BAB I PENDAHULUAN
Fore Forens nsik ik sero serolo logi gi adal adalah ah studi studi dan dan peme pemeri riks ksaan aan yang bertu bertuju juan an untu untuk k menganalisis darah dan cairan tubuh dalam berbagai tindak pidana. Ilmu serologi memungkinkan para ilmuwan forensik untuk membedakan cairan tubuh yang ditemui di tempat kejadian kejadian dan kemudian kemudian melakukan melakukan berbagai tes untuk mengidentif mengidentifikasi ikasi darimana darimana cairan cairan ini berasal1. Meskipun analisis DNA dan sidik jari adalah lebih akurat untuk mengidentifikasi seorang individu, namun pemeriksaan serologi dapat dila dilaku kukan kan deng dengan an cepa cepatt dan mura murah h disa disamp mpin ing g memb member erik ikan an data data yang yang seca secara ra saintifiknya masih valid.1 file:///C:/Users/rusunawa/Desktop/blood%20trace%20evidence%20ref/serology%20test%20in%20forensics.html
Terdapat banyak jenis cairan yang dihasilkan dalam tubuh badan manusia dan tetap ada didalam tubuh pada setiap waktu. Cairan ini sangat berguna bagi membantu ahli ahli forens forensik ik dan ahli ahli
patolo patologi gi dalam dalam mengum mengumpulk pulkan an bukti bukti untuk untuk menent menentuka ukan n
bagaimana kematian seseorang dapat terjadi dan dapat juga mengidentifikasi pelaku tindak pidana2. http://www.exploreforensics.co http://www.explorefo rensics.co.uk/bodily-fluids-in .uk/bodily-fluids-in-forensic-forensicscience.html
Darah merupakan bukti yang paling sering dijumpai dan mungkin bukti yang paling penting dalam suatu tindak kriminal sekarang ini. Dalam dunia forensik, darah selalu selalu menjadi bukti penting, penting, salah satu satu aspek penting dari serologi serologi dalam bidang bidang forensik adalah menentukan menentukan apakah noda yang menyerupai darah yang yang ditemukan di Tempat Kejadian Perkara (TKP) sebenarnya darah atau noda lain yang memiliki kemiripan yang sama2. Selama bertahun-tahun para pelaku kriminal telah mencoba banyak hal untuk menyembunyikan, membersihkan dan menghapus noda darah seba sebaga gaii bara barang ng bukt buktii di temp tempat at keja kejadi dian an perk perkar ara. a. Kebe Kebera rada daan an dara darah h sela selalu lu
1
berhubungan erat dengan tersangka maupun korban pada saat kejadian. Suatu noda darah darah dapat dapat member memberita itahuka hukan n banya banyak k hal sepert sepertii posisi posisi dan perger pergeraka akan n pada pada saat saat kejadian, siapa yang menyerang pertama kali, pada keadaan bagaimana, dan berapa kali dilakukan. Hal ini dapat menepis setiap alibi dan pembenaran diri dari tersangka, dan pada akhirnya memaksa tersangka untuk mengakui kebenaran yang terjadi3. Ada atau tidaknya noda darah selalu memberikan informasi yang penting pada investigasi kasus-kasus kriminal. Seorang forensik serologi biasanya diminta untuk menen menentu tuka kan n apak apakah ah noda noda mera merah h yang dite ditemu mukan kan di temp tempat at keja kejadi dian an perk perkar araa merupakan darah atau bukan darah. Apabila noda merah tersebut adalah darah maka selanjutnya harus ditentukan darah tersebut berasal darimana4,5.
