PREPARACIÓN DE PDA I.
INTRODUCCION
Las enfermedades de las plantas cultivadas ocasionan pérdidas en rendimiento, afectan la calidad del producto y elevan los costos de producción. Para eso eso hay hay técnicas y métodos para diagnosticar diagnosticar las enfermedades de una una planta, es conveniente determinar primero si esa enfermedad es ocasionada por un patógeno o factor ambiental. Uno de esos métodos de cultivos artificiales es la preparación del PDA consiste en cortar papas en cuadraditos para posteriormente hervirlos en una olla y todo el j ugo que sale de esa preparación se usa con una combinación de agar el cual luego se autoclava en una olla a p resión por una hora. El objetivo principal de esta práctica es de crear un sustrato o medio de cultivo para un patógeno que puede ser el esclerotium sclerotiorum, rhizoctonia, etc.
II.
III.
OBJETIVOS
Preparar un medio de cultivo artificial donde se desarrolle un patógeno.
Conocer el procedimiento de preparación del PDA.
REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA Cámara húmeda: El propósito es el de crear condiciones favorables de humedad para el desarrollo rápido de hongos que puedan estar involucrados en la síntoma de la enfermedad, la cámara húmeda debe permitir el grado de aireación adecuada para la respiración , pero reduzca la probabilidad de contaminación ;según sea el caso se requerirán cá maras mas grandes. El material enfermo que se introduzca a la cámara húmeda debe estar lo mas limpio posible, se recomienda en distintas cámaras por sumergimiento en hipoclorito de sodio( cloro al 1%). (Casa, 2009)
2.2 Cultivo en medio artificial Es una operación que consiste en sembrar un apequeña porción de material enfermo en un medio de cultivo artificial, ya sea sólido o liquido y que sea previamente Vaciado en placa petri.
A componentes de un medio de cultivo Fuentes de carbón, nitrógeno, sales inorgánicas, vitaminas, etc. Estos compuestos pueden ser aportados por productos naturales tales como: (hojas, raíces, tallos) o por mezcla de sustancias químicas.
B PH en medio: Los hongos por lo general crecen en condiciones acidas (PH de 5.5 a 5.8) La acidez del medio puede ser controlado al nivel requerido añadiendo, al medio todavía caliente. NaOh o HCl según se desee subir o bajar su valor.
C Esterilización del medio: Para evitar que se desarrollen microorganismos ajenos, se recomienda esterilizar el medio de cultivo el mismo día en que se prepara. Esto se da por el proceso de auto clavado a 20 minutos a una presión de 15 libras y 121ºC de temperatura. . (Casa, 2009)
IV.
MATERIALES Y MÉTODOS A. Materiales
Papel toalla. Placa petri Pinzas. Alcohol. Algodón. Plumón indeleble. Hipoclorito de sodio (lejía 1%) Autoclave Papa Papa pelada 200g. Agar. Dextrosa 20g. Agua destilada 1L.
B. Metodología PREPARACIÓN DEL PDA (PAPA DEXTROSA AGAR) o o o o
o o o
Hervir la papa en 500ml. De agua destilada Filtrar el caldo de papa. El caldo debe de tener unos 240ml. En un recipiente aparte colocar el aporte de Agar y con una baqueta mezclarlo, se disuelve el indicador. Mezclar el caldo caliente de papa mas el 1/2l de agua destilada que queda. Vaciar en un recipiente botella, cerrarlo herméticamente para que no ingrese humedad. Esterilizar en autoclave.
V.
RESULTADOS
Primero se cortaba la papa en cuadraditos, después de colocaba a hervir en una olla común, después que ha hervido nos disponíamos filtrar el caldo de papa el cual debía ser mezclado en una probeta donde se le adicionaba el agar agar y se mezclaba con una bageta, todo esto se mezclaba con el agua destilada. Después se colocaba en una botella donde se cerr aba herméticamente para que no ingrese humedad y pueda estar libre de cualquier barteria u otro patogeno. Luego para terminar se coloca las botellas en de PDA en el autoclave por el lapso de una hora para obtener el resultado final.
VI.
VII. o o o o
CONCLUSIONES
Conseguimos prepara el PDA o medio de cultivo para poder aislar una enfermedad.
Conocimos el procedimiento exacto de la preparación del PDA.
BIBLIOGRAFIA Casa, Gloria.2009.fitopatología general practicas.2009 Fundación hondureña de investigación agrícola-( FHIA), 2003 Universidad Nacional Agraria la Molina, Resumen .2008 www.wapedia.mobi/es/Clorosis
VIII. ANEXOS
