KARAKTERISASI MAKROSKOPIS DAN MIKROSKOPIS SPESIES PENICILLIUM KARAKTERISASI MAKROSKOPIS DAN MIKROSKOPIS SPESIES PENICILLIUM
TUJUAN Untuk mengetahui karakterisasi/deskripsi karakterisasi/deskripsi makroskopis dan mikroskopis 4 spesies Penicillium
ALAT DAN BAHAN BAHAN o Cawan petri o Object glass o 2 logam penyangga o Pipet volume o Beker glass 200ml o Aquades steril o Media PDA o Jarum ose o Timbangan o Alkohol o 4 spesies biakan murni kapang Penicillium
LANDASAN TEORI Mikroorganisme memiliki peranan sangat penting, karena mikroorganisme merupakan agen biologi penghasil antibiotik yang sangat penting dalam proses pencatatan berbagai macam penyakit. Penicillium adalah genus kapang dari kelas ascomycetes. Peran pentingnya dalam lingkungan alam serta produksi makanan dan obat. Salah satu dari genus ini menghasilkan penisilin, yaitu sebuah molekul yang digunakan sebagai antibiotik , yang membunuh atau menghentikan pertumbuhan beberapa jenis bakteri di dalam tubuh. Menurut Fungi Dictionary (edisi 10, 2008), genus luas berisi lebih dari 300 spesies (Wikipedia, 2011). Beberapa contoh produk antibiotik, yaitu penisilin yang dapat dihasilkan oleh Penicilliu Penicillium m notatum (Indrawati, 2006) dan Penicillium chrysogenum, salah satu dari genus Penicillium, telah lama dikenal sebagai antibiotik. Antibiotik berasal dari kata Yunani tua, yang merupakan gabungan gabungan dari kata anti (lawan) dan bios (hidup). Kalau diterjemahkan bebas menjadi "melawan sesuatu yang hidup". Penicillium Penicilliu m sp. adalah genus fungi dari ordo Hypomycetes, filum Askomycota. Penicillium sp.memiliki ciri hifa bersepta dan membentuk badan spora yang disebut konidium. Konidium berbeda dengan sporangim, karena tidak memiliki selubung pelindung seperti sporangium. Tangkai konidium disebut konidiofor, dan spora yang dihasilkannya disebut konidia. Konidium ini
memiliki cabang-cabang yang disebut phialides sehingga tampak membentuk gerumbul. Lapisan dari phialides yang merupakan tempat pembentukan dan pematangan spora disebut sterigma. Beberapa jenis Penicillium sp. yang terkenal antara lain P. notatum yang digunakan sebagai produsen antibiotik dan P. camembertii yang digunakan untuk membuat keju biru (Purves dan Sadava, 2003). Menurut Hoeller (1999) telah mengisolasi 45 isolat Penicillium dari 11 jenis spons, untuk meneliti diversitas, aktivitas biologik, dan metabolit sekunder dari f ungi yang diisolasi dari spons (dalam Indrawati Gandjar, 2006). Jamur ini berwarna hjjau kebiruan dan tumbuh baik pada buah-buahan yang telah masak, roti, nasi, serta makanan bergula. Hidup secara saprofit di berbagai tempat, terutama pada substrat yang mengandung gula (seperti nasi, roti, dan buah yang telah ranum). Berkembang biak secara vegetatif dengan membentuk konidia. Konidia dibentuk pada ujung hifa. Hifa pembawa konidia disebut konidiofor. Sehingga setiap konidia dapat dapat tumbuh membentuk jamur baru. Konidiofor nya berbentuk seperti sikat/kuas reproduksi generatif dengan membentuk askus, namun reproduksi secara generatif sulit ditemukan. Antibiotika di dunia kedokteran digunakan sebagai obat untuk memerangi infeksi yang disebabkan oleh bakteri atau protozoa. Antibiotika adalah zat yang dihasilkan oleh suatu mikroba, terutama fungi/jamur, yang dapat menghambat atau dapat membasmi mikroba jenis lain.