2
BAB II PEMBAHASAN
Rata-rata, jumlah darah adalah 8% dari total berat badan dimana 5 sampai 6 liter darah untuk pria dan 4 sampai 5 liter darah untuk wanita. Hilangnya volume darah sebanyak
40% dari berat tubuh akan menyebabkan syok yang bersifat
ireversibel dan berujung pada kematian6. Terdapat berbagai terminologi darah antara lain, golongan, rhesus (Rh), antigen, antibodi, aglutinasi. Golongan darah A-B-O dikelompokkan berdasarkan ada tidaknya antigen keduanya pada sel darah merah. Faktor resus (Rh) terdapat pada sel darah merah; Rh positif jika ditemukan dan negatif jika tidak ada. Antigen merupakan
zat yang dapat merangsang tubuh untuk membuat antibodi. Antigen
(protein) yang ditemukan di plasma membran sel darah
merah menunjukkan
golongan darah orang tersebut. Antibodi adalah zat yang bereaksi dengan antigen. Aglutinasi atau penggumpalan sel darah merah; akan terjadi jika darah yang berbeda antigennya dicampur 6 . Darah memiliki karakteristik yaitu plasma yang merupakan bagian cairan darah (55%), sel (45%), eritrosit atau sel darah merah yang bertanggung jawab untuk distribusi oksigen., leukosit atau sel darah putih yang bertanggung jawab untuk melawan atau pertahanan terhadap benda asing yang masuk ke dalam tubuh, trombosit atau platelet bertanggung jawab untuk penggumpalan darah dan serum adalah cairan yang memisahkan dari darah ketika bekuan terbentuk 6. Ketika darah meninggalkan tubuh, mulai berkumpul dan menggumpal. Waktu pembekuan darah normal yaitu 3-15 menit yang bervariasi pada tiap individu. Ketika darah pertama mulai menggumpal, berwarna gelap mengkilap, membentuk seperti
3
massa jelly. Seiring berjalannya waktu, gumpalan mulai berkontraksi dan berpisah dari serum yang berwarna kekuningan6. Penyidik menggunakan
pembekuan darah sebagai panduan
kasar untuk
memperkirakan waktu terjadinya kejadian. Jika darah masih cair, pendarahan terjadi hanya beberapa menit sebelumnya, jika yang didapatkan darah telah menyatu, mengkilap dan seperti agar-agar maka pendarahan terjadi kurang dari satu jam. Jika darah sudah terpisah dari serum menjadi gumpalan maka kejadian mungkin terjadi beberapa jam yang lalu. Noda darah yang terpercik atau mengalir pasti terjadi sesaat sebelum kematian. Hal ini dapat ditemukan pada saat setelah kematian apabila penyidik TKP bertindak tidak hati-hati6. Darah segar mempunyai nilai yang lebih penting daripada darah kering, karena uji darah segar dapat memperoleh hasil yang lebih baik. Darah akan mengering setelak kontak dengan udara luar dalam waktu 3-5 menit. Begitu darah mengering maka darah akan berubah warna dari merah menjadai coklat kehitaman. Darah pada kasus kriminal dapat berbentuk genangan darah, tetesan, usapan atau bentuk kerak. 6. Forensik serologi adalah ilmu yang digunakan untuk menjawab sejumlah pertanyaan yang berbeda ketika darah ditemukan di TKP. Tes pertama yang dilakukan adalah untuk menentukan apakah sesuatu benar-benar darah, dan kemudian untuk menentukan apakah itu darah manusia. Tes juga dilakukan untuk menentukan golongan darah dan faktor Rh, dan untuk mencari tahu yang antigen dan antibodi yang hadir 5. Karakteristik utama dari darah ialah hemoglobin, tes-tes yang dilakukan dalam forensik untuk darah berdasarkan keberadaan hemoglobin atau komponenkomponen yang ada di dalamnya. Hemoglobin merupakan protein yang berfungsi mengangkut oksigen dari paru-paru ke jaringan seluruh tubuh. Hemoglobin terdiri atas heme yang mengangkut oksigen dan globin komponen protein. Tes yang dilakukan di forensik untuk identifikasi darah sebenarnya mendeteksi keberadaan dari
4
heme. Digunakan beberapa substansi berwarna tertentu yang bila dicampur dengan peroksida akan merubah warna dasarnya yang disebut oksidasi. Kebanyakan enzim umumnya akan mempercepat reaksi. Enzim adalah katalis yang mempercepat reaksi dan heme berfungsi sebagai katalis7,8 Terdapat dua jenis metode pemeriksaan yaitu secara kimiawi dan biologis, dimana metode biologis umumnya lebih lambat yaitu seperti reaksi antigen-antibodi namun lebih spesifik daripada metode kimia . Salah satu persyaratan dari forensik adalah metode yang dapat digunakan di lapangan, dan kimia merupakan metode memiliki kecepatan dan cocok untuk ini4. Investigasi serologi untuk darah dibagi menjadi dua kategori, yaitu: 1. Tes Presumtif
-
Tes Katalitik o
Tes Kastel Meyer
o
Tes Luminol
2. Tes Konfirmasi -
Tes Kristal
-
Tes RSID-Darah
-
Tes ABAcard
1. Tes Presumtif
Tes ini memberikan dua hasil pemeriksaan yang berbeda yaitu mengeliminasi substansi yang didapat (bukan darah), memberikan kemungkinan (positif presumtif) dari sampel yang diteskan (mungkin darah)
5,9
. Salah satu adalah dengan
5
menggunakan
senyawa yang dapat memberikan efek ketika bersentuhan dengan
darah. Hasil ini adalah cara sederhana dan cepat untuk membuktikan bahwa sebenarnya sampel tersebut adalah darah5. Tes
presumtif
merupakan
tes
dugaan
karena
adanya
memberikan
kemungkinan hasil yang false-positive (pemutih yang bereaksi dengan luminol) atau hasilnya yang terlalu meluas (sampel adalah darah tetapi belum tentu berasal dari manusia).
