Control de Calidad. Sensibilidad o Linealidad Fotometrica

SENSIBILIDAD O LINEALIDAD FOTOMÉTRICA Es la capacidad de respuesta lineal de un espectrofotómetro a concentraciones crecientes o decrecientes de una sustancia que cumpla la Ley de Beer a distintas longitudes de onda. La Ley de Lambert-Beer establece que la absorbancia (A) de una sustancia en solución es dire direct ctam amen ente te prop propor orci cion onal al a la conc concen enttraci ración ón (C) (C) de dich dichaa sol solució uciónn y dich dichaa  proporcionalidad est dada por el coeficiente de absorción molar (ε) de la sustancia y por el camino óptico (b) que recorre la lu! al atra"esar la solución # A $ ε . b. C La capacidad de un espectrofotómetro de dar respuestas lineales a cambios crecientes o decrecientes en la concentración de una sustancia que cumple la Ley de Lambert % Beer se denomina LINEALIDAD FOTOMÉTRICA. Esta propiedad permitre conocer el rango de absorbancias dentro del cual un espectrofotómetro produce respuestas proporcionales a los cambios de concentración de una sustancia. &na de las causas importantes importantes que pueden originar p'rdida de linealidad linealidad fotom'trica fotom'trica es la  presencia de L& *A+A,A *A+A,A.. El propósito es correlacionar el estudio de linealidad fotom'trica con la presencia de lu!  parsita y establecer el grado de influencia de 'sta en los casos en que se s e detecte p'rdida de linealidad. C/0+/L 1E LA L0EAL1A1 2//34+CA El m'todo mas prctico consiste en preparar diluciones de determinadas sustancias y "er la respuesta del instrumento. ,e recomienda medir la linealidad a ms de una longitud de onda sobre todo de aquellas sustancias utili!adas en los m'todos de detección de 5u6mica Cl6nica. *ara el control se usan soluciones de concentraciones crecientes # a) dicrom dicromato ato de pota potasio sio cido cido a 789 nm  b) p % nitrofenol a 89: nm c) nitr nitrat atoo de cob cobal alto to a :;9 :;9 nm d) cianme cianmetah tahemo emoglo globin binaa :89 nm

a)

b)

c)

d)

a) b) c) d)

recta ideal buena linealidad. Diferencia de exactitud de la ab!rbancia linealidad ace"table #ata a"r!xi$ada$ente %&&& 'A( lue! di$inu*e $ala linealidad en t!d! el ran! de ab!rbancia + $ala enibilidad , n! reitra ca$bi! inificati-! de ab!rbancia al ca$biar la c!ncentracin )

/ALORES 01TIMOS

, err!r "endiente $en!r ! iual al 2 3

/ALORES ACE1TABLES , err!r "endiente $en!r ! iual al 4 3

LECT'RA DE LAS 5 SOL'CIONES DE DICROMATO DE 1OTASIO +A(B(C(D) -

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Tener encendid! el e6ui"! el tie$"! 6ue indi6ue el fabricante ante de reali7ar la ex"eriencia. Eleir una cubeta li$"ia * in ra*adura * a8utar el cer! de ab!rbancia c!n aua detilada a la l!nitud de !nda de traba8! +45&( 49& ! 4:: n$). Si n! "uede lle-ar a cer! de ab!rbancia a dic#a l!nitud de !nda( e! e ;ndice de $al funci!na$ient! del e"ectr!f!t$etr! "!r l! 6ue rec!$enda$! lla$ar al er-ici! t
LECT'RA DE LAS 5 SOL'CIONES DE 1=NITROFENOL A 5&9 n$ E"ectr!f!t$etr! $anuale , -

Tener encendid! el e6ui"! el tie$"! 6ue indi6ue el fabricante ante de reali7ar la ex"eriencia. Lle-ar el elect!r de l!nitud de !nda a 5&9 n$ * elecci!nar la te$"eratura de traba8! +29( 4& ! 4> ?C) Eleir una cubeta li$"ia * in ra*adura * a8utar el cer! de ab!rbancia c!n aua detilada. Medir la ab!rbancia de la !lucin C% * reitrar el reultad!. /!lcar la !lucin( -!l-er a carar la !lucin C%( $edirla * reitrar el reultad!. Calcular la ab!rbancia "r!$edi! de la d! $edida. 1r!ceder c!n la !luci!ne C2( C4 * C5 de la $i$a f!r$a 6ue e reali7 c!n la !lucin C%.