CARA KERJA - Disediakan 4 preparat kapang untuk diamati karakteristik makroskopis dan mikroskopisnya untuk kemudian digambar. Setelah itu ditentukan preparat manakah yang merupakan kapang Penicillium. - Mengamati makroskopis kapang dengan melihat bagian atas dengan mengamati warna koloni, struktur koloni dll. Mengamati bagian bawah pula (reverse side) dengan mengamati warna, ada/tidak garis radial, lingkaran konsentris dll. Kemudian digambar. - Mengamati mikroskopis kapang dengan melihat hifa, ada tidaknya metula, dll. - Untuk pengamatan mikroskopis, letakkan slide kultur hasil penanaman minggu sebelumnya (Hasil praktikum II) pada mikroskop, amati masing-masing spesies Penicillium, gambarlah bentuk mikroskopisnya, hifa, spora, dll. - Untuk pengamatan makroskopis, amati kultur Penicillium pada kultur cawan petri, lihat bagian atas amati warna koloni, struktur koloni dll, amati pula bagian bawah (reverse side) amati warna, ada/tidak garis radial, lingkaran konsentris dll, gambarlah. - Untuk biakan yang sudah di amati, sebelum dibuang harus disterilkan dulu dengan autoclave, kemudian buanglah kapang pada tempat sampah, cucilah semua cawan petri dan alat lainnya untuk mempersiapkan praktikum IV
- Untuk persiapan pengamatan praktkum IV, siapkanlah slide kultur dan kultur cawan petri untuk 3 spesies Rhizopus, lakukan hal yang sama dengan cara kerja praktikum I.
HASIL PENGAMATAN Tabel 1. Gambar Makroskopis Kapang No. Jenis Kapang Warna Tekstur Koloni Zonasi Radial Furrow Tetes Eksudat Top Reverse 1 A Hijau tua di tengah dengan lingkaran tepi warna putih Coklat Bludru - √ √ 2 B Putih Kuning Bludru - - 3 C Hijau di tengah dengan lingkaran tepi warna putih Putih Bludru - - √ 4 D Hijau di tengah dengan lingkaran tepi warna putih Putih Bludru - - -
Tabel 2. Karakteristik Mikroskopis Kapang No Jenis Kapang Bentuk Spora/Konidia Konidiofor/ Sporangiofor Bentuk Conidial head 1 A Bulat monotematous Bentuk botol 2 B Bulat synnematous Bentuk botol 3 C Bulat monotematous Bentuk botol 4 D Bulat - Bentuk botol
PEMBAHASAN
Untuk mengidentifikasi spesies apakah yang dipakai pada waktu praktikum kali ini adalah dengan cara melihat karakteristik secara makroskopis dan mikroskopis. Berdasarkan hasil pengamatan dari karakteristik makroskopis didapatkan: jenis kapang A memiliki warna bagian atas (top side) hijau tua dengan lingkaran tepian luarnya berwarna putih sedangkan warna bagian bawahnya (reverse side) berwarna agak kecoklatan, memiliki kenampakan radial furrow yang masih belum terlihat jelas karena usia kapang yang masih muda, dan memiliki sedikit tetestetes eksudat. Jenis kapang B warna atasnya hijau tua dengan bagian lingkaran tepinya berwarna putih sedangkan warna bawahnya putih dan hanya memiliki tetes eksudat. Jenis kapang C warna atasnya hijau di tengah sedangkan warna bawahnya putih dan tidak memiliki kenampakan radial furrow ataupun tetes eksudat. Jenis kapang D warna bagian atasnya putih
sedangkan bagian bawahnya berwarna kuning dan tidak memiliki kenampakan radial furrow ataupun tetes eksudat juga. Untuk kenampakan zonasi pada semua jenis kapang tidak terlihat, dikarenakan usia koloni yang masih muda. Pada umumnya kenampakan yang lain juga terlihat sedikit sekali. Untuk tekstur koloni semua jenis kapang (A, B, C, D) bertekstur seperti bludru. Hasil pengamatan bagian mikroskopis, kapang jenis A, B, C, D memiliki ciri-ciri bentuk spora/konidia bulat dan bentuk conidial headnya seperti botol. Tipe konidiofor/sporangiofor dari kapang jenis A : monotematous, kapang jenis B : synnematous dan kapang jenis C : monotematous sedangkan kapang jenis D bukan genus dari kapang. Menurut identifikasi hasil pengamatan makroskopis dan mikroskopis kapang maka diketahui bahwa jenis kapang A adalah spesies dari Penicillium crysogenum, karena berdasarkan ciri-ciri dari literatur bahwa koloni berwarna hijau kekuningan atau hijau agak biru pucat sedangkan bila berumur tua warna akan semakin gelap, koloni menghasilkan tetes eksudat yang berwarna kuning hingga hialin. Jenis kapang B adalah spesies dari Penicillium expansum ciri-ciri dari literatur bahwa koloni berwarna kuning hingga hijau kebiruan, bagian reverse side berwarna kekuningan atau coklat kekuningan. Jenis kapang C adalah spesies dari Penicillium citrinum ciriciri dari literatur bahwa koloni berwarna biru kehijauan, bagian reverse side berwarna kuning hingga jingga. Jenis kapang D adalah bukan spesies dari Penicillium karena tidak memiliki ciriciri seperti Penicillium.
