui tentang fungsi biologis CRP ialah :
CRP dapat mengikat C-polisakarida (CPS) dari berbagai bakteri melalui reaksi presipitasi/aglutinasi. CRP dapat meningkatkan aktivitas dan motilitas sel fagosit seperti granulosit dan monosit/makrofag. CRP dapat mengaktifkan komplemen baik melalui jalur klasik mulai dengan C1q maupun jalur alternatif. CRP mempunyai daya ikat selektif terhadap limfosit T. Dalam hal ini diduga CRP memegang peranan dalam pengaturan beberapa fungsi tertentu selama proses peradangan. CRP mengenal residu fosforilkolin dari fosfolipid, lipoprotein membran sel rusak, kromatin inti dan kompleks DNA-histon. CRP dapat mengikat dan mendetoksikasi bahan toksin endogen yang terbentuk sebagai hasil kerusakan jaringan.
3
2.3.
Pemeriksaan Kadar CRP
Pada penentuan CRP, maka CRP dianggap sebagai antigen yang akan ditentukan dengan menggunakan suatu antibodi spesifik yang diketahui (antibodi anti - CRP). Dengan suatu antisera yang spesifik, CRP (merupakan antigen yang larut) dalam serum mudah dipresipitasikan. Jadi pada dasarnya, penentuan CRP dapat dilakukan dengan cara, yaitu : 1. Tes Presipitasi : Sebagai antigen ialah CRP yang akan ditentukan, dan sebagai antibodi adalah anti - CRP yang telah diketahui. 2. Tes Aglutinasi Latex : Antibodi disalutkan pada partikel untuk menentukan adanya antigen di dalam serum. 3. Uji ELISA : Dipakai teknik Double Antibody Sandwich ELISA. Antibodi pertama (antibodi pelapis) dilapiskan pada fase padat, kemudian ditambahkan serum penderita. Selanjutnya ditambahkan antibodi kedua (antibodi pelacak) yang berlabel enzim. Akhirnya ditambahkan substrat, dan reagen penghenti reaksi. Hasilnya dinyatakan secara kuantitatif. 4. Imunokromatografi : Merupakan uji Sandwich imunometrik. Pada tes ini, antibodi monoklonal terhadap CRP diimobilisasi pada membran selulosa nitrat di garis pengikat. Bila ditambahkan serum yang diencerkan sampai ambang atas titer rujukannya pada bantalan sampel maka CRP dalam sampel akan diisap oleh bantalan absorban menuju bantalan konjugat, dan akan diikat oleh konjugat (antibodi monoklonal) pertama, berlabel emas koloidal. Selanjutnya CRP yang telah mengikat konjugat akan diisap oleh bantalan absorban menuju ke garis pengikat yang mengandung antibodi monoklonal kedua terhadap CRP (imobile) sehingga berubah warna menjadi merah. 5. Imunoturbidimetri : Merupakan cara penentuan yang kualitatif. CRP dalam serum akan mengikat antibodi spesifik terhadap CRP membentuk suatu kompleks immun. Kekeruhan (turbidity) yang terjadi sebagai akibat ikatan tersebut diukur secara fotometris. Konsentrasi dari CRP ditentukan secara kuantitatif dengan pengukuran turbidimetrik.
2.4.
Metode Pengukuran CRP
Ada 3 jenis metode pengukuran CRP, yaitu :
Conventional CRP. Metode pengukuran ini digunakan untuk menganalisa adanya infeksi, kerusakan jaringan, dan gangguan-
4
gangguan akibat proses inflamasi. Metode ini dapat mengukur kadar CRP secara tepat pada kadar 5 mg/L atau lebih. Orang yang sehat biasanya memiliki kadar CRP di bawah 5 mg/L, sedangkan adanya proses inflamasi ditunjukkan dengan kadar CRP sebesar 20 - 500 mg/L. High Sensitivity CRP (hs - CRP). Metode pengukuran ini digunakan untuk menganalisa kondisi - kondisi yang mungkin berhubungan dengan proses inflamasi. Metode ini bersifat lebih sensitif sehingga dapat mengukur kadar CRP secara tepat hingga 1 mg/L. Cardiac CRP (c - CRP). Metode pengukuran ini digunakan untuk menganalisis tingkat resiko penyakit jantung. Metode ini memiliki sensitivitas yang menyerupai dengan hs – CRP.
