LAPORAN PRAKTIKUM KIMIA FARMASI INSTRUMEN DAN BIOKIMIA (FA-3113) KROMATOGRAFI GAS
Oleh : Elya Khoirunnisa M. (10714013) Tanggal Tanggal Percobaan
: 15 o!e"ber #01$
Tanggal Tanggal Pengu"%ulan : ## o!e"ber #01$ a"a &sis'en &sis'en
: Mia a!ira (1071300#)
LABORATORIUM KIMIA FISIKOKIMIA PROGRAM STUDI SAINS DAN TEKNOLOGI FARMASI SEKOLAH FARMASI INSTITUT TEKNOLOGI BANDUNG 2016
PERCOBAAN IX
KROMATOGRAFI GAS I.
II.
TUJUAN 1. Menen'uan a*ar e'anol *ala" sa"%el "enggunaan ro"a'ogra+i gas *engan
%ro%anol sebagai s'an*ar in'ernal. TEORI DASAR Kro"a'ogra+i gas "eru%aan "e'o*e analisis %e"isahan "oleul "enggunaan ara'er gas sebagai +asa gera. Kro"a'ogra+i gas *a%a' *igunaan un'u analisis senya,a yang "u*ah "engua%- s'abil 'erha*a% %anas ('er"os'abil)- *an "e"ilii %olari'as 'er'en'u. a"%el yang *ianalisis *ibua' *ala" ben'u gas *engan cara *iua%an 'erlebih *ahulu *an berca"%ur *engan gas iner' %e"ba,a %a*a ine'or. elanu'nya+asa gera "e"ba,a anali' "elalui +ase *ia". /n'erasi anali' *engan +asa *ia" inilah yang *igunaan un'u %e"isahan %a*a ro"a'ogra+i gas. &nali' yang eluar *ari *ala" olo" yang aan *ianalisis *engan *e'e'or. &nalisis sa"%el sehingga *a%a' 'er%isah *ari o"%onen lain *ala" sa"%el ber*asaran 'eanan ua% rela'i+ *an a+ini'as 'erha*a% +asa *ia". Ko"%onen u'a"a *ari ro"a'ogra+i gasa an'ara lain +asa gera- flowmeter (%enga'ur aliran gas)- ine'or- olo"- +asa *ia" beru%a cairan a'au %a*a'an *an *e'e'or. Perbe*aan ro"a'ogra+i gas *an ro"a'ogra+i cair inera 'inggi bera*a %a*a +asa gera yang *igunaan. Pa*a ro"a'ogra+i gas- +asa gera beru%a gas iner' yang 'i*a bereasi *engan sa"%el se*angan %a*a ro"a'ogra+i cair inera 'inggi +asa gera beru%a cairan yang *a%a' "elaru'an anali' *an berin'erasi *engan sa"%el. elain i'u- %a*a ro"a'ogra+i gas *igunaan un'u "enganalisis senya,a beru%a gas yang "u*ah "engua% *an "e"ilii bera' "oleul ecil (500gra""ol). e*angan %a*a ro"a'ogra+i cair inera 'inggi *igunaan un'u analisis senya,a cair a'au %a*a' yang "e"ilii bera' "oleul yang besar (2500 gra""ol).
III.
ALAT DAN BAHAN 1. ALAT
a. b. c. *. e. +.
Kro"a'ogra+i gas Kro"a'ogra+i in'egra'or enera'or hi*rogen ,ha'"an Ko"%ressor u*ara Microsyringe 10l lo, "e'er
2. BAHAN
a. E'anol %ro analysis b. Pro%anol
I.
METODOLOGI 6aru'an s'an*ar* 1-#- 3- 4- 5- $ *an laru'an sa"%el *isia%an
6aru'an e'anol "urni *iinesian sebanya #l e *ala" sis'e" 8 "elalui ine'or *an *ica'a' ,a'u re'ensi *an luas ur!a 6aru'an %ro%anol "urni *iinesian e *ala" sis'e" 8 "elalui ine'or *an *ica'a' ,a'u re'ensi *an luas ur!a 9iinesian e *ala" sis'e" 8 laru'an s'an*ar* onsen'rasi 1- #- 3- 4- 5 *an $ secara beruru'an "elalui inec'or *an *ica'a' ,a'u re'ensinya. 9iinesian laru'an sa"%el e *ala" sis'e" 8 "elalui ine'or *an *ica'a' ,a'u re'ensi *an *ica'a' luas ur!a 9ibua' ur!a alibrasi *ari *a'a laru'an s'an*ar* *engan rasio luas %unca 'erha*a onsen'rasi e'anol 9ihi'ung onsen'rasi laru'an sa"%el *ari %ersa"aan ur!a alibrasi *an *ihi'ung gala'nya.
