DEMOSTRACIÓN DEMOSTRAC IÓN CUALITA CU ALITATIVA TIVA DE CARBOHIDRATOS, LÍPIDOS, AMINOÁCIDOS Y PROTEINAS
INFORME N°1
UNIVERSIDAD NACIONAL PEDRO RUIZ GALLO FACULTAD DE MEDICINA HUMANA INFORME DE LABORATORIO Nº 1 “DEMOSTRACIÓN CUALITATIVA DE CARBOHIDRATOS, LÍPIDOS, AMINOÁCIDOS Y PROTEINAS”
CURSO
:
Biología.
ALUMNO :
Paul Anderson Anderson Niño Huamán
DOCENTE :
Dr. Meléndez Guerrero Víctor
CICL CI CLO O ACAD ACADEM EMIC ICO O : 2!" # !
L!"#$%&$, '$ () '$ M#* '$ (+1
1
DEMOSTRACIÓN DEMOSTRAC IÓN CUALITA CU ALITATIVA TIVA DE CARBOHIDRATOS, LÍPIDOS, AMINOÁCIDOS Y PROTEINAS
INFORME N°1
I-.INTRODUCCION $l estudio de las %iomoleculas &a sido de gran im'ortancia en el desarrollo de la ciencia %iol(gica) *a +ue sin %ien es cierto las células constitu*en las unidades ,uncionales * estructurales de la materia -i-a) estas a su -ez están consti constitui tuidas das 'or molécu moléculas las)) tales tales como como car%o& car%o&idr idrato atos) s) lí'ido lí'idos) s) 'roteí 'roteínas nas * ácidos nucleicos +ue se com%inan en un sinnmero de ,ormas) dando lugar a todas las estructuras +ue con,orman el organismo. 2
DEMOSTRACIÓN DEMOSTRAC IÓN CUALITA CU ALITATIVA TIVA DE CARBOHIDRATOS, LÍPIDOS, AMINOÁCIDOS Y PROTEINAS
INFORME N°1
I-.INTRODUCCION $l estudio de las %iomoleculas &a sido de gran im'ortancia en el desarrollo de la ciencia %iol(gica) *a +ue sin %ien es cierto las células constitu*en las unidades ,uncionales * estructurales de la materia -i-a) estas a su -ez están consti constitui tuidas das 'or molécu moléculas las)) tales tales como como car%o& car%o&idr idrato atos) s) lí'ido lí'idos) s) 'roteí 'roteínas nas * ácidos nucleicos +ue se com%inan en un sinnmero de ,ormas) dando lugar a todas las estructuras +ue con,orman el organismo. 2
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$n este este la%o la%ora rato tori rio o nos nos cent centra rare remo moss en el estu estudi dio o dela delass %iom %iomol oléc écul ulas as organi organicas cas como son los car%o& car%o&idra idrato to conoce conocerem remos os sus ,uncio ,unciones nes tanto tanto estructurales como energéticas) así como tam%ién &aremos uso de reacti-os 'ara 'oder determinar determinar su 'resencia 'resencia en algunos de los alimentos alimentos %ásicos %ásicos en nuestra dieta como de algunos ,luidos cor'orales. $/'e $/'eri rime ment ntar arem emos os)) con con mues muestr tras as de orin orina a de una una 'ers 'erson ona a dia% dia%ét étic ica a demo emostra strand ndo o la 'res 'rese encia cia de azuc azucar ares es en ella ella.. 0den 0denti ti,i ,iccarem aremos os * di,ere di,erenci nciare aremos mos car%o car%o&id &idrat ratos os con * sin 'oder 'oder reduct reductor or)) a'reci a'reciare aremos mos la 'resencia de car%o&idratos en alimentos de consumo diario * en algunos ,luidos cor'orales como la orina * la sali-a. $n resume resumen n esta esta 'racti 'ractica ca nos 'ermit 'ermitirá irá conoce conocerr las 'ro'ie 'ro'iedad dades es de dos dos %iom %iomol olec ecul ulas as de gran gran im'o im'ort rtan anci cia) a) adem además ás de iden identi, ti,ic icar arla lass como como 'art 'arte e estructural de nuestros alimentos * 'or consiguiente de nuestro organismo.
