Aislamiento de Hongos Ambientales

LABORATORIO DE AISLAMIENTO DE HONGOS AMBIENTALES

PRESENTADO POR: PACHECO JANETH ARAGON SOFIA GIL ANA MARCELA CASTRO GLORISMARTH SUAREZ LUZ STEFANY LEAL AROCA CINDY

PROFESORA: ADRIANA SANDON

UNIVERSIDAD POPULAR DEL CESAR FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD PROGRAMA DE MICROBIOLOGIA MICOLOGIA VALLEDUPAR 2014

INTRODUCCION Los hongos son organismos cosmopolitas que pueden desarrollarse en los sustratos más variados, en todos los climas de la tierra e incluso en condiciones extremas. Su ámbito es tan amplio, que sus esporas incluso sobrepasan la atmósfera (Aira et al., 2003). El desarrollo fúngico está supeditado a ciertas condiciones ambientales tales como la humedad relativa, temperatura, precipitación, inversiones térmicas, contaminación, disponibilidad de sustrato y actividades humanas, las que influyen de manera determinante en la proliferación y propagación de las partículas fúngicas hacia los espacios interiores (Guerrero et al., 2003). La mayoría de los hongos viven libres en el suelo o en el agua y obtienen su energía por respiración o fermentación de materiales orgánicos solubles presentes en estos ambientes. El aire no es un medio en el que pueden desarrollarse los microorganismos pero es el portador de aerosoles biológicos como polvo, gotitas de agua y otros, que pueden estar cargados de los diversos grupos de microorganismos. De las capas de aire se han encontrado esporas de hongos que proceden principalmente del suelo, de la vegetación y del mar. Algunos de los géneros más comúnmente aislados del aire son Penicillium, Aspergillus, Rhizopus, Mucor y Cladosporium, entre otros. Todos los hongos se reproducen por esporulación. Las esporas fúngicas son componentes normales de ambientes externos y pueden ser la fuente contaminante de los ambientes internos y muchos de estos pueden servir como sitios de amplificación para el crecimiento de los hongos (Bueno et al., 2003). La inhalación sistémica de esporas y fragmentos de micelio de hongos puede inducir una afección alérgica respiratoria, tanto en las vías aéreas superiores como en las inferiores. Los componentes alergénicos de hongos contienen moléculas, como glucoproteínas, proteínas y polisacáridos, que pueden desencadenar reacciones de hipersensibilidad tipo I (Ruiz et al., 2006). A continuación en esta práctica daremos a conocer los hongos ambientales que se encuentran en los laboratorios de microbiología de la universidad popular del cesar.  HONGOS AMBIENTALES EN UNA BIBLIOTECA: UNA AÑO DE ESTUDIO Dante J. bueno. JulioO. Silva Guillermo Olive_2003

OBJETIVOS

 Demostrar la presencia y distribución de los hongos que se encuentran en el medio ambiente.  analizar la morfología delos hongos que se han obtenido de diversas fuentes  Diferenciar las estructuras fúngicas de cada uno de los hongos encontrados en las muestra a analizar usando técnicas de cultivo y coloraciones sencillas. Observar las características macroscópicas y microscópicas de cada morfotipo.  Conocer los importantes roles que cumplen los microorganismos en el medio ambiente.

MARCO TEORICO HONGOS AMBIENTALES

www.fotciencia06.fecyt.es/macro/nmerosvivos.html/13/11/2013/6:10 pm http://www.revistaciencias.com/publicaciones/EElEZylkAypNyfdfUV.php

Los hongos se encuentra tanto al aire libre como en interiores. Nadie sabe cuántas especies de hongos existen, pero se calcula que puede haber desde decenas de miles hasta quizá trescientas mil o más. Estos crecen mejor en condiciones cálidas, mojadas o húmedas, y se propaga y reproduce mediante esporas que pueden sobrevivir en condiciones ambientales, como la resequedad, que no favorecen el crecimiento normal del hongo. Los hongos en el ambiente/http://www.cdc.gov/mold/es/pdfs/faqs.pdf/13/11/2013/05:20 pm

Los hongos que pueden causar alergia no son los hongos comestibles. La alergia a la humedad corresponde a una hipersensibilidad a los llamados mohos u hongos ambientales, fundamentalmente a sus esporas. A diferencia de los pólenes, las esporas fúngicas no aparecen en determinadas épocas, sino en función de las condiciones de temperatura y humedad ambiental. En un medio ambiente idóneo las esporas aparecen con extraordinaria facilidad y rapidez. En viviendas húmedas, oscuras, poco soleadas y/o ventiladas, así como en sótanos o habitaciones con infiltraciones, pueden encontrarse elevadas concentraciones de esporas de hongos. En el ambiente domestico, la ropa, zapatos y otros objetos de piel, depositados en armarios cerrados son zonas decrecimiento ideal. Cuando son muy abundantes producen “manchas de humedad”. Son asimismo fuentes de hongos la tierra humeda de macetas, humidificadores, aparatos de aires acondicionados mal mantenidos, cubos de basura, etc. En zonas agrícolas, crecen en establos, graneros y donde haya restos vegetales. Fuera del ambiente domestico, se encuentran poblaciones

importantes de mohos en industrias que utilizan la fermentación (lácteos, cervezas, medicamentos, etc), silos y almacenes de frutas-verduras. Se han identificado en todos los lugares en que se han puesto los medios de cultivo para detectarlos, reconociendo mas de 100000 especies. Se han recogido esporas en alturas superiores a 3000 metros, encontrándose altas concentraciones en las nubes, el aire y bajo la mayoría de las condiciones climatológicas. Pueden encontrarse tanto dentro como fuera de los domicilios, dependiendo de las condiciones higiénicas del hogar y climatológicas del exterior. La mayoría de las alergias son producidas por los hongos anteriormente llamados imperfectos, los cuales necesitan para su crecimiento un alto grado de humedad relativa, y la mayor parte de las especies, una temperatura superior a 10º C. Sobreviven en condiciones adversas, produciendo un gran número de esporas, que en ocasiones exceden al número de granos de polen que hay en el aire. Las esporas de estos son muy resistentes y suelen ser de tamaño pequeño, entre 3 y 10 micras. Hay un cierto nivel de los hongos ambientales que puede ser considerado como seguro. Esto depende de la concentración fúngica en los ambientes externos y de los tipos de esporas presentes en el ambiente interno. Cada oficina, cada edificio o cada casa deben ser considerados como un caso separado y único. Generalmente, la concentración fúngica de los ambientes internos es menor que la presente en los externos Estableció que la concentración de hongos en ambientes internos por encima de 2.000 UFC/m3 puede ser considerada como un factor de riesgo serio para la salud de los ocupantes. Muchas esporas fúngicas son alérgicas, con capacidad de producir respuestas alérgicas en individuos susceptibles. Un pequeño grupo de hongos son patógenos y algunos producen micotoxinas, que pueden estar presentes dentro de las esporas y pueden ser inhalados con ellas 2,6. De esta manera, las bibliotecas, como un ambiente interno, son lugares aptos para el desarrollo y mantenimiento de estos microorganismos que pueden causar daño sobre los libros y las personas que trabajan y usan la misma. Los hongos anemófilos se encuentran ampliamente distribuidos en la naturaleza y generalmente se desarrollan sobre materia orgánica muerta; sin embargo, al crecer en el interior de casas o edificios, lo pueden hacer sobre cualquier substrato y contaminar alimentos, textiles, pisos, aparatos electrónicos, etc. Alergia a hongos/http://alergomurcia.com/pdf/Alergia_a_hongos.pdf/13/11/2013/03:52pm

Los principales hongos ambientales son:

Cladosporium sp.

Penicillium sp.

Mucor sp

MATERIALES       

Asa micológica Asa redonda Azul de lactofenol Laminas Laminillas Caja de Petri con agar ogy Microscopio

Aspergillus sp.

PROCEDIMIENTO 1. Tomamos cinco (5) cajas de petri con agar OGY, y las colocamos 15 minutos expuestas al ambiente de:    

Laboratorio microbiología : caja 1 Cuarto del laboratorio: caja 2 Laboratorio microbiología clínica : caja 3 Área de lavado caja 4

Luego las incubamos a temperatura ambiente por 8 días. 2. A los 8 días de incubados, observamos características macroscópicas y microscópicas de cada uno de los diferentes morfotipos presentados en las distintas cajas. 3. Estos resultados fueron comparados con los diferentes grupos de laboratorio

BIBLIOGRAFIA

 http://www.biologia.edu.ar/microgeneral/tp12.pdf  Hongos ambientales en una biblioteca: un año de estudio http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=63500602  La sensibilización a hongos ambientales y su relación con enfermedades atópicas en escolares http://scielo.sld.cu/scielo.php? pid=S0864-21252010000400007&script=sci_arttext

CUESTIONARIO

TECNICAS DE AMBIENTALES.