. 1.
PERHITUNGAN DAN PENGOLAHAN DATA Penen'uan onsen'rasi sa"%el
Tabel 5.1 9a'a &8 *an ;a'u
&8 1715>300 #1#>400
;a'u re'ensi ("eni') 4.173 7.4$3
Tabel 5.# 9a'a &8 *an ;a'u
;a'u
&8
Konsen'rasi
;a'u
&8
E'anol ()
E'anol
Pro%anol
re'ensi
%ro%ano
()
Pro%anol
l
1 #
("eni') 7.51$ 7.353
1#547#5 30##1>5
Parase'a"ol 1 #
("eni') 4.473 4.#70
##737?1 705?#00
3 4 5 $ a"%el
4.#3 4.#4$ 4.300 4.043 4.#53
5>37#1> 10373041 10$?43$5 17301?1? >$3>##4
# 3 4 5 $
7.570 7.4?0 7.5>$ 7.310 7.500
1#31443 1711#4> 1#>773$ #00>031 15?43#1
Tabel 5.3 9a'a rasio &8 e'anol *an %ro%anol ser'a onsen'rasi laru 'an s'an*ar* Konsen'rasi E'anol () 1 # 3 4 5 $ a"%el
&8 e'anol&8 %ro%anol 1.?1#175 #.335455 4.?#1351 $.0$1$7? ?.#330?1 ?.$1#0#1 $.0?413$
9ari *a'a *i a'as *a%a' *ibua' *ala" ur!a alibrasi rasio &8 e'anol 'erha*a% onsen'rasi laru'an s'an*ar*
Kurva Kalibrasi Etanol Standar 10 f(x) = 1.51x + 0.02 R² = 0.97
8 6
AUC etanol/AUC propanol
4 2 0 0
1
2
3
4
5
6
7
Konsentrasi Etanol (%)
a"bar 5.1 Kur!a Kalibrasi E'anol 'an*ar* y @ 1.51#4A B 0.01>4 $.0?413$ @ 1.51#4A B 0.01>4 A @ 4.01 Konsentrasi yang didapat −konsentrasi sampel sebenarnya ala' @ A 100 KonsentrasiSampel Sebenarnya
¿ 4.01 − 4 ∨
ala' @
¿
¿ 4
A 100
ala' @ 0.#5 I.
PEMBAHASAN Kro"a'ogra+i gas "eru%aan "e'o*e analisis %e"isahan "oleul "enggunaan
ara'er gas sebagai +asa gera. Prinsi% *ari ro"a'ogra+i gas a*alah sa"%el yang *ianalisis *ibua' *ala" ben'u gas *engan cara *iua%an 'erlebih *ahulu *an berca"%ur *engan gas iner' %e"ba,a %a*a ine'or. elanu'nya- +asa gera "e"ba,a anali' "elalui +ase *ia". /n'erasi anali' *engan +asa *ia" inilah yang *igunaan un'u %e"isahan %a*a ro"a'ogra+i gas. &nali' yang eluar *ari *ala" olo" yang aan *ianalisis *engan *e'e'or. &nalisis sa"%el sehingga *a%a' 'er%isah *ari o"%onen lain *ala" sa"%el ber*asaran 'eanan ua% rela'i+ *an a+ini'as 'erha*a% +asa *ia". Kro"a'ogra+i gas *a%a' *igunaan un'u analisis senya,a yang "u*ah "engua%s'abil 'erha*a% %anas ('er"os'abil)- *an "e"ilii %olari'as 'er'en'u. enya,a yang 'i*a "u*ah "engua% *a%a' *ianalisis *engan cara *eri!a'isasi un'u "enurunan 'i'i *i*ih. 9eri!a'isasi *a%a' *ilauan *engan reasi ase'ilasi alcohol- +enol *an a"in "enggunaan ase'a' anhi*ra' un'u "enghilangan ia'an hi*rogen yang "enyebaban "e"ilii 'i'i *i*ih yang 'inggi *an non!ola'il. Ko"%onen %a*a ro"a'ogra+i gas 'er*iri *ari bebera%a bagian yai'u : 1. as Pe"ba,a as yang *igunaan sebagai gas %e"ba,a a*alah gas heliu"- gas hy*rogen- gas ni'rogen *an argon. as %e"ba,a ini *isi"%an *ala" silin*er baa yang ber'eanan 10C50 %si un'u "engaliran gas bersa"a anali'. as %e"ba,a yang *igunaan harus "e"enuhi syara' sebagai beriu' : a. =ersi+a' iner'- sehingga 'i*a bereasi *engan anali' *an hanya "e"ba,a anali' "euu +asa *ia". b. as "urni c. Mu*ah *i*a%a' *. 8oco *engan *e'e'or yang *igunaan. #. Flowmeter (%enga'ur 'eanan) Penga'ur 'eanan *ala ins'ru"en' ini *igunaan un'u "enga'ur 'eanan *i *ala" silin*er baa yang berisi gas %e"ba,a agar *a%a' "engaliran gas yang berca"%ur *engan anali'. lo,"e'er u"u"nya *a%a' "enga'ur 'eanan silin*er baa *engan 'eanan 10C15 %si *engan lau aliran 150"6"eni'. 3. Injector /ne'or "eru%aan 'e"%a' un'u "e"asuan anali'. a"%el yang *i"asuan *a%a' beru%a cairan yang *isun'ian *engan microsyringe *an gas *engan ala' sun'i gas
