LAPORAN RESMI PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI FARMASI PRAKTIKUM X UJI ANGKA LEMPENG TOTAL TOTAL
Penyusun : 1. Annisa Nilams amsari Utami 14/362870/FA/10026 (……) 2. u!a u!amm mma" a" Fais! Fais!al al a!" a!"ii 14/3 14/362 6287 873/ 3/F FA/100 /1002# 2# (……) (……) 3. $inantya tya %alia Para aramita 14/36287#/FA/1003& (……) 'elas
:A
ln*an / 'elm+,
: -- / 2
ari %an**al Pra,ti,um
: au 20 ei 201&
sen a*a
: r. rer.nat. si 5ayu urti .i. A+t.
Asisten a*a
: ita "an i
Asisten 're,si
:
LABORATORIUM MIKROBIOLOGI FARMASI BAGIAN BIOLOGI FARMASI FAKULTAS FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS GADJAH MADA YOGYAKARTA 2015
PRAKTIKUM X UJI ANGKA LEMPENG TOTAL
I. Tujua
eneta+,an emaran a,teri yan* ter"a+at "alam se"iaan ma,anan minuman ,smeti,a at atau at tra"isinal. II. Da!a" T#$"% Pertumu!an a,teri "en*an era*ai ara yan* sala! satunya yaitu u9i an*,a
lem+en* ttal. Pen*u,uran "en*an platting technique (u9i an*,a lem+en* ttal) meru+a,an met"e +er!itun*an 9umla! sel tam+a, (isile) "an "i"asar,an +a"a asumsi a!a a,teri !i"u+ a,an tumu! memela! "an mem+r"u,si satu ,lni tun**al. atuan +er!itun*an yan* "i+a,ai a"ala! $FU ($lny Frmin* Unit) "en*an ara memuat seri +en*eneran sam+el "an menumu!,an sam+el +a"a me"ia +a"at. Pen*u,uran "ila,u,an +a"a +late "en*an 9umla! ,lni er,isar 2&;2&0 atau 30;300 (Pratii 2008). U9i an*,a lem+en* ttal (A<%) meru+a,an met"e yan* umum "i*una,an untu, men*!itun* a"anya a,teri yan* ter"a+at "alam se"iaan yan* "i+eri,sa. U9i an*,a lem+en* ttal "a+at "ila,u,an "en*an "ua te,ni, yaitu te,ni, aan tuan* ( pour plate) "an te,ni, searan ( spread plate). Pa"a +rinsi+nya "ila,u,an +en*eneran ter!a"a+ se"iaan yan* "i+eri,sa ,emu"ian "ila,u,an +enanaman +a"a me"ia lem+en* a*ar. umla! ,lni a,teri yan* tumu! +a"a lem+en* a*ar "i!itun* setela! in,uasi +a"a su!u "an a,tu yan* sesuai. Per!itun*an "ila,u,an ter!a"a+ +etri "en*an 9umla! ,lni a,teri antara 30;300. %iti, an*,a lem+en* ttal "inyata,an sea*ai 9umla! ,lni a,teri !asil +er!itun*an "i,ali,an "en*an =a,tr +en*eneran. umla! an*,a lem+en* ttal memenu!i aturan e+artemen 'ese!atan - 9i,a ,uran* "ari 10 6 (aet> ",,. 1##&). Prinsi+ "ari met"e aan tuan* a"ala! ila sel "itumu!,an +a"a me"ium ma,a mi,ra terseut a,an er,eman* ia, "an mementu, ,lni yan* "a+at "ili!at lan*sun* "an ,emu"ian "i!itun* tan+a men**una,an mi,rs,+. et"e ini meru+a,an ara yan* +alin* sensitie untu, menentu,an 9umla! 9asa" reni, "en*an alasan : a. anya sel mi,ra yan* !i"u+ yan* "a+at "i!itun*. . 5eera+a 9asa" reni, "i!itun* se,ali*us. . a+at "i*una,an untu, islasi "an i"enti=i,asi mi,ra ,arena ,lni yan* terentu, mun*,in erasal "ari mi,ra yan* mem+unyai +enam+a,an s +esi=i,. elain ,euntun*an;,euntun*an "i atas met"e !itun*an aan 9u*a mem+unyai ,elema!an : a. asil +er!itun*an ti"a, menun9u,,an 9umla! sel yan* seenarnya ,arena eera+a sel yan* er"e,atan mun*,in mementu, ,lni.