I-1-. A/0$$'$/0$2 H320453*2 Para este e/'erimento se uso dos reacti-os 'ara detectar la 'resencia de car%o&idratos1 el reacti-o ,e&ling * la soluci(n de ugol. $l reacti-o ,e&ling) tam%ién llamado como licor de ,e&ling) es una disoluci(n descu%ierta 'or el +uimico alemán Hermann Von 3e&ling.$l licor de 3e&ling consiste consiste en dos solucio soluciones nes acuosas acuosas11 el 3e&ling 3e&ling A com'uesto com'uesto 'or 'or 4ul,ato 4ul,ato de co%re * el 3e&ling B com'uesto 'or 4al de 4eignette. $l reacti-o lugol o soluci(n de ugol es una soluci(n de 02 * 50 en agua destilada. 3ue 're'arada 'or 'rimera -ez en !627 * nom%rada en &onor al médico médico ,rancé ,rancéss 8ean 8ean Guilla Guillaume ume Auguste Auguste ugol. ugol. $ste $ste 'roduc 'roducto to se em'lea em'lea ,recuentemente como desin,ectante * antisé'tico) 'ara la desin,ecci(n de agua en emergencias * como un reacti-o 'ara la 'rue%a del *odo en análisis médicos * de la%oratorio.
II-. MARCO TEORICO R$34/ '$ 6$783/9: $l reac reactiti-o -o de 3e&l 3e&lin ing) g) tam% tam%ié ién n cono conoci cido do como como ico icorr de 3e&l 3e&lin ing) g) es una una disoluci(n descu%ierta 'or el +uímico alemán Hermann -on 3e&ling * +ue se 3
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utiliza como reacti-o 'ara la determinaci(n de azcares reductores. 4ir-e 'ara demostrar la 'resencia de glusosa) así como 'ara detectar deri-ados de ésta tales como la sacarosa o la ,ructosa. $l licor de 3e&ling consiste en dos soluciones acuosas1 9
4ul,ato c'rico cristalizado) :" g; agua destilada) &asta !. ml.
9 4al de 4eignette ?) : g; agua) &asta !. ml. Am%as se guardan se'aradas &asta el momento de su uso 'ara e-itar la 'reci'itaci(n del &idr(/ido de co%re <00=.
$l ,undamento de esta reacci(n radica en +ue en un medio alcalino) el ion c'rico
$l medio alcalino ,acilita +ue el azcar esté de ,orma lineal) 'uesto +ue el azcar en soluci(n ,orma un anillo de 'iran(sico o ,uran(sico. na -ez +ue el azcar está lineal) su gru'o alde&ído 'uede reaccionar con el ion c'rico en soluci(n. $n estos ensa*os es 'osi%le o%ser-ar +ue la ,ructosa
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os disacáridos como la sacarosa == * la tre&alosa
S*8&34/ '$ L&9*8: $l reacti-o lugol o soluci(n de ugol es una soluci(n de 02 * 50 en agua destilada. 3ue 're'arada 'or 'rimera -ez en !627 * nom%rada en &onor al médico ,rancés 8ean Guillaume Auguste ugol. $ste 'roducto se em'lea ,recuentemente como desin,ectante * antisé'tico) 'ara la desin,ecci(n de agua en emergencias * como un reacti-o 'ara la 'rue%a del *odo en análisis médicos * de la%oratorio. a soluci(n de ugol consiste en "g 0 2 * !g 50) diluido con 6"m de agua destilada) o%teniéndose una soluci(n marr(n con una concentraci(n total de *odo de !"mgm. $l *oduro de 'otasio &ace el *odo diat(mico solu%le en agua) de%ido a la ,ormaci(n de iones tri*oduro 0 :I. No de%e con,undirse con la tintura de *odo) +ue consiste en *odo diat(mico * sales de *odo diluidas en agua * alco&ol. a soluci(n de ugol no contiene alco&ol.