5
BAB III METODOLOGI
Judul : “Pemeriksaan CRP (C-Reactive Protein)” Tujuan : Untuk mendeteksi adanya CRP Metoda : Slide (Aglutinasi) Prinsip : Ab (serum) + Ag (lateks yang disensitasi oleh anti – CRP) → Aglutinasi
Alat dan Bahan :
Alat yang digunakan - Slide hitam - Pipet dispossible Bahan yang digunakan - Serum - Kontrol positif - Kontrol negatif
6
-
Reagen lateks anti – CRP
Cara Kerja :
Kualitatif
Kontrol (+)
Kontrol (-)
Serum
Lateks
Kontrol (+)
50µL
-
-
-
Kontrol (-)
-
50µL
-
-
Serum
-
-
50µL
-
Lateks
50µL
50µL
50µL
50µL
Kuantitatif
NaCl Fisiologis
NaCl Fisiologis 50µL
Serum
Lateks
50µL
50µL
7
Serum
50µL
50µL
50µL
Lateks
50µL
50µL
50µL
Hasil Pengamatan :
Keterangan Gambar :
Kolom 1 Kolom 2 Kolom 3 Kolom 4
: Reagen positif (aglutinasi) : Reagen negative (tidak aglutinasi) : Serum 1 (tidak aglutinasi) : Serum 2 (tidak aglutinasi)
Interpretasi Hasil :
Hasil negatif : tidak terbentuk aglutinasi, kadar CRP < 6 mg/L Hasil positif : terbentuk aglutinasi, kadar CRP > 6 mg/L
Pembahasan :
CRP merupakan salah satu protein fase akut yang termasuk ke dalam sistem imun non-spesifik humoral (molekul terlarut). Kadar CRP akan meningkat pada keadaan infeksi (peradangan dan kerusakan jaringan). Peningkatan kadar CRP sampai ratusan kali antara lain terjadi pertama karena infeksi bakteri. Selama respon fase akut, tingkat CRP meningkat pesat dalam waktu kurang lebih 6 jam mencapai puncaknya pada 48 jam. Kadar CRP akan meningkat sampai seratus kali lipat dari
8
keadaan normal. Kadar tertinggi tercapai setelah lebih kurang 3 hari dan setelah 2 minggu akan kembali normal. CRP disintesis dalam organ hati. Peningkatan CRP di dalam sel parenkim hati diduga dicetuskan oleh interleukin I yang berasal dari makrofag atau monosit yang terstimulasi. CRP akan berinteraksi dengan protein protein komplemen untuk melawan infeksi. Penetapan kadar CRP sangat berguna karena dapat mengetahui perbaikan atau pengurangan keadaan peradangan atau infeksi dengan cepat. Berdasarkan hasil praktikum menunjukkan bahwa reagen kontrol positif yang diuji pada plate ke-1 terbentuk gumpalan-gumpalan putih (aglutinasi) sehingga menunjukkan hasil positif dan dapat diketahui bahwa kontrol mengandung konsentrasi CRP dalam keadaan di atas kadar normal. Plate ke-2 yang ditetesi dengan reagen kontrol negatif menunjukkan tidak terbentuk aglutinasi. Plate ke-3 yang ditetesi dengan sampel serum menunjukkan tidak terbentuk gumpalan-gumpalan putih (tidak terjadi aglutinasi). Plate ke-4 yang ditetesi dengan sampel serum juga menunjukkan tidak terbentuk gumpalan-gumpalan putih (tidak terjadi aglutinasi). Hasil negatif diartikan bahwa di dalam plasma tidak mengandung konsentrasi CRP yang menandakan tidak terjadinya peradangan infeksi atau kerusakan jaringan. Kadar CRP dalam tubuh akan meningkat seiring dengan terjadianya infeksi dan peradangan. Proses peradangan akan mengaktifkan makrofag terutama di dalam sinovium untuk mensintesa Interleukin-6 (IL-6). IL-6 akan merangsang sel hati untuk mensintesa protein fase akut yaitu C-Reactive Protein (CRP), sehingga kadar dalam darah akan meningkat sampai 10 kali lipat dari normal. Pembentukan CRP akan meningkat dalam 4 sampai 6 jam setelah terjadi peradangan, jumlahnya bahkan berlipat dua dalam 8 jam setelah peradangan. Konsentrasi puncak akan tercapai dalam 36 jam sampai 50 jam setelah inflamasi. Kadar CRP akan terus meningkat seiring dengan proses inflamasi yang akan mengakibatkan kerusakan jaringan. Apabila terjadi penyembuhan akan terjadi penurunan kadar CRP secara cepat karena CRP memiliki masa paruh 4 sampai 7 jam. Apabila terjadi penyembuhan atau perbaikan pada sel-sel yang mengalami inflamasi atau kerusakan, maka kadar CRP akan normal kembali setelah 2 minggu. Banyak manfaat dari uji CRP untuk mengetahui berbagai macam penyakit akibat infeksi maupun peradangan, dilihat dari peningkatan konsentrasinya. Dalam diagnosis bakteri Pneumonia, CRP serum bermanfaat untuk membedakan kolitis ulseratif dari penyakit Crohn dan Lupus eritematosus sistemik, sebaliknya dari artritis rheumatoid memperlihatkan sedikit atau tidak ada respon CRP kecuali ada penyakit infeksi berulang. Pada infark miokard suatu peningkatan tajam kadar CRP serum biasanya sejajar dengan luasnya infark. Pada pasien luka bakar, peningkatan CRP serum berkaitan dengan beratnya luka bakar. Penurunan kadar CRP serum dapat menunjukkan terapi yang berhasil pada pielonefretis akut. Peningkatan mendadak kadar CRP serum diakibatkan oleh ginjal.