. e"ium "an ,n"isi in,uasi yan* ere"a mun*,in men*!asil,an 9umla! yan* ere"a +ula. . i,ra yan* "itumu!,an !arus "a+at tumu! +a"a me"ium +a"at "an mementu, ,lni yan* ,m+a, 9elas "an ti"a, menyear. ". emerlu,an +ersia+an "an a,tu in,uasi yan* relati= lama a*ar +ertumu!an ,lni "a+at "i!itun*. ementara te,ni, searan "ila,u,an "en*an ara menuan*,an me"ia terlei! "a!ulu ,emu"ian setela! me"ia mema"at aru sus+ensi sam+el "imasu,,an +a"a +ermu,aan a*ar "an "irata,an "en*an spreader glass. 'euntun*an met"e spread plate: a. am+el yan* "iutu!,an !anya se"i,it . $, untu, se*ala maam a,teri . %i"a, ter+en*aru! su!u. 'eru*ian met"e spread plate: a. Perlu men**una,an spreader glass . Perlu ,ea!lian ,!usus "alam +eralatan sam+el a*ar me"ia ti"a, rusa, (Pratii 2008). yarat;syarat met"e yan* ai, a"ala! : a. usunan ma,anan !arus ter+enu!i untu, +ertumu!an a,teri missal sumer nitr*en . . ". e.
III.
"an sumer ,arn. %e,anan smsis !arus istnis era9at ,easaman (+) relati= netral %em+eratur in,uasi se,itar 37?$ terilitas !arus ter9a*a "en*an men*er9a,annya seara ase+tis.
A&a' (a Ba)a A. A&a' 1. 'ta, ase+tis 2. Laminar Air Flow (
3. e"ia P$A ( "late #ount Agar ) IV.
*a"a K#"ja itiman* 1 *ram sam+el yan* a,an "i+eri,sa "iam+ur "en*an 10 m< AA 00&
i;$orte! am+uran sam+el "an larutan +en*ener !in**a !m*en ila,u,an +en*eneran seri !in**a 10 ;& "ire+li,asi seanya, satu ,ali iamil seanya, 1 m< sam+el u9i "ari masin*;masin* taun* "ituan*,an ,e "alam aan +etri yan* tela! "itan"ai untu, tia+ ,nsentrasi "an seri +en*eneran °
iair,an me"ia P$A "itun**u !in**a su!unya se,itar 40 $ ituan* 10 m< me"ia P$A air ,e "alam tia+;tia+ aan +etri "iiar,an mema"at iuat ,ntrl me"ia "an ,ntrl +elarut °
iin,uasi +etri selama 24 9am +a"a su!u B 37 $ "alam +sisi terali, i!itun* 9umla! ,lni a,teri yan* tumu! +a"a masin*;masin* aan +etri V. Ha!%& P#+a,a'a
Gambar 1. %ampel
u&i dengan pengenceran 1' (1 setelah diin)ubasi selama 24 &am. *umlah )oloni pada
seri pengenceran pertama +)iri, adalah 12' dan pada seri pengenceran )edua +)anan, adalah 213.
Gambar 2. %ampel
u&i dengan pengenceran 1' (2 setelah diin)ubasi selama 24 &am. *umlah )oloni pada
seri pengenceran pertama +)iri, adalah 2' dan pada seri pengenceran )edua +)anan, adalah 17.
Gambar 3. %ampel
u&i dengan pengenceran 1' (3 setelah diin)ubasi selama 24 &am. *umlah )oloni pada
seri pengenceran pertama +)iri, adalah -7 dan pada seri pengenceran )edua +)anan, adalah 13.
Gambar 4. %ampel
u&i dengan pengenceran 1' (4 setelah diin)ubasi selama 24 &am. *umlah )oloni pada
seri pengenceran pertama +)iri, adalah 3 dan pada seri pengenceran )edua +)anan, adalah '.
Gambar 5. %ampel
u&i dengan pengenceran 1' (5 setelah diin)ubasi selama 24 &am. *umlah )oloni pada
seri pengenceran pertama +)iri, adalah 1 dan pada seri pengenceran )edua +)anan, adalah '.
Gambar 6. ontrol
media +)anan, dan )ontrol pelarut +)iri, setelah diin)ubasi selama &am. edua )ontrol bebas dari )oloni ba)teri.
Gambar 7. Larutan
sto) sampel u&i +tida) diencer)an, setelah diin)ubasi selama 24 &am. *umlah )oloni
pada seri pengenceran pertama +)iri, adalah 2'' dan pada seri pengenceran )edua +)anan, adalah 277
Pen*amatan "ila,u,an setela! sam+el "iin,uasi selama 1 C 24 9am +a"a su!u B °
37 $. ata 9umla! ,lni yan* tumu! +a"a masin*;masin* ,nsentrasi sam+el u9i "i!im+un "alam tael eri,ut ini. 'nsentras i 10;1 10;2 10;3 10;4 10;&
eri ,e
umla! ,lni
------
120 213 20 17 87 13 3 0 1 0
emenu!i syarat +er!itun*an A<%D a ,arena E 30 "an 120 a ,arena E 30 "an 120 %i"a, ,arena 30 %i"a, ,arena 30 a ,arena E 30 "an 120 %i"a, ,arena 30 %i"a, ,arena 30 %i"a, ,arena 30 %i"a, ,arena 30 %i"a, ,arena 30
Pa"a tin*,at +en*eneran 10 ;1 ,e"ua aan +etri men*!asil,an 9umla! ,lni antara 30;300. Untu, men"a+at,an nilai A<%;nya 9umla! ,lni rata;rata "ari ,e"ua aan +etri "i,ali,an "en*an =a,tr +en*eneran. Per!itun*annya a"ala! sea*ai eri,ut: Rata− rata jumlah koloni=
Jumlahkoloni× ALT =
120 + 213 2
=
333 2
1
faktor pengencer = gram sampel
=
166,5 koloni
166,5 × 1
1 −1
10
=1665 CFU / mL
5er"asar,an "ata yan* ter"a+at "alam tael terseut sam+el u9i yan* "i+eri,sa memili,i A<% lei! ,eil "ari+a"a yan* "iteta+,an le! e+artemen 'ese!atan e+uli, -n"nesia yaitu 10 6 $FU/m< ti"a, melei!i aman* atas ,nsumsi. VI. P#,-a)a!a Pra,ti,um ini ertu9uan untu, men*eta!ui ,eera"aan emaran a,teri "alam sam+el
yan* "iu9i. enurut e+artemen 'ese!atan e+uli, -n"nesia suatu se"iaan "ian**a+ aman untu, "i,nsumsi 9i,a A<%;nya ,uran* "ari 10 6 $FU/m< (Annim 1##2). am+el yan* "iu9i "alam +ra,ti,um ,ali ini a"ala! $al!ai" @ ,a+sul +r"u,si P% P% r. ar"9it men*an"un* G,stra, %onchi Folium seanya, 38& m* G,stra, #urcumae /hi0oma seanya, 100 m* "an a!arum latis (*ula susu) seanya, 1& m* tia+ ,a+sul. et"e yan* "i*una,an untu, menentu,an A'';nya a"ala! pour plate yaitu te,ni, menumu!,an a,teri "en*an menama!,an sus+ensi a,teri "alam me"ia ,emu"ian "i+a"at,an (
!m*en. i*una,an AA 00& ,arena >at ini memili,i + "an te,anan smti, yan* sesuai "en*an ,n"isi +ertumu!an a,teri. $am+uran ini men9a"i larutan st,.
