LAPORAN RESMI PRAKTIKUM TEKNOLOGI DAN FORMULASI SEDIAAN STERIL
PRAKTIKUM V PEMBUATAN TETES MATA KLORAMFENIKOL DAN UJI STERILITAS
Oleh: Nama
: Desi Riza Pratiwi
NIM
: 10/304988/FA/08652 10/304988/FA/08652
Kelas
: A 2010
Golongan/Kelompok
: IV/4
Hari,Tanggal Praktikum
: Jumat, 5 April 2013
Dosen jaga
: Drs. Mufrod, M.Sc., Apt.
Asisten jaga
:
Asisten koreksi
:
LABORATORIUM TEKNOLOGI FARMASI BAGIAN FARMASETIKA FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS GADJAH MADA YOGYAKARTA 2013
Pembuatan Tetes Mata Kloramfenikol Dan Uji Sterilitas I.
Tujuan
Agar mahasiswa dapat memahami dan mampu membuat tetes mata kloramfenikol.
II.
Dasar teori
Tetes mata adalah cairan steril atau larutan berminyak atau suspensi yang ditujukan untuk dimasukkan dalam saccus conjungtival. Tetes mata dapat mengandung bahan-bahan antimikroba seperti antibiotik, bahan antiinflamasi seperti kortikosteroid, obat miotik seperti fiostigmin sulfat atau obat midriatik seperti atropin sulfat (Ansel, 1989). Larutan obat mata adalah larutan steril, bebas partikel asing, merupakan sediaan yang dibuat dan dikemas sedemikian rupa sehingga sesuai digunakan pada mata (Farmakope Indonesia IV, 1995). Pada pembuatan obat mata perlu diperhatikan hal khusus sebagai berikut:
Toksisitas bahan obat
Tonisitas
Kebutuhan akan dapar
Sterilitas
Kemasan yang tepat Air mata normal memiliki pH kurang lebih 7,4 dan mempunyai kapasitas
dapar tertentu. Penggunaan obat mata merangsang pengeluaran air mata dan penetralan cepat setiap perubahan pH tertentu. Secara ideal larutan obat mempunyai pH dan isotonisitas yang sama dengan air mata. Hal ini tidak selalu dapat dilakukan, karena pada pH>7,4 banyak obat yang tidak cukup larut dalam air. Selain itu banyak obat yang secara khemis tidak stabil pada pH mendekati 7,4. ketidakstabilan ini lebih nyata pada suhu tinggi yaitu pada saat sterilisasi dengan pemanasan. Oleh karena itu pada system dapar harus dipilih sedekat mungkin dengan pH fisiologis yaitu 7,4 dan tidak menyebabkan pengendapan obat ataupun mempercepat kerusakan obat. Nilai isotonisitas cairan mata isotonic dan darah mempunyai nilai isotonisitas sesuai dengan larutan NaCl p 0,9%. Secara ideal larutan obat mata harus mempunyai nilai isotonisitas tersebut, tetapi mata tahan terhadap
isotonisitas rendah setara dengan larutan NaCl p 0,6% dan tertinggi setara dengan larutan NaCl p 0,2% tanpa gangguan yang nyata. Sebagian besar zat aktif yang digunakan untuk sediaan mata bersifat larut air, basa lemah atau dipilih bentuk garamnya yang larut air. Sifat- sifat fisikokimia yang harus diperhatikan dalam memilih garam untuk formulasi larutan optalmik yaitu : 1. Kelarutan 2. Stabilitas 3. pH stabilitas dan kapasitas dapar 4. kompatibilitas dengan bahan lain dalam formula Bentuk garam yang biasa digunakan adalah garam hidroksida, sulfat dan nitrat. Sedangkan untuk zat aktif yang berupa asam lemah, biasanya digunakan garam natrium (Lund, 1994). Larutan obat mata dapat dikemas dalam wadah takaran ganda bila digunakan secara perorangan pada pasien dan bila tidak terdapat kerusakan pada permukaan mata. Wadah larutan obat mata harus tertutup rapat dan disegel untuk menjamin sterilitas pada pemakaina pertama. Sedangkan untuk penggunaan pembedahan, disamping steril, larutan obat mata tidak boleh mengandung antibakteri karena dapat mengiritasi jaringan mata (Farmakope Indonesia IV, 1995).
III.
Alat dan bahan
Alat :
Timbangan
Gelas ukur
Vial
Penutup botol
Gelas pengaduk
Penangas air
CMC - Na
Gelas beaker
Glassware
Kloramfenikol
Aqua p.i.