E"ectr!f!t$etr! c!n b!$ba de a"iracin , 1ara l! "unt! % * 2 reali7ar la $edida "!r du"licad! de la iuiente $anera , - Selecci!nar la te$"eratura de traba8! +29( 4& ! 4> ?C) - Lle-ar a cer! de ab!rbancia a 5&9 n$ c!n aua detilada. A"irar aire. -  A"irar la !lucin a $edir * reitrar el -al!r. A"irar aire * re"etir la !"eracin c!n la $i$a !lucin. Calcular la ab!rbancia "r!$edi! * reitrarla en la "lanilla de reultad! c!rre"!ndiente. -  A"irar aire * "aar a $edir la iuiente !lucin.

 Aut!anali7ad!re * e6ui"! aut!$@tic! ,

C!nultar el $anual del fabricante "ara elecci!nar la funcin ! tet 6ue "er$ita $edir ab!rbancia ab!luta. Selecci!nar la te$"eratura de traba8! +29( 4& ! 4>?C). Selecci!nar la l!nitud de !nda de 5&9 n$. Reali7ar un blanc! c!n aua detilada * "r!ceder a la $edicin de la ab!rbancia de t!da la !luci!ne "!r  du"licad!. En ca! 6ue el ca$in! "tic! de la celda de $edicin n! ea de % c$( reali7ar la c!rreccin 6ue c!rre"!nda "ara n!r$ali7ar la ab!rbancia a % c$ de "a! de lu7. El fact!r a utili7ar en dic#! ca! er@ , % c$  Ab. N!r$ali7ada  Ab. le;da x ================================================ Ca$in! "tic! de la celda en c$ Si tiene aluna duda de c$! reali7ar eta $edici!ne c!n cu e6ui"! aut!$@tic!( le ac!ne8a$! e c!$uni6ue c!n el er-ici! t
L' 1ARASITA

E t!da radiacin electr!$ann
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lle-ar a cer! de ab!rbancia c!n aua detilada a 45& n$. i el e"ectr!f!t$etr! "er$ite #acer $edici!ne de tran$itancia( c!l!car el elect!r de $!d! tran$itancia * $edir el 3 de T de la !lucin c!ntr!l. Reali7ar la ex"eriencia "!r du"licad! * reitrar el -al!r "r!$edi! en la cailla indicada c!$! 3 T. Si el e"ectr!f!t$etr! n! "er$ite #acer $edici!ne de tran$itancia( $edir la ab!rbancia de la !lucin. Reali7ar la $edicin "!r du"licad! * reitrar el -al!r "r!$edi! en la cailla indicada c!$! Ab. En el ca! 6ue la ab!rbancia u"ere la ca"acidad de lectura del intru$ent!( c!nultar el $anual del fabricante "ara aber cual e la $@xi$a ab!rbancia 6ue "uede detectar el e6ui"! e indicar el reultad! c!$! , $a*!r 6ue dic#! -al!r. 1!r  e8e$"l! #a* intru$ent! 6ue n! "ueden leer ab!rbancia $a*!re de 2.&&& 'A. Si la lectura de eta !lucin u"era dic#! -al!r( inf!r$ar c!$! $a*!r de 2.&&&.

N!ta % , E"ectr!f!t$etr! c!n b!$ba de a"iracin

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lle-ar a cer! de ab!rbancia c!n aua detilada a 45& n$ a"irar aire a"irar la !lucin c!ntr!l * reitrar el -al!r. Ai"irar aire * re"etir la !"eracin c!n la $i$a !lucin. Calcular la ab!rbancia "r!$edi! * reitrarla en la "antalla de reultad! c!rre"!ndiente.

N!ta 2 , Aut!anali7ad!re * e6ui"! aut!$@tic! C!nultar el $anual del fabricante "ara elecci!nar la funcin 6ue le "er$ite $edir  ab!rbancia ab!luta. Selecci!nar la l!nitud de !nda de 45& n$. Reali7ar un blanc! c!n aua detilada * $edir la ab!rbancia de la !lucin "!r du"licad!. En ca! ca! 6ue el ca$in! "tic! de la celda de $edicin n! ea de % c$ reali7ar la c!rreccin 6ue c!rre"!nda "ara n!r$ali7ar la ab!rbancia a % c$ de "a! de lu7. El fact!r a utili7ar en dic#! ca! er@ , % c$  Ab n!r$ali7ada  Ab le;da x ==================================================== Ca$in! "tic! de la celda +en c$)