$n micro%iología) es em'leado en la tinci(n de Gram 'ara retener el colorante cristal -ioleta. $l 02 entra en las células * ,orma un com'leCo insolu%le en soluci(n acuosa con el cristal -ioleta.
4e utiliza esta soluci(n como indicador en la 'rue%a del *odo) +ue sir-e 'ara identi,icar 'olisacáridos como los almidones) gluc(geno * ciertas de/trinas) ,ormando un com'leCo de inclusi(n termolá%il +ue se caracteriza 'or ser colorido) dando distintos colores segn las rami,icaciones +ue 'resente la molécula. $l ugol no reacciona con azcares sim'les como la glucosa o la ,ructosa.
4e 'uede usar como un colorante 'ara células) &aciendo el ncleo celular más -isi%le en microsco'ías * 'ara 'reser-ar muestras de ,ito'lancton.
$n una col'osco'ía) la soluci(n de ugol se utiliza en la Prue%a de 4c&iller en %usca de teCido -aginal canceroso.
4e 'uede usar la soluci(n de ugol 'ara o%ser-ar la ,orma en la +ue la mem%rana celular &ace (smosis * di,usi(n.
4e usa el ugol en la 're'araci(n 're+uirrgica de las inter-enciones tiroideas) de%ido a +ue in&i%e la secreci(n de la &ormona tiroidea * reduce la 'érdida de sangre en las tiroidectomías de 'acientes con la $n,ermedad de Gra-es BasedoJ. 4in em%argo) resulta ine,ecti-a en 'acientes sin &i'ertiroidismo o +ue *a &an sido tratados con ,ármacos antitiroideos * K>.
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III-. IMPORTANCIA
De%ido a +ue el ser &umano esta ,ormado 'or %iomoléculas * *a +ue estas son de gran im'ortancias se &a 'ro'uesto identi,icar a 6
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una de las 'rinci'ales %iomoléculas orgánicas como son los car%o&idratos a 'artir de sus 'ro'iedades ,ísicoI+uimicas se tendrá en cuenta características como el color) 'ara determinar +ue clase de car%o&idrato es. Además de 'oder identicar la 'resencia de car%o&idratos en -arias muestras) la soluci(n ,e&ling nos 'ermitirá clasi,icarlos segn sea o no reductor.
IV-.MATERIALES A- MATERIALES BIOLÓGICOS: L$7$ ;&9* '$ &<2 7
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;&9* '$ !/=/ G2$*2 O53/ '$ >$52*/ '3"?03 A8!3'4/ '$ >>
B- MATERIALES NO BIOLÓGICOS: T&"*2 '$ $/2#* R$03<* F$783/9 A R$03<* F$783/9 B M$7$5* '$ 8*7*8 G*0$5* P8 P$053
V-.PROCEDIMIENTOS V-1-.3'$/036334/ '$ 8!3'4/: @olocar en un tu%o de ensa*o una muestra de un alimento +ue contenga almid(n
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Agregar a las muestras algunas gotas de lugol. muestra se tiñe de azulI -ioláceo con el lugol) será 'ositi-o 'ara 'resencia de almid(n 4i la
V-(-.I'$/036334/ D$ C5"*73'50*2 C*/ P*'$5 R$'&0*5 $n di,erentes tu%os de ensa*o) colocar las muestras en estudio
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%ser-ar los cam%ios de coloraci(n.
VI-.RESULTADOS a muestra de almid(n se 'uede a'reciar una coloraci(n azulI-iolácea dando así un resultado 'ositi-o
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$n cuanto a los car%o&idratos segn su 'oder reductor tenemos la siguiente ta%la
MUESTRA
PODER REDUCTOR
COLORACIÓN
;UGO DE MANZANA
40) 'or la 'resencia de ,ructuosa
L80
LECHE
4i
L8INALAN8A
;UGO DE UVA
4i
L8 4@L
ALMIDÓN DE PAPA
No
40N @LA@0N
ORINA DE DIABETICO
4i @
40N @LA@0N
GASEOSA
No
L80
Oa orina de dia%etico 'resenta un ni-el de glucosa del !> 'or lo +ue no se o%ser-o reacci(n alguna *a +ue el ni-el minimo 'ara +ue suceda es de !"
