CULTIVO DE SECRECIÓN FARINGEA Y EXUDADO DE HERIDAS GENERALIDADES
MICROBIOLOGÍA DE LA SECRECIÓN FARÍNGEA .
Los microorganismos que causan enfermedad en el tracto respiratorio superior, la nasofaringe y faringe deben entrar en contacto con el epitelio de la mucosa, adherirse y multiplicarse. N. meningitidis, Bordetella pertussis, Corynebacterium diphtheriae y muchos virus son transportados por aerosoles formados por las secreciones y llegan al nuevo huésped mediante contacto íntimo, condiciones de hacinamiento o de falta de higiene. Los Mycoplasma Los Mycoplasma y Streptococcus pyogenes Streptococcus pyogenes con frecuencia se adquieren también de esta manera. Aunque se puede aislar gran número de especies de bacterias y hongos a partir de muestras tomadas del tracto respiratorio superior, son muy pocos los microorganismos que provocan una verdadera patología en esta área. El S. pyogenes o estreptococo betahemolítico del grupo A es la bacteria más comúnmente aislada; este agente causa secuelas postestreptocócicas como fiebre reumática aguda y glomerulonefritis. No es infrecuente que el microorganismo provoque infecciones supurativas (piogénicas) de los senos paranasales y del oído medio y celulitis como una secuela piógena secundaria luego de un episodio de faringitis. En consecuencia, la faringitis estreptocócica usualmente se trata para prevenir tanto las secuelas supurativas como no supurativas, así como para disminuir la morbilidad. También se han observado casos poco frecuentes de faringitis debidos a estreptococos grupos B, C y G y a miembros no hemolíticos de estos grupos (incluyendo el grupo A). Si bien una faringitis puede deberse a otras bacterias además de los estreptococos grupo A, esto ocurre con muy poca frecuencia y por lo tanto los laboratorios no deben investigar otros agentes, excepto en circunstancias especiales y luego de una discusión con el clínico que atiende al paciente. Si bien mucho menos común que la faringitis estreptocócica, el C. diphtheriae aun puede ser aislado de pacientes con dolor de garganta o con enfermedades sistémicas más severas, otros Corynebacterium (C. ulcerans, C. hemolyticum y C. pyogenes) pyogenes) pueden provocar faringitis con formación o no de membrana o exantema asociado, pero estas infecciones son poco frecuentes. Neisseria meningitidis puede ser aislada de la nasofaringe de
portadores aunque no causa patología en esta localización, pero Neisseria gonorrhoeae puede provocar una faringitis exudativa con predominio sobre todo en los hombres homosexuales. En un proceso gonocócico diseminado el organismo también puede ser aislado de garganta. La faringitis gonocócica no siempre es sintomática. Aunque Haemophylus influenzae, Staphylococcus aureus y Streptococcus pneumoniae se aíslan con frecuencia de cultivos de materiales de nasofaringe y de garganta no se ha demostrado que causen faringitis, excepto en el caso de S. aureus en el paciente inmunosuprimido. La condición de portador de alguno de estos microorganismos así como de N. meningitidis puede tener importancia clínica para algunos pacientes o sus contactos . En particular, en pacientes con fibrosis quística, los cultivos de materiales de garganta pueden permitir el aislamiento de agentes etiológicos de neumonía que no pueden ser recuperados de esputo debido al sobrecrecimiento de las otras bacterias presentes. Como en todas las situaciones dudosas, la comunicación entre el microbiólogo y el clínico aclara la importancia de estos aislamientos. En el cultivo de muestras de la zona anterior de los orificios nasales a menudo se puede encontrar S. aureus. La frecuencia de portadores de este microorganismo es especialmente alta en el personal del área de salud. Mycoplasma pneumoniae puede causar faringitis de escasa aparición, siendo aislada entonces de hisopos de nasofaringe. Un hisopo de este tipo también es el espécimen de elección para el aislamiento de Chlamydia trachomatis a partir de casos de neumonía, especialmente en lactantes muy pequeños. Diversos virus pueden causar faringitis o rinitis exudativa, entre ellos los virus rino, adeno, sincicial respiratorio, influenza, parainfluenza, corona, coxsackie, de la citomegalia y Epstein-Barr. Además, el H. influenzae (y en ocasiones otros microorganismos) causan una epiglotitis grave que puede llevar rápidamente a la obstrucción de las vías aéreas si no es tratada. La acción conjunta de cierta flora oral anaeróbica causa una faringitis exudativa denominada angina de Vincent que puede ser caracterizada por una lesión membranosa del tipo de la difteria (el olor desagradable que se presenta en los pacientes con angina de Vincent diferencia un síndrome de otro). En este síndrome son comunes los abscesos peritonsilares. La evidencia disponible sugiere que Fusobacterium necrophorum es el patógeno clave de este cuadro, pero
también
pueden
estar
implicados
otros
anaerobios.
