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El método de Chelex-100 es un método empleado para la extracción de ADN en TEP con el objetivo de ser utilizado posteriormente en la técnica de la Reacción en Cadena de la Polimerasa (RCP).
El empleo del Chelex-100 en el campo de la genética molecular también ha sido explorado. Varios grupos de investigación han utilizado esta resina quelante para obtener ADN en bloques de parafina: en las ciencias forenses, en la detección molecular de diferentes especies de bacterias y en estudios virológicos.
El Chelex-100 es una resina que preferentemente captura iones metálicos polivalentes en soluciones. El efecto de esta
sustancia es prevenir a través de su acción quelante la ruptura del ADN a altas temperaturas catalizada por los iones involucrados.
Este método implica siempre cuatro pasos principales:
Procesamiento del tejido.
Extracción de ADN del corte histológico. Calentamiento.
Centrifugación.
Luego se procede a la utilización de la PCR
Procesamiento del tejido. •
•
Corte histológico. Tinción.
Centrifugación •
Centrifugación 13.000 rpm durante 10 minutos.
Extracción de ADN del corte histológico. •
Adición de una solución Chelex100 (Sigma-Aldrich, USA) al 5%.