Phenilhydrargyrinitas
IV.
Bahan :
pH meter
Prosedur kerja a. Formula
R/ tiap ml mengandung : -
Kloramfenikol
50
mg
Asam borat Natrium tetra borat
-
Asam borat
150
mg
- Natrii tetra borat
30
mg
-
Phenilhydrargyrinitas 100
µg
-
Aqua Pi
10
ad
ml
b. Cara kerja
Asam borat dan natrii tetra borat dilarutkan dalam aqua p.i (larutan 1)
Kloramfenikol ditambahkan pada larutan 1
larutan distir sampai larut sempurna
Larutan kloramfenikol dimasukkan ke dalam vial sebanyak 10 ml, ditutup kedap
Larutan kloramfenikol disterilisasi dengan cara B
Tetes mata yang dihasilkan diamati
Diberi etiket biru
V.
Pemerian a. Kloramfenikol
C11H12Cl2 N2O5
BM : 323,13
Kloramfenikol mengandung tidak kurang dari 97,0% dan tidak lebih dari 103,0% C 11H12Cl2 N2O5. Pemerian : hablur halus berbentk jarum atau lempeng memanjang, putih hingga putih kelabu atau putih kekuningan, larutan praktis netral terhadap lakmus p, stabil dalam larutan netral atau agak asam. Kelarutan : sukar larut dalam air, mudah larut dala m etanol, dalam glikol, dalam aseton dan dalam etil asetat. (Farmakope Indonesia IV, 1995).
b. Natrii tetra borat
Na2B4O7.10H2O
BM : 381,37
(Farmakope Indonesia IV, 1995). c. Asam borat
H3BO3
BM : 61,83
(Farmakope Indonesia IV, 1995). d. Phenylhidrargirinitas
C12H11Hg2 NO4
BM : 634,45
Fenilraksa (II) nitrat adalah campuran fenilraksa (II) nitrat dan fenilraksa (II) hidroksida. Mengandung tidak kurang dari 87,0% dan tidak lebih dari 87,9% ion fenilraksa (II) (C6H5Hg*) dan tidak kurang dari 62,75% dan tidak lebih dari 63,50 % raksa (II) (Hg). Pemerian : serbuk hablur putih, diperngaruhi oleh cahaya. Larutan jenuh memberikan reaksi asam terhadap lakmus. Kelarutan : sangat sukar larut dalam air, sangat sukar larut dalam etanol dan dalam gliserin, lebih mudah larut dengan adanya asam nitrat atau alkali hidroksida. (Farmakope Indonesia IV, 1995). e. Aqua pro injectione
Air untuk injeksi Air untuk injeksi adalah air suling segar yang disuling kembali,disterilkan dengan cara sterilisasi A atau C.
Pemerian : keasaman-kebasaan, ammonium, besi, tembaga, timbal, kalsium, klorida, nitrat, sulfat, zat teroksidasi memenuhi syarat yang tertera pada aqua destilata. ( Farmakope indonesia III,1979)
VI.
Data percobaan dan hasil
Penimbangan untuk 60 ml larutan suspensi : -
Kloramfenikol
300
mg
-
Asam borat
900
mg
- Natrii tetra borat
180
mg
-
Phenilhydrargyrinitas
100
µg
-
Aqua Pi
60
ml
Volume vial
= 10 ml
Jumlah vial
= 6 buah
Etiket
= biru
ad
Pengamatan sediaan suspensi : -
Tetes mata yang dihasilkan jernih
-
Tidak ada partikel asing
-
Tidak ada vial yang bocor
- pH : 7 Perhitungan tonisitas (untuk 1 L sediaan)
{( )( )( )} ⁄ 253, 77 ⁄ untuk 60 ml batch
Keterangan : fa : faktor disosiasi dari senyawa a fb : faktor disosiasi dari senyawa b fc : faktor disosiasi dari senyawa c fh : faktor disosiasi NaCl Ma: bobot molekul dari senyawa a Mb: bobot molekul dari senyawa b Mc: bobot molekul dari senyawa c Mh: bobot molekul NaCl
a : berat senyawa a (dalam 1000 ml) b : berat senyawa b (dalam 1000 ml) c : berat senyawa c (dalam 1000ml) h : banyaknya zat pembantu yang diperlukan untuk mencapai isotonis.
VII.
Pembahasan
Percobaan ini bertujuan untuk membuat tetes mata kloramfenikol. Kloramfenikol adalah antibiotik yang mempunyai aktifitas bakteriostatik, dan pada
dosis
tinggi
bersifat
bakterisid.
Aktivitas
antibakterinya
dengan
menghambat sintesa protein dengan jalan mengikat ribosom subunit 50S, yang merupakan langkah penting dalam pembentukan ikatan peptida. Kloramfenikol efektif terhadap bakteri aerob gram-positif, termasuk Streptococcus pneumoniae, dan beberapa bakteri aerob gram-negatif, termasuk Haemophilus influenzae, Neisseria meningitidis, Salmonella, Proteus mirabilis, Pseudomonas mallei, Ps. cepacia, Vibrio cholerae, Francisella tularensis, Yersinia pestis, Brucella dan Shigella. Kloramfenikol adalah salah satu antibiotik yamg secara kimiawi diketahui paling stabil dalam segala pemakaian. Kloramfenikol memiliki stabilitas yang angat baik pada suhu kamar dan kisaran pH sampai 7, stabilitas maksimumnya dicapai pada pH 6. Air mata mempunyai pH normal 7,4 dan memiliki suatu kemampuan dapar. Pemakaian suatu larutan yang mengandung obat mata merangsang aliran air mata yang mencoba menetralkan setiap kelebihan ion hidrogen atau hidroksil yamg dikenakan bersama larutan (Ansel, 1989). Daerah toleransi pH yang tidak merusak mata ternyata tidak sama pada beberapa literatur. Pada pemakaian tetesan biasa yang nyaris tanpa rasa nyeri adalah larutan dengan pH 7,3-9,7. Daerah pH 5,5 – 11,4 masih dapat diterima (Voight, 1994). Penyeimbangan pH pada umumnya dilakukan dengan larutan dapar isotonis pada praktikum kali ini digunakan dapar borat. Tetes mata yang dibuat pada percobaan ini berbentuk larutan. Bentuk larutan pada sediaan tetes mata mempunyai keuntungan antara lain mudah dipakai karena tinggal diteteskan pada mata dan media yang digunakan tidak menghalangi
penglihatan
mata
karena
jernih.
Sedangkan
kekurangan
pengggunaan larutan tetes mata antara lain kontak dengan mata sebentar se hingga pemakaiannya berulang ataupun perlu penambahan viscosity agent. Pertama-tama natrii tetra borat dan asam borat dilarutkan dalm aqua p.i sampai telarut sempurna. Campuran tersebut membentuk system dapar pada trayek pH 7 – 9 dan cenderung basa.
gb. 1 penambahan natrii tetra borat dan asam borat ke dalam aquadest
gb. 2 pengadukan natrii tetra borat dan asam borat
Kemudiaan kloramfenikol dimasukkan dalam larutan natrii tetra borat dan asam borat.
gb. 3 penambahan kloramfenikol
gb. 4 pengadukan kloramfenikol
Kelarutan kloramfenikol dalam air adalah sukar larut (1:400), sehingga dalam proses pelarutannya perlu perhatian khusus dan dipastikan bahwa kloramfenikol telah larut semua karena untuk menhindari adanya partikel yang tidak terlarut. Untuk mengatasi masalah kelarutan kloramfenikol yang susah larut, maka digunakan kloramfenikol basa yaitu kloramfenikol yang mudah larut dalam suasana basa. Tidak digunakan kloramfenikol palmitat maupun kloramfenikol stearat karena keduanya tidak larut dalam air. Kelarutan kloramfenikol lebih mudah larut dalam larutan alkali, tetapi perlu diingat bahwa dalam keadaan alkali kloramfenikol mudah mengalami hidrolisis menghasilkan senyawa yang tidak aktif sehingga dapat mengurangi kadar zat
aktifnya. Hidrolisis terjadi terutama pada gugus Cl kloramfenikol yang merupakan gugus penting dalam aktivitasnya sebagai bakteriostatik. Oleh karena itu, campuran natrii tetra borat dan asam borat dapat digunakan untuk
meningkatkan
kelarutan
kloramfenikol.
Peningkatan
kelarutan
kloramfenikol tersebut diduga karena adanya pembentukan kompleks antara kloramfenikol dengan boraks dengan rasio 2:1. Pembentukan kompleks ini memungkinkan terjadinya solvasi oleh medium air sehingga kloramfenikol mudah larut. Campuran boraks dan asam borat lebih berfungsi meningkatkan kelarutan kloramfenikol daripada sebagai buffer. Dalam
literature
disebutkan
bahwa
pembentukan
kompleks
antara
kloramfenikol dan boraks diperlukan suhu dan pengadukan yang cukup baik. Oleh karena itu dalam proses melarutkan kloramfenikol dibantu dengan pemanasan di atas penangas air. Pemanasan tidak akan merusak struktur karena kloramfenikol tahan terhadap pengaruh suhu. Setelah kloramfenikol larut dalam aqua p.i, sebanyak 10 ml larutan dimasukkan ke dalam vial kemudian ditutup dan dilakukan sterilisasi.
gb. 5 pengambilan 10 ml larutan kloramfenikol
gb. 7 penutupan vial
gb. 6 pemasukan larutan kloramfenikol ke dalam vial
gb. 8 proses sterilisasi B
Proses sterilisasi sangat diperlukan pada pembuatan tetes mata untuk menghilangkan mikroorganisme, karena larutan yang terkontaminasi dapat menyebabkan infeksi yang serius pada mata sehingga makin memperburuk luka dan akibat serius lainnya dapat menimbulkan kebutaan. Bila mata luka, infeksi dapat masuk ke dalam daerah non vaskuler di bawah kornea mata yang
merupakan daerah pertumbuhan yang sangat baik sehingga organisme dapat memperbanyak diri sehingga kornea mata menjadi rusak atau luka yang dapat menghilangkan penglihatan.
Pembuatan tetes mata kloramfenikol perlu
memperhatikan proses sterilisasinya. Proses sterilisasi panas yang berlebihan dapat merusak kimiawi zat aktifnya. Sterilisasi yang dilakukan untuk tetes mata kloramfenikol adalah sterilisasi cara B (Farmakope Indonesia, 1975), yaitu dengan memanaskan larutan dalam wadah pada suhu 98°-100°C selama 30 menit jika volume tidak lebih dari 30 ml. Tetapi jika volume lebih dari 30 ml, maka waktu diperanjang hingga dipastikan tiap wadah suhunya 98°-100°C selama 30 menit. Kloramfenikol stabil terhadap pengaruh suhu baik dalam bentuk kristal maupun larutan. Pendidihan dalam air selama 5 jam tidak merusak aktivitas mikrobanya. Salah satu syarat tetes mata yaitu harus punya pH yang sesuai baik dari segi terapi kenyamanan pasien maupun sifat fisika-kimia bahan obatnya. Dari segi terapi pH harus disesuaikan dengan pH tubuh karena larutan yang pH dan tonisitasnya sangat berbeda dari normal tubuh akan menyebabkan keluarnya air mata yang akan mencuci obatnya dari daerah kornea dan mengakibatkan obatnya tumpah keluar mata sehingga efektivitasnya berkurang. Dari segi sifat fisikakimia obatnya pengaturan pH harus memperhatikan juga kelarutan dan stabilitas obatnya. Pasien merasa sakit karena iritasi apabila pH terlalu jauh dari pH normal (lebih kurang 7,4). Oleh karena hal tersebut maka pH tetes mata kloramfenikol dibuat pada pH 7. Pengawet yang digunakan adalah phenylhydragyrinitas (fenil raksa (II) nitrat) yaitu campuran fenil raksa (II) nitrat dan fenil raksa (II) hidroksida. Fenil raksa (II) nitrat sangat sukar larut dalam air sehingga untuk melarutkannya perlu ditambahkan pada larutan buffer basa (asam borat dan boraks).
Tetapi pada
praktikum kali ini tidak diberi pengawet phenylhydragyrinitas. Karena tetas mata tidak melalui sirkulasi/peredaran darah mata tidak diperlukan adanya bebas pirogen.
Karena pirogen yang ada tidak akan
menimbulkan suatu respon piretik spesifik. Terjadinya respon piretik jika pirogen masuk kedalam sirkulasi sistemik, sedangkan pada penggunaan tetes mata tidak sampai masuk kedalam sirkulasi sistemik.
Setelah proses sterilisasi selesai kemudian vial diberi etiket biru karena penggunaan sediaan tetes mata kloramfenikol tidak melewati saluran pencernaan melainkan diteteskan pada mata. Dari hasil percobaan didapatkan pH tetes mata yang dihasilkan sebesar 7. Larutan jernih, tidak terdapat partikel asing. Dari tes kebocoran tidak ada satupun wadah yang bocor. Secara keseluruhan tetes mata yang dihasilkan sudah memenuhi syarat sediaan tetes mata.
VIII.
Kesimpulan
1. Formula sediaan tetes mata yang dibuat pada praktikum ini adalah :
IX.
-
Kloramfenikol
300
mg
-
Asam borat
900
mg
-
Natrii tetra borat
180
mg
-
Phenilhydrargyrinitas
100
µg
-
Aqua Pi
60
ml
ad
2.
Pada praktikum kali ini tidak diberi pengawet phenilhydrargyrinitas.
3.
Tetes mata yang dihasilkan sebanya 6 vial @ 10 ml.
4.
Tetes mata yang dihasilkan beretiket biru.
5.
Pengamatan sediaan suspensi : -
Tetes mata yang dihasilkan jernih
-
Tidak ada partikel asing
-
Tidak ada vial yang bocor
Daftar pustaka
Anonim, 1979, Farmakope Indonesia, edisi ketiga, Depkes RI, Jakarta. Anonim, 1995, Farmakope Indonesia, edisi keempat, Depkes RI, Jakarta. Ansel, C., Howard, 1989, Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi, edisi keempat, UI Press, Jakarta Lund, W., 1994, The Pharmaceutical Codex, 20th edition, PhP, London. Voight, R., 1994 , Buku Pelajaran Teknologi Farmasi, Gadjah Mada University Press, Yogyakarta.
X. JAWABAN PERTANYAAN 1. Sebutkan persyaratan yang harus dipenuhi untuk tetes mata?
a. Steril Tetes mata harus steril bebas mikroba karena digunakan pada selaput lender mata disekitar kelopak mata dan bola mata. Jika terdapat mikroba memungkinkan terjadinya iritasi, sehingga tetes mata harus steril. b. Bebas partikel asing Partikel asing merupakan bahan bergerak yang tidak larut dan secara tidak sengaja terdapat dalam sediaan. Adanya partikel asing pada tetes mata menyebabkan penggunaan yang tidak nyaman. c. Bebas dari pengaruh iritasi Tetes mata harus dapat mencegah iritasi pada mata supaya tidak semakin memperburuk luka. d. Media preservative yang sesuai (untuk multiple dose) Tetes mata yang digunakan berulang kali harus dapat menjaga kestabilannya dari pengaruh mikroorganisme, agar tetap terjaga efektivitasnya. e. Isotonik dan isohidris dengan cairan lacrimal Tetes mata harus punya pH yang baik karena larutan yang pH dan tonisitasnya sangat berbeda dari normal akan menyebabkan keluarnya air mata yang akan mencuci obatnya dari daerah kornea dan mengakibatkan obatnya tumpah keluar mata. g. Stabil Tetes mata harus stabil terutama dalam hal kestabilan kimia dalam rangka tetap menjaga efektivitas/khasiat obat. Jika obat telah rusak maka akan tidak berefek lagi. 2. Apakah tetes mata harus bebas pirogen? Jelaskan!
Karena tetas mata tidak melalui sirkulasi/peredaran darah mata tidak diperlukan adanya bebas pirogen. Karena pirogen yang ada tidak akan menimbulkan suatu respon piretik spesifik. Terjadinya respon piretik jika pirogen masuk kedalam sirkulasi sistemik, sedangkan pada penggunaan tetes mata tidak sampai masuk kedalam sirkulasi sistemik. 3. Sebutkan macam-macam bentuk sediaan untuk penggunaan pada mata
1. Tetes mata
-
larutan/ suspensi steril, mengandung satu atau lebih bahan obat, dalam media air/minyak, penggunaan pada conjungtiva sackus
2. Salep mata -
semisolid steril, homogen, mengandung satu atau lebih bahan obat, pada conjungtiva margin
3. Larutan pencuci mata -
larutan steril (air), washing or bathing
4. Sediaan untuk lensa kontak -
larutan (air) steril, cleaning, desinfectan, storage n wetting of contact lenses
5. Injeksi mata rute yang digunakan yaitu: -
subconjungtival injections
-
intracameral injections
-
intravitreous injections
4. Sebutkan pemeriksaan yang dilakukan pada tetes mata?
1. Isohidris (pH) larutan 2. Kejernihan 3. Partikel asing 4. Kebocoran 5. Sebutkan keuntungan penggunaan bentuk tetes mata larutan dan bentuk lain
(salep) pada penggunaan mata? Keuntungan bentuk larutan: 1. mudah dipakai/diteteskan 2. medium tidak mempengaruhi penglihatan