Los pacientes inmunosuprimidos, incluyendo los neonatos, pueden desarrollar una
candidiasis oral denominada muguet . El muguet oral puede extenderse y producir una esofagitis, un hallazgo común en pacientes con SIDA u otras inmunodeficiencias. En los pacientes granulocitopénicos, las Enterobacteriaceae, S. aureus o Candida pueden provocar mucositis oral o faringitis, que se manifiesta por edema, dolor de garganta y en algunos casos por exudado o ulceración. El virus herpes simple causa lesiones dolorosas en la
boca
y
la
orofaringe,
otra
condición
que
predomina
entre
los
pacientes
inmunosuprimidos. El rinoescleroma es una forma rara de una infección crónica, granulomatosa de los pasajes nasales, incluyendo los senos y en ocasiones la faringe y laringe, asociada con la Klebsiella rhinoscleromatis. Está caracterizada por obstrucción nasal que se desarrolla lentamente debido a un crecimiento de tipo tumoral con diseminación local. También puede recuperarse otra especie, la Klebsiella ozaenae de infecciones del tracto respiratorio superior. Este microorganismo contribuiría a una condición denominada ocena, caracterizada por una descarga crónica mucopurulenta (con frecuencia de olor fétido debido a infección secundaria por anaerobios).
MICROBIOLOGÍA DEL EXUDADO DE HERIDAS
Las heridas son injurias a tejidos del cuerpo causadas por eventos tales como, quemaduras, perforaciones y mordeduras animales y humanas. Las heridas o abscesos también ocurren dentro de los tejidos del cuerpo como resultado de la cirugía o procedimientos dentales. Las heridas llegan a infectarse cuando los microorganismos del ambiente externo o de dentro del cuerpo de la persona, entran a la herida abierta y se multiplican. Si una herida está infectada ésta se presenta enrojecida, dolorosa, inflamada y drenando pus; un proceso febril luego de un procedimiento quirúrgico indica una infección en el lugar de la cirugía. La colonización de heridas es frecuentemente polimicrobiana e involucra numerosos microorganismos que son potencialmente patogénicos por lo que implica siempre algún riesgo el llegar a infectarse.
Las bacterias involucradas pueden ser agrupadas en dos
categorías aerobias y anaerobias. Las heridas profundas, son ambientes ideales para que desarrolle una infección anaerobia siendo el mal olor, la producción de gas o gangrena en el lugar de la infección, signos de un proceso infeccioso causado por una bacteria anaerobia. Los cultivos de rutina típicamente sólo descubren bacterias aerobias. Si el médico pide al
laboratorio incluir cultivos para anaerobios, una porción de la muestra será sembrada en placas de cultivo o en tubos con caldo nutritivo apropiado e incubados en una estufa sin oxígeno. Las infecciones de piel pueden ser primarias o secundarias. Las infecciones primarias tienen características propias y son iniciadas por un único organismo, y usualmente ocurren sobre la piel normal. Son frecuentemente causados por Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, y bacterias corineformes. Los ejemplos más comunes son impétigo, foliculitis y eritrasma. Las infecciones sistémicas pueden también tener manifestaciones en la piel. Las infecciones secundarias dan lugar a una piel enferma como una condición superimpuesta. Intertrigo y las infecciones de los tejidos de los dedos de los pies son ejemplos de infecciones secundarias. Para mejorar la curación y prevenir la diseminación de la infección a otros tejidos del cuerpo, los microorganismos infectantes deben ser eliminados. Un cultivo de las heridas descubre no sólo que tipo de microorganismo es el causante de la infección sino que también mediante una prueba de susceptibilidad a antibióticos nos indica cuál es el mejor para eliminarlo. En caso se sospeche que la herida esté infectada con mohos o levaduras deberá realizarse un cultivo para hongos así como las pruebas bioquímicas y tinciones que son utilizadas para la identificación micótica. Microorganismos más inusuales como Mycobacterium leprae pueden ser causa de infecciones de heridas, generalmente la solicitud para la investigación de este microorganismo debe ser realizada por el médico. Los resultados de la coloración Gram deben estar disponibles el mismo día o en menos de una hora si así es requerido por el médico. Se hace necesario que al día siguiente se tenga un reporte preliminar, éste dirá si se ha encontrado algún microorganismo y cuál es su reacción al Gram. El reporte final usualmente está disponible en tres días el cual incluye una identificación completa un estimado de la cantidad de microorganismos, más una lista de los antibióticos para los cuales son sensibles. Cuando se realizan cultivos para hongos o bacterias anaerobias el análisis puede tomar de dos a tres semanas. El cultivo de heridas es llamado también cultivo de tejidos blandos, cultivo de abscesos o cultivo de tejidos y sensibilidad.