( gas tight syringe) a'au ran gas. a"%el yang "asu *ala" ine'or aan *iua%an sehingga sa"%el harus s'abil 'erha*a% %anas hingga 50 o8 *i a'as 'i'i *i*ihnya. 4. Kolo" Kolo" "eru%aan bagian yang ber+ungsi un'u "e"isahan ca"%uran *ala" anali'. Kolo" 'erbua' *ari loga" 'e"baga- alu"uniu" a'au stainless steel . Kolo" *ala" ro"a'ogra+i gas 'er*a%a' *ua 'i%e yai'u packed column *an capillary column. Packed colomn 'erbua' *ari aca a'au loga" yang beruuran #C#0 ". Kolo" enis ini *a%a' "ena"%ung sa"%el lebih banya. elain i'u 'er*a%a' capillary column *engan %anang 10C100 ". Kolo" ini "e"ilii *ia"e'er yang lebih ecil- e+isiensi yang 'inggi na"un hanya *a%a' "ena"%ung sa"%el 0.016. 5. asa *ia" asa *ia" bera*a *ala" olo" yang beru%a Da' %a*a' a'au Da' cair. asa *ia" yang *igunaan harus "e"ilii syara' "enahan 'eanan +asa gera- 'er"os'abil *an iner'. asa *ia" %a*a' *a%a' *igunaan arbon- alu"ina *an bubu +luorocarbon. asa *ia" cair harus "e"ilii ara'eris'i s'abil 'erha*a% %anas- 'i*a "u*ah "engua% *an iner'. $. 9e'e'or 9e'e'or "eru%aan 'e"%a' eluarnya +asa gera yang "e"ba,a o"%onen anali' yang aan *ibaca signalnya *an *i'a"%ilan *ala" ben'u ro"a'ogra". 9e'e'or a. b. c. *. e.
yang *igunaan harus "e"enuhi syara' sebagai beriu' : ensi'i+ 'abil 'abil 'erha*a% suhu hingga 400o8 ;a'u res%on yang ce%a' Men*es'rusi sa"%el Pa*a ro"a'ogra+i gas 'er*a%a' bebera%a enis yai'u : a. Flame ionization detector (FID) Meru%aan *e'e'or yang u"u" *igunaan *ala" ro"a'ogra+i gas. /9 "enggunaan %rinsi% nyala *ari gas hi*rogen "enyebaban "oleul 'erionisasi. /on ion *ari "oleul inilah yang aan "enabra ele'ro*a %aa* *e'e'or *an "enghasilan arus yang e"u*ian *ion!ersi *ala" ben'u 'egangan *an b. c. *. e. +.
*igunaan un'u "en*e'esi anali'. Thermal onducti!ity Detector (TD) "itrogen Phosphorus Detector ("PD) #lectron apture Detector (#D) Flame Photometry Detector (FPD) 9e'e'or s%e'roso%i "assa
a"bar $.1 Ko"%onen %a*a ro"a'ogra+i gas (h''%:,,,.analy'ical.uns,.e*u.au+acili'iesb"s+'echniFuesgasC chro"a'ogra%hy)03.0$ Meanis"e "enggunaan ro"a'ogra+i gas "elalui %enyun'ian anali' "elalui ine'ore"u*ian *iua%an *an *ica"%uran *engan gas %e"ba,a +asa gera. 9ala" hal ini gas %e"ba,a 'i*a berca"%ur a'au "elaru'an anali' arena bersi+a' iner'. elanu'nya- anali' *iba,a e *ala" olo" "elalui +asa *ia". &nali' yang "e"ilii e%olaran yang ber*ea'an *engan +asa *ia" aan *ire'ensi lebih la"a se*angan yang berbe*a aan *ile%asan. Ke"u*ian anali' yang 'i*a *ire'ensi oleh +asa *ia" aan *ieluaran bersa"a gas %e"ba,a "elalui *e'e'or *an *ianalisis *an *i'a"%ilan beru%a ro"a'ogra" luas *asar %unca *an ,a'u re'ensi.