eelum
"itama!,an "en*an sam+el yan* era"a "alam aan +etri me"ia yan* tela! menair °
terseut "i"iam,an terlei! "a!ulu !in**a su!unya mena+ai B 40 $. A+aila terlalu +anas a,teri "a+at mati se"an*,an a+aila terlalu "in*in me"ia a,an mema"at ,emali. e"ia air P$A yan* tela! mena+ai su!u B 40 $ ,emu"ian "ituan*,an ,e "alam aan °
+etri yan* tela! erisi sam+el u9iI setia+ aan +etri "iisi "en*an 10 m< me"ia air P$A. elain itu "iuat ,ntrl me"ia "en*an menuan*,an 10 m< me"ia air P$A +a"a aan +etri tan+a +enama!an a+a+un serta ,ntrl +elarut "en*an menetes,an 1 m< +elarut AA lalu "itama!,an 10 m< me"ia air P$A. Fun*si ,e"ua ,ntrl ini a"ala! men*eta!ui a+a,a! me"ia "an +elarut yan* "i*una,an tela! ter,ntaminasi le! a,teri atau ti"a,. elan9utnya aan +etri "i*yan*,an a*ar me"ia merata "an !m*en "en*an sam+el. etela! itu aan +etri "itutu+ "an "ire,at,an "en*an selti+ untu, men*!in"ari masu,nya °
,ntaminan. eluru! aan +etri ,emu"ian "iin,uasi +a"a su!u B 37 $ selama 24 9amI su!u terseut meru+a,an su!u +timum +ertumu!an a,teri "an rentan* a,tu 24 9am "iasumsi,an u,u+ untu, +er,eman*ia,an a,teri namun =un*i ti"a, "a+at tumu! +timal +a"a su!u terseut se!in**a +enama!an a!an anti=un*i ti"a, "i+erlu,an. aat in,uasi aan +etri "ileta,,an "alam ,n"isi terali, a*ar air atau ua+ air yan* terentu, a,an menem+el +a"a tutu+ aan +etri ali!;ali! "i +ermu,aan me"iaI sea +ermu,aan me"ia yan* terasa!i air a,an men**an**u +ertumu!an ,lni a,teri. 5er"asar,an !asil +en*amatan ,lni tumu! +a"a semua aan +etri yan* erisi sam+el u9i ,euali +a"a seri +en*eneran ,e"ua "en*an ,nsentrasi 10 ;4 "an 10;&I se"an*,an ,e"ua ,ntrl ersi! "ari +ertumu!an a,teri yan* menun9u,,an a!a me"ia "an +elarut yan* "i*una,an eas "ari ,ntaminan. 'arena !anya sam+el "en*an ,nsentrasi ,nsentrasi 10;1 yan* ,e"ua seri +en*enerannya memili,i 9umla! ,lni "alam ,isaran 30; 300 ma,a A<% "itentu,an "en*an merata;rata,an 9umla! ,lni "ari ,e"ua aan +etri
+a"a tin*,at +en*eneran terseut lalu "i,ali,an "en*an =a,tr +en*enerannya. i+erle! nilai A<% seesar 166& $FU/m< yan* masi! "iaa! aman* atas aman ,nsumsi yan* tela! "iteta+,an le! e+artemen 'ese!atan e+uli, -n"nesia yaitu 106 $FU/m< se!in**a "a+at "isim+ul,an a!a se"iaan ini aman untu, "i,nsumsi. VII. K#!%,u&a 1. Peraan ini "ila,u,an untu, men*eta!ui a+a,a! sam+el yan* "iu9i teremar a,teri
lei! "ari aman* atas ,nsumsi yan* tela! "iteta+,an le! e+artemen/'ementerian 'ese!atan e+uli, -n"nesia yaitu 10 6 $FU/m<. 2. An*,a
Kat "an a,anan ire,trat en"eral Pen*aasan Kat "an a,anan e+artemen 'ese!atan e+uli, -n"nesia a,arta. arley .P. H Prestt <.. 2001 Laborator !ercise in icrobiolog &t! e". ra;ill Ne r,. aet> G. elni, .<. A"eler* G.A. 5r,s .F. 5utel .. H Krnstn <.N. 1##& i)robiologi edo)teran e"isi ,e"ua+ulu! "iter9ema!,an le! Nu*r! H .F. aulany G$ a,arta.
Annisa Nilamsari Utami u!amma" Fais!al a!"i $inantya %alia Paramita
(10026) (………) (1002#) (………) (1003&) (………)