CUANTIFICACION

DE

MICROORGANISMOS

Método de exposición de placas  Se toma una caja de petri previamente hidratada y Agar nutritivo.  Se expone en un ambiente cerrado, durante quince minutos.  Se lleva a incubación durante cinco días a temperatura ambiente la caja de petri.  La caja de Agar nutritivo se incuba durante 48 horas a 37 grados centígrados.  Se hace un recuento reportando en UFC  Se identifican características macroscópicas de las colonias formadas  Sobre una lámina desengrasada y limpia se coloca una gota de azul de Lactofenol.  Con una asa previamente esterilizada al mechero se toma Una pequeña porción del hongo.  Se pone la muestra en contacto con el azul de lactofenol.  Sobre el portaobjetos se coloco un cubre objetos y se observa al microscopio.  Se observo con 10 y 40X en el microscopio

Método SAS compact Fundamento del método El método se basa en el muestreo del aire problema mediante el aparato SAS (Surface Aire System) compact. De los muestreadores descritos en la, se escogió éste por ser de fácil manejo, portátil y que permite elegir el medio de cultivo adecuado a cada requerimiento.El aire muestreado se hace incidir sobre un medio de cultivo determinado, según se pretendan valorar bacterias u

hongos. Posteriormente se procede a la incubación a una temperatura adecuada y finalmente se efectúa el contaje de colonias expresando el resultado en ufc/m3 (unidades formadoras de colonias por metro cúbico).

Toma de muestra 

Antes de empezar a tomar la muestra con el "SAS compact" ha de esterilizarse la cubierta del aparato. Ésta puede llevarse a cabo por medio del autoclave durante 20 minutos a 21 atmósferas. También se puede efectuar limpiando la cubierta del aparato con una solución desinfectante.



A continuación se coloca la cápsula de Petri en el lugar indicado del aparato de muestreo. Para manejar las cápsulas de Petri (conteniendo ya el medio de cultivo) y el muestreador se recomienda hacerlo con guantes estériles desechables. Después de cada bloque de toma de muestras, limpiar la cubierta del muestreador con una solución desinfectante, teniendo la precaución de que se haya secado totalmente antes de tomar una nueva muestra.



El aparato dispone de un conector de control de tiempo, dividido en unidades que van de 1 a 15, representando cada una de ellas un tiempo de 20 segundos. El volumen de aire muestreado en cada unidad es equivalente a 30 litros, lo que implica que se pueden realizar muestreos de una duración de 20 segundos hasta 5 minutos y con unos volúmenes de 30 a 450 litros de aire.



El tiempo y el volumen de muestreo dependen de la contaminación ambiental que se sospeche. Cuanto mayor sea ésta, menor es el tiempo de muestreo que se debe aplicar y viceversa.

http://www.catlab.com.ar/notas.php? idm=528&accion1=notas&PHPSESSID=b8f00ec70c6b7241702438ce7a 522dbd KIT DE 1 TEST COMPLETO de rastreo de bacterias perjudiciales y esporas de mohos, por personal no especializado. Incluye todo lo necesario (7 DESINFECTEST ® y 2 P/A) para detectarlas en:  Las cocinas: 1 D-STAPH, 1 D-ARCPC y 1 D-LM para detectar la presencia de Estafilococos, Listeria, Bacterias totales, Enterobacterias y Hongos  Los aseos: 1 D-LM y 1 D-EC para detectar Hongos (incluidos Dermatofitos), Coliformes, E.coli, Enterobacterias y Salmonella.  Los dormitorios, pasillos, salas...: 1 D-MIX para detectar Bacterias y Hongos 1  El aire acondicionado: 1 D-MIX para detectar Bacterias y Hongos  El agua que bebe su familia, compañeros o clientes: 1 MICROKIT® P/A MCC, 1 MICROKIT® P/A ENTEROCULT para detectar Coliformes, E.coli y Enterococos.  2 PARES de guantes estériles para la toma de todas las muestras, 10 etiquetas para escribir dónde realizó cada toma, todo ello en maletín.  Incluye el posterior análisis en nuestro laboratorio y el informe completo de diagnóstico que le enviaremos a su casa  Incluye el porte de envío del kit y de su devolución con el kit utilizado

RESULTADOS CAJA 1: LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA 1 COLONIA

MORFOTIPO CARACTERISTICAS MACROSCOPICAS MEDIO DE CULTIVO: Agar OGY

TO DE INCUBACION Ambiente

TIEMPÓ DE INCUBACION 8 días

DIAMETRO DE LA COLONIA COLOR DE ANVERSO COLOR DEL REVERSO No se puede medir por que se Colonia blancas Colonias blancas presento invasión de colonias blancas. PRESENTA PLEGAMIENTOS TEXTURA MARGEN O SURCOS: algodonosa definido No presento CRECIMIENTO: no concéntrico, invadia un poco por una colonia blanca

CARACTERISTICAS MICROSCOPICAS

TIPO DE HONGO

DESCRIPCION MICROSCOPICA Hifas aseptada gruesas, conidioforo grueso, en las puntas se observa conidias de color cafe. Se considera que es Mucor sp.

CAJA 2: CUARTO DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA 8 COLONIAS

MORFOTIPO 1 CARACTERISTICAS MACROSCOPICAS MEDIO DE CULTIVO: Agar OGY

TO DE INCUBACION ambiente


DIAMETRO DE LA COLONIA No se puede medir

COLOR DE ANVERSO Colonias negras con borde blanco TEXTURA algodonosa

COLOR DEL REVERSO Colonias negras

PRESENTA PLEGAMIENTOS O SURCOS: No presento CRECIMIENTO: no concéntrico, se disperso por toda la caja

MARGEN irregular


TIPO DE HONGO

DESCRIPCION MICROSCOPICA Hifas septadas gruesas, conidióforo grueso, fialides y en las puntas se observa conidias de color negro. Se considera que es Aspergillus niger.

CAJA : LABORATORIO CLINICO 11 COLONIAS




DIAMETRO DE LA COLONIA No se puede medir por que se presento invasión de colonias PRESENTA PLEGAMIENTOS O SURCOS: No presento CRECIMIENTO: no concéntrico.

COLOR DE ANVERSO Colonia mostasa

COLOR DEL REVERSO Colonia mostasa

TEXTURA algodonosa

MARGEN Irregular, invadiendo las colonias grises.


TIPO DE HONGO

DESCRIPCION MICROSCOPICA

No se identifico

no hubo una identificación de una especie exacta.

CAJA 4: AREA DE LAVADO 5 COLONIAS




DIAMETRO DE LA COLONIA No se puede medir por que se presento invasión de colonias PRESENTA PLEGAMIENTOS O SURCOS: No presento CRECIMIENTO: no concéntrico.

COLOR DE ANVERSO Colonia blanco

COLOR DEL REVERSO Colonia blanco

TEXTURA algodonosa

MARGEN Irregular.


TIPO DE HONGO

DESCRIPCION MICROSCOPICA

Dematiaceos No se identifico

no hubo una identificación de una especie exacta.

ANALISIS DE RESULTADO Durante el laboratorio de hongos ambientales logramos identificar con respecto a la información de todos los grupos que: Denatiaceos, Fusarium sp y Penicillium sp son las especies dominantes en el ambiente de los laboratorios, esto es debido a que contienen esporas que son

Con relacion a otros laboratorios específicamente clínicos encontramos que el 80% de las especies que habitan en estos lugares pertenecen a él genero Aspergillus sp. Como alternativas de solución para el control de la diseminación de las esporas encontramos algo muy novedoso como el ANTAGON WP este es un mecanismo del efecto inhibidor lo cumple mediante la emisión de sustancias o componentes volátiles como el dióxido de carbono, etanol, acetaldehído, acetona, propanol, isobutanol e isopentanol, sustancias que impiden el crecimiento de otros hongos, efecto conocido con fungistasis, que consiste en un menor crecimiento micelial del patógeno e interferencia en la biosíntesis de melanina, sustancia esencial para el crecimiento de los hongos. CUESTIONARIO 1. Métodos que se utilicen para el rastreo de los hongos ambientales. Para la captación del polen y esporas presentes en el aire existen diferentes procedimientos agrupables en procedimientos pasivos y activos o volumétricos. CAPTACION POR IMPACTO ACTIVO “SAS COMPACT ”

El método se basa en el muestreo del aire problema mediante el aparato SAS (Surface Aire System) compact. De los muestreadores descritos en la NTP-203, se escogió éste por ser de fácil manejo, portátil y que permite elegir el medio de cultivo adecuado a cada requerimiento. El aire muestreado se hace incidir sobre un medio de cultivo determinado, según se pretendan valorar bacterias u hongos. Posteriormente se procede a la incubación a una temperatura adecuada y finalmente se efectúa el contaje de colonias expresando el resultado en ufc/m3 (unidades formadoras de colonias por metro cúbico). Un volumen de aire es aspirado y conducido a traves de una superficie perforada sobre una placa conteniendo un medio de cultivo adecuado. Este metodo es útil para la captación de bacterias y hongos y es el que se ha venido empleando en el INSHT para estos microoganismos, pero no es valido para la captacion de granos de polen y solamente permite captaciones puntuales. Reactivos y productos Todos los reactivos deben tener como mínimo la especificación "para análisis". El agua utilizada ha de ser bidestilada o de calidad equivalente. Medios de cultivo Triptisoy Agar (TSA) Es un medio de cultivo sólido compuesto por: Peptona de caseína...............15,0 g/l Peptona de soja.......................5,0 g/l Cloruro sódico.........................5,0 g/l Agar-Agar.............................15,0 g/l pH del medio a punto de uso: 7,3 aproximadamente Preparación del medio: Añadir 40 g de esta mezcla a un litro de agua destilada. Dejar embeber y llevar a ebullición hasta disolver totalmente el agar. Esterilizar al autoclave durante 15 minutos a 121 ºC. Con esta preparación llenar las cápsulas de Petri, haciéndolo en el ambiente estéril de la cámara de bioseguridad, dejar enfriar y una vez solidificado el medio colocar las cápsulas 24 horas en la estufa de cultivo a 37ºC. Pasado este tiempo se observan las placas desechando las que presenten contaminación.

Agar de sabouraud con cloranfenicol Es un medio de cultivo sólido, específico para hongos, compuesto por: Peptona de caseína............ 5,0 g/l Peptona de carne............... 5,0 g/l D (+) Glucosa................... 40,0 g/l Cioranfenicol...................... 0,5 g/l Agar - agar...................... 15,0 g/l pH del medio a punto de uso: 5,6, aproximadamente Preparación del medio: Suspender 65,5 g de la mezcla en un litro de agua destilada y llevar a ebullición. Esterilizar al autoclave durante 10 minutos a 121ºC. Evitar el sobrecalentamiento que afectaría a la gelificación. Una vez distribuido en placas de Petri hacer la prueba de esterilidad como se ha explicado en el punto anterior. Solución de Armil al 1/1000 Se disuelve 1 ml. de Armil en 1 litro de agua. Aparatos y material Muestreador de aire . "SAS compact" Tal como se describe en el punto 5 de la Nota Técnica de Prevención nº 203, existen diferentes tipos de muestreadores de aire para contaminantes biológicos. En la presente NTP se expone el procedimiento a emplear con el equipo "SAS compact" (ver la figura 1, cuyas características son las siguientes: El aire a examinar es aspirado a una velocidad fijada durante un tiempo variable,a través de una cubierta de protección perforada con múltiples agujeros pequeños de diseño especial. El flujo de aire es dirigido sobre la superficie de una cápsula de Petri del tipo "Rodac", que contiene el medio de cultivo adecuado para el examen microbiológico que se desee hacer. El aparato es transportable, funciona con bateria recargable y el control del tiempo de funcionamiento es programable. Placas de cultivo Se utilizan las placas tipo "Rodac", útiles también para análisis de superficies. Estufas de cultivo Estufa de cultivo a 37ºC de temperatura, para el cultivo de bacterias. Estufa de cultivo a 28ºC de temperatura, para el cultivo de los hongos. Contador de colonias Procedimiento de análisis Toma de muestra Antes de empezar a tomar la muestra con el "SAS compact" ha de esterilizarse la cubierta del aparato. Ésta puede llevarse a cabo por medio de la autoclave durante 20 minutos a 21 atmósferas. También se puede efectuar limpiando la cubierta del aparato con una solución desinfectante. A continuación se coloca la cápsula de Petri en el lugar indicado del aparato de muestreo. Para manejar las cápsulas de Petri (conteniendo ya el medio de

cultivo) y el muestreador se recomienda hacerlo con guantes estériles desechables. Después de cada bloque de toma de muestras, limpiar la cubierta del muestreador con una solución desinfectante, teniendo la precaución de que se haya secado totalmente antes de tomar una nueva muestra. El aparato dispone de un conector de control de tiempo, dividido en unidades que van de 1 a 15, representando cada una de ellas un tiempo de 20 segundos. El volumen de aire muestreado en cada unidad es equivalente a 30 litros, lo que implica que se pueden realizar muestreos de una duración de 20 segundos hasta 5 minutos y con unos volúmenes de 30 a 450 litros de aire. El tiempo y el volumen de muestreo dependen de la contaminación ambiental que se sospeche. Cuanto mayor sea ésta, menor es el tiempo de muestreo que se debe aplicar y viceversa. Medios de cultivo Triptisoy-agar Se utiliza este medio de cultivo para efectuar el contaje de bacterias. Una vez tomada la muestra, se trasladan las cápsulas de Petri al laboratorio, dejándolas en la estufa de cultivo a 37ºC durante 48 horas. Agar-Sabouraud con cloranfenicol Se utiliza este medio de cultivo para efectuar el contaje de hongos. Una vez tomada la muestra, se trasladan las cápsulas de Petri al laboratorio dejándolas en la estufa de cultivo a 28ºC durante 5 días. Recuento de colonias Pasado el tiempo de incubación, se observa el crecimiento de las colonias y se procede al recuento de las mismas mediante un contador de colonias que proporciona el número de colonias formadas por placa. Cálculos Una vez determinado el número de colonias, y sabiendo el flujo de aire y el tiempo de muestreo que se ha aplicado, se puede calcular el número de unidades formadoras de colonias por metro cúbico de aire, aplicando la fórmula siguiente: siendo: NC: número de colonias por placa NU: número de unidades de tiempo empleadas en el muestreo Las cápsulas de Petri una vez llevado a cabo el recuento se retiran del laboratorio empleando un contenedor de residuos biológicos. Campo de aplicación En lugares que, por el tipo de trabajo que se realiza en ellos, no precisan ser estériles, se recomienda llevar a cabo el recuento de hongos y bacterias en aire cuando exista una sintomatología en la población expuesta que sugiera una posible contaminación biológica causada por estos microorganismos. Cuando el nº de ufc/m3 hallado sea superior a 500 se recomienda efectuar la identificación de los gérmenes existentes en el aire muestreado. En ambientes considerados estériles el nº de ufc/m3 debe ser 0. CAPTACION POR IMPACTO ACTIVO: CAPTADOR BURKARD

Este método se basa en el impacto de una masa de aire sobre una superficie captadora, que se desplaza con lentitud. La corriente de aire, en este caso, es activa gracias a una bomba de aire colocada debajo del colector. El aire entra por un orificio anterior e impacta sobre una superficie dispuesta verticalmente, constituida por una cinta transparente, impregnada por sustancias adhesivas. Este método es útil porque la cinta puede permanecer durante una semana expuesta al aire. Gracias a los dispositivos mecánicos del aparato, el movimiento lento de la misma permite separar las capturas diarias y, también, hacer una aproximación horaria de las mismas. Por contra, debe tenerse especial cuidado en el montaje de la cinta para la observación microscópica, evitando la formación de burbujas y preparando montajes no demasiado gruesos. NTP 335: Calidad de aire interior: evaluación de la presencia de polen y espora fúngicashttp://www.jmcprl.net/NTPs/@Datos/ntp_335.htm/13/11/2013/7:18 pm

CAPTACIÓN POR FILTRACIÓN ACTIVA. CAPTADOR MCV

El aire a examinar es aspirado, a través de un filtro de acetato de celulosa (Millipore). Este tipo de filtro permite la identificación inmediata de las partículas ya que se transparenta con aceite de inmersión. Consta de una cámara filtradora con dispositivo de veleta, una bomba electromagnética de membrana para la aspiración de aire a bajo volumen, un contador y un temporizador horario. Este método fue diseñado por Suárez-Cervera & Seoane-Camba en 1983. SAS ISO SUPER: SU COMPAÑERO EN LA MICROBIOLOGIA AMBIENTAL

El muy conocido "SAS amarillo (Surface Air System)" se considera el estándar internacional para los muestreadores de aire portátiles microbiológicos. Más de 25 años de experiencia se ha adquirido en los cinco continentes ayudando a los microbiólogos en el sector hospitalario, industria farmacéutica y alimentaria, y los campos de calidad del aire en interiores. La experiencia también ha sido adquirida en la exploración del espacio como el SAS (Surface Air System) se utiliza a bordo de la Estación Espacial Internacional. Este conocimiento ha resultado en el desarrollo de la nueva "SAS-ISO 100" y "SAS-ISO 180". La idea básica • Para utilizar una simple placa para el aire y la superficie de muestreo • Para tener la mayor flexibilidad de elección, ya sea placas de contacto o placas de Petri • Para aplicar cGLP y cGMP a las operaciones de muestreo de aire • Para establecer datos sobre el nivel microbiano en ambientes seleccionados • Organizar el muestreo secuencial para obtener una muestra más representativa del aire en condiciones reales de funcionamiento del El "SAS - ISO" tiene las siguientes características nuevas: • Rendimiento en el cumplimiento de la norma ISO 14698-1 • Pantalla LCD iluminada grande con pantalla táctil • Todos los comandos de operador a través de teclado táctil para facilitar la limpieza • Más de 70.000 litros de aire / 8 horas de autonomía • Transferencia por infrarrojos de toma de muestras de datos a PC o impresora • Hasta 300 ciclos de muestreo memorizada • capítulo USP <1116> y 21 CFR 11 Cumplimiento • Frecuencia de muestreo con precisión gestionada por el sensor de velocidad incorrecta anula la aspiración de ciclo • diseño evita la turbulencia en el flujo de aire unidireccional y re-aspiración de aire probado de acuerdo con las especificaciones de la norma ISO http://www.internationalpbi.it/docs/Minisiti/SAS/Vers.Inglese/saspcr.html/13-11-2013/7:45 PM

EL DECHADO DE AIRE DE SAS-PCR

recoger los microorganismos patógenos dispersos en el bioaerosoles para "casi en tiempo real" de detección de pruebas de biología molecular o las pruebas tradicionales de cultivo microbiológico. Las características SAS PCR: Aéreo y que el flujo de fluidos estériles entre sí a través de una boquilla y se vierte en un recipiente con una bobina. El líquido se distribuye continuamente para prolongar el tiempo de contacto entre bioaerosoles y la recolección de líquido. http://www.internationalpbi.it/docs/Minisiti/SAS/Vers.Inglese/saspcr.html/13/11/2013/7:45p m

CAPTADOR DE ALTO VOLUMEN MCV CAV-A/MB Captador de alto volumen para determinación de partículas en suspensión en inmisión, con recogida de muestra sobre filtro y determinación gravimétrica en laboratorio. Sistema de captación formado por un conjunto de aspiración con bomba centrífuga y circuitería de control electrónico del sistema montado en caja de poliester-fibra de vidrio apta para trabajo en intemperie, con bastidor de sustentación del equipo. Funcionamiento, medida y regulación del caudal controlado por microprocesador. Regulación automática del caudal programado con compensación automática de la pérdida de carga por colmatación del filtro o fluctuaciones de la red. Normalización del caudal aspirado por corrección de presión y temperatura. Interfaz de comunicación con el usuario a través de pantalla gráfica LCD de 240 x 128 puntos y teclado. http://www.internationalpbi.it/docs/Minisiti/SAS/Vers.Inglese/saspcr.html/13 / 11/2010/8:00 pm

CONCLUSION Los autores de este laboratorio finalizamos subrayando algo muy importante y que debe quedar claro; los métodos de impacto activo nos permiten la captación de microorganismos en el aire mediante una relación volumétrica permitiendo expresar cuantitativamente las unidades formadoras de colonias bacterianas o fungicidas, llegando en ciertos métodos separar capturas de aire inclusive la identificación inmediata de las partículas siendo importantes en el control y estudio de la contaminación ambiental.

Aislamiento de Hongos Ambientales

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