KESIMPULAN
Menurut identifikasi hasil pengamatan makroskopis dan mikroskopis kapang maka diketahui bahwa jenis kapang A adalah spesies dari Penicillium crysogenum. Jenis kapang B adalah spesies dari Penicillium expansum. Jenis kapang C adalah spesies dari Penicillium citrinum. Jenis kapang D adalah bukan spesies dari Penicillium.
DAFTAR PUSTAKA
Gandjar, Indrawati. 2006. Mikologi: Dasar dan Terapan. Jakarta: Yayasan Obor Indonesia. Gandjar, Indrawati, dkk, 2000. Pengenalan Kapang Tropik Umum. Jakarta: IKAPI DKI Jakarta. Anonim. 2011. Penicillium. http://en.wikipedia.org/wiki/Penicillium diakses pada tanggal 12 Oktober 2011. Ian C Uthenian. 2011. Kingdom Fungi. http://www.scribd.com/doc/31470592/Kingdom-Fungi diakses pada tanggal 12 Oktober 2011. Monruw. 2011. Morfologi Jamur Benang. http://monruw.wordpress.com/2011/06/18/morfologi jamur-benang-kapang/ diakses pada tanggal 12 Oktober 2011.
Tyan, Rumz. 2011. Makalah mikrobiologi: Manfaat Jamur Penicillium sp. Di Bidang Industri. http://www.scribd.com/doc/40485533/MAKALAH-penisilin diakses pada tanggal 12 Oktober 2011.
Penicillium Klasifikasi Ilmiah
Kingdom: Fungi
Division: Ascomycota
Class: Eurotiomycetes
Order: Eurotiales
Family: Trichocomaceae
Genus:
Penicillium
Morfologi Penicillium sp. adalah genus fungi dari ordo Hypomycetes, filum
Askomycota. Penicilliumsp. memiliki ciri hifa bersepta dan membentuk badan spora yang disebut konidium. Konidium berbeda dengan sporangim, karena tidak memiliki selubung pelindung seperti sporangium. Tangkai konidium disebut konidiofor, dan spora yang dihasilkannya disebut konidia. Konidium ini memiliki cabang-cabang yang disebut phialides sehingga tampak membentuk gerumbul. Lapisan dari phialides yang merupakan tempat pembentukan dan pematangan spora disebut sterigma. Beberapa jenis Penicilliumsp. yang terkenal antara lain P. notatum yang digunakan sebagai produsen antibiotik dan P. camembertii yang digunakan untuk membuat keju biru (Purves dan Sadava, 2003). Pengecatan Pengecatan jamur Penicillium sp. adalah dengan menggunakan teknik pengecatan LPCB (Lactopenol Conten Blue). Dengan teknik ini, maka jamur yang diamati akan tampak berwarna hijau kebiru-biruan. Hal ini dikarenakan spora secara sederhana bisa dilihat sebagai badan intraseluler pada suspensi. Sel yang tidak diwarnai sebagai area tidak berwarna dalam sel yang diwarnai dengan metode konvensional. Dinding spora relative impermeable tetapi zat pewarna dapat dibuat menembusnya dengan pemanasan preparat. Sifat impermeable ini juga bisa menghambat dekolorisasi spora pada tahap pemberian alkohol yang biasanya cukup untuk
dekolorisasi sel vegetative. Bentuk dan warna spora ini dapat digunakan sebagai salah satu cara untuk mengidentifikasi jamur (Fardiaz, 1987). Penggunaan Lactophenol Biru Stain dalam memberi warna pada jamur dan memungkinkan spesimen untuk dapat dengan mudah divisualisasikan dengan mikroskop. Lactophenol Cotton Blue (LPCB) adalah metode yang paling banyak digunakan dalam pewarnaan dan mengamati jamur. Komposisi dari Lactophenol Cotton Blue yaitu kristal, cotton blue 0,075 gr berfungsi untuk memberi warna pada sel kapang, asam laktat 20 ml yang berfungsi untuk menjernihkan latar belakang dan mempertajam struktur kapang, gliserol 40 ml berfungsi menjaga fisiologi sel dan menjaga sel terhadap kekeringan, kristal fenol dan air panas 70oC untuk membunuh jamur, serta air suling 40 ml (Astrid dan Leck, 1999) Pengecatan LPCB dilakukan dengan menempatkan alkohol 70% pada objek glass. Merendam spesimen / bahan dalam alkohol. Menambahkan satu atau paling banyak dua tetes mountant lactophenol sebelum alkohol menguap. Memegang coverslip antara jari telunjuk dan ibu jari, menyentuh pada satu sisi dari setetes mountant dengan tepi coverslip dan bawah dengan lembut, menghindari gelembung udara. Sediaan sekarang siap untuk diperiksa. (Astrid dan Leck, 1999). Agen Penyakit Keberadaan kapang dalam rumah dapat berbeda dengan kapang yang tumbuh di luar rumah. Kapang yang paling sering ditemukan dalam rumah umumnya tergolong kapang penerjun (air-borne fungi) dimana spora yang merupakan bibit dari kapang masuk ke dalam lingkungan rumah melalui perantara udara. Beberapa kapang penerjun yang mudah tumbuh dan ditemukan di lingkungan rumah adalah marga Aspergillus dan Penicillium. Pada jumlah yang tinggi paparan spora kelompok kapang tersebut dapat menyebabkan gangguan kesehatan seperti alergi, batuk-batuk, dan infeksi saluran pernafasan atas lainnya. Dampak kesehatan yang lebih serius akan lebih dirasakan oleh penderita asma, penderita autoimun, penderita HIV (ODHA), balita, ibu hamil, dan manula. Mengingat banyaknya dampak negatif dari hadirnya kapang di lingkungan rumah, maka diperlukan serangkaian tindakan dan kiat-kiat untuk mencegah datangnya kapang di dalam lingkungan rumah(Martiny, 2006).
English Reference Koloni biasanya cepat tumbuh, dalam nuansa hijau, kadang-kadang putih, sebagian besar terdiri dari merasa padat konidiofor. Mikroskopis, rantai bersel tunggal konidia (ameroconidia) diproduksi dalam suksesi basipetal dari sel conidiogenous khusus yang disebut phialide a. The basocatenate Istilah ini sering digunakan untuk menggambarkan rantai seperti konidia mana Konidium termuda di ujung basal atau proksimal dari rantai. Di Penicillium, phialides dapat diproduksi secara tunggal, dalam kelompok atau dari bercabang metulae, memberikan penampilan yang mirip kuas dikenal sebagai penicillus a. Penicillus dapat berisi kedua cabang dan metulae (cabang kedua dari belakang yang menanggung whorl dari phialides). Semua sel antara metulae dan stipes dari konidiofor disebut sebagai cabang. Pola bercabang mungkin baik sederhana (non-bercabang atau monoverticillate), satu tahap bercabang (biverticillate-simetris), dua-tahap bercabang (biverticillate-asimetris) atau tiga lebih-dipentaskan bercabang. Konidiofor yang hialin dan mungkin polos atau kasar berdinding. Phialides biasanya labu berbentuk, yang terdiri dari bagian silinder basal dan leher yang berbeda, atau lanset (dengan bagian basal sempit meruncing ke agak menunjuk puncak). Konidia yang bulat, elips, silinder atau fusiform, hialin atau kehijauan, polos atau kasar-berdinding. Sclerotia dapat dihasilkan oleh beberapa spesies.
Culture of Penicillium sp.
Konidiofor P. verrucosum var. cyclopium menunjukkan dua tahap bercabang. Conidiophore sederhana P. cheresanum menunjukkan rantai panjang phialoconidia bersel t unggal. Untuk identifikasi, isolat biasanya diinokulasi pada tiga titik di Czapek dox agar dan potato dextrose agar dan diinkubasi pada 25C. Sebagian besar spesies bersporulasi dalam waktu 7 hari. Gunung mikroskopis yang terbaik dibuat menggunakan bendera sellotape atau budaya geser persiapan dipasang di lactophenol katun biru. Setetes alkohol biasanya diperlukan untuk melepaskan bendera sellotape dari tongkat, dan bertindak sebagai agen pembasahan.
Struktur morfologi dan jenis conidiophore percabangan Penicillium. a. sederhana; b. satutahap bercabang; c. dua tahap bercabang; d. tiga tahap bercabang (Samson et al., 1984).
