Dasar Teori HIV/AIDS termasuk jajaran penyakit yang mempunyai tingkat penularan yang sangat tinggi. Hal ini terjadi karena seringkali seseorang tidak menyadari bahwa dirinya telah terinfeksi HIV, sehingga menjadi sumber penularan bagi orang lain. Seseorang terkena HIV biasanya diketahui jika telah terjadi Sindrom Defisiensi Imun Dapatan (AIDS) yang ditandai antara lain penurunan berat badan, diare berkepanjangan, Sarkoma Kaposi, dan beberapa gejala lainnya. Berkembangnya teknologi pemeriksaan saat ini mengijinkan kita untuk mendeteksi HIV lebih dini. Beberapa pemeriksaan tersebut antara lain adalah : ELISA ELISA (Enzym-Linked Immunosorbent Assay), tes ini mendeteksi antibodi yang dibuat tubuh terhadap virus HIV. Antibodi tersebut biasanya diproduksi mulai minggu ke 2, atau bahkan setelah minggu ke 12 setelah terpapar virus HIV. Kerena alasan inilah maka para ahli menganjurkan pemeriksaan ELISA dilakukan setelah minggu ke 12 sesudah melakukan aktivitas seksual berisiko tinggi atau tertusuk jarum suntik yang terkontaminasi. Tes ELISA dapat dilakukan dengan sampel darah vena, air liur, atau air kencing. Saat ini telah tersedia Tes HIV Cepat (Rapid HIV Test). Pemeriksaan ini sangat mirip dengan ELISA. Ada dua macam cara yaitu menggunakan sampel darah jari dan air liur. Hasil positif pada ELISA belum memastikan bahwa orang yang diperiksa telah terinfeksi HIV. Masih diperlukan pemeriksaan lain, yaitu Western Blot atau IFA, untuk mengkonfirmasi hasil pemeriksaan ELISA ini. Jadi walaupun ELISA menunjukkan hasil positif, masih ada dua kemungkinan, orang tersebut sebenarnya tidak terinfeksi HIV atau betul-betul telah terinfeksi HIV. Western Blot Sama halnya dengan ELISA, Western Blot juga mendeteksi antibodi terhadap HIV. Western blot menjadi tes konfirmasi bagi ELISA karena pemeriksaan ini lebih sensitif dan lebih spesifik, sehingga kasus 'yang tidak dapat disimpulkan' sangat kecil. Walaupun demikian, pemeriksaan ini lebih sulit dan butuh keahlian lebih dalam melakukannya. IFA IFA atau indirect fluorescent antibody juga meurupakan pemeriksaan konfirmasi ELISA positif. Seperti halnya dua pemeriksaan diatas, IFA juga mendeteksi antibodi terhadap HIV. Salah satu kekurangan dari pemeriksaan ini adalah biayanya sangat mahal.
PCR Test PCR atau polymerase chain reaction adalah uji yang memeriksa langsung keberadaan virus HIV di dalam darah. Tes ini dapat dilakukan lebih cepat yaitu sekitar seminggu setelah terpapar virus HIV. Tes ini sangat mahal dan memerlukan alat yang canggih. Oleh karena itu, biasanya hanya dilakukan jika uji antibodi diatas tidak memberikan hasil yang pasti. Selain itu, PCR test juga dilakukan secara rutin untuk uji penapisan (screening test) darah atau organ yang akan didonorkan. infeksi HIV memiliki empat tahap dasar: periode inkubasi, infeksi akut , latency panggung dan AIDS. Awal masa inkubasi pada infeksi asimtomatik dan biasanya berlangsung antara dua dan empat minggu. Tahap kedua, infeksi akut, berlangsung rata-rata 28 hari dan dapat termasuk gejala seperti demam ,limfadenopati (bengkak kelenjar getah bening ), faringitis (radang tenggorokan), ruam , mialgia (nyeri otot), malaise , dan mulut dan luka kerongkongan. Tahap latensi, yang terjadi ketiga, menunjukkan sedikit gejala atau tidak dan dapat berlangsung dari dua minggu untuk dua puluh tahun dan seterusnya.AIDS, dan terakhir tahap keempat infeksi HIV menunjukkan sebagai gejala dari berbagai infeksi oportunistik . Sebuah studi dari pasien rumah sakit Perancis menemukan bahwa sekitar 0,5% orang yang terinfeksi HIV-1 mempertahankan tingkat tinggi-sel T CD4 dan viral load rendah atau tidak terdeteksi secara klinis tanpa pengobatan anti-retroviral. Orang-orang ini diklasifikasikan sebagai pengendali HIV atau panjang nonprogressors panjang . [22] Infeksi akut Awal infeksi HIV umumnya terjadi setelah transfer cairan tubuh dari orang yang terinfeksi ke yang belum terinfeksi. Tahap pertama infeksi,, atau akut infeksi primer, adalah masa yang cepat replikasi virus yang segera berikut individu pajanan terhadap HIV menyebabkan kelimpahan virus dalam darah perifer dengan tingkat HIV biasanya mendekati beberapa juta virus per mL. [23] Respons ini disertai dengan penurunan ditandai dalam jumlah yang beredar + sel T CD4. Ini viremia akut dikaitkan pada hampir semua pasien dengan aktivasi CD8 + sel T , yang membunuh sel yang terinfeksi HIV, dan kemudian dengan produksi antibodi, atau serokonversi . Respon sel T
CD8 + dianggap penting dalam mengontrol tingkat virus, yang kemudian turun puncak, sebagai CD4 + T sel jumlah rebound. Sebuah respon CD8 + T sel yang baik telah dikaitkan dengan perkembangan penyakit lambat dan prognosis yang lebih baik, meskipun tidak menghilangkan virus. [24] Selama periode ini (biasanya 2-4 minggu pasca pajanan) individu sebagian besar (80 sampai 90%) mengembangkan influenza atau mononukleosis seperti penyakit yang disebut infeksi HIV akut , gejala yang umum yang sebagian besar mungkin termasuk demam , limfadenopati , faringitis , ruam , mialgia ,malaise , mulut dan luka kerongkongan, dan bisa juga menyertakan, tapi kurang umum, sakit kepala , mual dan muntah , pembesaran hati / limpa,penurunan berat badan , sariawan , dan gejala neurologis. Individu yang terinfeksi bisa mengalami semua, beberapa, atau tidak ada gejalagejala. Durasi gejala bervariasi, rata-rata 28 hari dan biasanya berlangsung setidaknya seminggu. [25] Karena sifat spesifik dari gejala-gejala, mereka sering tidak diakui sebagai tanda-tanda infeksi HIV. Bahkan jika pasien pergi ke dokter atau rumah sakit, mereka akan sering misdiagnosed sebagai salah satu dari yang lebih umum penyakit menular dengan gejala yang sama. Sebagai akibatnya, gejala-gejala utama tidak digunakan untuk mendiagnosis infeksi HIV, karena mereka tidak berkembang di semua kasus dan karena banyak disebabkan oleh penyakit yang lebih umum lainnya. Namun, mengenali sindrom bisa menjadi penting karena pasien jauh lebih menular selama periode ini. [26] Infeksi kronis Sebuah pertahanan kekebalan yang kuat mengurangi jumlah partikel virus dalam aliran darah, menandai awal infeksi HIV kronis atau sekunder. Tahap sekunder dari infeksi HIV dapat bervariasi antara dua minggu dan 20 tahun. Selama tahap infeksi, HIV aktif dalam kelenjar getah bening , yang biasanya menjadi bengkak terusmenerus, dalam menanggapi sejumlah besar virus yang menjadi terperangkap dalam folikel sel dendritik (FDC) jaringan. [27] yang mengelilingi jaringan yang kaya CD4 + T sel juga dapat menjadi terinfeksi,
