LAPORAN PRAKTIKUM KIMIA FARMASI INSTRUMEN DAN BIOKIMIA (FA-3113) ANALISIS KARBOHIDRAT
Oleh : Elya Khoirunnisa M. (10714013) Tanggal Tanggal Percobaan
: 20 e!"e#ber 201$
Tanggal Tanggal Pengu#!ulan : 27 e!"e#ber 201$ %a#a &sis"en &sis"en
: &lber"us &lber"us 'an (1071300$)
LABORATORIUM KIMIA FARMASI PROGRAM STUDI SAINS DAN TEKNOLOGI FARMASI SEKOLAH FARMASI INSTITUT TEKNOLOGI BANDUNG 2016
PERCOBAAN I ANALISIS KARBOHIDRAT I.
1.
TUJUAN Menen"uan a*anya +enis arbohi*ra" !a*a sa#!el
*engan 2.
u+i 'o*in,
u+i -ehling,
u+i Molisch,
+i
elli/ano, u+i hi*rolisis asa#. Menen"uan an*ungan gluosa !a*a sa#!el *engan #e"o*e eni#a"i. TEORI DASAR Karbohi*ra" #eru!aan !olihi*rosi al*ehi* *an e"on.
II.
Karbohi*ra" #e#ilii #ono#er #onosaari*a yang saling *ihubungan oleh ia"an gliosi*a. u#us e#!iris arbohi*ra" (2O)y yang #enun+uan hi*ra" *ari arbon. Karbohi*ra" *a!a" *igolongan #en+a*i bebera!a bagian, salah sa"unya ber*asaran +u#lah #ono#ernya yai"u : 1. Monosaari*a Meru!aan arbohi*ra" yang "er*iri *ari 357 arbon "an!a a*anya ia"an gliosi*a sehingga "i*a *a!a" *iuraian *engan cara hi*rolisis #en+a*i arbohi*ra" yang lain. enya/a yang #eru!aan golongan #onosaari*a 2.
a*alah *ihi*rosiase"on, gliseral*ehi*, gluosa, 6ru"osa *an gala"osa. Oligosaari*a Meru!aan arbohi*ra" yang "er*iri *ari 25 #ono#er #onosaari*a. 8i ala# "er*a!a" +u#lah oligosaari*a !aling banya "er*iri *ua #onosaari*a yang *isebu" *isaari*a. 9enis oligosaari*a !a*a u#u#nya a*alah la"os a, #al"osa,
3.
*an surosa. Polisaari*a Meru!aan arbohi*ra" *engan #ono#er #onosaari*a lebih *ari #eru!aan arbohi*ra" #oleul besar, ber/arna !u"ih, "i*a #e#ilii rasa #anis *an "i*a #e#ilii e#a#!uan un"u #ere*usi. on"oh *ari !olisaari*a a*alah !a"i, gliogen, *an selulosa. elain i"u, !enggolongan arbohi*ra" +uga ber*asaran gugus 6ungsi yang
"eran*ung *ala# #ono#ernya, yai"u : 1. &l*ose Meru!aan arbohi*ra" yang #engan*ung #ono#er *engan gugus al*ehi*. on"oh *ari al*ose a*alah gluosa.
2. Ke"osa Meru!aan arbohi*ra" yang #engan*ung #ono#er *engan gugus e"on. on"oh *ari e"osa a*alah 6ru"osa.
Menuru"
-ischer,
!ena#aan
arbohi*ra"
arbohi*ra" #enggunaan 8 *an . Pena#aan ini ber*asaran gugus O yang "er*a!a" *a!a !usa" iral yang le"anya !aling +auh *engan a"o# *engan bilangin osi*asi "er"inggi. Pena#aan 8 (8es"ro) gugus O *i sebelah anan *an (eo) *i sebelah iri.
'''.
