UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA Bioquímica Celular Celular y De Los Tejidos
INFORME Extracción e identificación de carbohidratos de reserva en Animales y Plantas
EQUIPO 1 INTEGRANTES Almazan Rivas Aimée Monserrat Barrios Rubí Aarón Antonio De Los Santos Páez Andrés
GRUPO 2453
Objetivos Analizar la importancia biológica de los carbohidratos de reserva. Extraer polisacárido de muestras diferentes Identificar a estos con la prueba de lugol y Benedict, antes y después de su hidrolisis.
Marco teórico Los carbohidratos son compuestos químicamente formados por C, H, O. Se obtienen como producto de la fotosíntesis que se realiza en plantas. Los únicos carbohidratos de origen animal son: la lactosa (presente en la leche de mamíferos) y glucógeno (presente en hígado y músculos). El glucógeno (o estramadol) es un polisacárido de reserva energética formado por cadenas ramificadas de glucosa; no es soluble en agua, por lo que forma dispersiones coloidales. Abunda en el hígado y en menor cantidad en el músculo, está formado por monómeros de glucosa, unido mediante enlaces alfa (1,4) y enlaces alfa (1,6) en las ramificaciones, presenta estructura en forma de abanico.
El almidón, o fécula, es una macromolécula compuesta de dos polisacáridos, la amilosa (en proporción del 25 %) y la amilopectina (75 %). Es el glúcido de reserva de la mayoría de los vegetales. Gran parte de las propiedades de la harina y de los productos de panadería y repostería pueden explicarse conociendo las características del almidón.
Los polisacáridos como el almidón y el glicógeno contienen un solo grupo reductor por varios cientos o más de residuos, así que, la hidrólisis acida libera los monosacáridos constituyentes que pueden ser estudiados después. Ensayo de Benedict: El ensayo de Benedict permite el reconocimiento de carbohidratos reductores, al igual que el reactivo de Felhing, el de Benedict contiene ion cúprico en medio alcalino que se reduce hasta óxido cuproso en presencia de azúcares con el hidroxilo hemiacetálico libre. Ensayo con Lugol: El reactivo de Lugol que contiene una mezcla de yodo y yoduro, permite reconocer polisacáridos, particularmente el almidón por la formación de una coloración Azul violeta intensa y el glicógeno y las dextrinas por formación de coloración roja.
Resultado Benedict
Lugol
Testigo Negativo
No existe presencia de extremos reductores para su identificación cualitativa.
Antes de hidrolisis Almidón
Benedict
Lugol
Glucógeno
No se reconocen extremos reductores los cuales puedan ser identificados cualitativamente por medio de la prueba.
Los polisacáridos son polímeros naturales (biopolímeros) de los carbohidratos, constituidos por un gran número de unidades de monosacáridos unidos mediante enlaces glucídicos. Dentro de los polisacáridos de mayor importancia se encuentra el Almidón y Glucógeno (polímeros de la glucosa).Son carbohidratos que se pueden hidrolizar dando muchas unidades de monosacáridos. El almidón es un polisacárido cuyas unidades de glucosa se unen fácilmente para formar esta sustancia de reserva energética, o se separan para proporcionar energía a las células. La hidrólisis del almidón o de la celulosa da lugar a muchas moléculas de glucosa. Las cuales poseen extremos reductores que pueden ser identificados por medio de las pruebas.
Después de hidrolisis Almidón
Glucógeno
Benedict
Lugol
En las muestras la reacción de Benedict tienen la capacidad de reducir al cobre y formar un precipitado de color anaranjado o rojizo por lo que podemos afirmar que existen azúcares reductores en nuestra muestra.
El yodo forma complejos coloreados de adsorción con los polisacáridos; el almidón da un color azul con yodo, mientras que el glicógeno y el almidón parcialmente hidrolizado reaccionan dando una coloración pardo rojiza.
Al agregar gotas de yodo a la papa nos dio una coloración azul negruzco, dando como resultado que la papa contiene almidón de origen natural.
Análisis de resultados
Como se puede ver que en las pruebas, el reactivo de Benedict reacciona con los azucares reductores por lo tanto, el almidón y en el glucógeno solo tienen un extremo reductor por lo cual da como negativo; después de la hidrólisis se rompen los enlaces por lo que los extremos reductores son más por lo tanto reaccionan más con el reactivo de Benedict. En la reacción con el Lugol, el yodo se queda en medio de la cadena de sacáridos y por motivo de este fenómeno de que se introduce en la cadena provocando la absorción o fijación de este en las moléculas del almidón se obtiene un color azul, en cambio con el glucógeno no pasa esto, debido los enlaces alfa (1-6). En la hidrolisis del almidón del lugol no se logró observar la coloración rojiza debido a que se le puso un exceso de NaOH y la cantidad de HCl que se le agrego no fue suficiente para acidificar la muestra. El almidon y el glucógeno al someterse a la reacción de Benedict después de ser hidrolizados dan como resultado positivo debido a que se presenta el precipitado color rojo ladrillo o anaranjado que es el óxido cuproso lo cual es evidencia de que en ellos existen azucares reductores.
Conclusión
Con la reacción del yodo (lugol) podemos identificar de modo general polisacáridos, pero de modo específico entre uno de ellos se encuentra el almidón que lo identificamos en la práctica. El almidón al ponerse en contacto con el yodo presenta una coloración azul negruzco, esto se debe a que cuando el lugol reacciona con las dos estructuras que forman el almidón, con la amilosa proporciona un color azul y cuando reacciona la amilopectina con yodo proporciona un color rojo y la combinación de estos dos colores nos proporciona el color azul negruzco característico del almidón. Mediante la reacción de Benedict podemos identificar azúcares reductores y comprobar que la reducción que se lleva a cabo es por el efecto del grupo aldehído del azúcar (CHO) en forma de Cu + y el nuevo ion se observa a modo de precipitado de color rojo anaranjado o amarillo ladrillo que corresponde al óxido cuproso(Cu 2O)
Bibliografía
Tabla 6.2 tomada de: http://www.bioquimica.dogsleep.net/Laboratorio/Plummer/Chp06.pdf
Whelan, W. J., Biochemistry of carbohydrates, Londres, Butterworth & University Park, University Park Press, 1975.
Quezada, M. S., Manual de experimentos de laboratorio para bioquímica. Editorial EUNED, 2007. Pp. 94-97