Tes presumtif yang umum dilakukan untuk darah antara lain
Phenolphthalein, Luminol, Hemastix, and Leuco-crystal Violet (blood)9,10
Tes Katalitik
Tes ini didasarkan bahwa heme dapat mengkatalisis hidrogen peroksida. Cairan H2O2 direaksikan dengan sampel dan akan terjadi reaksi teroksidasi yang menghasilkan perubahan warna. Penting untuk dicatat bahwa hasil tes yang positif tidak berarti bahwa noda tersebut atau sampel adalah darah, apalagi untuk menentukan dengan pasti sampel adalah darah manusia, karena berbagai enzim dan logam tertentu juga bisa memberikan hasil positif 4. Metode ini didasarkan bahwa heme dari hemoglobin memiliki sifat seperti peroksida yang mengkatalis pemecahan hidrogen peroksida. Zat yang teroksidasi ini dapat bereaksi dengan substrat lainnya yang akan menghasilkan perubahan warna. Substrat yang umum digunakan adalah benzidin dan bahan lainnya seperti tetramethyl-benzidines, orto-tolidine, leukomalachite hijau, leucocrystal ungu dan fenolftalein - yang terakhir ini dikenal sebagai tes Kastle-Meyer. Reaksi dengan 3aminophthalhydrazide (Luminol) yang menghasilkan cahaya4.
6
Gambar 1. Tetramethyl-benzidines, Orto-tolidine, Leukomalachite green, Leucocrystal violet 5
Tes katalitik sangat sensitif (darah dapat dideteksi dengan pengenceran sekitar 1 di 100.000), tetapi terdapat beberapa faktor yang dapat memberikan interpretasi hasil yang salah sehingga tes ini tidak spesifik untuk darah. Zat yang dapat mengganggu hasil yang diinginkan pada tes katalitik termasuk enzim seperti katalase dan peroksidase (dapat ditemukan pada tanaman dan hewan), bahan kimia dan logam yang teroksidasi khususnya tembaga dan besi4. Ketika hasil diinterpretasikan harus lebih teliti, terutama ketika pengujian dilakukan luar ruangan, di mana banyak jenis bahan tanaman yang dapat ditemukan, atau pengujian di kendaraan, di mana permukaan logam dapat mengganggu4. Prinsip umum adalah bahwa jika tes adalah negatif, darah tidak ada, tapi jika tes ini positif maka sampel kemungkinan adalah darah tetapi
tidak pasti. Untuk
alasan ini tes sering digambarkan sebagai tes "dugaan"4. a. Konfirmasi Noda Terlihat
Konfirmasi noda terlihat sebagian besar dilakukan dengan menggunakan "Sangur" stick , atau menggunakan Kastle-Meyer tes. Sangur stick, di mana reagen mendeteksi berada dalam bergerak bentuk cara melakukannya yaitu dengan menggosok lembut pada noda dan basah. Hasilnya langsung terlihat dari perubahan warna, dari kuning pucat ke biru kehijauan yang intens menunjukkan kemungkinan adanya darah. Tes ini sangat sensitif tetapi karena cara itu sudah diatur tidak mudah dimodifikasi untuk memeriksa untuk gangguan mungkin4.
