UNIVERSIDAD DE CHILE FACULTAD DE CIENCIAS AGRONÓMICAS Departamento de Producción Animal Genética y Bases del Mejoramiento
INFORME DE TRABAJO EXPERIMENTAL Genética Mendeliana con Pez Cebra
INTEGRANTES: Camila Bustamante Álvarez.
Grupo 1 Fecha de entrega: 24/ Abril/ 2014
Introducción Los peces cebras Danio rerio pertenecen a la familia de los ciprínidos originarios del sureste asiático, los cuales se han convertido en un organismo modelo por excelencia dentro de los vertebrados dado que tienen fácil manejo y descendencias numerosas, facilitando el estudio de la genética y biología del desarrollo. Danio rerio es
un ciprínido de unos 5-6 cm, dulceacuícola y de aguas tropicales. Es nativo del sur de Asia, se distribuye sobre todo por el norte y este de India, aunque también lo podemos encontrar en lugares como Bangladesh y Nepal. Habita en lagos, lagunas y charcas con abundantes plantas acuáticas, creciendo en la orilla más que en los ríos y arroyos ya que prefiere los cursos de agua remansada antes que las corrientes (Díaz, 2006). La metodología utilizada para la elaboración de este organismo transgénico es a través de la extracción de proteínas verdes fluorescente, amarillo fluorescente y rojo fluorescente, la proteína rojo fluorescente fue aislada del coral del océano pacífico Discosoma sp. las cuales presentaban los peces con los cuales se hicieron la muestra de los datos.
Descripción del cruzamiento Se cruzaron dos individuos una hembra normal (wt) y un macho fluorescente, del cual se obtuvo su progenie y se colectaron los huevos en una placa Petri de 9 mm. Posteriormente se recurrió a la selección de huevos viables, los cuales se incubaron a una temperatura de 28°C. Transcurridos 4-7 días el desarrollo embrionario era evidenciable por lo cual los peces se trasladaron a contenedores de crianza, el cual se controló diariamente eliminando los peces muertos para evitar una contaminación hacía los otros peces dentro del contenedor. Finalmente se hizo un muestreo de datos de la progenie final obtenida de un total de 9 peces normales. En las primeras etapas de desarrollo posteriores al cruzamiento se obtuvieron 27 huevos de los cuales sólo eclosionaron 22, quedando finalmente 9 peces tras una muerte la cual afecto a la mayoría de la muestra.
Hipótesis estadística Del cruzamiento entre una hembra normal (wt) y un macho fluorescente, se obtuvo 9 peces normales. Se plantea una hipótesis donde los datos se justan o no a la proporción de 1:1. H0: Los datos se ajustan a la proporción 1:1 H1: Los datos no se ajustan a la proporción 1:1 Se determinara la hipótesis a través de la prueba de G 2. Para calcular el valor esperado, tanto de peces normales como fluorescentes se dividirá el número total de individuos obtenidos por la proporción utilizada en nuestra hipótesis, en este caso 9/2= 4,5, con este valor obtenido de procederá a sacar la proporción esperada multiplicándola por la proporción correspondiente: Fenotipo Normal Fluorescente
Proporción 1 1
Observado 9 0
Esperado 4,5*1 4,5*1
Para saber si los datos se ajustan o no a la proporción, X 2calculado se compara con X 2tabulado. Este último valor se obtiene de la tabla de valores críticos de la distribución chi- cuadrado para el nivel de significancia del 5%. Los grados de libertad se obtienen restándole uno al número de fenotipos, en este caso es un grado de libertad (2 fenotipos – 1= 1), por lo tanto el valor de X 2tabulado = 3.841.
∑ ( ) ( ) 12,47 Dado que el valor tabulado, para el grado 1 de libertad con un nivel de significancia de 5% es de 3,841 es menor que el valor obtenido se rechaza la hipótesis nula por los tanto los datos de la muestra no se ajustan a la proporción 1:1.
Discusión Se puede inferir que el individuo macho era heterocigoto para el gen de fluorescencia, dado que de no ser así la progenie final debería haber sido completamente roja. La F1 esperada tendría que obedecer el patrón 1:1 de haber tenido una muestra con mayor cantidad de datos, por lo cual se puede suponer que los peces fluorescente no soportaron algún cambio en las condiciones del medio en contraste a los normales, o simplemente que fue azaroso. Por lo cual las estimaciones estadísticas no se ajustaron a la hipótesis.
Datos de sobrevivencia y mortalidad 25 20 15 10 5 0 1-Apr
2-Apr
3-Apr
4-Apr
5-Apr Vivos
6-Apr
7-Apr
8-Apr
9-Apr 10-Apr 11-Apr
Muertos
Gráfico 1. Muestras de peces vivos y muertos por día, FUENTE: elaboración propia.
Dentro del proceso de crianza se evidencio una baja significativa de la cantidad de peces durante los días 7-9 de abril antes de evidenciar fluoresencia.
Conclusión Dado a la baja proporción de especies sobrevivientes al momento de evidenciar fluorescencia, la muestra no es representativa por lo cual la refutación de la hipótesis no es consistente.