Pa*a %ercobaan K8KT *ilauan bebera%a 'aha% yai'u %re%arasi sa"%el- na"un *ala" hal ini sa"%el 'elah *ibua' oleh analis. a"%el a+ein *an %arase'a"ol *ilaru'an *ala" %elaru' beru%a "e'hanol %ro GP68 *an aFuabi*es'. Ke"u*ian *ilauan %enyaringan "enggunaan "e"brane +il'er 45" yang ber'uuan un'u "enghilangan su"ba'an *ala" olo" agar 'i*a 'era*i erusaan. Ke"u*ian %e"bua'an laru'an s'an*ar* *engan onsen'rasi 5. 10- 15- #0 *an #5 %%. a"un- *ala" langah ini 'i*a *ilauan arena laru'an s'an*ar* 'elah *ise*iaan. elanu'nya %enginesian laru'an s'an*ar* *an sa"%el beruru'an *ari onsen'rasi yang ren*ah e 'inggi. Pa*a %enginesian *igunaan syringe *an
harus berha'i ha'i agar 'i*a 'er*a%a' gele"bung yang iu' "asu. ele"bung yang iu' *iinesian aan "erusa sis'e" K8KT *an ""enngaruhi hasil %e"bacaan. e'elah %enginesian laru'an sa"%el *an s'an*ar* se'ia% onsen'rasi yang berbe*a harus *ilauan %e"bilasan syringe. Gal ini ber'uuan agar 'i*a 'era*i on'a"inan a'au %engo'or e'er'inggalan onsen'rasi sebelu"nya. elnu'nya- %o"%a *ala" sis'e" aan "en*orong +asa gera "enuu e olo" *an *i%roses %e"isahan *i olo". enya,a *engan e%olaran sa"a *engan +asa *ia" aan 'er'ahan lebih la"a oleh +asa *ian yang *i'unuan *engan ,a'u re'ensi. Ke"u*ian *ilauan %enguuran ,a'u re'ensi *an &8 un'u *ibua' ur!a alibrasil un'u %enen'uan a*ar sa"%el. =er*asaran ur!a alibrasi yang *i'en'uan *ari *a'a 8 *an onsen'rasi laru'an s'an*ar* "aa *i*a%a'an a*ar a+ein *ala" sa"%el sebesar %arase'a"ol
24.749 ppm
nilai gala' sebesar
21.905
24.381 ppm
*an a*ar
se*angan %a*a sa"%el sebesar #0 %%" sehingga "en*a%a'an un'u a+ein *an
23.745
un'u %arase'a"ol. Perbe*aan
onsen'rasi sa"%el ini *a%a' 'era*i arena e'i*a ho"ogenan senya,a sa"%el- selain i'u *a%a' %ula 'era*i arena %e"bilasan syringe yang 'i*a bersih sehingga "asih 'er*a%a' e'er'inggalan sa"%el onsen'rasi yang lain *an "enyebaban e'i*a %resisian hasil %e"bacaan. elain i'u- *a%a' %ula *i%engaruhi oleh gele"bung yang "asu 'erba,a oleh inec'or.
II.
KESIMPULAN
1. Kosen'rasi sa"%el a+ein sebesar
24.381 ppm
#. Kosen'rasi sa"%el %arase'a"ol sebesar III.
*engan gala'
24.749 ppm
*an gala'
21.905 . 23.745 .
DAFTAR PUSTAKA KaDae!ich- Huri- *an 6o=ru''o- <. #007. $igh Performance %i&uid hromatography
for Pharmaceutical 'cientists. e, Iersey: Iohn ;iley J ons. Gala"n 3C10. oog- 9.&.- Goller- .I.- *an 8rouch- .<. 1>>?. Principle of Instrumental nalysis. 8ali+ornia: Tho"son Gigher E*uca'ion. Gala"an 7#5C730. h''%:,,,.!ici.co"su%%or'a%%ca%%11.%h% *iases %a*a 'anggal 11 o!e"ber #01$ %uul 00.45 ;/= h''%s:co""ons.,ii"e*ia.org,iiile:GP68a%%ara'us.s!g *iases %a*a 'anggal 11 o!e"ber #01$ %uul 01.1# ;/=