7
Gambar 9. Reaksi pada tes Kastel Meyer
Gambar 2. A. Warna pink menunjukkan aktivitas dari hemolisis dan fenolftalin, menunjukkan hasil positif. B. tidak terdapat darah pada sampel, tidak tampak hemolisis peroksida dan perubahan warna, hasil tes negatif 11.
Pada uji Kastle-Meyer yang fenolftalein disimpan dalam larutan basa yang didalamnya terdapat seng, larutan ini tidak berwarna. Oksidasi dengan hemoglobin dan peroksida menyebabkan perubahan warna yang cepat menjadi
merah muda
terang, Gambar 2 menunjukkan reaksi tersebut. Awalnya tes dilakukan dalam satu langkah, tapi banyaknya gangguan potensial dapat dihilangkan dengan melakukan tes dalam dua langkah4.
8
Gambar 3 - Oksidasi fenolftalein berkurang oleh hemoglobin dan peroksida 5
Dalam bentuk asli, sejumlah kecil reagen Kastle-Meyer yang telah dipersiapkan dicampur dengan etanol 95% (volume sama) dan 10% larutan hidrogen peroksida. Noda yang dicuragai darah kemudian
digosok dengan sepotong kecil
kertas filter dan ditambahkan setetes campuran pereaksi ke kertas. Perubahan warna menjadi merah
muda merupakan indikasi dari adanya hemoglobin, yang telah
dikatalisis pemecahan hidrogen peroksida. Namun, yang digunakan dalam formulir ini, tes akan memberikan hasil yang tampaknya positif dengan bahan pengoksidasi lainnya. Dalam versi pengujian dua langkah, reagen Kastle-Meyer hanya dicampur dengan etanol 95% (volume sama). Larutan ditambahkan ke noda pada kertas filter. Jika warna pink atau warna
merah
langsung berubah, yaitu tanpa penambahan
hidrogen peroksida4. Sampel yang memberikan hasil positif baik pada tes Sangur dan tes KastleMeyer akan dilaporkan sebagai kemungkinan darah. Kecuali hasil positif kemudian diperoleh dengan uji biologis dikenal spesifikasi manusia-, adanya darah tidak bisa dikonfirmasi. Tes yang dapat digunakan untuk konfirmasi akan termasuk reaksi antigen-antibodi yang disebut sebagai difusi ganda Ouchterlony dimana keberadaan enzim seperti alpha-2-HS-glikoprotein dikenal untuk lebih spesifik manusia, atau adanya urutan DNA spesifik bagi manusia4.
9
Noda merah
Tes Presumtif
Mungkin
Bukan darah
Tes
Hewan
Manusia
Golongan darah (A,B,O) dan resus
DNA
Gambar 4. Alogaritma pemeriksaan
10
b. Deteksi Noda Yang Tidak Terlihat
Hal ini secara tradisional telah dilakukan dengan menggunakan luminol. Aplikasi luminol adalah pada daerah dimana mungkin ada darah tapi sulit untuk dilihat, misalnya di antara vegetasi, atau dimana ada upaya yang telah dilakukan tersangka untuk membersihkan darah dan jejak masih ada. Sebuah reaksi positif juga kadang-kadang dapat ditemukan pada pakaian yang berlumuran darah yang telah dicuci4. Luminol, 3-aminophthalhydrazide, merupakan salah satu dari tes presumti yang paling dikenal luas khususnya pada penggunaannya di tempat kejadian10. Luminol berbentuk bubuk yang dicampur dengan sodium karbonat (Na2CO3) and hidrogen peroksida (H2O2) dan air. Campuran ini menghasilkan suatu larutan basa (pH 10,4-10,8) atau campuran luminal dasar. Cahaya emisi akan dihasilkan bila liminol teroksidasi oleh oksidan dalam luminal tetapi reaksi ini tidak da pat terjadi bila tidak terdapat katalis. Katalis merupakan substansi yang mempercepat laju reaksi tetapi tidak mempengaruhi hasil reaksi tersebut. Katalis pada luminal biasanya logam, dan oksidannya adalah hidrogen peroksida. Bila luminal digunakan untuk mendeteksi darah maka hemoglobin berfungsi sebagai katalis dalam reaksi ini. Hemoglobin merupakan molekul yang terdiri atas besi yang terdapat dalam sel darah merah4,8 Reaksi: Luminol + hydrogen peroxide oxidised luminol + LIGHT haemoglobin catalyst
11
Gambar 5. Reaksi kimia Luminol8 Larutan luminal biasanya dikemas dalam semprotan dan adanya darah menghasilkan pendaran kebiruan yang berlangsung selama sekitar 45 detik. Pendaran dapat dilihat kembali dengan penyemprotan tambahan tetapi ini perlu dilakukan hatihati karena noda akan hilangan jika terlalu banyak cairan yang ditambahkan ke dalamnya. Pendaran cahaya bisa difoto dalam hitam-putih atau dengan warna tetapi membutuhkan teknik khusus4.