VII-.CONCLUCIONES $l cam%io de color de las muestras nos 'ermiti( reconocer la 'resencia de almid(n en la 'a'a * la 'resencia de car%o&idratos reductores en dic&a sustancia organicas. un car%o&idrato será reductor o no reductor de'endiendo el color +ue muestre al reaccionar con el 3e&ling 11
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'odemos in,erir +ue los car%o&idratos en es'ecial los monosacáridos * los disacáridos 'oseen un gran 'oder reductor *a +ue tienen una ma*or mani,estaci(n al &acerlos reaccionar con el reacti-o 3e&ling. a coloraci(n +ue toman las muestras en cada 'rocedimiento +ue tiene +ue -er con los reacti-os +ue se suministran *a +ue estos alteran la estructura molecular * +uímica de los com'uestos) rom'iendo enlaces +ue li%eran energía
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I-.INTRODUCCIÓN 13
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$l estudio de las %iomoléculas &a sido de gran im'ortancia en el desarrollo de la ciencia %iol(gica) *a +ue sin %ien es cierto las células constitu*en las unidades ,uncionales * estructurales de la materia -i-a) estas a su -ez están constituidas 'or moléculas) tales como car%o&idratos) lí'idos) 'roteínas * ácidos nucleicos +ue se com%inan en un sinnmero de ,ormas) dando lugar a todas las estructuras +ue con,orman el organismo. $n este la%oratorio nos centraremos en el estudio de las %iomoléculas orgánicas como son los lí'idos) com'ro%aremos su gran reser-a energética a si como tam%ién su 'resencia en algunos alimentos. $/'erimentaremos con ,rutas secas com'ro%ando la 'resencia de lí'idos en ellas. @om'araremos la 'resencia de lí'idos entre las ,rutas secas. $n resumen esta 'ráctica nos 'ermitirá conocer las 'ro'iedades de dos %iomoléculas de gran im'ortancia) además de identi,icarlas como 'arte estructural de nuestros alimentos * 'or consiguiente de nuestro organismo.
II-.MARCO TEORICO 14
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os lí'idos son un conCunto de moléculas orgánicas) la ma*oría) son %iomoléculas) com'uestas 'rinci'almente 'or car%ono e &idr(geno * en menor medida o/ígeno) aun+ue tam%ién 'ueden contener ,(s,oro) azu,re * nitr(geno) +ue tienen como característica 'rinci'al el ser &idro,(%icas o insolu%les en agua * sí en sol-entes orgánicos como la %encina) el %enceno * el cloro,ormo. $n el uso colo+uial) a los lí'idos se les llama incorrectamente grasas) *a +ue las grasas son s(lo un ti'o de lí'idos 'rocedentes de animales. os lí'idos cum'len ,unciones di-ersas en los organismos -i-ientes) entre ellas la de reser-a energética
III-.IMPORTANCIA 15
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De%ido a +ue el ser &umano esta ,ormado 'or %iomoléculas * *a +ue estas son de gran im'ortancias se &a 'ro'uesto identi,icar a una de las 'rinci'ales %iomoléculas orgánicas como son los lí'idos a 'artir de sus 'ro'iedades ,ísicoI+uímicas se tendrá en cuenta características como la ca'acidad de arder * las marcas oleáceas +ue deCan algunos alimentos al entra en contacto con el 'a'el ,iltro. @on el ,in de identi,icar la 'resencia de lí'idos en alimentos se tomara -arias muestras.
IV-.MATERIALES 16
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C- MATERIALES BIOLÓGICOS: P$/2 M/ A$30$ <$9$08
D- MATERIALES NO BIOLÓGICOS: P3/=2 M$7$5* P>$8 63805*
V-.PROCEDIMIENTOS 17
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se utilizaron dos métodos 'ara reconocer lí'idos1 tilizando el 'a'el ,iltro 'ara identi,icar las manc&as oleáceas +ue deCa%an las muestras +ue contenían lí'idos<'ecana) maní * aceite -egetal=. a o%ser-aci(n de energía contenida en los lí'idos a tra-és de la com%usti(n de una 'ecana.