9
Pemeriksaan CRP merupakan uji laboratorium yang dapat membantu untuk menentukan derajat beratnya suatu penyakit. Pemeriksaan CRP dapat dilakukan secara kualitatif dan kuantitatif. Pemeriksaan CRP secara kualitatif yaitu pemeriksaan yang bertujuan untuk mendeteksi keberadaan CRP dalam sampel tanpa mengetahui besarnya kadar CRP, contoh pemeriksaan CRP secara kualitatif yaitu metode aglutinasi atau metode lain yang lebih maju, misalnya sandwich imunometri. Berbeda dengan pemeriksaan CRP secara kualitat if, pemeriksaan CRP secara kuantitatif yaitu pemeriksaan yang bertujuan untuk mengetahui besarnya kadar CRP dalam sampel, contoh pemeriksaan ini yaitu menggunakan metode ELISA (Enzim Linked Immunosorbent Assay).
10
BAB IV PENUTUP
4.1.
Kesimpulan
CRP Adalah suatu protein fase akut yang diproduksi oleh hati sebagai respon adanya infeksi, inflamasi atau kerusakan jaringan. Inflamasi merupakan proses dimana tubuh memberikan respon terhadap injury. Jumlah CRP akan meningkat tajam beberapa saat setelah terjadinya inflamasi dan selama proses inflamasi sistemik berlangsung. Sehingga pemeriksaan CRP kuantitatif dapat dijadikan petanda untuk mendeteksi adanya inflamas i/infeksi akut. Berdasarkan hasil dan pembahasan sebelumnya dapat diambil kesimpulan bahwa :
4.2.
Hasil praktikum menunjukkan bahwa pada reagen kontrol positif yang diuji pada plate 1 terbentuk aglutinasi, pada plate ke-2 yang ditetesi dengan reagen kontrol negatif menunjukkan tidak terbentuk aglutinasi, plate ke-3 yang ditetesi dengan sampel serum menunjukkan tidak terbentuk aglutinasi dan plate ke-4 yang ditetesi dengan sampel serum juga menunjukkan tidak terbentuk aglutinasi. Hasil positif pada pemeriksaan CRP secara kualitatif mendiagnosa kadar CRP dalam sampel > 6 mg/L namun kadar CRP secara pasti dapat diketahui dengan melakukan pemeriksaan CRP secara kuantitatif.
Saran
Pada saat pengambilan darah vena dan dimasukkan dalam wadah perlu dijauhkan dari panas karena CRP mudah berubah akibat suhu. Sebaiknya sebelum dilakukan pengambilan darah, pasien harus ditenangkan terlebih dahulu.Perlu dikenali setiap peningkatan CRP yang berhubungan dengan proses inflamasi akut (misal sakit dan pembengkakan sendi, panas, merah-merah dan meningkatnya suhu tubuh).
11
DAFTAR PUSTAKA
Price, A. Sylvia, dkk. 1995. Patofisiologi Konsep Klinis Proses-Proses Penyakit . Jakarta : EGC. Robbins dan Kumar. 1995. Buku Ajar Patologi II Edisi 4. Jakarta : EGC. https://armantonnynasution.blogspot.com/2013/01/pemeriksaan-crp-c-reaktif protein.html. diakses pada tanggal 4 Desember 2017. Touogiie. 2011. Kumpulan artikel kesehatan. (online). https://www.medicinet.com/c-reaktive-protein-test-crp/article.html. diakses pada tanggal 4 Desember 2017. Wikipedia. 2012. CRP (C-ReaktiveProtein). (online). https://en.wikipedia.org/wiki/C-reaktive-protein.html. diakses pada tanggal 4 Desember 2017.
12