Gambar 6. A. noda pada karpet tidak terlihat, B menunjukkan tes luminol yang positif 13
Gambar 7.A Noda darah pada perkaks tanaman tidak terlihat oleh mata telanjang, B menunjukkan tes luminol yang positif 8.
12
Gambar 8. A. Noda pada pintu kayu tidak terlihat, B. menunjukkan adanya bekas darah melalui pendaran biru 14
Luminol tidak spesifik untuk darah dan juga dapat memberikan reaksi positif dengan beberapa enzim tanaman, oksidasi dan logam. Pengguna yang berpengalaman dari luminol dapat membedakan reaksi yang diberikan oleh darah dengan warna pendaran, berlangsung berapa lama, dan derajat "kilauan" dari luminescent. Darah cenderung tidak berkilau, tapi menghasilkan pendaran yang stabil, sedangkan beberapa logam cenderung memberikan pendaran yang pasti berkilau4.
Tabel 1. Hasil Tes Presumtif menggunankan Phenoftalin dan Tetrametilbenzedin.
13
Seperti tes presumtif-phenoftalin dan tetrametilbenzidin, reaksi luminol juga didasarkan pada reaksi peroksida pada heme (tabel 1). Heme pada darah mengkatalis proses oksidasi pada luminol dalam larutan basa. Reaksi luminal yang positif memberikan warna pendaran biru yang terlihat bila lampu dimatikan, dan phenoftalin menghasilkan wana pink sedangkan tetrametilbenzidin memberikan warna hijau-biru bila hasil sampel positif.
2. Tes Konfirmasi:
Ini adalah suatu tes yang dilakukan dengan menggunakan
sampel yang
diyakini sebagai darah dan mencampurkan dengan senyawa kimia yang akan bereaksi dengan hemoglobin, faktor yang dihasilkan menjadi produksi kristal yang dapat diidentifikasi di bawah mikroskop sebagai darah5. Banyak tes yang digunakan untuk tes Konfirmasi antara lain yaitu : A. Tes Kristal :
Tes yang tertua adalah mengkonfirmasi keberadaan hemoglobin dan turunannya dengan terbentuknya Kristal spesifik, misalnya Tes Takayama atau hemokromogen,
dimana ferrous
dari
hemoglobin
bereaksi
dengan
piridin
menghasilkan kristal merah. Heme membentuk kristal ketika bereaksi dengan reagen tertentu. Reagen yang biasa digunakan adalah piridin yang hasilnya akan membentuk kristal merah muda yang khas6. Bila larutan basa piridin ditambahkan ke noda dan jika terdapat darah, maka akan terbentuk kompleks antara piridin dan heme yaitu kristal merah muda.
14
Sekarang ini, tes kristal jarang digunakan. Semua didasarkan pada pembentukan
turunan
kristal
hemoglobin
seperti
haematin,
haemin
dan
haemokromogen. Tes ini dilakukan pada slide mikroskop, dengan reagen diteteskan pada noda di bawah kaca penutup, dan pembentukan
kristal diamati secara
mikroskopis4. Sejumlah basa nitrogen lainnya, termasuk nikotin, metilamin, histidin dan glisin telah digunakan dalam variasi dari tes ini4.