&& KE9& 1. +i 'o*in Pa*a analisis *ilauan
arbohi*ra"
*engan
bebera!a
#aca# u+i. +i yang !er"a#a *ilauan a*alah u+i io*ine. 8ua
buah
"abung
reasi
*isia!an *an #asing ; #asing *iisi *engan laru"an con"rol beru!a bebera!a "e"es gluosa *an laru"an !a"i. Ke#u*ian, *i"a#bahan bebera!a "e"es laru"an K' *an io*ine !a*a #asing ; #asing "abung reasi. elan+u"nya, e*ua "abung reasi yang berisi laru"an on"rol *i!anasan sela#a bebera!a #eni" !a*a gelas i#ia yang berisi air yang "elah *i!anasan !a*a !enangas. e"elah i"u, "abung reasi *i*ingian !a*a suhu ruang *an *ia#a"i !erubahan /arna yang "er+a*i. 2. +i -ehling +i arbohi*ra" yang e*ua a*alah u+i *engan #enggunaan -ehling. angah !er"a#a yang *ilauan a*alah *ica#!uran laru"an 6ehling & (uO 4.2O *ala# air) *an laru"an 6ehling < (aliu# "ar"ra"e *ala# air) !a*a gelas i#ia 2= #. Ke#u*ian, *isia!an laru"an gluosa !a*a "abung reasi *an laru"an surosa !a*a "abung reasi. Pa*a #asing ; #asing "abung reasi *i"a#bhan bebera!a "e"es laru"an 6ehling & *an < e#u*ian *i!anasan sela#a bebera!a #eni" !a*a gelas i#ia yang berisi air yang "elah *i!anasan !a*a !enangas *an *ia#a"i !erubahan /arna yang "er+a*i. 3. +i Molisch +i #olisch #eru!aan u+i yang e"iga, *ilauan *engan cara *ibua" laru"an >5 na!h"ol *engan cara serbu *ilaru"an *ala# e"hanol !a*a gelas i#ia =0 #. Ke#u*ian, *i#asuan #asing ; #asing laru"an surosa *an 6ru"osa e *ala# "abung reasi. aru"an #olisch *i"a#bahan !a*a se"ia! "abung reasi *an *i!anasan !a*a gelas i#ia yang berisi air yang "elah *i!anasan !a*a !enangas. e"elah i"u, *i"a#bahan laru"an 2O4 !ea" *i le#ari asa# e#u*ian *ia#a"i !erubahan /arna yang "er+a*i. 4. +i elli/ano66 elan+u"nya, *ilauan u+i elli/ano !a*a laru"an con"rol *engan cara *i#asuan laru"an con"rol !a*a "abung reasi #asing ; #asing 6ru"osa *an gluosa. Ke#u*ian *i"a#bahan laru"an selli/ano a"au resoscinol (resoscinol *ilaru"an *ala# l 3M) *an *i!anasan sela#a bebera!a #eni" e#u*ian *ia#a"i !erubahan /arna yang "er+a*i. =. +i i*rolisis &sa# +i hi*rolisis asa# un"u #engu+i arbohi*ra" *ilauan *engan l 3M *i"a#bahan e *ala# laru"an con"rol !a*a "abung reasi #asing ; #asing surosa *an 6ru"osa. elan+u"nya, laru"an con"rol *i!anasan sela#a bebera!a #eni" !a*a !enangas *an *i"a#bahan bebera!a "e"es %aO 3M. Ke#u*ian *ilauan !enge"esan #enggunaan er"as la#us #erah. aru"an con"rol *ia#bil
un"u *ilauan u+i 6ehling #enggunaan laru"an 6ehling *an *ia#a"i !erubahan /arna yang "er+a*i. $. +i Eni#a"i +i uan"i"a"i6 !a*a arbohi*ra" *ilauan *engan u+i eni#a"i. 8i#asuan laru"an gluosa osi*ase e *ala# "abung ? ue" *an *ilauan inubasi !a*a water bath !a*a suhu 37 o sela#a bebera!a
#eni". elan+u"nya !a*a "abung
!er"a#a *i"a#bahan laru"an gluosa s"an*ar* an "abung e*ua *i"a#bahan a@ua*es" *an *ilauan !engocoan. Ke#u*ian *ilauan inubasi !a*a water bath !a*a suhu 37 o *an *ilauan !e#bacaan absorbansi *engan #enggunaan s!e"ro6o"o#e"er. 'A.
PE'T%B&% 8&% PE%BO&&% 8&T& %o
+i
. 1.
'o*ine
asil !enga#a"an
Ke"erangan aru"an !a"i : /arna biru Bluosa
:
bening
ecola"an
2.
-ehling
gluosa : en*a!an #erah surosa : /arna biru
3.