VI-.RESULTADOS 18
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I$n la 'rue%a con el 'a'el de ,iltro las 'ecanas) el maní * el aceite demostraron 'resentar lí'idos 'uesdCaron manc&as so%re él. I$n cuanto a la 'rue%a de energía almacenada 'or los lí'idos se 'udo e-idenciar al &acer arder la 'ecana
VII-.CONCLUCIONES a 'udimos demostrar la 'resencia de lí'idos en algunas ,rutas secas como tam%ién en aceite. Demostramos la energía almacenada en los lí'idos al &acer arder una 'ecana.
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I-.INTRODUCCIÓN 20
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as 'roteínas son %iomoléculas ,ormadas %ásicamente 'or car%ono) &idr(geno) o/ígeno * nitr(geno. Pueden además contener azu,re * en algunos ti'os de 'roteínas) ,(s,oro) &ierro) magnesio * co%re entre otros elementos. Pueden considerarse 'olímeros de unas 'e+ueñas moléculas +ue reci%en el nom%re de aminoácidos * serían) 'or tanto) los mon(meros la unidad. os aminoácidos están unidos mediante enlaces 'e'tídicos. a uni(n de un %aCo nmero de aminoácidos da lugar a un 'é'tido; si el nmero de aminoácidos +ue ,orma la molécula no es ma*or de !) se denomina oligo'é'tido) si es su'erior a ! se llama 'oli'é'tido * si el nmero es su'erior a " aminoácidos se &a%la *a de 'roteína. Por tanto) las 'roteínas son cadenas de aminoácidos +ue se 'liegan ad+uiriendo una estructura tridimensional +ue les 'ermite lle-ar a ca%o miles de ,unciones. as 'roteínas están codi,icadas en el material genético de cada organismo) donde se es'eci,ica su secuencia de aminoácidos) * luego son sintetizadas 'or los ri%osomas. as 'roteínas desem'eñan un 'a'el ,undamental en los seres -i-os * son las %iomoléculas más -ersátiles * más di-ersas. Lealizan una enorme cantidad de ,unciones di,erentes) entre ellas ,unciones estructurales) enzimáticas) trans'ortadora) etc.
I-1-.ANTECEDENTES HISTORICOS $l reacti-o Biuret) un método colorimétrico +ue 'ermite determinar la concentraci(n de 'roteínas de una muestra mediante es'ectrosco'ía ultra-ioletaI-isi%le a una longitud de onda de "> nm <'ara detectar el i(n @u 2= a Nin&idrina de se &a usado en todos los a-ances en análisis de aminoácidos desde +ue en !7>7 4tein * Moore) desarrollaron las %ases de los métodos cromatográ,icos. Así los 'rocedimientos más actuales * los instrumentos más sensi%les necesitan la e/celente res'uesta de color * %lancos lim'ios +ue s(lo la nin&idrina 'uede o,recer.
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II-.MARCO TEÓRICO B3&5$0 $l reacti-o %iuret se utiliza como una ,uente de nitr(geno no 'roteico en la alimentaci(n de rumiantes) donde se con-ierte en 'roteína 'or microorganismos intestinales. $s menos ,a-orecida +ue la urea) de%ido a su ma*or costo * menor digesti%ilidad) 'ero esta característica tam%ién se ralentiza su digesti(n * así disminu*e el riesgo de to/icidad del amoníaco. a 'rue%a %iuret es una 'rue%a +uímica de 'roteínas * 'oli'é'tidos. 4e %asa en el reacti-o de %iuret) una soluci(n de azul +ue se -uel-e -ioleta al entrar en contacto con las 'roteínas) o cual+uier sustancia con enlaces 'e'tídicos. a 'rue%a * el reacti-o en realidad no contienen %iuret; +ue se llaman así 'or+ue tanto %iuret * 'roteínas tienen la misma res'uesta a la 'rue%a.