dan partikel virus terakumulasi baik dalam sel yang terinfeksi dan virus gratis. Individu yang berada dalam tahap ini masih menular. Selama waktu ini, CD4 + CD45RO + T sel membawa sebagian besar beban provirus. [28] Selama tahap awal infeksi inisiasi ARV terapi secara signifikan meningkatkan kelangsungan hidup, dibandingkan dengan terapi ditangguhkan. [29] AIDS Ketika CD4 + T sel nomor penurunan di bawah tingkat kritis 200 sel per uL, kekebalan yang dimediasi sel hilang, dan infeksi dengan berbagai oportunistik mikroba muncul. Gejala pertama biasanya termasuk yang tak dapat dijelaskan berat badan dan moderat, berulang saluran pernafasan infeksi (seperti sinusitis , bronkitis , otitis media , faringitis ), prostatitis , ruam kulit, dan ulcerations oral. infeksi oportunistik umum dan tumor, yang sebagian besar biasanya dikendalikan oleh kuat CD4 + T-imunitas dimediasi sel kemudian mulai untuk mempengaruhi pasien. Biasanya, perlawanan yang hilang sejak awal untuk spesies Candida lisan, dan untuk Mycobacterium tuberculosis, yang mengarah ke peningkatan kerentanan terhadap kandidiasis oral (thrush) dan TB . Kemudian, reaktivasi laten virus herpes dapat menyebabkan perburukan kambuh dari herpes simpleks letusan, sirap , Epstein-Barr Virus -induced -sel limfoma B , atau 's sarkoma Kaposi . Pneumonia yang disebabkan oleh jamur Pneumocystis jirovecii adalah umum dan sering fatal. Pada tahap akhir AIDS, infeksi dengan cytomegalovirus (lain virus herpes ) atau kompleks Mycobacterium avium lebih menonjol. Tidak semua pasien dengan AIDS mendapatkan semua ini infeksi atau tumor, dan ada tumor dan infeksi lain yang kurang menonjol tetapi masih signifikan. Prinsip Entebe HIV dipstick merupakan tes imunologik atas dasar reaksi antigen antibody . Sebagai dasar indicator dipergunakan reagensia pewarna (colloidal gold ) yang mampu memberikan perubahan warna yang dapat
dilihat dengan mata telanjang, prinsip memerlukan waktu selama 30 menit. Sisir atau Coomb dipstick dibuat dari polystyrene yang di bagian ujungujungnya dilekatkan peptide sintetik sebagai antigen. Apabila Coomb dicelupkan ke dalam sampel yang mengandung anti HIV , akan terjadi ikatan antigen- antibody yang spesifik. Sesudah dicuci, untuk menghilangkan protein-protein yang tidak terikat dan diinkubasikan dalam reagensia pertama, ujung Coomb dimana peptide menempel berubah warna menjadi merah muda, beraarti sampel mengandung antibody. Bila tidak timbul warna berarti sampel tidak mengandung antibody HIV. Spesimen
: Serum
Peralatan
: 1. Mikroplate tipe U 2. Mikropipet 100 µl 3. Coomb dipstick 4. Basin 5. Timer 6. Tissue
Reagensia
: 1. Reagensia Signal 2. Serum Dilluent 3. Serum positif control 4. Serum negatif control
Persiapan larutan kerja pencuci ( working wash solution) 1. Larutan pencuci diencerkan dengan akuades perbandingan 1:4 ( 20 ml larutan pencuci pekat +80 ml akuades ) 2. Homogenkan
Prosedur 1. Coomb dipstick dilabelisasi ( Kontrol positif, kontrol negatif, dan
sampel) 2. Mikrotiter lubang A 1 dimasukkan kontrol negatif sebanyak 100 µl,
lubang B1- G1 dimasukkan masing-masing 100 µl sampel, lubang H1 dimasukkan 100 µl kontrol positif. 3. Serum
kontrol
dan
sampel
dibuat
pengenceran
dengan
perbandingan 1:1 sehingga didapat pengenceran ½ ( 100 µl 4. pengencer + 100 µl serum kontrol/sampel) 5. Coomb diinkubasi dalam sampel dan kontrol selama 10 menit,
setelah itu diangkat dan tempelkan ujungnya pada tissue agar kering. 6. Coomb dicuci ke dalam larutan pencuci yang ditaruh dalam basin sambil digoyang-goyangkan 7. Kedalam 8 sumur lain diisi dengan reagensia signal masing-masing sebanyak 200 µl (4 tetes) 8. Coomb dimasukkan kedalam reagen signal tersebut lalu diinkubasi selama 10 menit. Setelah itu diangkat dan dikeringkan dengan ditempelkan pada tissue 9. Hasil diamati
Hasil Pengamatan :
-
1 2 6 +
3
4
5