Gambar 10. Tes Takayama positif membentuk Kristal yang dap at dilihat dibawah mikroskop
15
Gambar 11. Struktur Kristal merah-pink pada tes Takayama5
Pada umumnya tes kristal dengan yang hasil positif menegaskan kehadiran darah. Sensitivitas adalah sekitar 0,001 mL darah atau 0,1 mg hemoglobin. Sebuah hasil negative tidak selalu menunjukkan bahwa darah tidak ada dapat saja diakibatkan teknik yang salah dan kontrol positif harus selalu dijalankan perbandingan. Selama 20 tahun tes Kristal digunakan untuk memberikan petunjuk yang benar mengenai adanya darah4. Tes Kristal lainnya adalah Teichman yang terdiri atas larutan potassium bromide, potassium klorida dan potassium iodide dalam alam asetat yang dipanaskan agar dapat bereaksi dengan hemoglobin. Pertama-tama hemoglobin diubah menjadi hemin dan kemudian halides bereaksi dengan hemin membentuk Kristal rhomboid berwarna kuning kecoklatan9. B. Tes Presipitasi :
Darah dapat diidentifikasi berasal dari manusia melalui reaksi dengan antiserum tertentu untuk komponen darah manusia. Biasanya ini merupakan serum anti-human serum yaitu, suatu antiserum untuk serum manusia. Hal ini bertujuan untuk melihat apakah sampel berasal dari manusia. Pada dasarnya tes presipitasi dilakukan dengan menempatkan larutan antibodi pada bagian atas dari ekstrak noda dalam tabung reaksi, kemudian dibiarkan beberapa saat untuk melihat apakah ada pita/ garis presipitasi yang terbentuk 9. C. RSID-Blood
Rapid Stain Identification of Human Blood ( RSID™-Blood ) menggunakan dua antibodi monoklonal anti-human glycophorin A pada lateral flow format untuk mendeteksi keberadaan glycophorin A yang khas pada manusia. Glycophorin A terdapat dalam jumlah yang banyak dan terutama pada membran sel darah merah
16
dimana berfungsi untuk mencegah agregasi selular. Tes konfirmasi RSID™-Blood memiliki beberapa keuntungan lebih disbanding metode lainnya untuk mendeteksi darah, termasuk tingkat sensitivitas yang tinggi, spesifitas dan kecepatannya13.
Keterangan : C: garis kontrol T: garis tes S: jendela sampel Gambar 11. Interpretasi Tes RSID-Darah Prinsip dari tes ini adalah immunochromatographic assay yang menggunakan antibodi monoklonal yang spesifik untuk glycophorin A manusia. Dimana salah satu dari monoklonal tersebut dikonjugasikan dengan koloid emas yang diletakkan pada wadah konjugasi yang terletak dibawah jendela sampel (S). Antibodi lainnya diletakkan pada membran “Test line” yang dilekatkan pada wadah konjugasi, sedangkan membrane untuk “Control line” terdiri atas antibodi anti-mouse IgG yang digunakan sebagai kontrol fungsiona14. Bila glycophorin A manusia terdapat dalam sampel maka kompleks antigen antibodi yang berwarna emas akan muncul. Kompleks ini kemudian akan dibaca oleh antibodi anti-glycophorin A pada test line (T) yang menghasilkan garis merah. Bila tidak terdapat glycophorin A dalam sampel, maka tidak terbentuk kompleks emas yang tidak dapat berakumulasi pada test line. Anti-mouse IgG pada garis kontrol (C)
17
membaca adanya antibodi tikus yang melalui test line yang kemudian menghasilkan garis merah pada garis kontrol, ini membuktikan bahwa tes yang dilakukan sudah benar dilakukan14. D. Tes ABAcard® HemaTrace
Prinsip tes ini adalah, ekstrak warna diletakkan pada bagian bawah dari tes strip, dimana terdapat juga hemoglobin manusia yang akan bereaksi dengan antibodi monoklonal hemoglobin anti-human. Antibodi tersebut diberi tanda dengan pewarna khusus, sehingga bila terbentuk antibodi-antigen yang melalui membrane tes maka immobilized polyclonal antihuman hemoglobin akan membentuk kompleks Ag-AbAg yang diinterpretasikan dengan garis pink 14.
Gambar 12. Alat Tes ABAcard15
Gambar 13. Hasil Tes ABAcard8
18
Kontrol terdiri atas human hemoglobin antibody, pewarna yang terkonjugasi tidak dapat terikat pada antibodi pada area tes tetapi terbaca pada area kontrol. Pengujian yang benar dengan hasil yang positif akan menunjukkan dua garis pink, satu pada area tes dan satunya pada area kontrol, sedangkan pengujian yang benar dengan hasil negative akan menunjukkan satu garis pink pada area control saja. Tes ini diketahui memiliki validitas yang baik dan sensitif, spesifik dan cepat9. Setelah semuanya itu, maka pengujian sampel dilanjutkan untuk menentukan golongan darah dan kemudian menentukan jenis kelamin dari orang yang memiliki darah tersebut.