OBJETIVO
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Confirmar la sospecha de infección nasofaríngea y determinar al agente causante.
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Aislar e identificar el o los agentes etiológicos de una herida infectada.
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Determinar la sensibilidad o resistencia de las bacterias aisladas a diferentes agentes antimicrobianos.
METODOLOGÍA DE ESTUDIO DE LA SECRECIÓN FARÍNGEA: MATERIALES
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Muestra de secreción nasofaríngea
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Medio de transporte Amies con gel de agar y carbón
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Placas con Agar sangre, Chocolate, Sangre Azida, Mac Conkey, Manitol Salado, y Sabouraud con Cloranfenicol.
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Tubo con medio Tioglicolato.
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Batería bioquímica.
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Batería Gram.
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Láminas porta y cubre objeto
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Solución salina estéril.
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Hisopos de rayón.
RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA
Tomar la muestra con hisopo de rayón y si permanece húmedo no deben tomarse otras precauciones para muestras que serán inoculadas dentro de las 4 h de la recolección. Luego de este período debe agregarse el medio de transporte indicado para mantener la viabilidad y evitar el sobrecrecimiento de los contaminantes. Para la detección de B. pertussis la mejor muestra es el aspirado de secreciones nasofaríngeas recogidas con un bulbo de goma. Los materiales para aislamiento de B. pertussis debieran ser inoculados directamente en los medios de cultivo frescos,
al lado de la cama del enfermo; si esto es imposible, es aceptable el transporte no más de 2 h. Se coloca la cabeza del paciente en hiperextensión y se iluminan las fauces en forma conveniente. Con hisopo estéril se frotan ambas amígdalas (o ambos pilares en pacientes amigdalectomizados) . Si existiera un exudado visible se debería tratar de tocarlo con la punta del hisopo. En cualquier caso se deberá evitar el contacto del hisopo con el paladar o la lengua, es por ello que resulta imprescindible ayudarse con un bajalenguas. El hisopo se deberá colocar en un tubo con gotas de solución fisiológica estéril o con medio de transporte (Amies con gel de agar y carbón). Como alternativa recomendada sólo ante una emergencia se puede conservar seco en un tubo de ensayo estéril. El hisopo seco puede conservar la viabilidad de los estreptococos ß-hemolíticos en un alto porcentaje de casos. La conservación de estas muestras se deberá efectuar a temperatura ambiente durante el menor tiempo posible. METODOLOGÍA DE ESTUDIO DE LOS EXUDADOS DE HERIDAS MATERIALES
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Muestra de exudado de heridas
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Placas con Agar Sangre, Agar MacConkey y Agar Manitol Salado.
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Tubos con Medio Tioglicolato fluido.
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Hisopos de rayón con medio de transporte
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Batería Gram
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Batería Bioquímica
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Láminas porta y cubre objeto.
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Solución Salina estéril
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Solución KOH
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Jeringa estéril
RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA.
Se prefiere que la muestra sea un aspirado o una biopsia. Cuando sea posible, tome un trozo de pared del absceso, si no lo es tome una muestra de pus de la herida.
No está permitido tocar el área circundante a la herida debido a que muchos microorganismos viven en la piel. Para este fin se debe limpiar primero la superficie de la lesión utilizando alcohol. Si hubiere costra sobre la herida ésta debe ser retirada con la hoja de un bisturí. Usando una jeringa se succiona tanto pus como sea posible a partir de la herida, si la muestra es insuficiente, instilar suero fisiológico y aspirarlo nuevamente en la jeringa. Si los procedimientos anteriores no son factibles entonces puede realizarse un frotis de las partes profundas de la herida con una torunda.
Si bien es posible que el médico pueda comenzar el tratamiento antibiótico antes del cultivo y de las pruebas de sensibilidad a antibióticos, sin embargo la muestra para el cultivo debe ser colectada antes del consumo de antibióticos. La muestra del material debe ser colocada en un contenedor estéril y enviado directamente al laboratorio. Para el caso de las muestras tomadas con torundas éstas pueden ser transportadas en tubos con medio de transporte (medio de Amies con agar y carbón).
Para el estudio de hongos se pueden obtener además raspados de piel o uñas infectadas en una placa de Petri estéril o un sobre limpio. Las muestras deben ser procesadas en ≤ 2 h a temperatura ambiente.
