Descripción: INSTALACION DE AISLAMIENTO TERMICO A TUBERIA DE VAPOR DE DIÁMETRO VARIABLE ENTRE 2” A 12” EN 1627.61 ml
Descripción: Los plásmidos son moléculas de DNA extracromosomal los cuales están presentes en algunas células bacterianas, levaduras y hongos. Los mismos poseen DNA de doble hebra, mayormente son circulares per...
Descripción completa
Tema fundamental en la tranferencia de calor en recubrimientosDescripción completa
Práctica bioquímicaDescripción completa
dcsDfdfdDescripción completa
Descripción: ,klklkk
Fallas de AislamientoDescripción completa
transferencia de calorDescripción completa
Search
Home
Saved
720 views
0
Upload
Sign In
Join
RELATED TITLES
0
Aislamiento de cloroplastos Uploaded by Roberto Castellanos Cabrera
Books
Audiobooks
Magazines
Save
Embed
Share
Print
Trabajo Especial de Inorganic A
1
Download
News
Documents
Sheet Music
of 2
practica de cloroplastos
TRABAJO Y ENERGÍA
Search document
PRÁCTICAS DE FISIOLOGÍA VEGETAL EXTRACCIÓN DE CLOROPLASTOS Y MEDIDA DE LA REACCIÓN DE HILL EN CLOROPLASTOS AISLADOS
1. INTRODUCCIÓN
En 1939, Robin Hill y col. encontraron que una suspensión de cloroplastos aislados pue desprender O2 en presencia de luz, si se suministra un compuesto oxidado capaz de aceptar electron procedentes de la fotolisis del agua. De esta forma, el proceso de desprendimiento de O 2 en la fotosínte pudo ser separado del de la fijación de CO2.
En la hoja intacta, los principales aceptores naturales de electrones son la ferredoxina y el NAD pero se inactivan durante el proceso de aislamiento de los cloroplastos. “in vitro”, estos acepto naturales pueden sustituirse por el 2,6 diclorofenolindofenol (DCPIP). Este compuesto es azul en form oxidada (quinona) pero se decolora lentamente cuando se reduce (fenol). La reacción que tiene lugar es siguiente:
+
Luz
DCPIP (azul) + H2O Cloroplastos
DCPIP-H (azul pálido) + ½ O2
En esta práctica se medirá la fotosíntesis a través de la decoloración del DCPIP mediante espectrofotómetro. 2. MATERIAL Hojas frescas de espinaca Mortero y mano Papel de filtro Centrífuga y tubos Papel de aluminio Espectrofotómetro y cubeta Parafilm Gradilla con tubos de ensayo pyrex Probeta de 50 ml Erlenmeyer Embudo Varilla de vidrio Pipetas de 2 ml (2) y de 1 ml (1) Vaso de precipitados de 50 ml Solución de sacarosa 0.5 M Propilenglicol al 10%
Sign up to vote on this title
Useful
Not useful
Home
Saved
Books
Audiobooks
Magazines
News
Documents
Sheet Music
Upload
Sign In
Join
Search
Home
Saved
720 views
0
Upload
Sign In
Join
RELATED TITLES
0
Aislamiento de cloroplastos Uploaded by Roberto Castellanos Cabrera
Books
Audiobooks
Magazines
Save
Embed
Share
Print
Trabajo Especial de Inorganic A
1
Download
News
Documents
Sheet Music
of 2
practica de cloroplastos
TRABAJO Y ENERGÍA
Search document
Filtrar el homogenado obtenido a través de papel de filtro y recogerlo sobre un tubo de centrífug
Centrifugar el filtrado durante 10 min a 1000 r.p.m. Eliminar el precipitado y volver a centrifug el resto de sobrenadante durante 10 min a 2500 r.p.m. Desechar el sobrenadante y resuspender precipitado que contiene los cloroplastos aislados en 6 ml de propilenglicol al 10% agitando con u varilla o un pincel.
Tomar 2 ml de esta suspensión de cloroplastos en un tubo de ensayo pyrex y llevarla a ebullició Enfriar con agua.
Reacción de Hill. Preparar 3 tubos de ensayo siguiendo el esquema que a continuación se expone
Tubo
1
2
3
Solución tampón
9 ml
9 ml
9 ml
Suspensión cloroplastos hervidos
0.5 ml
-
-
0.5 ml
0.5 ml
Suspensión cloroplastos frescos
A continuación cubrir el tubo 2 con papel de aluminio con objeto de mantenerlo en oscuridad
Seleccionar en el espectrofotómetro la longitud de onda de 590 nm (es la longitud de onda a la q You're Reading a Preview absorbe el DCPIP) Unlock with a free trial. *Colocar un recipiente con agua a 30 full cmaccess del foco luminoso aunque sin encender todavía éste.
Añadir rápidamente 0.1 ml de la solución de DCPIP al tubo 1. Agitar, poner una parte de Download With Free Trial solución en la cubeta de espectrofotómetro y medir la absorbancia a 590 nm.
Situar el tubo en el recipiente con agua y encender el foco. Mirar la hora, y a partir de es momento, medir la absorbancia a los 3, 6 y 9 min. Apagar el foco. Repetir desde * para los tubos 2 y 3. Apagar el foco Anotar los resultados de absorbancia en el siguiente cuadro: