INFORME PRÁCTICA ENZIMAS INDUSTRIALES Daniela Molano Cáceres, Ximena Plata Hernández Grupo: 1.3 _______________ ______________________ ______________ _____________ _____________ ______________ _____________ _____________ ____________ _____
Resumen En esta esta prác práctic tica a de laora laorato torio rio,, se reali realiza zaron ron ensa! ensa!os os con con el "in de estud estudiar iar las las aplicaci aplicaciones ones de las enzimas enzimas más utiliza utilizadas das industri industrialme almente, nte, tales tales como: como: pectinas pectinasa, a, amil amilas asa, a, in# in#erta ertasa sa,, entr entre e otra otras. s. $os $os enzi enzima mas s son son cata catali liza zado dore res s comp comple le%o %os s iol&'icamente empleados no s&lo en el or'anismo de los seres #i#os, sino tami(n son de 'ran importancia en distintas industrias, me%orando la #ida cotidiana, a)uellas de alimentos, "armac(utica ! de deter'entes. En cada ensa!o "ue necesario tener presente el sustrato indicado para cada enzima, pues, es importante recordar )ue estas se caracterizan por ser espec*"icas.
+ma'en 1. Comple%o enzimasustrato. -uente: oet, D. / oet, 0. 245. Bioquímica 3ra Bioquímica 3ra ed., p. 4645. Editorial m(dica panamericana. Disponile e n: 7ttps:88oo9s.'oo'le.com.co8oo9s 7ttps:88oo9s.'oo'le.com.co8oo9s id;r<edH_a=>C/p';P? id;r<edH_a=>C/p';P?463/d);io)uimica@de@enzim 463/d);io)uimica@de@enzimas/7l;es/sa;X/#ed;a7A as/7l;es/sa;X/#ed;a7ABE%$$_!t)%M BE%$$_!t)%M?7 ?7 ABr4BHFdDo?E ABr4BHFdDo?E+Gz??#;onepa'e/);i +Gz??#;onepa'e/);io)u*micaI2deI2enzimas/ o)u*micaI2deI2enzimas/";"alse ";"alse
Jtro aspecto a tener en cuenta, "ue el control de la temperatura, siendo &ptima a 36KC para una acti#idad ideal de la enzima. ?nalizando los resultados otenidos, se conclu!e
)ue )ue cada cada iom iomol ol(c (cul ula a tien tiene e una una espe espec ci"ic i"icid idad ad,, las las cuál cuáles es son son cla# cla#e e para para la identi"icaci&n de las mismas ! )ue a partir de distintos ensa!os, se puede determinar la utilidad de cada sustancia identi"icada.
Palabras clave Hidr&lisis Hidr&lisis enzimática, enzimática, "ermentaci&n, "ermentaci&n, industrializaci&n, industrializaci&n, prote&lisis, enlaces 'lucos*dicos, precipitaci&n, des rami"icaci&n
Abstract +n t7is t7is la, la, tests tests ere ere condu conducte cted d to stud! stud! t7e t7e appli applicat catio ions ns o" t7e enz!mes enz!mes most most commonl! commonl! used used industri industriall! all! suc7 suc7 as pectina pectinase, se, am!lase am!lase,, in#ertas in#ertase, e, amon' amon' ot7ers. ot7ers. Enz!mes are iolo'icall! compleL catal!sts used not onl! in t7e od! o" li#in' ein's, ut are also o" 'reat importance in #arious industries, impro#in' e#er!da! li"e, t7ose o" "ood, "ood, p7armac p7armaceut eutical ical and deter'en deter'ents. ts. +n eac7 eac7 test as necessa necessar! r! to conside considerr t7e indic indicat ated ed sus sustra trate te "or eac7 eac7 enz! enz!me, me, it is import important ant to remem rememe err t7at t7at t7ese t7ese are are c7aracte c7aracterize rized d ! ein' ein' speci"i speci"ic. c. ?not7e ?not7err aspect aspect to consider consider as t7e tempera temperature ture control, it7 optimum at 36 C "or an ideal enz!me acti#it!. ?nal!zin' t7e results, e conclude conclude t7at eac7 iomolecule iomolecule 7as a speci"icit!, speci"icit!, 7ic7 are 9e! to identi"!in' t7em and "rom di""erent tests can determine t7e use"ulness o" eac7 identi"ied sustance.
Ke !"r#s Enz!mati Enz!matic c 7!drol! 7!drol!sis, sis, "ermenta "ermentation tion,, industri industrializ alizati ation, on, proteol! proteol!sis, sis, 'l!cosi 'l!cosidic dic onds, onds, precipitation
Marc" te$r%c" & Intr"#ucc%$n $as enzimas son catalizadores )ue aceleran unas 1 #eces más la #elocidad de las reaccion reacciones es )u*mica )u*micas, s, pero pero tami(n tami(n particip participan an en mecanism mecanismos os de re'ulac re'ulaci&n i&n para para permitir )ue el metaolismo se adapte a di"erentes situaciones. Gran ma!or*a de las enzimas son prote*nas pero eListen ácidos nucleicos )ue son catal*ticamente acti#os. >al como se oser#a en la ima'en 1, es importante tener en cuenta el sustrato con el cual actuará la enzima, pues en el sitio de uni&n se encuentran restos de aminoácidos )ue )ue se dispo dispone nen n para para inter interact actuar uar de maner manera a espe espec*" c*"ica ica con con el sustra sustrato to,, como como se relaciona en la tala 1. >ala 1. ?l'unas enzimas industriales con su correspondiente sustrato.
En'%ma $actasa 'alactosidasa $ipasa pancreática Fennina
Sustrat" $actosa >riacil'licerol Case*na
romelina Papa*na
Prote*nas
?milasa
?lmid&n
+n#ertasa
=acarosa
Proteasas en deter'entes
Prote*nas
Pectinasa
Pectina
-uente: Molano, D. / Plata, X. 215. Pre in"orme enzimas: aplicaciones industriales p. 135. o'otá.
Estas iomol(culas se otienen de distintos or'anismos adecuados como acterias, animales, plantas, 7on'osN de estos especialmente acterias ! 7on'os son "uente apropiada de la ma!or*a de enzimas utilizadas en la industria, deido a su "ácil manipulaci&n. $a ma!or*a de catalizadores industriales se otienen de la especie acillus acteria Gram positi#a5 ! ?sper'illus 7on'o "ilamentoso5, s&lo un OI de las enzimas son otenidas de ori'en animal ! un 4I proceden de las plantas. ? partir del culti#o de estos microor'anismos se puede otener la macromol(cula deseada por m(todos tradicionales de puri"icaci&n de prote*nas. $a consecuci&n de la enzima se resumen en tres pasos: culti#o o "ermentaci&n del microor'anismo, eLtracci&n ! puri"icaci&n de la enzima ! la "ormulaci&n o preparaci&n del producto enzimático en pol#o o 'ranos. ?ctualmente eListen más de 2 enzimas per"ectamente caracterizadas con su secuencia de aminoácidos. $as enzimas pueden utilizarse como reacti#os anal*ticos, por e%emplo, para la cuanti"icaci&n de 'lucosa en san're o en alimentos. ? continuaci&n se e#idencian las enzimas industriales más empleadas: >ala 2. Principales enzimas industriales ! campos de aplicaci&n.
>ala 2. Principales enzimas industriales ! campos de aplicaci&n. -uente: Castillo Fodr*'uez, -. 2<5. Biotecnología Ambiental 1ra ed., p.3165. Madrid: Editorial >(ar. Fe#isado de: 7ttps:88oo9s.'oo'le.com.co8oo9s id;1""P?m3E39C/p';P?33/d);enzimas@industriales/7l;es/sa;X/#ed;a7ABEiprC0)a%M?7X-X 4BHXeQCP??E+G%??#;onepa'e/)/";"alse
?lrededor de un
Met"#"l"()a *+ D%a(rama #e la act%v%#a# en'%m,t%ca #e -&(alact"s%#asa " lactasa
.+ D%a(rama #e la act%v%#a# #e l%/asas /ancre,t%cas sales b%l%ares en me#%cament"s
0+ D%a(rama #e la act%v%#a# #e la Renn%na
1+ D%a(rama #e Pr"teasas /resentes en 2rutas ablan#a#"r #e carnes
3+ D%a(rama #e la act%v%#a# #e la am%lasa /resente en me#%cament"s c"merc%ales
4+ D%a(rama #e la act%v%#a# #e las /r"teasas /resentes en #eter(entes preparaci&n de la 'elatina
preparaci&n deter'ente
5+ D%a(rama #e la act%v%#a# #e la %nvertasa
6+ D%a(rama #e la act%v%#a# #e las /ect%nasas en la elab"rac%$n #e 7u("s
Tablas #e #at"s & Resulta#"s & An,l%s%s #e resulta#"s Tabla 8+ Resulta#"s an,l%s%s #e la act%v%#a# en'%m,t%ca #e -&(alact"s%#asa " lactasa IMA9EN
RESULTADOS
ANÁLISIS
=e us& reacti#o de enedict, se "orm& una coloraci&n amarilla con una precipitaci&n naran%a +ma'en 2. >uo 1 $ec7e ! reacti#o de enedict5
$a lec7e es un alimento )ue contiene un 4.OI de lactosa RComponentes de la lec7eR, 215. Este disacárido compuesto por 'lucosa ! 'alactosa, es considerado como caro7idrato reductor deido a )ue posee un 7idroLilo 7emiacetálico ! por lo cual da positi#o a la reacci&n de enedict. En un medio alcalino, el ion cSprico se reduce por e"ecto del 'rupo alde7*do del azScar CHJ5 a su "orma de Cu@. Este nue#o ion se oser#a como un precipitado ro%o ladrillo o #erde correspondiente al &Lido cuproso Cu2J5 RFeacci&n de enedictR, 215.
=e "orm& una $a 'alactosidasa, al i'ual )ue la lactasa, es una coloraci&n enzima )ue por medio de una 7idr&lisis, con#ierte naran%a al azScar presente en la lec7e en sus componentes 'lucosa ! 'alactosa5 como se puede #er en la ima'en.
+ma'en 3. >uo 2 $ec7e, 'alactosidasa ! reacti#o de enedict5
+ma'en 4. Feacci&n de la lactasa. -uente: KEGG REACTIO: R!""!! . 215. Genome#$p. Fe#isado 24 ?ril 21, disponile en: 7ttp:88.'enome.%p8d'et in8_'etreaction@F11@F114@F16O@FO
Estos monosacáridos, son reductores, pues poseen un 'rupo caronilo intacto ! por esta raz&n al mezclarse con el reacti#o de enedict se 'enera una coloraci&n naran%a. =i el ensa!o se 7uiera realizado con ar"oed, el precipitado se 7uiera "ormado entre < ! 1 minutos.
Tabla *:+ Resulta#"s an,l%s%s #e la act%v%#a# #e l%/asas /ancre,t%cas sales b%l%ares en me#%cament"s RESULTADOS
ANÁLISIS
>uo 1: pH; con un olor a crema de lec7e #encida
$a pancreatina, contiene enzimas lipasas las cuales 7idrolizan la 'rasa en ácidos 'rasos ! 'licerol. $a crema de lec7e contiene un 1.3I de 'rasa total RComposici&n Tutricional de CFEM? DE $ECHE, F?$?R,
>uo 2: pH; con un color caracter*stico a crema de lec7e
>uo 3: pH; con un olor a crema de lec7e mu! cortada >uo 4: pH; con un olor a lec7e
215. En el tuo 3, se produ%o un olor mu! cortado pues, las sales iliares emulsi"ican l*pidos e incrementan la super"icie solule para )ue actSe la enzima. En este ensa!o se e#idencia el enranciamiento 7idrol*tico % el cual consiste en la 7idr&lisis de los tri'lic(ridos )ue inte'ran el l*pido, causadas por e"ecto de la enzima, por esta raz&n es )ue se percien los olores detectados.
Tabla **+ Resulta#"s an,l%s%s #el act%v%#a# #e la Renn%na IMA9EN
RESULTADOS
ANÁLISIS
?proLimadamente a los <6 minutos aparecen coá'ulos en medio de la lec7e, la parte l*)uida se coloca de un tono más claro
$a renina es una enzima )ue pertenece a las 7idrolasas EC 3.4.23.45, )ue actSa sore el sustrato case*na prote*na presente en la lec7e5 en el cual la enzima realiza una incisi&n sore el enlace p7e met, dando como producto la "ormaci&n de coá'ulos, en otras palaras, Vla renina produce la cua%ada de la lec7e al con#ertir la sal de case*na solule a una paracase*na insolule, )ue es el cua%oW 0ean Mc-addin, 235, esto se e#idencia en la ima'en.
+ma'en <. >uo 1 U de pastilla de renina ! lec7e pre incuada5 To se precipitado
"orma +ma'en . Estructura tridimensional de la renina.
+ma'en O. -ormaci&n de la cua%ada. -uente: 0ean Mc-addin. Prueas io)u*micas para la identi"icaci&n de acterias de importancia cl*nica
+ma'en 6. >uo 2
Por esta raz&n solamente en el tuo 1 se
U de pastilla de renina ! a'ua destilada5 To se precipitado
e#idencia la "ormaci&n de coá'ulos, !a )ue 7a! presencia de sustrato ! enzima para )ue se 7a'a posile la reacci&n, lo )ue no ocurre en los otros dos tuos: deido a )ue "orma en el tuo 2 está presente la enzima pero no se encuentra sustrato para lle#ar a cao la reacci&n, caso contrario al tuo 3 donde está presente el sustrato pero no la enzima renina.
+ma'en . >uo 3 lec7e pre incuada5
Tabla *.+ Resulta#"s an,l%s%s #e Pr"teasas /resentes en 2rutas ablan#a#"r #e carnes IMA9EN
RESULTADOS Positi#o
+ma'en 1. Composici&n de la 'elatina con reacti#o iuret
ANÁLISIS El reacti#o de iuret es una pruea en la )ue se identi"ican enlaces pept*dicos en una muestra, dando como resultado la "ormaci&n de un color #ioleta, el cual se lo'ra por la VAn color #ioleta resulta cuando los iones cSpricos en medio alcalino se comple%a con los electrones no saturados de los átomos de nitr&'eno ! oL*'eno de los enlaces de todas las prote*nas. 7arton 1625
+ma'en 11. Feacci&n de iuret con enlaces pept*dicos. -uente: 'oo'le. disponile en: 7ttp:882.p.lo'spot.com8 O+QXY-?8>OzsCO%uE+8??????????c8Oma0 e"Q8s18iuret.pn'
=e lo'ra una 'eli"icaci&n completa a los 3 minutos, posteriormente se colocaron a 36C, temperatura a la cual se coloca la 'elatina l*)uida.
>anto la romelina como la papa*na pertenecen a las proteasas, las cuales con su Vacci&n enzimática permite disminuir el comple%o miosinaactina. Hidrolizan el colá'eno ! elastina alandando el te%ido conecti#oW Foles e'a, 21<5
+ma'en 12. >uo 1 'elatina5 =e lo'ra una 'eli"icaci&n completa a los 3 minutos, posteriormente se colocaron a 36C, temperatura a la cual se coloca la +ma'en 13. >uo 'elatina l*)uida. 2 'elatina ! trozos pe)ueZos de piZa "resca5 =e lo'ra una 'eli"icaci&n completa a los 3 minutos, posteriormente se colocaron a 36C, temperatura a la +ma'en 1<. >uo cual se coloca la 3 'elatina ! una 'elatina l*)uida. cantidad pe)ueZa de alandador de carne comercial5
+ma'en 14. Comple%o miosinaactina. -uente: mor"o"isiolo'*a mSsculos. disponile en: 7ttp:88.anatomia7umana.uc#.cl8e"i8modulo11.7tm l
El colá'eno presente en la 'elatina es una prote*na )ue tiene como "unci&n la retenci&n del l*)uido entre sus mallas para encapsular ! lo'rar as* redes de s&lidos. Por lo )ue cuando 7a! al'una presencia de enzimas proteol*ticas, en este caso de romelina ! papa*na, se 'enera una 7idr&lisis sore esta prote*na ! se espera )ue no se 'eli"i)ue la mezcla, este comportamiento ocurre al estar cada tuo a 36KC, pues es la temperatura &ptima para )ue la enzima actSe sore el colá'eno ! por tal raz&n se torna l*)uida la 'elatina.
=e lo'ra una 'eli"icaci&n completa a los 3 minutos, posteriormente se colocaron a 36C, temperatura a la +ma'en 1. >uo cual se coloca la 4 'elatina ! 'elatina l*)uida. trozos pe)ueZos de papa!a5
Tabla *0+ Resulta#"s an,l%s%s #e la act%v%#a# #e la am%lasa /resente en me#%cament"s c"merc%ales IMA9EN
RESULTADOS
ANÁLISIS
=e "orm& la El lu'ol es utilizado para identi"icar coloraci&n azul, polisacáridos, dando como resultado la positi#o para aparici&n de un comple%o de color azul, el presencia de cual se dee a )ue el I 2 se introduce en polisacáridos los espacios encontrados en la cadena de 'lucosa, este proceso es irre#ersile a determinadas temperaturas. ?l contacto de este reacti#o con el almid&n, da e#idencia de una pruea +ma'en 16. >uo 1 positi#a deido a )ue el almid&n es un soluci&n de polisacárido "ormado por dos almid&n ! lu'ol5 polisacáridos, la amilosa ! amilopectina, las cuales están "ormadas por unidades de 'lucosa
+ma'en 1O. Feacci&n pruea de lu'ol. Gu*a de la uni#ersidad 0or'e >adeo $ozano para )u*mica or'ánica 21<5
=e "orm& una coloraci&n #erde con el reacti#o de enedict, ne'ati#o.
$a reacci&n de enedict se usa para identi"icar azucares reductores, este reacti#o contiene sul"ato cSprico )ue se reduce ! se precipita como &Lido cuproso, oteniendo como resultado una coloraci&n ro%o ladrillo, amarillo o #erde, esto se oser#a en la si'uiente ima'en:
+ma'en 2. Feacci&n con enedict. -uente: 'oo'le. disponile en: 7ttp:88or'anica1.or'8la28+ma'e<.'i"
?l pre#iamente 7aer adicionado pancreatina, el almid&n )ued& "inalmente en sus monosacáridos constitu!entes, por e"ecto de la acti#idad de la enzima, al realizar el ensa!o con enedict, se "orma una coloraci&n #erde, lo cual indica )ue 7a! presencia de azScares reductores.
+ma'en 1. >uo 2 soluci&n de almid&n ! media pastilla de pancreatina5
Tabla *1+ Resulta#"s an,l%s%s #e la act%v%#a# #e las /r"teasas /resentes en #eter(entes IMA9EN
RESULTADOS
ANÁLISIS
Presenta El 2uo 1. las manc7as proteicas ! de almid&n contiene 'elatina ! respecti#amente REl papel de las deter'ente
=e oser#a )ue enzimas en los deter'entesR, 2125. es (l tu#o )ue más ele#aci&n de ni#el tiene. ?proLimadament e 1 m$.
+ma'en 23. ?cci&n de las enzimas en deter'entes. -uente: &alud're(enti(a#com 215. &aludpre(enti(a#com. Fe#isado 2< ?ril 21, 7ttp:88.saludpre#enti#a.com8e8indeL.p7p pa'ina;capitulo2.7tml/comando;des_recomend aciones
+ma'en 22. >uo 2. contiene 'elatina ! deter'ente Presenta ele#aci&n m*nima.
?l tuo 2 contener más muestra del deter'ente, presenta más ele#aci&n de su ni#el por)ue 7uo más concentraci&n de enzima para actuar sore la prote*na de la 'elatina mencionada anteriormente. Es e#idente )ue al tuo 3 no contener a)uella muestra )ue e%erce acti#idad sore la macromol(cula, su ni#el de ele#aci&n es m*nimo.
+ma'en 24. >uo 3. contiene 'elatina ! a'ua destilada
Tabla *3+ Resulta#"s an,l%s%s #e la act%v%#a# #e la %nvertasa IMA9EN
RESULTADOS
ANÁLISIS
=e oser#a una $a 'lucosa es un monosacárido, 7eLosa ! coloraci&n ro%o aldosa, )ue 'eneralmente se encuentra en ladrillo, naran%a. productos como la miel.
+ma'en =oluci&n 'lucosa enedict patr&n5
2<. de con
+ma'en 2. Estructura de la 'lucosa. -uente: 'oo'le. disponile en:7ttp:88recursos.cnice.mec.es8ios"era8alumno82ac 7illerato8iomol8imá'enes8'lScido8a'lucosa.%p'
Como se oser#a en la ima'en la 'lucosa es un azScar reductor )ue reduce el sul"ato cSprico a &Lido cuproso, oteniendo el color ro%o ladrillo de la ima'en 2<.
=e oser#a una $a sacarosa es un azScar no reductor coloraci&n amarilla
+ma'en 26. >uo 1. contiene sacarosa ! le#adura "resca
+ma'en 2O. Estructura de la sacarosa. -uente: 'oo'le. disponile en: 7ttp:88.pera"an.com8azucar8ima'enes8ea2sac3.' i"
$a le#adura tiene la capacidad de de'radar en este caso los azScares por medio de la "ermentaci&n alco7&lica ausencia de oL*'eno, en la )ue los productos son: etanol, di&Lido de carono, T?D@ ! ?>P5. Este microor'anismo, posee una enzima )ue de'rada la sacarosa ! la separa en sus con"ormaciones como se oser#a en la ima'en 2O, estos dos monosacáridos, tienen como caracter*stica )ue son azScares reductores ! por esta raz&n se produce una coloraci&n amarilla con el reacti#o.
=e oser#a una ?l 7acer la pruea con azScares reductores coloraci&n #erde ! otener una coloraci&n azul indica la no claro presencia de azScares reductores, es decir un resultado ne'ati#o. Este resultado era el esperado !a )ue la le#adura no es un azScar si no por el contrario un tipo de microor'anismo 7on'o5 >al como se oser#a en la ima'en 3. En este caso la enzima presente en la le#adura no tiene una mol(cula en la cual actuar, es +ma'en 2. decir un sustrato ! por tanto no se producen >uo 2. azScares reductores, as* )ue la pruea no contiene dará resultado positi#o. le#adura "resca
=e oser#a coloraci&n azul
una
+ma'en 31. >uo 3. contiene a'ua destilada ! le#adura "resca
+ma'en 3. ista microsc&pica de las le#aduras. -uente: -am., >. 2115. )'or qu* utilizar le(adura seleccionada para la elaboraci+n de (ino, Fe#isado 2< ?ril 21, disponile en: 7ttp:88#inicolatorresale're!"amilia.com8lo'8elaoracio n#ino8211811838por)ueutilizarle#adura seleccionadaparalaelaoracionde#ino8
Tabla *4+ Resulta#"s an,l%s%s #e la act%v%#a# #e las /ect%nasas en la elab"rac%$n #e 7u("s IMA9EN
RESULTADOS
ANÁLISIS
=e otu#o ml de $as pectinasas EC 3.2.1.15), tienen 'ran %u'o de man'o utilidad en la elaoraci&n de %u'os ! #inos, pues está actSa sore la pectina, la cual suele tener un e"ecto espesante en los alimentos, por tal raz&n estas enzimas a!udan a clari"icar estos productos. $a pectina es un polisacárido )ue se encuentra de "orma natural en una 'ran #ariedad de #e'etales ! en particular en "rutas. Mezclado a temperatura mediaalta en una soluci&n con azScar o "ructosa5 ! con la presencia de un ácido, es un potente espesante ! 'eli"icante RPectina[ .cocinista.esR, 215. +ma'en 32. aso Con la a!uda de una mol(cula de a'ua la 1. 0u'o de pectinasa separa la pectina como se oser#a man'o sin en la ima'en 33. pectinasa
=e otu#o aproLimadamente 21 ml de %u'o de man'o
+ma'en 34. aso 2. 0u'o de man'o con pectinasa
+ma'en 33. ?cci&n de la pectinasa sore el sustrato, 7idr&lisis aleatoria de enlaces 1\ 45 al"aD 'alactur&nico en pectato ! 'alacturonano. -uente: KEGG E-./E: 0#1#"#"2 . 215. Genome#$p. Fe#isado 2< ?ril 21, disponile en: 7ttp:88.'enome.%p8d'etin8_'etec:3.2.1.1<
En las imá'enes 32 ! 34, se 7ace e#idente lo mencionado anteriormente, el %u'o con presencia de pectinasa se clari"ic& notoriamente, se oser#a un #olumen de 21 ml de %u'o mientras )ue en el #aso 1, no 7uo clari"icaci&n al'una.
C"nclus%"nes ➔
➔
$a aplicaci&n de iocatálisis con enzimas en la industria, se da principalmente en los alimentos ! es una de las áreas de ma!or impacto. ?un)ue las enzimas son un "actor limitante deido al nSmero de reacciones )ue pueden lle#ar a cao, son altamente empleadas para me%orar aspectos de industrias )u*micas o alimentarias.
-%bl%"(ra2)a ➔
➔
➔
Castillo Fodr*'uez, -. 2<5. Biotecnología Ambiental 1ra ed., p. 333165. Madrid: Editorial >(ar. Fe#isado de: 7ttps:88oo9s.'oo'le.com.co8oo9s id;1""P?m3E39C/p';P?33/d);enzimas@industriales/7l;es/sa;X/#ed;a7ABEi prC0)a%M?7X-X4BHXeQCP??E+G%??#;onepa'e/)/";"alse Biotecnología alimentaria . 245 1ra ed., p. 135. M(Lico. Disponile en: 7ttps:88oo9s.'oo'le.com.co8oo9s id;2ctd#n>a1OC/p';P?13/d);enzimas@en@la@industria/7l;es/sa;X/#ed;a7AB E%cu<C)%M?7XTu4BH33M?E+0D??#;onepa'e/);enzimasI2en I2laI2industria/";"alse oet, D. / oet, 0. 245. Bioquímica 3ra ed., p. 4645. Editorial m(dica panamericana. Disponile en: 7ttps:88oo9s.'oo'le.com.co8oo9s id;r<edH_a=>C/p';P?463/d);io)uimica@de@enzimas/7l;es/sa;X/#ed;a7AB E%$$_!t)%M?7ABr4BHFdDo?E+Gz??#;onepa'e/);io)u*micaI2de I2enzimas/";"alse