Molisch
-ru"osa
:
cincin
:
/arna
ungu urosa : 5
4.
elli/ano
-ru"osa #erah Bluosa : 5
=.
i*rolisis &sa#
urosa : en*a!an #erah -ru"osa : biru
Pengolahan *a"a !a*a u+i uan"i"a"i6 arbohi*ra" *engan #e"o*e eni#a"i &bsorbansi s"an*ar* : 0,021 &bsorbansi sa#!el : 0,02 Konsen"rasi s"an*ar* : 100 #g?* Absorbansi standard Absorbansi sampel Konsentrasi standard C konsentrasi sampel 0,021 100
0,02
C
C 2
2 C D=,23 #g?* Konsen"rasi sa#!el 0,00= •
0,005 gram
C
100 mL
C = #g?* ¿ 95,23 −5 ∨ •
Bala" C
¿
5
x
100
¿
C 104,$
A.
PEM<&&&% Pa*a u+i arbohi*ra" #enggunaan u+i io*in
*igunaan
un"u
#engi*en"i6iasi
!olisaari*a. Pa*a u+i ini #enggunaan ' 2 yang *ilaru"an *ala# K'. Prinsi! u+i io*in a*alah #e#benru
ia"an
an"ara
!olisaari*a
yang
*isebu"
io*in
*an
!oliio*i*a.
Polisaari*a yang a*a *ala# arbohi*ra" berben"u helis sehingga *a!a" beria"an *engan io*in *an #enghasilan /arna biru a"au ehi"a#an. asil *ari u+i io*ine !a*a laru"an gluosa *an *i!anasan ber/arna bening ecola"an se*angan !a*a laru"an !a"i ber/arna biru se"elah *i!anasan. Pa*a laru"an gluosa laru"an ber/arna bening a"au "i*a ber/arna biru arena gluosa #eru!aan #onosaari*a yang "i*a berben"u helis sehingga "i*a *a!a" #enghasilan /arna biru arena io*in "i*a *a!a" #asu !a*a ia"an helis. Pa*a laru"an !a"i hasil #enun+uan laru"an ber/arna biru *an "er*a!a" en*a!an *i *asar "abung reasi. al ini "er+a*i arena !a"i "er*iri *ari #ono#er a#ilosa *an a#ilo!e"in. Pa*a saa" sebelu# !e#anasan, laru"an !a"i yang *iberi io*in "i*a berubah /arna (bening), na#un se"elah *i!anasan /arna laru"an berubah #en+a*i /arna biru, !e#anasan !a*a !roses ini ber"u+uan un"u #enghi*rolisis laru"an !a"i #en+a*i a#ilosa *an a#ilo!e"in. Farna biru !a*a laru"an !a"i *ihasilan oleh a#ilosa hasil hi*rolisis yang #engia" 'o*in !a*a s"ru"ur helisnya *an #e#ben"u o#!les !a"i5io*in, se*angan a#ilo!e"in yang #engia" io*in ber/arna cola".
Pa*a u+i -ehling #eru!aan u+i un"u #e#bu"ian gula !ere*usi a"au gugus al*ehi*. +i 6ehling #enggunaan laru"an u+i -ehling & (uO 4.2O) *an -ehling < (%a5K5Tar"ra"e *an %aO) *an laru"an con"rol gluosa *an surosa. Pa*a u+i -ehling ini #enggunaan !e#anasan yang ber"u+uan un"u #e#ecah #ono#er agar guus al*ehi* yang *ian*ung *a!a" beria"an *engan O5 #e#ben"u asa# arbosila" *an hasil sa#!ing beru!a u2O yang ber/arna #erah ba"a sehingga *igunaan sebagai in*iasi a*anya al*ehi* !a*a u+i -ehling. Pa*a !ercobaan *i*a!a"an hasil sesuai "eori yai"u !a*a laru"an gluosa berubah #en+a*i /arna #erah ba"a arena #engan*ung gugus al*ehi*
*an *a!a" #ere*usi uO #en+a*i u 2O (#erubah
bilangan osi*asi u2G #en+a*i uG) yang #enyebaban /arna #erah ba"a. e*angan surosa ber/arna biru ("i*a a*a en*a!an /arna #erah ba"a) arena "i*a #engan*ung gugus al*ehi* *an "i*a *a!a" #ere*usi uO #en+a*i u2O.