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$s un 'oderoso agente reacti-o comn 'ara o%ser-ar <@astro) 8. !77= las %andas de se'araci(n de aminoácidos 'or cromatogra,ía o electro,oresis) tam%ién es utilizada con ,ines cuantitati-os 'ara la determinaci(n de aminoácidos Leacciona con todos los aminoácidos al,a cu*o 'H se encuentra entre > * 6) dando una coloraci(n +ue -aría de azul a -ioleta intenso. $ste 'roducto colorido
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III-. IMPORTANCIA
De%ido a +ue el ser &umano esta ,ormado 'or %iomoléculas * *a +ue estas son de gran im'ortancias se &a 'ro'uesto identi,icar a una de las 'rinci'ales %iomoléculas orgánicas como son las 'roteínas * los com'onentes de esta los aminoácidos) a 'artir de sus 'ro'iedades ,ísicoI+uimicas se tendrá en cuenta características como el color) 'ara determinar la 'resencia o no de estos en las muestras a analisar Además de 'oder identi,icar la 'resencia de aminoácidos * 'roteínas dentro de algunas muestras tam%ién discutiremos el 'or+ué de la 'resencia o no de estas en las muestras analizadas.
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IV-.MATERIALES E- MATERIALES BIOLÓGICOS: L$7$ 283< 85 '$ 7&$<* 3/*!*0* O53/ '$ >$52*/ '3"?03 A8!3'4/ '$ >>
F- MATERIALES NO BIOLÓGICOS: T&"*2 '$ $/2#* R$03<* B3&5$0 R$03<* N3/73'53/ M$7$5* '$ 8*7*8 G*0$5*
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V-.PROCEDIMIENTOS V-1-.AMINOÁCIDOS: $n di,erentes tu%os de ensa*o) coocar las muestras en estudio.
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V--.PROTEINAS $n di,erentes tu%os de ensa*o) coocar las muestras en estudio.
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VI-.RESULTADOS VI-1-.AMINOÁCIDOS MUESTRA
PRESENCIA DE AMINOÁCIDO
COLORACIÓN
SALIVA
40
V0$KA
LECHE
4i
AA@$
CLARA DE HUEVO
4i
V0$KA
ALMIDÓN DE PAPA
No
40N @LA@0N
ORINA DE DIABETICO
40
V0$KA
A;INOMOTO
40
V0$KA
MUESTRA
PRESENCIA DE AMINOÁCIDO
COLORACIÓN
SALIVA
40
V0$KA
LECHE
4i
0A
CLARA DE HUEVO
4i
V0$KA
CARNE MOLIDA
4i
Anillo /anto'roteico
ORINA DE DIABETICO
40
V0$KA
A;INOMOTO
40
V0$KA
VI-(-.PROTEINAS
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VII-.COCLUCIONES VII-1AMINOÁCIDOS .@oncluimos en la 'resencia de aminoácidos no solo en alimentos de consumo diario sino tam%ién dentro de ,luidos cor'orales
VII-(-.PROTEINAS
as 'roteínas son 'olímeros de aminoácidos * se 'roducen en las células del cuer'o. as 'roteínas de otros animales * de algunas 'lantas son un alimento im'ortante) *a +ue 'ro'orcionan los aminoácidos +ue son esenciales 'ara el cuer'o en la 'roducci(n de las 'roteínas necesarias.
$l estudio de los ,actores +ue a,ectan la solu%ilidad de las 'roteínas) &a 'ermitido idear gran cantidad de métodos 'ara 'reci'itar estas sustancias de sus soluciones. $stos métodos tienen su 'rinci'al a'licaci(n en la des'roteinizaci(n de los di-ersos ,luidos %iol(gicos
$l Leacti-o de Biuret es a+uel +ue detecta la 'resencia de 'roteínas) 'é'tidos cortos * otros com'uestos con dos o más enlaces 'e'tídicos en sustancias de com'osici(n desconocida.
a reacci(n /anto'roteica es un método +ue se 'uede utilizar 'ara determinar la cantidad de 'roteína solu%le en una soluci(n) em'leando ácido nítrico concentrado. a 'rue%a da resultado 'ositi-o en a+uellas 'roteínas
con
aminoácidos
'ortadores
de
gru'os
aromáticos)
es'ecialmente en 'resencia de tirosina.
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