Gambar 14. Menunjukkan tes Aglutinasi baik untuk penentuan golongan darah ,maupun Rh17.
19
Sel darah merah memiliki antigen tertentu pada permukaan selnya yaitu A dan B yang merupakan dasar penggolongan darah. Orang yang sel darah merahnya memiliki anrigen-A memiliki golongan darah A, begitu juga dengan golongan darah B, individu dengan antigen-AB pada sel darah merahnya memiliki golongan darah AB sedangkan mereka yang tidak memiliki antigen digolongkan kedalam golongan darah O17. Untuk menentukan golongan darah, digunakan beberapa tes, yang paling mudah dan sering dipakai sampai sekarang adalah tes aglutinasi.
Prinsip tes ini
adalah bila antigen pada sampel bereaksi dengan antibody reagen maka akan terbentuk gumpalan atau aglutinasi dari antigen16. Antigen permukaan yang juga penting adalah factor Rhesus (Rh). Bila faktor ini terdapat pada sel darah merah maka golongan darahnya adalah Rh positif dan bila tidak ada, maka golongan darahnya adalah Rh negatif 16,17. Bila telah didapatkan golongan darah secara spesifik, maka tes selanjutnya yang harus dilakukan adalah tes DNA untuk mempersempit bidang pencarian. 9
20
BAB III KESIMPULAN Ketika noda merah ditemukan pada tempat kejadian perkara, maka noda tersebut dapat dicurigai sebagai darah dan barang bukti. Untuk membuktikan apakah sampel tersebut adalah darah, maka dapat dilakukan beberapa tes4. Tes-tes yang dilakukan dalam forensik untuk darah berdasarkan keberadaan hemoglobin atau komponen-komponen yang ada di dalamnya. Hemoglobin terdiri atas heme yang mengangkut oksigen dan globin komponen protein. Tes yang dilakukan di forensik untuk identifikasi darah sebenarnya mendeteksi keberadaan dari heme. Digunakan beberapa substansi berwarna tertentu yang bila dicampur dengan peroksida akan merubah warna dasarnya yang disebut oksidasi. Kebanyakan enzim umumnya akan mempercepat reaksi. Enzim adalah katalis yang mempercepat reaksi dan heme berfungsi sebagai katalis7,8 Tes pertama adalah tes presumtif yang bertujuan menyingkirkan substansi lain selain darah, namun tes ini tidak dapat memastikan keberadaan darah. Tes Kastel Meyer merupakan tes presumtif yang paling banyak dilakukan dimana bila hasilnya positif maka akan menghasilkan warna pink. Luminol juga merupakan tes presumtif yang sering digunakan. Terlebih luminol digunakan untuk mendeteksi keberadaan noda darah yang sudah dihapus atau dicuci. Luminisens atau pendaran biru yang akan dihasilkan bila luminol bereaksi dengan hemoglobin dan dapat dilihat bila cahaya lampu dimatikan (ruangan gelap). Bila telah ditetapkan bahwa sampel tersebut mungkin adalah darah, maka pengujian dilanjutkan untuk mengkonfirmasi, apakah darah tersebut berasal dari manusi atau hewan4. Untuk itu dilakukan tes konfirmasi antara lain : tes presipitasi dimana darah dapat diidentifikasi berasal dari manusia melalui reaksi dengan
21
antiserum tertentu untuk komponen darah manusia9, RSID-darah yang mendeteksi keberadaan glycophorin A yang khas pada manusia13 ataupun ABAcard yang prinsipnya dimana hemoglobin manusia yang akan bereaksi dengan antibodi monoklonal hemoglobin anti-human14. Penentuan golongan darah dan rhesus dari sampel darah yang telah dikonfirmasi berasal dari manusia, merupakan langkah selanjutnya yang dilakukan untuk mempersempit pencarian. Bila semua tes diatas telah dilakukan, maka uji DNA merupakan tahap akhir yang lebih spesifik untuk menentukan kepemilikan dari noda darah tersebut.
22