elan+u"nya a*alah u+i Molisch, u+i ini ber"u+uan un"u #enen"uan a*anya arbohi*ra" secara u#u#. +i ini #enggunaan laru"an #olisch yang "er*iri *ari >5 na6"ol *an e"anol. 'n*iasi a*anya arbohi*ra" secara u#u# *a!a" beru!a cincin 6ur6ural /arna ungu yang *ihasilan *ari o#!les >5na6"ol *an ben"u 6ur6ural. Pa*a !ercobaan ini *igunaan laru"an con"rol beru!a surosa *an 6ru"osa yang e#u*ian
*i"a#bahan 2O4. -ungsi *ari !ena#bahan 2O4 a*alah un"u #en*ehi*rasi
arbohi*ra" agar #e#ben"u cincin 6ur6ural yang aan beria"an *engan >5na6"ol. asil yang *i*a!a"an !a*a u+i Molisch ini a*alah !a*a laru"an 6ru"osa #enghasilan cincin /arna ungu se*angan !a*a surosa "i*a #enghaasilan cincin ungu. esuai *engan li"era"ur e*uanya aan #enghasilan cincin /arna ungu, na#un !a*a !ercobaan surosa "i*a #enghasilan /arna ungu. al ini "er+a*i arena surosa #eru!aan
oligosaari*a
*engan
*ua
#ono#er
#onosaari*a
sehingga
#e#bu"uhan /a"u yang lebih la#a un"u #enghasilan o#!les cincin 6ur6ural /arna ungu se*angan 6ru"osa #eru!aan #onosaari*a sehingga lebih #u*ah *an ce!a" un"u *i*ehi*rasi asa# *an #enghasilan /arna ungu.
+i yang *ilauan selan+u"nya a*alah u+i elli/ano, u+i ini ber"u+uan un"u #e#bu"ian a*anya e"osa *ala# arbohi*ra". +i ini #enggunaan laru"an reoscinol yang *ilaru"an *ala# l 3M. Prinsi! !a*a u+i ini a*alah l yang a*a !a*a laru"an ber6ungsi un"u #e#ben"u hi*rosi#e"il6ur6ural. Ke#u*ian, resoscinol aan #engia" hi*rosi#e"il6ur6ural "ersebu" *an #e#ben"u o#!les laru" air ber/arna #erah ba"a. Pa*a u+i ini *igunaan laru"an con"rol beru!a 6ru"osa *an gluosa. aru"an con"rol *i"a#bahan laru"an resoscinol e#u*ian *i!anasan, *engan "u+uan !e#anasan a*alah #eban"u #e#!erce!a" !roses hi*rolisis #en+a*i #ono#er yang #engan*ung e"osa. asil yang *i*a!a"an !a*a u+i ini a*alah 6ru"osa ber/arna #erah ba"a, hal ini "er+a*i arena 6ru"osa #engan*ung e"osa sehingga *a!a" bereasi *engan resoscinol *an l *an #enghasilan /arna #erah ba"a. e*angan !a*a laru"an gluosa "i*a #e#berian /arna #erah ba"a arena "i*a #engan*ung e"osa #elainan al*ose. &l*ose +uga *a!a" #e#berian /arna #erah !a*a u+i ini, na#un harus #elalui !engubahan #en+a*i e"osa "erlebih *ahulu #elalui reasi "au"o#erisasi *an #e#bu"uhan /a"u yang la#a.
+i uali"a"i6 yang "erahir *ilauan a*alah u+i hi*rolisis asa#. al ini ber"u+uan un"u #enge"ahui "er+a*inya reasi hi*rolisis arbohi*ra" oleh asa#. 8ala# u+i ini *igunaan laru"an l yang ber6ungsi sebagai agen !enghi*rolisis, e#u*ian laru"an con"rol beru!a laru"an surosa *an 6ru"osa *i!anasan un"u #e#!erce!a" !roses hi*rolisis. elan+u"nya, *i"a#bahan %aO !a*a lru"an agar laru"an "erben"u *ala# suasana basa a"au ne"ral. al ini ber"u+uan agar *a!a" *ilauan u+i -ehling yang hanya *a!a" *ilauan !a*a on*isi basa a"au ne"ral. asil !a*a !ercobaan ini, se"elah *ilauan u+i 6ehling laru"an surosa #e#ilii en*a!an /arna #erah se*angan 6ru"osa ber/arna biru. al ini sesuai *engan "eori arena !a*a laru"an surosa "er+a*i hi*rolisis #en+a*i gluosa *an 6ru"osa. Ke#u*ian, gluosa inilah yang #enun+uan hasil !osi"i6 !a*a u+i -ehling arena #e#ilii gugus al*ehi* yang *a!a" beria"an *engan laru"an -ehling *an #ere*usi uO #en+a*i u 2O sehingga #enghasilan /arna #erah ba"a !a*a en*a!an. e*agan !a*a gluosa, "i*a #enghasilan /arna #erah arena gluosa "i*a *a!a "erhi*rolisis #en+a*i ben"u yang lebih se*erhana *an "i*a #engan*ung gugs al*ehi* yang *a!a" #engia" 6ehling sehingga "i*a #engahsilan /arna #erah.
+i uan"i"a"i6 *ilauan *engan #enggunaan #e"o*e eni#a"i. Prinsi! *ari u+i eni#a"i ini a*alah !engubahan gluosa s"an*ar* #en+a*i 2O2 *an asa# gluorona" #enggunaan eni# gluosa osi*ase. Pa*a !ercobaan ini #enggunaan gluosa yang *i#asuan e *ala# "abung ? ue" *an *ilauan inubasi !a*a water bath !a*a suhu 37 o sela#a bebera!a #eni". Tu+uan *ari inubasi !a*a suhu 37 o a*alah #enggunaan suhu o!"i#u# un"u eni# gluosa osi*ase. elan+u"nya !a*a
"abung !er"a#a *i"a#bahan laru"an gluosa s"an*ar* *an "abung e*ua *i"a#bahan a@ua*es" *an *ilauan !engocoan. -ungsi *ari !engocoan a*alah agar eni# gluosa osi*ase berca#!ur secara #era"a. Ke#u*ian *ilauan inubasi !a*a water bath !a*a suhu 37 o *an *ilauan !e#bacaan absorbansi *engan #enggunaan s!e"ro6o"o#e"er.
Pe#bacaan
!a*a
s!e"ro6o"o##e"er
#enggunaan
!an+ag
gelo#bang =00 n# agar *a!a" #e#baca absorbansi /arna cahaya "a#!a yang *ihasilan *ari reasi 2O2 *an a#inoan"i!irin yang #enghasilan @uinonei#in *ye yang
aan
#enghasilan
/arna.
Pa*a
!e#bacaan
*engan
#enggunaan
s!e"ro6o"o#e"er *i*a!a"an onsen"rasi sa#!el D=,23 #g?* se*angan onsen"rasi sa#!el yang *ibua" sebesar =#g? * sehingga *i*a!a"an gala" yang cuu! besa r. al ini *a!a" "er+a*i arena !a*a saa" !roses !engocoan laru"an !a*a cue" "i*a #era"a *an hanya *ilauan *engan !engocoan "angan sehingga onsen"rasi gluosa *an eni# "i*a "erca#!ur secara #era"a. elain i"u, !a*a saa" !engu+ian *ilauan "i*a *ala# suhu o!"i#u# er+a eni# yai"u !a*a suhu ruang sehingga "er+a*i e#unginan !erubahan +u#lah hasil !enguraian gluosa *an #engaiba"an !erbe*aan !e#bacaan absorbansi *an !erbe*aan onsen"rasi yang sanga" berbe*a.
+i uan"i"a"i6 !a*a arbohi*ra" *a!a" #enggunaan #e"o*e lain salah sa"unya yai"u #e"o*e legg &n"hrone. Me"o*e ini #enggunaan reagen an"ron *an asa# !erlora" e#u*ian *i!anasan. +i ini ber"u+uan un"u #enghi"ung gula "o"al yang a*a *i *ala# arbohi*ra". e"elah !ena#bahan reagen e#u*ian *ilauan
!e#bacaan #enggunaan s!e"ro6o"o#e"er A5Aisible. Proses yang "er+a*i !a*a u+i ini a*alah !e#ecahan arbohi*ra" #en+a*i #ono#er ; #ono#ernya e#u*ian #ono#er ini *ihi*rolisis oleh asa# sul6a" !ea" e#u*ian beria"an *engan reagen #e#ben"u o#!les ber/arna biru *an hi+au. A'.
8&-T& PT&K&
!a*a
2$
